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文檔簡(jiǎn)介
1、.1寵物傳染病生物制品寵物傳染病生物制品 .2第一節(jié)第一節(jié) 犬瘟熱犬瘟熱(CD) 一、病況與病原概述:一、病況與病原概述:(一)、病況:(一)、病況:1 1、概念:、概念:犬瘟熱犬瘟熱是由是由犬瘟熱病毒犬瘟熱病毒引起的犬和肉食目中許引起的犬和肉食目中許多動(dòng)物的一種多動(dòng)物的一種熱性高度接觸性傳染病熱性高度接觸性傳染病。2 2、流行特點(diǎn):、流行特點(diǎn):主要感染犬和水貂,幼犬和幼貂感染死亡主要感染犬和水貂,幼犬和幼貂感染死亡率高達(dá)率高達(dá)30-80%30-80%。該病不同年齡、性別和品種的犬都可感染,該病不同年齡、性別和品種的犬都可感染,但但2 2月齡以?xún)?nèi)的仔犬由于受母源抗體的保護(hù),月齡以?xún)?nèi)的仔犬由于受
2、母源抗體的保護(hù),80%80%不受感染,不受感染,3-123-12月齡的幼犬易感性最高月齡的幼犬易感性最高,2 2歲以上的犬發(fā)病率逐漸降歲以上的犬發(fā)病率逐漸降低。犬瘟熱病低。犬瘟熱病康復(fù)犬可獲終身免疫力康復(fù)犬可獲終身免疫力。.33 3、主要癥狀:、主要癥狀:呼吸道癥狀:呼吸道癥狀:表現(xiàn)為支氣管炎、卡他性肺炎、表現(xiàn)為支氣管炎、卡他性肺炎、咳嗽、氣咳嗽、氣喘、呼吸困難。喘、呼吸困難。神經(jīng)癥狀:神經(jīng)癥狀:表現(xiàn)為癲癇、轉(zhuǎn)圈、共濟(jì)失調(diào)表現(xiàn)為癲癇、轉(zhuǎn)圈、共濟(jì)失調(diào)、肌肉強(qiáng)直痙、肌肉強(qiáng)直痙攣等。攣等。消化道癥狀:消化道癥狀:嚴(yán)重病犬腹瀉水樣糞便,惡臭,混有血液。嚴(yán)重病犬腹瀉水樣糞便,惡臭,混有血液。特征性癥狀:
3、特征性癥狀:雙相熱型,雙相熱型,少數(shù)病犬的鼻和足墊可發(fā)生少數(shù)病犬的鼻和足墊可發(fā)生角角質(zhì)化過(guò)度。質(zhì)化過(guò)度。.4犬瘟熱足掌角質(zhì)化犬瘟熱足掌角質(zhì)化.5犬瘟熱全身抽搐犬瘟熱全身抽搐.6(二)、病原:(二)、病原:CDVCDV,只有一個(gè)血清型。,只有一個(gè)血清型。1 1、分類(lèi)地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征:、分類(lèi)地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征:該病毒屬于該病毒屬于副粘病毒科副副粘病毒科副粘病毒亞科麻疹病毒屬粘病毒亞科麻疹病毒屬。病毒核酸為單股。病毒核酸為單股RNARNA,病毒粒子,病毒粒子外觀呈球形,大小直徑外觀呈球形,大小直徑150-200nm150-200nm。核衣殼呈螺旋狀立體。核衣殼呈螺旋狀立體對(duì)稱(chēng)。有囊膜,對(duì)稱(chēng)。有囊膜
4、,3737時(shí)有的毒株可以凝集雞的紅細(xì)胞,時(shí)有的毒株可以凝集雞的紅細(xì)胞,只有一個(gè)血清型。只有一個(gè)血清型。2 2、生長(zhǎng)繁殖特征:、生長(zhǎng)繁殖特征:適應(yīng)雞成纖維細(xì)胞的犬瘟熱病毒在雞適應(yīng)雞成纖維細(xì)胞的犬瘟熱病毒在雞胚上傳胚上傳100100代后不致病可做疫苗。代后不致病可做疫苗。該病毒在犬、雪貂、犢該病毒在犬、雪貂、犢牛腎、脾、肺、睪丸等細(xì)胞上都可生長(zhǎng),在乳地鼠和乳牛腎、脾、肺、睪丸等細(xì)胞上都可生長(zhǎng),在乳地鼠和乳小鼠腦內(nèi)可傳代,也可用小鼠腦內(nèi)可傳代,也可用VeroVero細(xì)胞(非洲綠猴腎細(xì)胞株)細(xì)胞(非洲綠猴腎細(xì)胞株)培養(yǎng)。培養(yǎng)。.7二、疫苗與免疫:二、疫苗與免疫:(一)疫苗:(一)疫苗:現(xiàn)用于犬的犬瘟熱
