現(xiàn)代測(cè)試技術(shù)8

1、主講：主講： 何品剛何品剛 質(zhì)譜是由質(zhì)譜是由J.J.Thomson在上世紀(jì)在上世紀(jì)1906年發(fā)明了質(zhì)譜，并由年發(fā)明了質(zhì)譜，并由Aston在在1919年制成了世界上第一臺(tái)速度聚焦型質(zhì)譜儀，成為質(zhì)譜年制成了世界上第一臺(tái)速度聚焦型質(zhì)譜儀，成為質(zhì)譜發(fā)展史上的里程碑。發(fā)展史上的里程碑。 質(zhì)譜本質(zhì)上是一種物理方法，它與化學(xué)分析法及計(jì)算機(jī)技術(shù)相質(zhì)譜本質(zhì)上是一種物理方法，它與化學(xué)分析法及計(jì)算機(jī)技術(shù)相結(jié)合，可解決大量的化學(xué)分析問題。結(jié)合，可解決大量的化學(xué)分析問題。 質(zhì)譜是帶電原子、分子或分子碎片按質(zhì)荷比（或質(zhì)量）的大小質(zhì)譜是帶電原子、分子或分子碎片按質(zhì)荷比（或質(zhì)量）的大小順序排列的圖譜。順序排列的圖譜。 質(zhì)譜儀

2、是一類能使物質(zhì)粒子離子化并通過適當(dāng)?shù)碾妶?chǎng)、磁場(chǎng)將質(zhì)譜儀是一類能使物質(zhì)粒子離子化并通過適當(dāng)?shù)碾妶?chǎng)、磁場(chǎng)將它們按空間位置、時(shí)間先后或者軌道穩(wěn)定與否實(shí)現(xiàn)質(zhì)荷比分離，它們按空間位置、時(shí)間先后或者軌道穩(wěn)定與否實(shí)現(xiàn)質(zhì)荷比分離，并檢測(cè)強(qiáng)度后進(jìn)行物質(zhì)分析的儀器。并檢測(cè)強(qiáng)度后進(jìn)行物質(zhì)分析的儀器。第十章第十章 質(zhì)譜質(zhì)譜 (MS) Mass Spectroscopy 主要因?yàn)榘l(fā)展質(zhì)譜技術(shù)和方法而獲諾貝爾獎(jiǎng)的科學(xué)家有主要因?yàn)榘l(fā)展質(zhì)譜技術(shù)和方法而獲諾貝爾獎(jiǎng)的科學(xué)家有: :J. J. Thompson (J. J. Thompson (物理物理19061906，發(fā)明質(zhì)譜技術(shù)并用以研究氣體的電導(dǎo)，發(fā)明質(zhì)譜技術(shù)并用以研究氣體

3、的電導(dǎo)) )，F(xiàn). W. Aston (F. W. Aston (化學(xué)化學(xué)19221922，用質(zhì)譜儀發(fā)現(xiàn)了非放射性元素的同位素，用質(zhì)譜儀發(fā)現(xiàn)了非放射性元素的同位素) )， W. Paul (W. Paul (物理物理19801980，發(fā)明離子阱質(zhì)譜原理與技術(shù)，發(fā)明離子阱質(zhì)譜原理與技術(shù)) )，R. F. Curl, R. E. Smalley and H. W. Kroto (R. F. Curl, R. E. Smalley and H. W. Kroto (化學(xué)化學(xué)19961996，用質(zhì)譜，用質(zhì)譜儀觀察到激光轟擊下產(chǎn)生的儀觀察到激光轟擊下產(chǎn)生的C60), C60), K.TanakaK.Ta

