《酶分子修飾》精選

1、上節(jié)課主要內(nèi)容回顧上節(jié)課主要內(nèi)容回顧 從酶的生產(chǎn)到酶的改性從酶的生產(chǎn)到酶的改性 酶分子修飾酶分子修飾 所要解決的問題和修飾的目標(biāo)所要解決的問題和修飾的目標(biāo) 酶分子修飾的種類酶分子修飾的種類 側(cè)鏈基團(tuán)修飾側(cè)鏈基團(tuán)修飾酶的改性（酶的改性（enzymic improving）：通過各種方法：通過各種方法使酶的催化特性得以改進(jìn)的技術(shù)過程。使酶的催化特性得以改進(jìn)的技術(shù)過程。酶改性的技術(shù)酶改性的技術(shù)l 酶分子的修飾酶分子的修飾l 酶固定化酶固定化l 酶的非水相催化酶的非水相催化l 酶的定向進(jìn)化酶的定向進(jìn)化l 酶分子修飾酶分子修飾 通過各種方法使通過各種方法使酶分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變酶分子的結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變

2、，從而改變酶的某些特性和功能的技術(shù)過程從而改變酶的某些特性和功能的技術(shù)過程稱為酶分子修飾。稱為酶分子修飾。4.1 4.1 概述概述2、酶分子修飾的原因、酶分子修飾的原因 細(xì)胞外穩(wěn)定性差；細(xì)胞外穩(wěn)定性差； 酶活性不夠高；酶活性不夠高； 具有抗原性。具有抗原性。4.1 4.1 概述概述4、酶分子修飾的目的、酶分子修飾的目的 研究酶的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。研究酶的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系。 人為改變天然酶的某些性質(zhì)，擴(kuò)大酶的應(yīng)用范圍。人為改變天然酶的某些性質(zhì)，擴(kuò)大酶的應(yīng)用范圍。（70年代末之后）年代末之后）提高酶的生物活性（酶活力）。提高酶的生物活性（酶活力）。增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性（熱穩(wěn)定性、體內(nèi)半衰期）。增強(qiáng)酶的穩(wěn)

3、定性（熱穩(wěn)定性、體內(nèi)半衰期）。消除抗原性（針對特異性反應(yīng)降低生物識別能消除抗原性（針對特異性反應(yīng)降低生物識別能力）。力）。產(chǎn)生新的催化能力。產(chǎn)生新的催化能力。4.4 酶分子的修飾方法酶分子的修飾方法 金屬離子置換修飾金屬離子置換修飾 大分子結(jié)合修飾大分子結(jié)合修飾 側(cè)鏈基團(tuán)修飾側(cè)鏈基團(tuán)修飾 肽鏈有限水解修飾肽鏈有限水解修飾 氨基酸置換修飾氨基酸置換修飾 酶分子的物理修飾酶分子的物理修飾 氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)修飾劑Lys（賴）氨基三硝基苯磺酸，2,4-二硝基氟苯、碘乙酸、碘乙酰胺、丹磺酰氯、亞硝酸Asp、Glu（天冬、谷）羧基碳化二亞胺Arg（精）胍基苯乙二醛，1,2環(huán)己二酮、丁二酮Cys（半胱）巰基碘

4、乙酸、碘乙酰胺、N-乙基馬來酰亞胺二硫鍵巰基乙醇、DTT（二硫蘇糖醇）His（組）咪唑基焦碳酸二乙酯、碘乙酸Tyr（酪）酚羥基碘、四硝基甲烷Trp（色）吲哚基N-溴代琥珀酰亞胺 各種氨基酸側(cè)鏈的修飾劑各種氨基酸側(cè)鏈的修飾劑4. 酶蛋白主鏈修飾（肽鏈有限水解修飾）酶蛋白主鏈修飾（肽鏈有限水解修飾） 利用酶分子利用酶分子主鏈的切斷和連接主鏈的切斷和連接，使酶分子的化學(xué)，使酶分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變，從而改變酶的結(jié)構(gòu)及其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生某些改變，從而改變酶的特性和功能的方法。特性和功能的方法。主鏈的主鏈的切斷切斷修飾修飾1）主鏈的切斷引起酶活性中心的破壞，酶將喪失其）主鏈的切斷引起酶活性中