5、疫苗有現(xiàn)用于犬的犬瘟熱疫苗有弱毒疫苗弱毒疫苗和和滅滅活疫苗活疫苗。包括犬瘟熱組織滅活疫苗、細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫。包括犬瘟熱組織滅活疫苗、細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗、雪貂組織活疫苗、雞胚活疫苗、雞胚細(xì)胞活疫苗苗、雪貂組織活疫苗、雞胚活疫苗、雞胚細(xì)胞活疫苗和犬六聯(lián)疫苗、犬七聯(lián)疫苗。目前多使用六聯(lián)疫苗和和犬六聯(lián)疫苗、犬七聯(lián)疫苗。目前多使用六聯(lián)疫苗和七聯(lián)疫苗。七聯(lián)疫苗。.81 1、犬瘟熱雞胚細(xì)胞活疫苗:、犬瘟熱雞胚細(xì)胞活疫苗:毒株為犬瘟熱病毒雞胚化毒株為犬瘟熱病毒雞胚化弱毒株適應(yīng)于雞胚成纖維細(xì)胞的傳代毒,用雞胚成纖弱毒株適應(yīng)于雞胚成纖維細(xì)胞的傳代毒,用雞胚成纖維細(xì)胞增殖病毒,制成弱毒疫苗。用以免疫犬和水貂,維細(xì)胞增殖
6、病毒,制成弱毒疫苗。用以免疫犬和水貂,安全有效。歐美國(guó)家廣泛用于水貂犬瘟熱的預(yù)防。我安全有效。歐美國(guó)家廣泛用于水貂犬瘟熱的預(yù)防。我國(guó)用于配制犬的六聯(lián)疫苗或七聯(lián)疫苗,廣泛用于預(yù)防國(guó)用于配制犬的六聯(lián)疫苗或七聯(lián)疫苗,廣泛用于預(yù)防犬的犬瘟熱。犬的犬瘟熱。.9制苗過(guò)程如下:制苗過(guò)程如下:(1)毒種:)毒種:低溫保存的低溫保存的毒種毒種使用前經(jīng)使用前經(jīng)雞胚成纖維細(xì)胞培雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)傳養(yǎng)傳23代代。腦內(nèi)接種。腦內(nèi)接種12日齡小白鼠,最小發(fā)病量不低于日齡小白鼠,最小發(fā)病量不低于10-3/0.03ml。1520g小鼠腦內(nèi)接種小鼠腦內(nèi)接種0.03 ml或皮下注射或皮下注射0.5 ml,觀察觀察10d無(wú)異常反應(yīng)
7、為合格。無(wú)異常反應(yīng)為合格。(2)制苗:)制苗:取取911日齡日齡SPF雞胚制備雞成纖維細(xì)胞,待細(xì)雞胚制備雞成纖維細(xì)胞,待細(xì)胞長(zhǎng)成單層后按胞長(zhǎng)成單層后按2.5%3%比例將種毒接入維持液,比例將種毒接入維持液,37恒恒溫培養(yǎng)。接毒后溫培養(yǎng)。接毒后35d出現(xiàn)細(xì)胞腫大、聚集如星芒狀、拉網(wǎng)出現(xiàn)細(xì)胞腫大、聚集如星芒狀、拉網(wǎng)變圓,脫落,當(dāng)變圓,脫落,當(dāng)CPE達(dá)達(dá)85%以上時(shí),收獲培養(yǎng)物,反復(fù)凍以上時(shí),收獲培養(yǎng)物,反復(fù)凍融融3次,加入抗生素即成弱毒疫苗原液。加次,加入抗生素即成弱毒疫苗原液。加5%蔗糖脫脂乳蔗糖脫脂乳凍干成凍干疫苗。凍干成凍干疫苗。 .10(3 3)疫苗檢驗(yàn):)疫苗檢驗(yàn):疫苗病毒毒價(jià)應(yīng)達(dá)疫苗病
