神經(jīng)干動作電位的記錄與觀察

1、神經(jīng)干動作電位神經(jīng)干動作電位目的目的o通過記錄神經(jīng)干的復(fù)合動作電位，掌握生物電記錄的一般原則和方法。o學(xué)會利用刺激器誘發(fā)組織興奮的方法；掌握設(shè)定刺激參數(shù)的方法。o學(xué)習(xí)分析辨別動作電位，了解其產(chǎn)生的基本原理，加強對興奮性和閾強度的了解。實驗原理實驗原理o用電刺激神經(jīng)，在刺激電極的負極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)用電刺激神經(jīng)，在刺激電極的負極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)產(chǎn)生去極化，當(dāng)去極化達到閾電位，膜上產(chǎn)生一次產(chǎn)生去極化，當(dāng)去極化達到閾電位，膜上產(chǎn)生一次可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn)，即可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn)，即動作電位動作電位。o神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動作電位是以神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動作電位是以膜外膜外記錄方式記錄方式

2、記錄到的記錄到的復(fù)合動作電位復(fù)合動作電位。o如果兩個引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面，如果兩個引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面，興奮波先后通過兩個電極處，便引導(dǎo)出兩個方向相興奮波先后通過兩個電極處，便引導(dǎo)出兩個方向相反的電位波形，稱反的電位波形，稱雙相動作電位雙相動作電位。雙相動作電位雙相動作電位 biphasic action potential興奮區(qū)細胞外引導(dǎo)電極檢流計刺激偽跡(stimulus artifact)刺激器刺激器放大器放大器+地地刺激電流i-i+r+r-地地刺激偽跡是刺激電流通過導(dǎo)電介質(zhì)擴散至刺激偽跡是刺激電流通過導(dǎo)電介質(zhì)擴散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號。兩引導(dǎo)電極而形

3、成的電位差信號。刺激偽跡ap屏蔽盒用有機玻璃制成，盒內(nèi)有兩根導(dǎo)軌，導(dǎo)軌上有屏蔽盒用有機玻璃制成，盒內(nèi)有兩根導(dǎo)軌，導(dǎo)軌上有7個裝有銀絲電極個裝有銀絲電極的有機玻璃滑塊，每個電極滑塊通過導(dǎo)線與標(biāo)本盒側(cè)壁的一個接的有機玻璃滑塊，每個電極滑塊通過導(dǎo)線與標(biāo)本盒側(cè)壁的一個接線柱相聯(lián)，其中一對作刺激電極，線柱相聯(lián)，其中一對作刺激電極，l2對作記錄電極，記錄電極對作記錄電極，記錄電極與刺激電極間的電極接地。與刺激電極間的電極接地。屏蔽盒內(nèi)要保持一定的濕度，但電極間不要短路，電極的銀絲必需保持清潔；屏蔽盒內(nèi)要保持一定的濕度，但電極間不要短路，電極的銀絲必需保持清潔；實驗時標(biāo)本應(yīng)經(jīng)常保持濕潤，標(biāo)本兩端的扎線要懸空

4、；實驗時標(biāo)本應(yīng)經(jīng)常保持濕潤，標(biāo)本兩端的扎線要懸空； 神經(jīng)的近中樞端置于刺激電極一側(cè)，外周端置于記錄電極側(cè)。神經(jīng)的近中樞端置于刺激電極一側(cè)，外周端置于記錄電極側(cè)。 地0123456刺激通道2通道1實驗材料實驗材料o動物動物蟾蜍蟾蜍o器械器械常用手術(shù)器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、常用手術(shù)器械、蛙板、毀髓針、玻璃解剖針、神經(jīng)屏蔽盒神經(jīng)屏蔽盒、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。、大頭針、任氏液、燒杯、培養(yǎng)皿。rm6240b生理信號記錄儀。生理信號記錄儀。操作過程操作過程o坐骨神經(jīng)干的制備坐骨神經(jīng)干的制備o雙毀髓雙毀髓 （錄像）（錄像）o制備下肢標(biāo)本制備下肢標(biāo)本 （錄像）（錄像）o制備坐骨神經(jīng)標(biāo)本制備坐骨