5、心的破壞，酶將喪失其活性?；钚?。 主要用于主要用于探測酶活性中心的位置探測酶活性中心的位置。2）主鏈切斷后仍可維持酶活性中心的空間構(gòu)象，酶）主鏈切斷后仍可維持酶活性中心的空間構(gòu)象，酶的催化能力保持不變或損失不多，其抗原性等特的催化能力保持不變或損失不多，其抗原性等特性發(fā)生改變。性發(fā)生改變。 提高提高某些酶特性特別是某些酶特性特別是藥用酶的使用價值藥用酶的使用價值。3）主鏈切斷有利于酶活性中心的形成，使酶分子顯）主鏈切斷有利于酶活性中心的形成，使酶分子顯示其催化功能，使酶活力提高。示其催化功能，使酶活力提高。 酶原酶原酶酶主鏈的切斷修飾主鏈的切斷修飾胃蛋白酶原胃蛋白酶N端失去端失去44個個氨基酸

6、殘基氨基酸殘基HClpH1.52自身激活自身激活a、胃蛋白酶原的激活、胃蛋白酶原的激活5. 酶組成單位置換修飾酶組成單位置換修飾 氨基酸置換修飾氨基酸置換修飾：將蛋白酶分子肽鏈上的某一個：將蛋白酶分子肽鏈上的某一個氨基酸換成另一個氨基酸的修飾方法。氨基酸換成另一個氨基酸的修飾方法。 核苷酸置換修飾核苷酸置換修飾：將核酸類酶核苷酸鏈上的某一：將核酸類酶核苷酸鏈上的某一個核苷酸換成另一個核苷酸的修飾方法。個核苷酸換成另一個核苷酸的修飾方法。（1）酶分子組成單位修飾的作用）酶分子組成單位修飾的作用 通過修飾可以提高酶活力通過修飾可以提高酶活力 通過修飾可以增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性通過修飾可以增強(qiáng)酶的穩(wěn)定性 通

7、過修飾可以使酶的專一性發(fā)生改變通過修飾可以使酶的專一性發(fā)生改變 通過核苷酸置換修飾可獲得各種人造核酸類酶。通過核苷酸置換修飾可獲得各種人造核酸類酶。如：酪氨酸如：酪氨酸-RNA合成酶合成酶反應(yīng)：催化酪氨酸與其對應(yīng)的反應(yīng)：催化酪氨酸與其對應(yīng)的tRNA反應(yīng)生成酪反應(yīng)生成酪氨酰氨酰-tRNA置換：將置換：將51位的位的蘇氨酸蘇氨酸換為換為脯氨酸脯氨酸結(jié)果：酶對結(jié)果：酶對ATP的親和性提高近的親和性提高近100倍，酶活力倍，酶活力提高提高25倍。倍。 如：枯草桿菌的蛋白酶如：枯草桿菌的蛋白酶反應(yīng)：催化蛋白質(zhì)和多肽水解反應(yīng)：催化蛋白質(zhì)和多肽水解置換：活性中心上的置換：活性中心上的絲氨酸絲氨酸換成換成半胱

8、氨酸半胱氨酸結(jié)果：酶對蛋白質(zhì)和多肽的水解活性消失，出結(jié)果：酶對蛋白質(zhì)和多肽的水解活性消失，出現(xiàn)催化硝基苯酯等底物進(jìn)行水解反應(yīng)的活性?，F(xiàn)催化硝基苯酯等底物進(jìn)行水解反應(yīng)的活性。 采用核苷酸置換修飾技術(shù)將保守核苷酸以外采用核苷酸置換修飾技術(shù)將保守核苷酸以外的某個或某些核苷酸置換，就可以獲得各種不同的某個或某些核苷酸置換，就可以獲得各種不同的人造核酸類酶。的人造核酸類酶。 如：如：T4-溶菌酶溶菌酶置換：第置換：第3位的位的異亮氨酸異亮氨酸換成換成半胱氨酸半胱氨酸，半胱氨，半胱氨酸可與第酸可與第97位的半胱氨酸形成位的半胱氨酸形成二硫鍵。二硫鍵。結(jié)果：酶活力保持不變，但酶對熱的穩(wěn)定性大結(jié)果：酶活力保持