8、毒毒價(jià)應(yīng)達(dá)1010-3.5-3.5/ml/ml以上以上,安全,安全檢驗(yàn)時(shí)用檢驗(yàn)時(shí)用161618g18g小鼠小鼠4 4只,每只腹腔接種只,每只腹腔接種0.2ml0.2ml;另用;另用250250300g300g豚鼠豚鼠2 2只腹腔接種只腹腔接種0.5ml0.5ml,觀察,觀察10d10d應(yīng)健活。應(yīng)健活。(4 4)保存與使用:)保存與使用:凍干疫苗凍干疫苗2 277保存,有效期保存,有效期2 2年。年。使用時(shí),每只犬皮下或肌肉注射使用時(shí),每只犬皮下或肌肉注射1ml1ml,間隔,間隔2 23 3周加強(qiáng)周加強(qiáng)免疫一次,保護(hù)期免疫一次,保護(hù)期1 1年。年。.112、組織滅活疫苗:、組織滅活疫苗:(1 1
9、)制苗:)制苗:犬瘟熱病毒感染雪貂或犬發(fā)病,無(wú)菌采集病犬瘟熱病毒感染雪貂或犬發(fā)病,無(wú)菌采集病死犬肝、脾、淋巴結(jié)制成死犬肝、脾、淋巴結(jié)制成20%20%組織乳懸液,凍融三次,三組織乳懸液,凍融三次,三層紗布過(guò)濾,加入終濃度層紗布過(guò)濾,加入終濃度0.1%0.1%甲醛,甲醛,3737滅活滅活24h24h。(2 2)疫苗檢驗(yàn):)疫苗檢驗(yàn):無(wú)菌檢驗(yàn)按常規(guī)進(jìn)行,安全檢驗(yàn)用健康無(wú)菌檢驗(yàn)按常規(guī)進(jìn)行,安全檢驗(yàn)用健康小犬小犬2 2只,皮下或肌肉注射只,皮下或肌肉注射10ml10ml,觀察,觀察7d7d,無(wú)不良反應(yīng),無(wú)不良反應(yīng),判為合格。判為合格。(3 3)使用方法:)使用方法:每只犬皮下接種每只犬皮下接種5ml5m
10、l,間隔,間隔2-32-3周加強(qiáng)免周加強(qiáng)免疫一次,免疫保護(hù)期疫一次,免疫保護(hù)期3-63-6個(gè)月。個(gè)月。 .12(二)免疫程序:(二)免疫程序:1 1、犬瘟熱雞胚弱毒凍干苗:、犬瘟熱雞胚弱毒凍干苗:首免:首免:9 9周齡剛斷奶犬注射一針。周齡剛斷奶犬注射一針。二免:二免:1515周齡加強(qiáng)免疫一次。周齡加強(qiáng)免疫一次。免疫期一年,以后每年加強(qiáng)免疫一次。免疫期一年,以后每年加強(qiáng)免疫一次。.132 2、犬六聯(lián)或七聯(lián)苗:、犬六聯(lián)或七聯(lián)苗:首免:首免:斷奶(斷奶(45-6045-60日齡)幼犬注射日齡)幼犬注射1 1頭份。頭份。二免:二免:首免后首免后1515天再注射天再注射1 1頭份。頭份。三免:三免:二
11、免后二免后1515天再注射天再注射1 1頭份。頭份。免疫期一年,以后每年免疫一次兩針(首免免疫期一年,以后每年免疫一次兩針(首免1 1頭份,頭份,1515天天后二免后二免1 1頭份)。頭份)。.14第二節(jié)第二節(jié) 犬細(xì)小病毒?。ㄈ?xì)小病毒病(CPDCPD) 一、病況與病原概述:一、病況與病原概述:1、病況:、病況:概念:概念:該病又稱(chēng)該病又稱(chēng)犬傳染性腸炎犬傳染性腸炎(拉稀呈番茄醬樣發(fā)出特殊腥(拉稀呈番茄醬樣發(fā)出特殊腥臭味)。是由犬細(xì)小病毒(臭味)。是由犬細(xì)小病毒(CPV)引起的一種急性接觸性致死)引起的一種急性接觸性致死性傳染病。性傳染病。流行特點(diǎn):流行特點(diǎn):多發(fā)生于幼犬,病死率多發(fā)生于幼犬,病
12、死率1050%。小于。小于4周齡的仔周齡的仔犬和大于犬和大于5歲的老犬發(fā)病率低,歲的老犬發(fā)病率低,一般分別為一般分別為2%和和16%。.15特征性病變:特征性病變: 表現(xiàn)為出血性腸炎和心肌炎。表現(xiàn)為出血性腸炎和心肌炎。34周齡犬感染周齡犬感染后以心肌炎為主,后以心肌炎為主,810周齡犬感染后以腸炎為周齡犬感染后以腸炎為主,先嘔吐,后腹瀉,主,先嘔吐,后腹瀉,拉出灰黃色或番茄醬樣拉出灰黃色或番茄醬樣稀糞發(fā)出難聞的特殊腥臭味。稀糞發(fā)出難聞的特殊腥臭味。.16.17.18.19.20.212 2、病原:、病原:CPVCPV。 該病毒屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬。該病毒屬于細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬。病毒核酸病
