正交實(shí)驗(yàn)法改進(jìn)廣西莪術(shù)醋制炮制工藝的初探

1、DOC格式論文，方便您的復(fù)制修改刪減正交實(shí)驗(yàn)法改進(jìn)廣西莪術(shù)醋制炮制工藝的初探(作者：單位：郵編：)【摘要】目的探討醋制廣西莪術(shù)的最佳炮制工藝條件。方法選擇醋制的米醋用量、醋制溫度、醋制加熱時間3個因素，每個因 素3個水平，按照L9(34)正交實(shí)驗(yàn)表安排實(shí)驗(yàn)，并提取出莪術(shù)各醋 制品中的有效成分揮發(fā)油和總姜黃素，分別對其含量進(jìn)行測定，以對莪術(shù)飲片的醋制工藝進(jìn)行優(yōu)選。結(jié)果較佳的工藝條件是A3B2C1，即 用20 ml米醋悶潤2 h后，控制溫度60 C烘制30 min。結(jié)論米醋用 量、烘制溫度、烘制時間均使莪術(shù)飲片質(zhì)量產(chǎn)生變化?！娟P(guān)鍵詞】廣西莪術(shù)；正交實(shí)驗(yàn)法；醋制；揮發(fā)油；姜黃素Abstract:Ob

2、jectiveTo optimize the processing technique of Rhizoma Curcumae fromGuan gxi.MethodsL9(34)orthog onalexperimental design table was adopted with 3 factors(dosage of vinegar, pocessing temperature, pocessing time)and 3 levels,and the contents of volatile oil and curcumin in different processedRhizoma

3、Curcumae from Guangxi were determined.ResultsThe optimal processed technique was A3B2C1 , namely, the sample was soaked with rice vinegar 20 ml, moisted for 80min,then dried at 90 C for 30min.Con clusi on The dosage of rice vin egar,process ing time ,process ing temperature are the mai n factors whi

4、ch affect the quality of processed Rhizoma OCurcumae from Guan gxi.Key words:Rhizoma Curcumae from Guangxi; Orthogonal desig n; Vi negar-porcess; Volatile oil; Curcumin廣西莪術(shù)即桂莪術(shù)為 Curcuma kwangsiensis S.G. LeeetC. F.Liang的塊根與根莖，其性味辛、苦、溫，歸肝、脾經(jīng)，具行氣破血、 消積止痛功效1，主要有效成分為揮發(fā)油和姜黃素，以桉油精、樟腦、 異龍腦、B-欖香烯、莪術(shù)烯、吉馬酮、a

5、-松油醇等含量為高，尚有姜 黃素(curcumin, I)、脫甲氧基姜黃素(demethoxycurcumin, II)和雙脫 甲氧基姜黃素(bisdemethoxycurcumin, III)等成分2。莪術(shù)炮制已有 數(shù)千年的歷史，目前莪術(shù)的炮制方法主要有潤切、蒸切、醋浸、醋炒、 醋煮等方法3，廣西主要為醋煮4,中國藥典2005年版收載為蒸 切、醋煮法。已知傳統(tǒng)不同炮制方法是莪術(shù)飲片中揮發(fā)油和姜黃素含 量以及莪術(shù)的藥理活性的重要影響因素5,6。本實(shí)驗(yàn)選擇醋制的米醋 用量、醋制溫度、醋制加熱時間3個因素，每個因素3個水平，按照 L9(34)正交實(shí)驗(yàn)表安排實(shí)驗(yàn)，并提取出莪術(shù)各醋制品中的有效成分揮

6、發(fā)油和總姜黃素，分別對其含量進(jìn)行測定，對莪術(shù)飲片的醋制工藝進(jìn) 行優(yōu)選。1儀器及材料揮發(fā)油提取器；BP211D電子分析天平（德國賽多利 斯）;KQ-500E型醫(yī)用超聲清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；UV分光光 度計(jì)（上海第三分析儀器廠）；姜黃素對照品由中國藥品生物制品檢定 所提供（批號為0823-9802）。實(shí)驗(yàn)所用莪術(shù)藥材購于廣西靈山縣，經(jīng) 廣西中醫(yī)學(xué)院韋松基教授鑒定為姜科植物廣西莪術(shù)（桂莪 術(shù)）Curcuma kwan gsie nsis S.G. LeeetC. F. Lia ng的根莖;其余所用試劑均為分析純。2方法2.1對照用炮制品制備2.1.1生莪術(shù)取原藥材，除凈雜質(zhì)，大小分檔，浸泡