9、不變，但酶對熱的穩(wěn)定性大大提高。大提高。氨基酸置換修飾的方法氨基酸置換修飾的方法 化學(xué)修飾法化學(xué)修飾法 定點突變技術(shù)定點突變技術(shù)（2）定點突變技術(shù)在酶分子修飾中的應(yīng)用）定點突變技術(shù)在酶分子修飾中的應(yīng)用 定點突變（定點突變（site directed mutagenesis ）：指：指DNA序列中的某一特定位點上進(jìn)行堿基的改變，序列中的某一特定位點上進(jìn)行堿基的改變，從而獲得突變基因的操作技術(shù)。是蛋白質(zhì)工程從而獲得突變基因的操作技術(shù)。是蛋白質(zhì)工程（protein engineering）和酶分子組成單位置換）和酶分子組成單位置換修飾中常用的技術(shù)。修飾中常用的技術(shù)。定點突變技術(shù)用于酶分子修飾的主要過

10、程定點突變技術(shù)用于酶分子修飾的主要過程（P148）1. 設(shè)計新酶分子結(jié)構(gòu)設(shè)計新酶分子結(jié)構(gòu) 設(shè)計新酶的設(shè)計新酶的RNA的核苷酸排列次序或酶蛋白的氨的核苷酸排列次序或酶蛋白的氨基酸排列次序，確定需置換的核苷酸或氨基酸及基酸排列次序，確定需置換的核苷酸或氨基酸及其位置。其位置。2. 確定突變基因堿基序列確定突變基因堿基序列 酶酶RNA互補(bǔ)原則互補(bǔ)原則DNA序列序列 酶蛋白酶蛋白遺傳密碼遺傳密碼mRNA DNA3. 獲得突變基因獲得突變基因 寡核苷酸誘導(dǎo)的定位突變。寡核苷酸誘導(dǎo)的定位突變。4. 獲得新酶獲得新酶 獲得基因體外重組后導(dǎo)入宿主內(nèi)進(jìn)行表達(dá)。獲得基因體外重組后導(dǎo)入宿主內(nèi)進(jìn)行表達(dá)。6. 酶分子的

11、物理修飾酶分子的物理修飾 通過物理修飾，可以了解通過物理修飾，可以了解不同物理條件不同物理條件下，特下，特別是在極端條件下（高溫、高壓、高鹽、極端別是在極端條件下（高溫、高壓、高鹽、極端pHpH值等）由于酶分子值等）由于酶分子空間構(gòu)象空間構(gòu)象的改變而引起酶的改變而引起酶的特性和功能的變化情況。的特性和功能的變化情況。 特點在于不改變酶的組成單位及其基團(tuán)，酶分特點在于不改變酶的組成單位及其基團(tuán)，酶分子中的共價鍵不發(fā)生改變，只是在物理因素的子中的共價鍵不發(fā)生改變，只是在物理因素的作用下，副鍵發(fā)生某些變化和重排。作用下，副鍵發(fā)生某些變化和重排。 共價鍵與副鍵共價鍵與副鍵酶分子修飾的應(yīng)用酶分子修飾的應(yīng)

12、用 理論研究理論研究 醫(yī)學(xué)和工業(yè)應(yīng)用醫(yī)學(xué)和工業(yè)應(yīng)用 酶的作用機(jī)制研究酶的作用機(jī)制研究 親和標(biāo)記法和差示標(biāo)記法親和標(biāo)記法和差示標(biāo)記法 有機(jī)介質(zhì)酶催化反應(yīng)中的應(yīng)用有機(jī)介質(zhì)酶催化反應(yīng)中的應(yīng)用酶分子的修飾方法酶分子的修飾方法 金屬離子置換修飾金屬離子置換修飾 大分子結(jié)合修飾大分子結(jié)合修飾 側(cè)鏈基團(tuán)修飾側(cè)鏈基團(tuán)修飾 肽鏈有限水解修飾肽鏈有限水解修飾 氨基酸置換修飾氨基酸置換修飾 酶分子的物理修飾酶分子的物理修飾 氨基的修飾氨基的修飾羧基的修飾羧基的修飾巰基的修飾巰基的修飾精氨酸胍基的修飾精氨酸胍基的修飾酪氨酸酚基的修飾酪氨酸酚基的修飾組氨酸咪唑基的修飾組氨酸咪唑基的修飾色氨酸吲哚基的修飾色氨酸吲哚基的修