4、naka和和J.B. Fenn J.B. Fenn （化學(xué)（化學(xué)20022002，發(fā)明生物大分子質(zhì)譜技術(shù)）。，發(fā)明生物大分子質(zhì)譜技術(shù)）。 質(zhì)譜分析原理質(zhì)譜分析原理 樣品分子（或原子）在離子源中離化成具樣品分子（或原子）在離子源中離化成具有不同質(zhì)量的帶電荷分子離子和碎片后，在有不同質(zhì)量的帶電荷分子離子和碎片后，在加速電場(chǎng)中獲得動(dòng)能形成離子束，離子束在加速電場(chǎng)中獲得動(dòng)能形成離子束，離子束在磁場(chǎng)中，運(yùn)動(dòng)的軌道發(fā)生偏轉(zhuǎn)，因此，具有磁場(chǎng)中，運(yùn)動(dòng)的軌道發(fā)生偏轉(zhuǎn)，因此，具有不同質(zhì)荷比的離子聚焦在不同點(diǎn)上，相同質(zhì)不同質(zhì)荷比的離子聚焦在不同點(diǎn)上，相同質(zhì)荷比的離子聚焦在同一點(diǎn)上，形成不同質(zhì)荷荷比的離子聚焦在同一點(diǎn)

5、上，形成不同質(zhì)荷比的譜線比的譜線 質(zhì)譜。質(zhì)譜。質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀儀器框圖儀器框圖儀器分類儀器分類質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀靜態(tài)質(zhì)譜儀靜態(tài)質(zhì)譜儀動(dòng)態(tài)質(zhì)譜儀動(dòng)態(tài)質(zhì)譜儀單聚焦質(zhì)譜儀單聚焦質(zhì)譜儀雙聚焦質(zhì)譜儀雙聚焦質(zhì)譜儀四極濾波器（或四極質(zhì)譜儀）四極濾波器（或四極質(zhì)譜儀）飛行時(shí)間質(zhì)譜儀飛行時(shí)間質(zhì)譜儀真空系統(tǒng)真空系統(tǒng) 為避免離子源燈絲損壞，離子損失，本底增高，為避免離子源燈絲損壞，離子損失，本底增高，副反應(yīng)過多，質(zhì)譜儀必須保持在副反應(yīng)過多，質(zhì)譜儀必須保持在10-3 10-8托的高真空托的高真空度。度。進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng) 樣品在進(jìn)入離子化室前必須轉(zhuǎn)化成氣態(tài)，因此進(jìn)樣品在進(jìn)入離子化室前必須轉(zhuǎn)化成氣態(tài)，因此進(jìn)樣系統(tǒng)通常放置于樣系統(tǒng)通

6、常放置于150oC恒溫箱中。氣體或揮發(fā)性強(qiáng)、恒溫箱中。氣體或揮發(fā)性強(qiáng)、沸點(diǎn)不同的液體試樣，通過擴(kuò)散小孔直接進(jìn)入貯氣球，沸點(diǎn)不同的液體試樣，通過擴(kuò)散小孔直接進(jìn)入貯氣球，再由細(xì)小鉑片漏氣孔導(dǎo)入離子化室。再由細(xì)小鉑片漏氣孔導(dǎo)入離子化室。名稱名稱簡稱簡稱類型類型離子化試劑離子化試劑特點(diǎn)特點(diǎn)電子轟擊離子化電子轟擊離子化（Electron Bomb Ionization)EI氣相氣相高電解電勢(shì)高電解電勢(shì) 高離子流，靈敏度高，穩(wěn)定性好；高離子流，靈敏度高，穩(wěn)定性好；但電子能量較大時(shí)，容易使分子離子進(jìn)但電子能量較大時(shí)，容易使分子離子進(jìn)一步斷裂。一步斷裂?；瘜W(xué)電離化學(xué)電離(Chemical Ionization

7、)CI氣相氣相試劑離子試劑離子 譜圖簡單，易解釋；但實(shí)驗(yàn)條件改譜圖簡單，易解釋；但實(shí)驗(yàn)條件改變能導(dǎo)致結(jié)果有很大差別。變能導(dǎo)致結(jié)果有很大差別。場(chǎng)電離場(chǎng)電離(Field Ionization)FI氣相氣相高能電勢(shì)電極高能電勢(shì)電極 能提高分子離子峰的相對(duì)強(qiáng)度，有能提高分子離子峰的相對(duì)強(qiáng)度，有利于混合物的定性、定量分析。利于混合物的定性、定量分析?？煸愚Z擊快原子轟擊(Fast Atom Bombandment)FAB解吸解吸高能電子高能電子 適合分析強(qiáng)極性、大分子量的化合適合分析強(qiáng)極性、大分子量的化合物，特別是熱穩(wěn)定性差的生化樣品。物，特別是熱穩(wěn)定性差的生化樣品。二次離子質(zhì)譜二次離子質(zhì)譜（Secon