7、 4 h，撈出 吸潤約23 d，吸潤時至透心為度，切成厚約 3 mm的薄片，曬干 即可7。2.1.2醋煮莪術(shù)取原藥材，除去雜質(zhì)，大小分檔，略泡，洗凈 后置鍋內(nèi)，用醋與適量熱水浸沒，用微火加熱煮，不斷翻動，煮至醋 吸盡透心，取出切中片，干燥，篩去灰屑。莪術(shù)每100 kg，用米醋20 kg4。2.1.3醋炙莪術(shù)取莪術(shù)片，加入定量醋拌勻，稍悶透，待醋被 吸盡后，置炒制容器后，用文火加熱，炒至微黃色，略帶焦斑時，取 出放涼，篩去碎屑。莪術(shù)每100 kg，用米醋20 kg8。2.1.4醋炒莪術(shù)取莪術(shù)片，放入熱鍋內(nèi)拌炒，每100 kg用醋10 kg，兌水適量，用武火邊炒邊灑，炒至醋水吸干，呈黃褐色，取出晾

8、 干即可5。2.1.5醋拌莪術(shù)取原藥材，除雜，淋醋拌透，約1 d,至醋被吸 盡，切片曬干。每100 kg莪術(shù)用醋25 kg8。2.1.6酒制莪術(shù)取莪術(shù)片，用微火加熱，炒熱后，均勻噴入酒， 繼續(xù)炒干，取出晾涼。莪術(shù)每100 kg，用米醋12 kg9。2.2正交試驗(yàn)樣品的制備根據(jù)莪術(shù)揮發(fā)油和姜黃素的理化特性 和文獻(xiàn)資料5,6，以揮發(fā)油和姜黃素的含量為目標(biāo)，選擇米醋用量、 加熱時間、加熱溫度3個因素，每個因素3個水平，按照L9（34）正 交實(shí)驗(yàn)表安排實(shí)驗(yàn)，見表1。挑揀形狀比較均勻，顏色比較鮮艷的凈 莪術(shù)根部飲片100 g 9份，加米醋（0，10，20 ml），拌勻，常溫下悶 潤2 h，待醋被飲片吸干

9、之后，分別放置于（60，80，100 C ）于干燥 箱中加熱一段時間（5，15，30 min）取出，后于鼓風(fēng)燥箱中鼓風(fēng)干燥， 溫度為室溫35 C，粉碎過65目篩，最后保存于硅膠 G干燥皿中1 個月。2.3實(shí)驗(yàn)樣品中揮發(fā)油測定根據(jù) 2005年版中國藥典I部附 錄XD揮發(fā)油測定甲法測定，讀取揮發(fā)油量，并計(jì)算藥材的出油率。 結(jié)果見表24。2.4總姜黃素含量測定102.4.1樣品制備各取100 g正交實(shí)驗(yàn)樣品中不同的莪術(shù)炮制品， 以15倍量的水提取兩次,1.5 h/次,合并兩次藥液，于水浴鍋上濃縮得 莪術(shù)干膏;精密稱定所得干膏適量，置離心管中,加入30 ml石油醚超聲 脫脂,棄去石油醚液，加入95%乙

10、醇20 ml,超聲提取2次海次30 min, 提取液濾過，定容至50 ml。表1正交實(shí)驗(yàn)因素水平表2正交實(shí)驗(yàn)樣 品中揮發(fā)油和總姜黃素的含量測定結(jié)果242標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制精密稱取姜黃素對照品適量，加乙醇溶解使 濃度為1.064 mg ml-1。精密吸取對照品溶液10,20,30,40,50山加乙 醇稀釋至10 ml搖勻，在426 nm波長處測定吸收度，得回歸方 程:Y=0.144 6X+0.016 9,r=0.999。總姜黃素濃度在 1.064 5.32 卩 g ml-1范圍內(nèi)與吸收度呈良好的線性關(guān)系。將正交實(shí)驗(yàn)各稠膏樣品依法提取、測定，計(jì)算含量。2.4.3穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取對照品溶液和莪術(shù)供試樣品液，間