5、神經(jīng)標(biāo)本 （錄像）（錄像）2. 連接實驗裝置連接實驗裝置地0123456刺激通道2通道1o實驗操作實驗操作進入實驗?zāi)K進入實驗?zāi)K：“實驗實驗” 肌肉神經(jīng)肌肉神經(jīng)神經(jīng)神經(jīng)干動作電位干動作電位 彈出彈出刺激器對話框，并處刺激器對話框，并處于示波狀態(tài)于示波狀態(tài) 在刺在刺激器對話框中選擇同激器對話框中選擇同步觸發(fā)。步觸發(fā)。o測量坐骨神經(jīng)干的閾強度、最適刺激強度測量坐骨神經(jīng)干的閾強度、最適刺激強度：調(diào)整刺：調(diào)整刺激強度從激強度從0mv遞增，求得遞增，求得閾強度、最適刺激強度閾強度、最適刺激強度。o在最適刺激強度下，在最適刺激強度下，觀察動作電位形狀，觀察動作電位形狀，測量其測量其時時程程及及幅度幅度。

6、 根據(jù)波形幅度可調(diào)節(jié)位于屏幕根據(jù)波形幅度可調(diào)節(jié)位于屏幕上顯示通道右側(cè)的上顯示通道右側(cè)的靈敏度靈敏度。 參數(shù)調(diào)節(jié)后，應(yīng)再次點擊參數(shù)調(diào)節(jié)后，應(yīng)再次點擊“開開始刺激始刺激”鍵，以刷新波形。鍵，以刷新波形。 可用可用“pgup”與與“pgdn”翻頁查翻頁查找波形。找波形。o神經(jīng)損傷對復(fù)合動作電位的影響神經(jīng)損傷對復(fù)合動作電位的影響 在第一對記錄電在第一對記錄電極間用鑷子夾傷神經(jīng)干，記錄動作電位。觀察復(fù)合極間用鑷子夾傷神經(jīng)干，記錄動作電位。觀察復(fù)合動作電位有何變化。動作電位有何變化。+ - r1-r1 +r2-r2 +peripheral endcentral end注意事項注意事項o制作標(biāo)本過程中應(yīng)盡量

7、減少對神經(jīng)的牽拉，以免損傷制作標(biāo)本過程中應(yīng)盡量減少對神經(jīng)的牽拉，以免損傷神經(jīng)。神經(jīng)。o實驗過程中，要經(jīng)常保持標(biāo)本濕潤。實驗過程中，要經(jīng)常保持標(biāo)本濕潤。o神經(jīng)干應(yīng)與每個使用的電極密切接觸。神經(jīng)干應(yīng)與每個使用的電極密切接觸。o實驗結(jié)束后，神經(jīng)屏蔽盒應(yīng)清洗、擦干，以防止殘留實驗結(jié)束后，神經(jīng)屏蔽盒應(yīng)清洗、擦干，以防止殘留的鹽液常腐蝕電極。的鹽液常腐蝕電極。坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備 方法與步驟：方法與步驟：1. 雙毀髓雙毀髓： 毀髓針自枕骨大孔分別進入顱腔和椎管搗毀腦和脊髓；毀髓針自枕骨大孔分別進入顱腔和椎管搗毀腦和脊髓；2. 剝制后肢標(biāo)本剝制后肢標(biāo)本：剪去頭、前肢和內(nèi)臟，剩余脊柱和后肢；剪去頭、前肢和內(nèi)臟，剩余脊柱和后肢；3. 分離兩后肢分離兩后肢：左右兩后肢分開，勿損傷兩側(cè)坐骨神經(jīng)；左右兩后肢分開，勿損傷兩側(cè)坐骨神經(jīng)；4. 分離坐骨神經(jīng)分離坐骨神經(jīng)：玻璃分針，保留一段脊柱骨；玻璃分針，保留一段脊柱骨；5. 游離腓腸肌游離腓腸?。焊旖Y(jié)扎跟腱結(jié)扎6. 分離股骨頭分離股骨頭7. 檢驗標(biāo)本檢驗標(biāo)本：鋅銅弓電極鋅銅弓電極完整標(biāo)本完整標(biāo)本坐骨神經(jīng)坐骨神經(jīng)腓腸肌腓腸肌股骨頭股骨頭一段脊柱骨一段脊柱骨注意事項注意事項：.操作過程中切勿