8、dary Ion MS)SIMS解吸解吸高能離子高能離子 不需加熱樣品或使樣品汽化，適用不需加熱樣品或使樣品汽化，適用于熱不穩(wěn)定樣品，難揮發(fā)或不揮發(fā)樣品。于熱不穩(wěn)定樣品，難揮發(fā)或不揮發(fā)樣品。場(chǎng)解吸場(chǎng)解吸（Field Desorption)FD解吸解吸高電勢(shì)電極高電勢(shì)電極 適合分析難于汽化和熱穩(wěn)定性差適合分析難于汽化和熱穩(wěn)定性差的有機(jī)固體樣品，離子源容易被沾污。的有機(jī)固體樣品，離子源容易被沾污。離子源離子源電子轟擊電子轟擊離子源離子源 電噴霧電噴霧離子源離子源( (Electrospray Ionizsation, ESI)ESI)基質(zhì)輔助激光解吸基質(zhì)輔助激光解吸離子源離子源（Matrix As

9、sisted Laser Desorption/Ionization, MALDI） 原理原理 MALDI 是是80年代末才出現(xiàn)的一種新型電離技術(shù)，這種年代末才出現(xiàn)的一種新型電離技術(shù)，這種技術(shù)是將被分析物分散在基質(zhì)分子中并形成晶體，當(dāng)用激光技術(shù)是將被分析物分散在基質(zhì)分子中并形成晶體，當(dāng)用激光照射晶體時(shí)，由于基質(zhì)分子經(jīng)輻射所吸收的能量，導(dǎo)致能量照射晶體時(shí)，由于基質(zhì)分子經(jīng)輻射所吸收的能量，導(dǎo)致能量蓄積并迅速產(chǎn)熱，從而使晶體升華，釋放出完整的大分子的蓄積并迅速產(chǎn)熱，從而使晶體升華，釋放出完整的大分子的氣體分子、離子。氣體分子、離子。 因此特別適合于對(duì)生物大分子，如蛋白質(zhì)、因此特別適合于對(duì)生物大分子，

10、如蛋白質(zhì)、核酸、多糖以及磷脂等的質(zhì)量分析。核酸、多糖以及磷脂等的質(zhì)量分析?；|(zhì)的作用：基質(zhì)的作用：基質(zhì)相當(dāng)于樣品分子溶劑，樣品分子分散在基質(zhì)中，可消基質(zhì)相當(dāng)于樣品分子溶劑，樣品分子分散在基質(zhì)中，可消弱樣品分子間的相互作用。弱樣品分子間的相互作用?；|(zhì)將能量傳遞給樣品。要求對(duì)樣品的溶解性好，能有效基質(zhì)將能量傳遞給樣品。要求對(duì)樣品的溶解性好，能有效地吸收激光，并對(duì)樣品無共價(jià)修飾作用。地吸收激光，并對(duì)樣品無共價(jià)修飾作用。合適的反應(yīng)活性合適的反應(yīng)活性常用基質(zhì)常用基質(zhì)基質(zhì)基質(zhì)激發(fā)波長激發(fā)波長備注備注煙酸煙酸266nm266nm芥子酸芥子酸337337，355nm355nm耐雜質(zhì)，適用于混合物耐雜質(zhì)，適用

11、于混合物2 2，5-5-二羥基苯甲酸（二羥基苯甲酸（DHB)DHB)337,355nm337,355nm耐雜質(zhì)耐雜質(zhì)琥珀酸琥珀酸2.94,10.6nm2.94,10.6nm阿魏酸阿魏酸337nm337nm耐雜質(zhì)耐雜質(zhì)質(zhì)量分析器質(zhì)量分析器單聚焦質(zhì)量分析器單聚焦質(zhì)量分析器 收集器收集器離子源離子源BS1S2磁磁場(chǎng)場(chǎng)R在磁場(chǎng)存在下，帶電離子按曲線軌跡在磁場(chǎng)存在下，帶電離子按曲線軌跡飛行；飛行； 離心力離心力 =向心力；向心力；m 2 / R= H0 e V曲率半徑：曲率半徑： R= m 2 / e H0 V質(zhì)譜方程式：質(zhì)譜方程式：R=1.414 (m /e )1/2 V1/2 /H0離子在磁場(chǎng)中的軌