11、隔15min測定吸收度，結(jié)果表明在 2 h內(nèi)吸收度穩(wěn)定，RSD分別為 1.35%(n=9)和 1.27%(n=9)。2.4.4精密度考察取同一莪術(shù)樣品液，進(jìn)行精密度測定，結(jié)果RSD 為 1.82%(n=5)。2.4.5重復(fù)性考察取同一批莪術(shù)樣品稠膏，重復(fù)提取測定5次, 結(jié)果RSD為1.56%。2.4.6加樣回收率測定精密稱取姜黃素對照品加入到已知含量 的莪術(shù)稠膏中，依法提取測定，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果顯示，平均回收率 為 98.63%,RSD 為 2.19%(n二5)。3結(jié)果1號至8號實(shí)驗(yàn)方案所得飲片的揮發(fā)油含量和姜黃素含量測定結(jié)果如表2所示。方差分析如表3所示。表3方差分析4討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：

12、對揮發(fā)油，A :1平均皿平均，表明條件比A2 , A3好。同理，B2和C1條件較好;從極差看出，因素B的極 差最大，是影響揮發(fā)油含量變化的主要因素，其次是 C，A因素影響 沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在本實(shí)驗(yàn)中，不考慮交互作用的影響，把各主要因 素的最優(yōu)水平組合起來，得到較佳工藝條件是 A1B2C1。對姜黃素， A因素A3是影響姜黃素含量變化的主要因素，其次是 C，B因素的 影響沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，A3-和C3為較佳工藝條件。表4廣西莪術(shù)不同炮制品揮發(fā)油得率本文旨在初探醋制莪術(shù)的最佳工藝，從莪術(shù)藥理活性姜黃素和 揮發(fā)油成分的理化性質(zhì)出發(fā)和以姜黃素和揮發(fā)油為目標(biāo)選擇了4個因素3個水平，試驗(yàn)結(jié)果表明，加熱處理過程

13、中，部分揮發(fā)油受熱易 揮發(fā)，過長時間過高溫度可造成其含量下降， 但是較短的加熱時間較 低的溫度又不能使米醋更好地滲入藥材細(xì)胞內(nèi)，影響莪術(shù)飲片姜黃素 有效成分的溶出；因此控制飲片炮制時受熱程度以及加入足量米醋時 保證莪術(shù)飲片質(zhì)量的主要因素，以試驗(yàn)結(jié)果和方差分析為依據(jù)，對各 個樣品進(jìn)行綜合評分，確定最佳工藝為 A3B2C1，即8號實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì); 本正交設(shè)計(jì)中溫度因素60 C，100 C水平分別為太陽曝曬干燥飲片和 水煎莪術(shù)的模擬條件，目的考察這兩個因素對莪術(shù)飲片質(zhì)量的影響。 但是何為最佳的炮制工藝標(biāo)準(zhǔn)還有待進(jìn)一步深入研究，包括對本實(shí)驗(yàn) 進(jìn)行藥理研究。正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)8號方案工藝炮制的莪術(shù)飲片中揮發(fā)油和姜黃

14、素 含量與傳統(tǒng)各種炮制規(guī)格莪術(shù)飲片揮發(fā)油和姜黃素含量比較都具有 統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，8號方案工藝炮制的莪術(shù)飲片中揮發(fā)油和姜黃素含量比傳統(tǒng)各種炮制規(guī)格莪術(shù)飲片揮發(fā)油和姜黃素含量高，而且所采用的米醋用量、溫度和加熱時間因素和水平范圍沒有超越各種傳統(tǒng)炮制方 法，因此這個莪術(shù)炮制的改進(jìn)方案是可行的。【參考文獻(xiàn)】1 國家藥典委員會中國藥典，I部S.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005:194.2 肖培根.新編中藥志，第1卷M.北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2002:778.3 衛(wèi)生部中醫(yī)研究院中藥研究所.中藥炮炙經(jīng)驗(yàn)集成M. 北京:人民衛(wèi)生出版社,1963:99.4 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳.廣西中藥炮制規(guī)范S.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997 : 115.5 魯漢蘭，彭智聰，劉勇，等.莪術(shù)炮制后對止痛及活血化瘀作用的影響J.中成藥，2000，22(2) : 136.6 陸兔林，楊光明，宋坤，等.氣質(zhì)聯(lián)用法分析炮