13、飾分子內(nèi)交聯(lián)修飾分子內(nèi)交聯(lián)修飾4.6 酶的定向進(jìn)化酶的定向進(jìn)化 定向進(jìn)化：模擬自然進(jìn)化的過程，進(jìn)行定向進(jìn)化：模擬自然進(jìn)化的過程，進(jìn)行人工隨人工隨機(jī)突變機(jī)突變，并在特定的環(huán)境條件下進(jìn)行，并在特定的環(huán)境條件下進(jìn)行選擇選擇，使，使進(jìn)化朝著進(jìn)化朝著人們所需方向人們所需方向發(fā)展的技術(shù)過程。發(fā)展的技術(shù)過程。定向進(jìn)化定向進(jìn)化分子定向進(jìn)化分子定向進(jìn)化細(xì)胞定向進(jìn)化細(xì)胞定向進(jìn)化酶分子定向進(jìn)化酶分子定向進(jìn)化蛋白質(zhì)分子定向進(jìn)化蛋白質(zhì)分子定向進(jìn)化核酸分子定向進(jìn)化核酸分子定向進(jìn)化微生物細(xì)胞定向進(jìn)化微生物細(xì)胞定向進(jìn)化植物細(xì)胞定向進(jìn)化植物細(xì)胞定向進(jìn)化動物細(xì)胞定向進(jìn)化動物細(xì)胞定向進(jìn)化 酶分子的定向進(jìn)化酶分子的定向進(jìn)化（dire

14、cted evolution）：模）：模擬自然進(jìn)化過程（隨機(jī)突變和自然選擇），在擬自然進(jìn)化過程（隨機(jī)突變和自然選擇），在體外體外進(jìn)行酶基因的人工進(jìn)行酶基因的人工隨機(jī)突變隨機(jī)突變，建立突變基建立突變基因文庫因文庫，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，定向定向選擇選擇得到具有優(yōu)良催化特性的酶的得到具有優(yōu)良催化特性的酶的突變體突變體的技的技術(shù)過程。術(shù)過程。 屬于蛋白質(zhì)的屬于蛋白質(zhì)的非合理設(shè)計非合理設(shè)計，它，它不需事先了解不需事先了解酶的酶的空間結(jié)構(gòu)和催化機(jī)制?？臻g結(jié)構(gòu)和催化機(jī)制。 適應(yīng)面廣；適應(yīng)面廣； 目的性強(qiáng)；目的性強(qiáng)； 效率高。效率高。 以很低的比率向目的基因中以很低的比率向

15、目的基因中隨機(jī)引入突變隨機(jī)引入突變，構(gòu)建突，構(gòu)建突變庫，憑借變庫，憑借定向的選擇方法定向的選擇方法，選出所需性質(zhì)的優(yōu)化，選出所需性質(zhì)的優(yōu)化酶酶(或蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì))，從而排除其他突變體。，從而排除其他突變體。 定向進(jìn)化的定向進(jìn)化的基本規(guī)則基本規(guī)則是是“獲取你所篩選的突變體獲取你所篩選的突變體”。 定向進(jìn)化定向進(jìn)化=隨機(jī)突變隨機(jī)突變+定向選擇定向選擇。4.6.3 酶基因的隨機(jī)突變酶基因的隨機(jī)突變1、易錯、易錯PCR技術(shù)為代表的無性進(jìn)化技術(shù)為代表的無性進(jìn)化 無性突變無性突變：向：向單一酶分子單一酶分子基因內(nèi)隨機(jī)引入突變，基因內(nèi)隨機(jī)引入突變，制造突變酶庫以便篩選。制造突變酶庫以便篩選。 易錯易錯PCR

16、：從酶的：從酶的單一基因單一基因出發(fā)，在出發(fā)，在改變反應(yīng)條改變反應(yīng)條件件的情況下進(jìn)行的情況下進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)，使擴(kuò)增得到的基，使擴(kuò)增得到的基因出現(xiàn)堿基配對錯誤，從而引起基因突變的技術(shù)因出現(xiàn)堿基配對錯誤，從而引起基因突變的技術(shù)過程。過程。 反應(yīng)條件：提高反應(yīng)條件：提高M(jìn)g2+濃度；添加濃度；添加Mn2+；改變四；改變四種底物濃度比等。種底物濃度比等。易錯易錯PCR技術(shù)技術(shù) 特點：操作簡便，隨機(jī)突變豐富。特點：操作簡便，隨機(jī)突變豐富。 缺點：正突變基因少，需多次缺點：正突變基因少，需多次PCR。 注意：控制好基因突變頻率。注意：控制好基因突變頻率。 適用：較小基因的定向進(jìn)化。適用：較小

