植物樣品全氮磷鉀測定

1、植株全氮、磷、鉀測定方法一、植物全氮測定（一）H2SO4-H2O2 消煮法1、適用范圍本方法不包括硝態(tài)氮的植物全氮測定 , 適合于含硝態(tài)氮低的植物樣品的測定。2、方法提要植物中的氮、磷大多數(shù)以有機(jī)態(tài)存在，鉀以離子態(tài)存在。樣品經(jīng)濃H2SO4和氧化劑H2O2消煮，有機(jī)物被氧化分解 , 有機(jī)氮和磷轉(zhuǎn)化成銨鹽和磷酸鹽 , 鉀也全部釋出。 消煮液經(jīng)定容后 , 可用于氮、 磷、鉀的定量。采用 HzO2為加速消煮的氧化劑，不僅操作手續(xù)簡單快速，對氮、磷、鉀的定量沒有 干擾 , 而且具有能滿足一般生產(chǎn)和科研工作所要求的準(zhǔn)確度。但要注意遵照操作規(guī)程的要求操作 ,防止有機(jī)氮被氧化成N2氣或氮的氧化物而損失。3、試

2、劑（1）硫酸 （ 化學(xué)純 , 比重 ;（2）30%甩02（分析純）。4、主要儀器設(shè)備。消煮爐，定氮蒸餾器。5、操作步驟稱取植物樣品 （ 稱準(zhǔn)至裝入 100ml 開氏瓶或消煮管的底部 , 加少量水潤濕 ，加濃 H2SO45ml, 搖 勻（最好放置過夜）,蓋上彎勁漏斗，在電爐或消煮爐上先小火加熱 ，待ESQ發(fā)白煙后再升高溫度， 當(dāng)溶液呈均勻的棕黑色時(shí)取下。稍冷后加1-5滴H2Q，再加熱至微沸，消煮約710min,稍冷后重復(fù)加HQ,再消煮。如此重復(fù)數(shù)次，每次添加的H2Q應(yīng)逐次減少，消煮至溶液呈無色或清亮后 ， 再加熱10min,除去剩余的 fQ2。取下冷卻后，用水將消煮液無損地轉(zhuǎn)移入 100ml容量

3、瓶中，冷卻至 室溫后定容 （V1）。 每批消煮的同時(shí) , 進(jìn)行空白試驗(yàn) , 以校正試劑和方法的誤差。6、注釋（1）所用的H2Q應(yīng)不含氮和磷。fO2在保存中可能自動(dòng)分解，加熱和光照能促使其分解 ，故應(yīng) 保存于陰涼處。在 H2Q中加入少量HLSQ酸化，可防止H2C2分解。（2） 稱樣量決定于 NPK含量，健狀莖葉稱，種子,老熟莖葉可稱1g,若新鮮莖葉樣，可按干樣 的5倍稱樣。稱樣量大時(shí)，可適當(dāng)增加濃 HSQ用量。（3）加H2Q2時(shí)應(yīng)直接滴入瓶底液中，如滴在瓶勁內(nèi)壁上，將不起氧化作用，若遺留下來還會(huì)影 響磷的顯色。（ 4）上機(jī)分析準(zhǔn)備的試劑指示劑溶液：取 10ml 指示劑儲(chǔ)備液加入 500ml 容量

4、瓶，加入 4ml 磷酸鹽緩沖液。用蒸餾水 定容。在分析前一天準(zhǔn)備此試劑。（一般 1L 能分析 200 個(gè)樣品）4mol/LNaQH : 在蒸餾水中溶解 80g 氫氧化鈉并稀釋定容至 500ml. （一般 1L 能分析 200 個(gè)樣 品）1000ppm N 儲(chǔ)備液 ; 在 1000ml 容量瓶中溶劑氯化銨，并稀釋定容。分析標(biāo)線梯度： 0、5、10、15、20、25ppm（二）水楊酸 -鋅粉還原 - H 2SQ4- 加速劑消煮法1 、適用范圍 包括銷態(tài)氮的植物全氮測定 , 適合于硝態(tài)氮含量較高的植物樣品的測定。2、方法原理樣品中的硝態(tài)氮在室溫下與硫酸介質(zhì)中的水楊酸作用,生成硝基水楊酸 ,再用硫代硫