12、道半徑離子在磁場(chǎng)中的軌道半徑R取決于：取決于： m/e 、 H0 、 V改變加速電壓改變加速電壓V, 可以使不同可以使不同m/e 的離的離子進(jìn)入檢測(cè)器。子進(jìn)入檢測(cè)器。質(zhì)譜分辨率質(zhì)譜分辨率 = M / M （分辨率與選（分辨率與選定分子質(zhì)量有關(guān)定分子質(zhì)量有關(guān)）加速后離子的動(dòng)能加速后離子的動(dòng)能 :(1/2)m 2= e V = (2V)/(m/e)1/2雙聚焦質(zhì)量分析器雙聚焦質(zhì)量分析器 由一個(gè)扇型靜電場(chǎng)（由一個(gè)扇型靜電場(chǎng)（ 90o或或60o）和一個(gè)扇型（）和一個(gè)扇型（ 90o或或60o）的）的均勻磁場(chǎng)組成。均勻磁場(chǎng)組成。 離子獲得動(dòng)能：離子獲得動(dòng)能：離子源離子源收集器收集器磁場(chǎng)磁場(chǎng)電場(chǎng)電場(chǎng)S1S2

13、+-2212eErmv能量聚焦：能量聚焦： 相同質(zhì)荷比，速度(能量)不同的離子會(huì)聚；方向聚焦：方向聚焦： 相同質(zhì)荷比，入射方向不同的離子會(huì)聚； 質(zhì)量相同，能量不同的離子通過電場(chǎng)和磁場(chǎng)時(shí)，均產(chǎn)生能量色散；兩種作用大小相等，方向相反時(shí)互補(bǔ)實(shí)現(xiàn)雙聚焦；四極質(zhì)量分析器四極質(zhì)量分析器 四極質(zhì)量分析器為非磁性結(jié)構(gòu)的動(dòng)態(tài)質(zhì)量分析器，四根互相平四極質(zhì)量分析器為非磁性結(jié)構(gòu)的動(dòng)態(tài)質(zhì)量分析器，四根互相平行、直線性良好的金屬棒組成。行、直線性良好的金屬棒組成。飛行時(shí)間質(zhì)量分析器飛行時(shí)間質(zhì)量分析器 為一種無磁態(tài)質(zhì)量分析器，根據(jù)不同質(zhì)荷比的離子在無場(chǎng)分離為一種無磁態(tài)質(zhì)量分析器，根據(jù)不同質(zhì)荷比的離子在無場(chǎng)分離區(qū)中的速度不同

14、，而造成漂移時(shí)間的差異而分離。區(qū)中的速度不同，而造成漂移時(shí)間的差異而分離。 = (2V)/(m/e)1/2; t=l/ ; t=l (m/e)/(2V)1/2檢測(cè)器檢測(cè)器法拉第杯：檢測(cè)方便，靈敏度不高，但它可準(zhǔn)確測(cè)定穿過出射狹縫的離子法拉第杯：檢測(cè)方便，靈敏度不高，但它可準(zhǔn)確測(cè)定穿過出射狹縫的離子流。流。照相板：質(zhì)譜法中應(yīng)用最早的檢測(cè)方式，現(xiàn)僅應(yīng)用于某些無機(jī)質(zhì)譜儀中。照相板：質(zhì)譜法中應(yīng)用最早的檢測(cè)方式，現(xiàn)僅應(yīng)用于某些無機(jī)質(zhì)譜儀中。電子倍增管：原理類似于光電倍增管，檢測(cè)靈敏度高。電子倍增管：原理類似于光電倍增管，檢測(cè)靈敏度高。質(zhì)譜圖質(zhì)譜圖基峰基峰一、分子離子峰一、分子離子峰 分子電離一個(gè)電子形成