17、基因的定向進(jìn)化。2、DNA重排技術(shù)為代表的有性進(jìn)化重排技術(shù)為代表的有性進(jìn)化 又稱又稱DNA改組技術(shù)，有性改組技術(shù)，有性PCR（sexual PCR）。從正突變基因文庫中分離得到的）。從正突變基因文庫中分離得到的同源同源DNA，用酶切割成隨機(jī)片段，經(jīng)過不加引物，用酶切割成隨機(jī)片段，經(jīng)過不加引物的多次的多次PCR循環(huán)，使循環(huán)，使DNA的堿基序列重新排布而的堿基序列重新排布而引起基因突變的技術(shù)過程。引起基因突變的技術(shù)過程。DNA改組技術(shù)改組技術(shù) 特點：正突變頻率高，進(jìn)化速度快。特點：正突變頻率高，進(jìn)化速度快。 注意：需多次進(jìn)行。注意：需多次進(jìn)行。3、基因家族之間的同源重組、基因家族之間的同源重組 從

18、自然界中存在的基因家族出發(fā)，利用它從自然界中存在的基因家族出發(fā)，利用它們之間的同源順序進(jìn)行們之間的同源順序進(jìn)行DNA改組實現(xiàn)同源重組。改組實現(xiàn)同源重組。 如：如：Stemmer等從等從4種微生物種微生物中選擇編碼頭孢菌中選擇編碼頭孢菌素酶的素酶的4個同源基因個同源基因，對它們進(jìn)行單獨進(jìn)化或同，對它們進(jìn)行單獨進(jìn)化或同源重組進(jìn)化。結(jié)果對源重組進(jìn)化。結(jié)果對單基因進(jìn)化單基因進(jìn)化得到的突變酶中，得到的突變酶中，對頭孢羥羧氧胺的抗性最高的對頭孢羥羧氧胺的抗性最高的增加了增加了8倍倍，而用，而用家族同源重組進(jìn)化家族同源重組進(jìn)化的方法使抗性比其中兩種微生的方法使抗性比其中兩種微生物來源的天然酶提高物來源的天然

19、酶提高270倍倍，比另外兩種酶提高，比另外兩種酶提高了了540倍倍。 雜合酶：把來自不同酶分子中的結(jié)構(gòu)單元或是雜合酶：把來自不同酶分子中的結(jié)構(gòu)單元或是整個酶分子進(jìn)行組合或交換，以產(chǎn)生具有所需整個酶分子進(jìn)行組合或交換，以產(chǎn)生具有所需性質(zhì)的優(yōu)化酶雜合體。性質(zhì)的優(yōu)化酶雜合體。定向進(jìn)化中，突變具有隨機(jī)性，但通過定向進(jìn)化中，突變具有隨機(jī)性，但通過，加之控制實驗條件，加之控制實驗條件，限定突變種類，限定突變種類， 降低突變率，縮小突變庫的容量，降低突變率，縮小突變庫的容量，這不僅減少了工作量，更重要的是加快了酶在某一這不僅減少了工作量，更重要的是加快了酶在某一方向的進(jìn)化速度。方向的進(jìn)化速度。另有。另有一些

20、其他的篩選方法，如加入能產(chǎn)生可見光信號的一些其他的篩選方法，如加入能產(chǎn)生可見光信號的底物或利用綠色熒光蛋白的熒光性質(zhì)等。底物或利用綠色熒光蛋白的熒光性質(zhì)等。1、突變基因文庫的構(gòu)建、突變基因文庫的構(gòu)建定義：將各種不同定義：將各種不同突變基因突變基因與與載體重組載體重組，再轉(zhuǎn)入，再轉(zhuǎn)入適宜的細(xì)胞或包裝成重組適宜的細(xì)胞或包裝成重組噬菌體的技術(shù)過程。噬菌體的技術(shù)過程。質(zhì)量要求：文庫質(zhì)量要求：文庫包容性包容性和文庫和文庫完整性完整性過程：過程：l載體選擇載體選擇l基因重組基因重組l形成基因文庫形成基因文庫質(zhì)粒質(zhì)粒噬菌體噬菌體DNA黏粒載體黏粒載體噬菌粒載體噬菌粒載體轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)導(dǎo)2、突變基因的篩選、突