5、酸鈉及鋅粉使硝基水楊酸還原為氨基水楊酸.然后按HSQ-加速劑消煮法進(jìn)行消煮法進(jìn)行消煮樣品，使樣品中全部氮轉(zhuǎn)化為銨鹽。( 2)還原鋅粉 (AR);(3) 水楊酸-硫酸:30g水楊酸溶于1L濃硫酸中。也可以該用含苯酚的濃硫酸：40g苯酚溶于1L濃硫酸中。4、儀器設(shè)備。同上。5、操作步驟稱取磨細(xì)烘干樣品(過篩)或新鮮莖葉樣品，置于100ml開氏瓶或消煮管中，先用水濕潤 內(nèi)樣品(烘干樣),然后加水楊酸-硫酸10ml,搖勻后室溫放置30min,加入NqSzQ約,鋅粉和水10ml, 放置 10 min, 待還原反應(yīng)完成后 , 加入混合加速劑 2g, 按土壤全氮測定方法進(jìn)行消煮 , 消煮完畢 , 取下冷卻后

6、，用水將消煮液無損地轉(zhuǎn)移入100ml容量瓶中，冷卻至室溫后定容(Vi) o用于濾紙過濾，或放置澄清后吸取清液測定氮。每批消煮的同時(shí) , 進(jìn)行空白試驗(yàn) , 以校正試劑和方法的誤差。(三) 消煮液中銨的定量 (凱氏法 )1、適用范圍。適合于各種植物樣品消煮液中氮的定量。2、方法原理植物樣品經(jīng)開氏消煮、定容后，吸取部分消煮液堿化,使銨鹽轉(zhuǎn)變成氨，經(jīng)蒸餾,用HBQ吸收，硼酸中吸收的氨可直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,以甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑指標(biāo)終點(diǎn)。3、試劑(1) 400g/L NaOH 溶液。(2) 20g/L H 3BO-指示劑溶液。( 3)酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 c(HCL 或 1/2H2SO4)=L o4、儀器設(shè)備

7、。蒸餾裝置或半自動(dòng)蒸餾儀。入半微量蒸餾器的內(nèi)室。另取150ml三角瓶，內(nèi)加5 ml 2% H 3BO指示劑溶液（若為包括硝態(tài)氮的待測液，應(yīng)加約6 mL的400g/L NaOH溶液）,通過蒸氣蒸餾（注意開放冷凝水,勿使餾岀液溫度超過 40 C ）。待餾岀液體積約達(dá) 5060ml時(shí)，停止蒸餾,用少量已調(diào)節(jié)至的水沖洗冷凝管末端。用酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定餾岀液至由藍(lán)綠色突變?yōu)樽霞t色 （ 終點(diǎn)的顏色應(yīng)和空白測定的滴定終點(diǎn)相同 ） 。與此同 時(shí)進(jìn)行空白測定的蒸餾、滴定、以校正試劑和滴定誤差。6、結(jié)果計(jì)算3 （N）, %= c（V-V 0） xx Dx 100/m;式中：3 （N）植物全氮的質(zhì)量分?jǐn)?shù) ，;c酸標(biāo)準(zhǔn)溶

8、液的濃度,mol/L;V滴定試樣所用的酸標(biāo)準(zhǔn)液體積，ml;V）滴定空白所用的酸標(biāo)準(zhǔn)液，ml; N 的摩爾質(zhì)量 ,kg/mol;D分取倍數(shù)（即消煮液定容體積 W吸取測定的體積 V2） o二、植物全磷的測定（一）釩鉬黃吸光光度法1、 適用范圍。適合于含磷量較高的植物樣品的測定（如籽粒樣品）。2、方法原理植物樣品經(jīng)濃H2SO消煮使各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。待測液中的正磷酸與偏釩酸和鉬酸能生成黃色的三元雜多酸，其吸光度與磷濃度成正比，可在波長400490nm處用吸光光度法測 定。磷濃度較高時(shí)選用較長的波長 , 較低時(shí)選用較短波長。此法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，可在室溫下顯色，黃色穩(wěn)定,在HNQ HCI04和f