15、的離子所產(chǎn)生的峰分子電離一個(gè)電子形成的離子所產(chǎn)生的峰(M(M+ +) )，也稱母峰。，也稱母峰。 分子離子的質(zhì)量與化合物的分子量相等。分子離子的質(zhì)量與化合物的分子量相等。一般質(zhì)譜圖上質(zhì)荷比最大的一般質(zhì)譜圖上質(zhì)荷比最大的峰為分子離子峰；有例外峰為分子離子峰；有例外, ,例例如同位素離子峰。如同位素離子峰。 形成分子離子需要的能量形成分子離子需要的能量最低，一般約最低，一般約1010電子伏特。因電子伏特。因此，很多分子會(huì)分裂成很多碎此，很多分子會(huì)分裂成很多碎片峰。有機(jī)化合物分子離子峰片峰。有機(jī)化合物分子離子峰的穩(wěn)定性順序：的穩(wěn)定性順序：芳香化合物共軛鏈烯烯烴芳香化合物共軛鏈烯烯烴脂環(huán)化合物直鏈烷烴

16、酮脂環(huán)化合物直鏈烷烴酮胺酯醚酸支鏈烷烴胺酯醚酸支鏈烷烴醇醇例如：例如：CHCH4 4 M M=16=161212C+C+1 1H H4=16 4=16 M M1313C+C+1 1H H4=17 4=17 M M +1+11212C+C+2 2H+H+1 1H H3=17 3=17 M M +1+11313C+C+2 2H+H+1 1H H3=18 3=18 M M +2+2二、同位素離子峰（二、同位素離子峰（M+1峰）峰）由于同位素的存在，可以看到比分子離子峰大一個(gè)質(zhì)量單位的峰；有由于同位素的存在，可以看到比分子離子峰大一個(gè)質(zhì)量單位的峰；有時(shí)還可以觀察到時(shí)還可以觀察到M M+2+2，M M+

17、3+3。；。；1615m/zR A13.1121.0133.9149.2158516100171.1M,M+1 M,M+1 峰相對(duì)強(qiáng)度峰相對(duì)強(qiáng)度 - - 同位素自然豐度同位素自然豐度(M+1)/M = c(1.107/98.893) + h(0.015/99.985) + n(0.366/99.634) + o(0.037/99.759) c: C 個(gè)數(shù)個(gè)數(shù) h: H個(gè)數(shù)個(gè)數(shù) n: N個(gè)數(shù)個(gè)數(shù) o: O個(gè)數(shù)個(gè)數(shù)CH4(M+1)/M = 1 (1.107/98.893) + 4 (0.015/99.985) = 0.0118Beynon 表表 對(duì)只有對(duì)只有 C, H, O, N C, H, O,

18、 N 的的化合物同位素峰強(qiáng)度比與組成分子的元素間的化合物同位素峰強(qiáng)度比與組成分子的元素間的關(guān)系編制成表關(guān)系編制成表例如：例如： M=150化合物化合物 M+1 M+2 化合物化合物 M+1 M+2C6H14NOCl 8.15 0.49 C7H11N4 9.25 0.38C6H14O4 6.86 1.0 C8H6 O3 8.36 0.95C7H2 O4 7.75 1.06 C8H8N O2 9.23 0.78C7H4N O3 8.13 1.06 C8H11N2 O 9.61 0.61C7H6N2 O2 8.50 0.72 C8H12N3 9.98 0.45C7H8N3 O 8.88 0.55 C

19、9H10 O2 9.96 0.84只含只含 C, H, O, N C, H, O, N 的的 M+2 M+2 峰很弱，峰很弱， 幾乎可忽略。幾乎可忽略。但含但含 Br, Cl, S Br, Cl, S 的的 M+2 M+2 卻很強(qiáng)卻很強(qiáng) （自然豐度大）自然豐度大）Cl 75.53 (35Cl) 24.47 (37Cl)Br 50.54 (79Br) 49.46 (81Br)S 95.0 (32S) 4.22 (34S)M/(M+2) Cl: 3:1 Br: 1:1(a) 2-氯丙烷氯丙烷M+ 78M+2 80 (M+2)/M 1:3(b) 2-溴丁烷溴丁烷M+ 136M+2 138 (M+2)

