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1、人教版選修人教版選修1專題專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)課題背景 尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。但是尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氮之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕浮?尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的。 1828年,德國化學(xué)家維勒成功地通過無機(jī)物的化學(xué)反映合成了尿素,揭開了歷史上人工合成有機(jī)物的新篇章。尿素研究思路 篩選菌株 pcr的自動(dòng)化需要耐高溫的 dna聚合酶,這種酶要能忍受
2、93左右的高溫。 科學(xué)家從水生耐熱細(xì)菌taq中分離到耐高溫的taq dna 聚合酶。 為什么taq 細(xì)菌能從熱泉中被篩選出來呢? 因?yàn)闊崛?0-80的高溫條件淘汰了絕大多數(shù)微生物,而使耐高溫的taq 細(xì)菌脫穎而出。實(shí)驗(yàn)室微生物的篩選原理 應(yīng)用篩選 taq 細(xì)菌的原理,人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、ph等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 常用稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)3030
3、0的平板計(jì)數(shù)。培養(yǎng)基上的菌落設(shè)置對照設(shè)置對照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)合課本上給出的資料與實(shí)驗(yàn)流程示意圖,思考有關(guān)問題,然后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),并且給出詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案。 資料一 土壤取樣 資料二 樣品的稀釋 資料三 微生物的培養(yǎng)與觀察操作提示無菌操作 1.取土樣的小鐵鏟和盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。 2.應(yīng)在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入燒瓶中,塞好棉塞。 3.在稀釋土壤溶液的過程中,每一步都要在火焰旁操作。做好標(biāo)記本實(shí)驗(yàn)使用的平板和試管比較多。為避免混淆,最好在使用前就做好標(biāo)記。 例如: 在標(biāo)記培養(yǎng)皿時(shí),應(yīng)注明培養(yǎng)基種類、培
4、養(yǎng)日期以及平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度。 規(guī)劃時(shí)間對于耗時(shí)較長的生物實(shí)驗(yàn),我們需要實(shí)現(xiàn)規(guī)劃時(shí)間,以便提高工作效率,在操作時(shí)更加有條不紊。結(jié)果分析與評價(jià)結(jié)合對照,分析培養(yǎng)物總共是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出一些菌落?是否獲得了某一稀釋度下,菌落數(shù)目在30300的平板。在這一稀釋度下,是否至少有兩個(gè)平板的菌落數(shù)相接近?你統(tǒng)計(jì)的每克土壤中含有能分解尿素的細(xì)菌的菌落數(shù)是多少?與其他同學(xué)的結(jié)果接近嗎?如果差異很大,可能是什么原因引起的?課題延伸本課題對能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選,這只是純化菌種的第一步。對分離菌種作進(jìn)一步的鑒定,還需要借助生物化學(xué)的方法。我們可以通過檢測培養(yǎng)基ph的變化來判斷細(xì)菌是否分解尿素的化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。指示劑也可以幫助我們準(zhǔn)確地鑒定該種細(xì)菌能否分解尿素。相關(guān)鏈接活菌計(jì)數(shù)技術(shù)廣泛應(yīng)用于土壤含菌亮的測定、食品衛(wèi)生和水源污染度的檢驗(yàn)等方面。如果你趕興
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