9、SQ等介質(zhì)中都適用對酸度和顯色劑濃度的要求也不十分嚴(yán)格 , 干擾物少 , 在可見光范圍內(nèi)靈敏度較低 , 適測范圍廣（約為120mg/L P）,故廣泛應(yīng)用于含磷較高而且變幅較大的植物和肥料樣品中磷的測定。3、試劑（1）釩鉬酸銨溶液：鉬酸銨（NH 4） 6M07O2 4H2O,分析純?nèi)苡?00mL水中，必要時(shí)可適當(dāng)加熱， 但溫度不得超過 60 C。另將偏釩酸銨（NH4VO,分析純）溶于300mL沸水中，冷卻后加入250mL濃 HNO（分析純）。將鉬酸銨溶液緩緩注入釩酸銨 （溶液中，不斷攪勻，最后加水稀釋至1L,貯于棕色瓶 中。（2）NaOH溶液（c=6moI/L）:24gNaOH 溶于水，稀釋至

10、100ml。（3） 二硝基酚指示劑（p =2g/L）:,6- 二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中。（4）磷標(biāo)準(zhǔn)溶液p （P）=50mg/L:（ 干燥的KHPQ（分析純）溶于水，加入5ml濃HNO,于1L容 器瓶中定容。4、主要儀器設(shè)備。分光光度計(jì)。5、分析步驟準(zhǔn)確吸取定容,過濾或澄清后的消煮液 520ml（ V2,含放入50ml容量瓶中，加2滴二硝基酚 指示劑，滴加6mol/LNaOH中和至剛呈黃色，加入5ml釩鉬酸銨試劑，用水定容（V3）。15min后，用 1cm光徑的比色槽在波長 440nm處進(jìn)行測定，以空白溶液（空白溶液消煮液按上述步驟顯色 ）,調(diào)節(jié) 儀器零點(diǎn)。校準(zhǔn)曲線或直線回

11、歸方程 :準(zhǔn)確吸取 50mg/L P 標(biāo)準(zhǔn)液 0， 1， ， ， 10， 15ml分別放入 50mL容量瓶中 ， 按上述步驟顯色 ， 即得 0， ， ， ， ， 10， 15 ml P的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液 ， 與待測液一起進(jìn)行測定， 讀取吸光度 ， 然后繪制校準(zhǔn)曲線或求直線回歸方程。-4p (P) X VX (V1/V2) X 103 (P) =m式中：3 (P) 植物磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%；p (P)從校準(zhǔn)曲線或回歸方程求得的顯色液中磷的質(zhì)量濃度，mg/L;V消煮液定容體積，ml;V2吸取測定的消煮液體積，ml;M顯色液體積，ml;m稱樣量,g;10-4將mg/L濃度單位換算為百分含量的換算因數(shù)。7、注

12、釋(1) 顯色液中 p (P)=15 mg/L時(shí)，測定波長 420nm;520mg/L用490nm。待測液中 Fe3+濃度 高應(yīng)選用450nm,以清除Fe3+干擾。校準(zhǔn)曲線也應(yīng)用同樣波長測定繪制。(2) 一般室溫下，溫度對顯色影響不大，但室溫太低(如15C)時(shí),需顯色30min。穩(wěn)定時(shí)間 可達(dá) 24h。(3) 如試液為 HCl,HClO4介質(zhì)，顯色劑應(yīng)用 HCl配制；試液為SO介質(zhì)，顯色劑也用 HSC4 配制。 顯色液酸的適宜濃度范圍為 mol/L, 最好是 mol/L 。酸度高顯色慢且不完全 , 甚至不顯 色；低于mol/L易產(chǎn)生沉淀物，干擾測定。鉬酸鹽在顯色液中的終濃度適宜范圍為X10-3