20、/M 1:1 一般有機(jī)化合物的電離能為一般有機(jī)化合物的電離能為7 71313電子伏特，質(zhì)譜中常用電子伏特，質(zhì)譜中常用的電離電壓為的電離電壓為7070電子伏特，使結(jié)構(gòu)裂解，產(chǎn)生各種電子伏特，使結(jié)構(gòu)裂解，產(chǎn)生各種“碎片碎片”離離子。子。H3CCH2CH2CH2CH2CH315712957434357297115H3CCH2CH2CH2CH2CH3H3CCH2CH2CH2CH2CH3H3CCH2CH2CH2CH2CH3H3CCH2CH2CH2CH2CH3CH3CH2CH2CH2CH2CH31529435771正己烷正己烷H3C C CH3CH3H3C CH CH3H3C CH2CH3m/z15294

21、357859911314271正癸烷正癸烷應(yīng)用應(yīng)用化合物的分子量和化學(xué)式化合物的分子量和化學(xué)式在低分辨率的質(zhì)譜圖中的同位素在低分辨率的質(zhì)譜圖中的同位素 即利用分子離子與它的即利用分子離子與它的（M+1),(M+2)M+1),(M+2)等同位素離子的相對(duì)豐度比來推導(dǎo)其元素組成等同位素離子的相對(duì)豐度比來推導(dǎo)其元素組成。在高分辨質(zhì)譜精密測(cè)定分子離子的精確質(zhì)量，然后根據(jù)每一種同位素在高分辨質(zhì)譜精密測(cè)定分子離子的精確質(zhì)量，然后根據(jù)每一種同位素的原子量所特有的質(zhì)量虧損推出分子離子的元素。的原子量所特有的質(zhì)量虧損推出分子離子的元素。官能團(tuán)和化合物的類型官能團(tuán)和化合物的類型通過質(zhì)譜中各種碎片離子的質(zhì)荷比和豐度

22、來提供有關(guān)化合物所含官能通過質(zhì)譜中各種碎片離子的質(zhì)荷比和豐度來提供有關(guān)化合物所含官能團(tuán)和化合物的類型。團(tuán)和化合物的類型?；鶊F(tuán)之間的連接和空間結(jié)構(gòu)基團(tuán)之間的連接和空間結(jié)構(gòu)質(zhì)譜中一些重排離子屬于一類特征離子的產(chǎn)生需要相關(guān)基團(tuán)處于特定質(zhì)譜中一些重排離子屬于一類特征離子的產(chǎn)生需要相關(guān)基團(tuán)處于特定的空間位置，因此，這些離子的存在能提供分子中某些基團(tuán)的連續(xù)次的空間位置，因此，這些離子的存在能提供分子中某些基團(tuán)的連續(xù)次序或空間排列。序或空間排列。SampleSample 58901.0 DEG/MINHEWLETTPACKARDHEWLETTPACKARD5972AMass Selective Detect

23、orDCBA ABCDGas Chromatograph (GC)Mass SpectrometerSeparationIdentificationBACDADBCMS色譜色譜- -質(zhì)譜聯(lián)用質(zhì)譜聯(lián)用GC-MS；LC-MS；CZE-MSGC-MS噴射式分子分離器：噴射式分子分離器： 由一對(duì)同軸收縮型噴嘴構(gòu)成，噴嘴被封在一真空室中，如由一對(duì)同軸收縮型噴嘴構(gòu)成，噴嘴被封在一真空室中，如圖所示?？勺龀啥嗉?jí)。圖所示?？勺龀啥嗉?jí)。色譜色譜- -四極桿質(zhì)譜儀結(jié)構(gòu)示意圖四極桿質(zhì)譜儀結(jié)構(gòu)示意圖LC-MSLC-MS大氣壓電離技術(shù)大氣壓電離技術(shù)（API）（1 1）電噴霧電離）電噴霧電離（ API Electrosp