21、變基因的篩選（1）定向選擇環(huán)境條件的設(shè)定）定向選擇環(huán)境條件的設(shè)定（2）高通量篩選技術(shù)）高通量篩選技術(shù)l平板篩選技術(shù)平板篩選技術(shù)l熒光篩選法熒光篩選法l噬菌體表面展示法噬菌體表面展示法l酵母細(xì)胞表面展示法酵母細(xì)胞表面展示法舉例舉例 例例1：定向進(jìn)化提高枯草芽孢桿菌脂肪酶的活力：定向進(jìn)化提高枯草芽孢桿菌脂肪酶的活力 例例2：大腸桿菌堿性磷酸酶的體外定向進(jìn)化研究：大腸桿菌堿性磷酸酶的體外定向進(jìn)化研究 例例3：采用易錯：采用易錯PCR對粘質(zhì)沙雷氏菌幾丁質(zhì)酶對粘質(zhì)沙雷氏菌幾丁質(zhì)酶C進(jìn)進(jìn)行定向進(jìn)化行定向進(jìn)化酶酶性質(zhì)性質(zhì)突變方法突變方法枯草桿菌蛋白酶枯草桿菌蛋白酶E有機(jī)相活性有機(jī)相活性/穩(wěn)定性穩(wěn)定性易錯易錯

22、PCR-內(nèi)酰胺酶內(nèi)酰胺酶總活力總活力/底物專一性底物專一性DNA改組改組枯草桿菌蛋白酶枯草桿菌蛋白酶BPN穩(wěn)定性穩(wěn)定性 盒式誘變盒式誘變對硝基苯酯酶對硝基苯酯酶底物專一性底物專一性/有機(jī)相活性有機(jī)相活性易錯易錯PCR/DNA改組改組 胸腺嘧啶核苷激酶胸腺嘧啶核苷激酶底物專一性底物專一性盒式誘變盒式誘變-半乳糖苷酶半乳糖苷酶底物專一性底物專一性DNA改組改組綠色熒光蛋白綠色熒光蛋白熒光熒光DNA改組改組核酶核酶底物專一性底物專一性易錯易錯PCR/DNA改組改組天冬氨酸酶天冬氨酸酶活性與穩(wěn)定性活性與穩(wěn)定性隨機(jī)隨機(jī)/定位誘變定位誘變藥物和疫苗藥物和疫苗活性活性/專一性專一性/最佳表達(dá)最佳表達(dá)DNA改

23、組改組4.7 酶分子修飾的應(yīng)用（酶分子修飾的應(yīng)用（P152-157） 在在酶學(xué)研究酶學(xué)研究方面的應(yīng)用方面的應(yīng)用 在在醫(yī)藥醫(yī)藥方面的應(yīng)用方面的應(yīng)用 在在工業(yè)工業(yè)方面的應(yīng)用方面的應(yīng)用 在在抗體酶抗體酶研究開發(fā)方面的應(yīng)用研究開發(fā)方面的應(yīng)用 在在核酸類酶核酸類酶人工改造方面的應(yīng)用人工改造方面的應(yīng)用 在在有機(jī)介質(zhì)酶催化有機(jī)介質(zhì)酶催化反應(yīng)中的應(yīng)用反應(yīng)中的應(yīng)用4.7 酶分子修飾的應(yīng)用（酶分子修飾的應(yīng)用（P152-157）1、在、在酶學(xué)研究酶學(xué)研究方面的應(yīng)用方面的應(yīng)用l酶活性中心的研究酶活性中心的研究l酶的空間結(jié)構(gòu)研究酶的空間結(jié)構(gòu)研究l酶的作用機(jī)制研究酶的作用機(jī)制研究4.7 酶分子修飾的應(yīng)用（酶分子修飾的應(yīng)用（P152-157）2、在、在醫(yī)藥醫(yī)藥方面的應(yīng)用方面的應(yīng)用l降低或者消除酶的抗原性降低或者消除酶的抗原性l增強(qiáng)醫(yī)藥用酶的穩(wěn)定性（半衰期）增強(qiáng)醫(yī)藥用酶的穩(wěn)定性（半衰期）4.7 酶分子修飾的應(yīng)用（酶分子修飾的應(yīng)用（P152-157）3、在、在工業(yè)工業(yè)方面的應(yīng)用方面的應(yīng)用l提高工業(yè)用酶的催化效率提高工業(yè)用酶的催化效率l提高工業(yè)用酶的穩(wěn)定性提高工業(yè)用酶的穩(wěn)定性l改變酶的動力學(xué)特性改變酶的動力學(xué)特性4.7 酶