13、 10-2mol/L, 釩酸鹽為 8X 10-5X 10-3 mol/L 。4、此法干擾離子少。主要干擾離子是鐵，當(dāng)顯色液中Fe3+濃度超過寸,它的黃色有干擾，可用扣除空白消除。二) 鉬銻抗吸光光度法1、適用范圍適合于含磷量較低的植物樣品的測定 (如莖稈樣品等 ) 。2、方法提要植物樣品經(jīng)濃 H2SO4 消煮使各種形態(tài)的磷轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。在一定酸度下 , 待測液中的正磷酸與鉬酸銨和酒石酸銻鉀生成一種三元雜多酸 , 后者在室溫下能迅速被抗壞血酸還原為藍(lán)色絡(luò)合物 , 可用吸光光度法測定。3、試劑(1)6mol/L NaOH 溶液(2)%二硝基酚指示劑(3) 2mol/L(1/2 H 2SQ)硫酸溶液

14、：濃SQ加水至 100mL。(4) 鉬銻貯存液：濃HSO(分析純)126 ml緩慢地注入約400 ml水中，攪拌,冷卻。鉬酸銨(分 析純)溶解于約60C的300ml水中，冷卻。然后將 HSO溶液緩緩倒入鉬酸銨溶液中，再加入100 % 酒石酸銻鉀(KSbOC4O6 I/2H2O,分析純)溶液,最后用水稀釋至 1L,避光貯存。此貯存液含鉬酸銨 為 1%,酸濃度為 c(1/2 H 2SO4)= mol/L(5) 鉬銻抗顯色劑：抗壞血酸(CsfO,左旋，旋光度+21+22,分析純)溶于100ml鉬銻貯存 液中，此液須隨配隨用，有效期一天，冰箱中存放，可用35天。(6) 磷標(biāo)準(zhǔn)工作液p (P)=5 mg

15、/L: 吸取100mg/L P標(biāo)準(zhǔn)貯存液稀釋 20倍，即為5 mg/L P 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 , 此溶液不宜久存。4、主要儀器設(shè)備。同上5、分析步驟吸取定容過濾或澄清后的消煮液(V2,含P530 u g)于50ml容量瓶中，用水稀釋至約 30ml,加12滴二硝基酚指示劑，滴加6mol/L NaOH溶液中和至剛呈黃色 ，再加入1滴2mol/L(1/2 H2SO)溶液，使溶液的黃色剛剛褪去，然后加入鉬銻抗顯色劑，搖勻，用水定容（V3） o在室溫高于15 C的條 件下放置30min后，用1cm光徑比色槽在波長 700nm處測定吸光度，以空白溶液為參比調(diào)節(jié)儀器零 點(diǎn)。校準(zhǔn)曲線或直線回歸方程 ：準(zhǔn)確吸取p

16、（P）= 5mg/L標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 0,1,2, 3, 4,5 ml, 分別 放入50mL容量瓶中，加水至30ml,同上步驟顯色并定容,即得0,按，L P標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，與 待測液同時(shí)測定，讀取吸光度，然后繪制校準(zhǔn)曲線或直線回歸方程。6、結(jié)果計(jì)算：同1o7、注釋根據(jù)分光光度計(jì)性能，可選用650890nm波長處測定,880890nm處靈敏度高三、植物全鉀的測定一火焰光度法（一）適用范圍。適合于植物樣品消煮液中鉀含量的測定。（二）方法提要植物樣品經(jīng)消煮或浸提，并經(jīng)稀釋后，待測液中的K可用火焰光度法測定。（三）試劑K標(biāo)準(zhǔn)溶液p （K）= 100mg/L:（ 分析純），在105110C干燥2h）溶于水，于1L容量瓶中定 容,存于塑料瓶中。（四）主要儀器設(shè)備。火焰光度計(jì)。（五）分析步驟吸取定容后的消煮液（V2）放入50mL容量瓶中，用水定容（V1）,直接在火焰光度計(jì)上測定 ，讀 取檢流計(jì)讀數(shù)。校準(zhǔn)曲線或直線回歸方程準(zhǔn)確吸取100mg/L K標(biāo)準(zhǔn)溶液0, 1, , 10, 20 ml,分別放入50mL 即得 0, 2, 5, 10, 20, 40 mg/L K 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。以濃度最高的標(biāo)準(zhǔn)溶液定火