24、ray）RayleighLimitReached+-+-+-+-Evaporation+Charged Droplets試樣離子準(zhǔn)分子離子Analyte Ions Solvent Ion ClustersSalts/Ion pairsNeutrals+-其他離子流出液在高電場(chǎng)下形成帶電噴霧，在電場(chǎng)力作用下穿過氣簾；流出液在高電場(chǎng)下形成帶電噴霧，在電場(chǎng)力作用下穿過氣簾；氣簾的作用：霧化；蒸發(fā)溶劑；阻止中性溶劑分子氣簾的作用：霧化；蒸發(fā)溶劑；阻止中性溶劑分子Capillary-HPLC/CE/ESI-MS System系統(tǒng)結(jié)構(gòu)示意圖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)示意圖生物質(zhì)譜（生物質(zhì)譜（Biomass Spectrom

25、etry) 1.1.新的離子化技術(shù)新的離子化技術(shù) 電噴霧質(zhì)譜技術(shù)和基質(zhì)輔助激光解吸附質(zhì)譜技術(shù)的誕生。電噴霧質(zhì)譜技術(shù)和基質(zhì)輔助激光解吸附質(zhì)譜技術(shù)的誕生。這兩項(xiàng)技術(shù)的出現(xiàn)使傳統(tǒng)的主要用于小分子物質(zhì)研究的質(zhì)譜技術(shù)這兩項(xiàng)技術(shù)的出現(xiàn)使傳統(tǒng)的主要用于小分子物質(zhì)研究的質(zhì)譜技術(shù)發(fā)生了革命性的變革。它們具有高靈敏度和高質(zhì)量檢測(cè)范圍，使發(fā)生了革命性的變革。它們具有高靈敏度和高質(zhì)量檢測(cè)范圍，使得在得在pmolpmol（10-1210-12甚至甚至fmolfmol（10-1510-15的水平上準(zhǔn)確地分析分子量的水平上準(zhǔn)確地分析分子量高達(dá)幾萬到幾十萬的生物大分子成為可能，從而使質(zhì)譜技術(shù)真正高達(dá)幾萬到幾十萬的生物大分子成

26、為可能，從而使質(zhì)譜技術(shù)真正走入了生命科學(xué)的研究領(lǐng)域走入了生命科學(xué)的研究領(lǐng)域. . 2. .各種色譜技術(shù)聯(lián)用各種色譜技術(shù)聯(lián)用GC/MS, HPLC/MS, TLC/MS 和和CZE/MS等。等。生物質(zhì)譜技術(shù)的生物質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用應(yīng)用 肽和蛋白質(zhì)分析肽和蛋白質(zhì)分析糖蛋白、糖肽和糖質(zhì)量測(cè)定糖蛋白、糖肽和糖質(zhì)量測(cè)定肽的測(cè)序肽的測(cè)序蛋白質(zhì)中胱氨酸和胱氨酸殘基的定位蛋白質(zhì)中胱氨酸和胱氨酸殘基的定位蛋白磷酸化定位蛋白磷酸化定位肽指紋圖譜測(cè)定肽指紋圖譜測(cè)定 對(duì)蛋白酶解或降解后所得多肽混合物進(jìn)行質(zhì)譜分析的方法，對(duì)對(duì)蛋白酶解或降解后所得多肽混合物進(jìn)行質(zhì)譜分析的方法，對(duì)質(zhì)譜分析所得肽片與多肽蛋白數(shù)據(jù)庫中蛋白質(zhì)的理論肽片進(jìn)行比較，質(zhì)譜分析所得肽片與多肽蛋白數(shù)據(jù)庫中蛋白質(zhì)的理論肽片進(jìn)行比較，從而判別所測(cè)蛋白是已知還是未知。由于不同的蛋白質(zhì)具有不同的氨從而判別所測(cè)蛋白是已知還是未知。由于不同的蛋白質(zhì)具有不同的氨基酸序列，因而不同蛋白質(zhì)所得肽片具有指紋的特征?；嵝蛄?，因而不同蛋白質(zhì)所得肽片具有指紋的特征。 核酸的質(zhì)譜分析核酸的質(zhì)譜分析 ESIESI和和MALDIMALDI質(zhì)譜技術(shù)為寡核苷酸及其