13、毒核酸為單股為單股DNADNA,病毒粒子大小直徑,病毒粒子大小直徑20-22nm20-22nm,病毒粒,病毒粒子外觀呈足球形,蛋白質(zhì)衣殼為子外觀呈足球形,蛋白質(zhì)衣殼為2020面體立體對(duì)稱(chēng)面體立體對(duì)稱(chēng) ,無(wú)囊膜。該病毒在無(wú)囊膜。該病毒在44和和2525能凝集豬和恒河猴的能凝集豬和恒河猴的紅細(xì)胞,但不能凝集其它動(dòng)物的紅細(xì)胞??稍谌t細(xì)胞,但不能凝集其它動(dòng)物的紅細(xì)胞。可在犬腎、貓腎細(xì)胞上增殖并產(chǎn)生腎、貓腎細(xì)胞上增殖并產(chǎn)生CPECPE。.22二、疫苗和免疫:二、疫苗和免疫:(一)疫苗:(一)疫苗:目前用于預(yù)防犬細(xì)小病毒病的疫苗目前用于預(yù)防犬細(xì)小病毒病的疫苗主要有主要有CPV滅活疫苗、滅活疫苗、CPV弱
14、毒疫苗弱毒疫苗(犬細(xì)小病犬細(xì)小病毒毒-犬鉤端螺旋體二聯(lián)疫苗、犬瘟熱犬鉤端螺旋體二聯(lián)疫苗、犬瘟熱-CPV-犬傳染犬傳染性肝炎性肝炎-副流感副流感-犬鉤端螺旋體五聯(lián)疫苗、犬鉤端螺旋體五聯(lián)疫苗、狂犬病狂犬病-犬瘟熱犬瘟熱-CPV-犬肝炎犬肝炎-副流感副流感-犬鉤端螺旋體六聯(lián)犬鉤端螺旋體六聯(lián)疫苗疫苗)。 .231、CPV細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗:細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗:(1)種毒:種毒:CPV-GN毒株。毒株。(2)制苗:制苗:用用CPV-GN種毒接種種毒接種CRFK(貓腎細(xì)胞株)細(xì)胞,(貓腎細(xì)胞株)細(xì)胞,37培養(yǎng)培養(yǎng)24h形成單層后換入維持液,形成單層后換入維持液,37繼續(xù)培養(yǎng)繼續(xù)培養(yǎng)7296h,待待CPE達(dá)達(dá)8
15、0%以上時(shí)以上時(shí)(HA1:1024),收獲病毒,凍融,收獲病毒,凍融3次,次,3000r/min離心離心15min,取上清,除去細(xì)胞碎片,取上清,除去細(xì)胞碎片,上清加入終上清加入終濃度濃度0.25%甲醛,甲醛,37持續(xù)攪拌持續(xù)攪拌24h,HA1:512,再加入,再加入7%8%氫氧化鋁膠混勻即成氫氧化鋁膠混勻即成CPV滅活疫苗。滅活疫苗。 .24(3)疫苗檢驗(yàn):)疫苗檢驗(yàn):安全檢驗(yàn):安全檢驗(yàn):選取選取5只斷奶幼犬,只斷奶幼犬,3只皮下或肌肉接種疫只皮下或肌肉接種疫苗苗35ml,另,另2只作對(duì)照,觀察只作對(duì)照,觀察710d均應(yīng)健活,糞便檢均應(yīng)健活,糞便檢查查HA為陰性。為陰性。效價(jià)檢驗(yàn):效價(jià)檢驗(yàn):
16、HA1:512。.25(4)保存與使用:)保存與使用: 于于4保存,有效期保存,有效期1年。斷奶幼犬肌肉注射年。斷奶幼犬肌肉注射1ml,間隔,間隔23周再接種周再接種1ml,懷孕犬產(chǎn)前,懷孕犬產(chǎn)前20d肌肉注射疫苗肌肉注射疫苗1ml,免疫,免疫保護(hù)期保護(hù)期1年。年。 .262、異源滅活疫苗:、異源滅活疫苗:(1)種毒:種毒:貓泛白細(xì)胞減少癥病毒貓泛白細(xì)胞減少癥病毒FNF8毒株,由病死貓分毒株,由病死貓分離并鑒定,離并鑒定,TCID5010-5.5/ml。(2)制苗:制苗:種毒稀釋后接種種毒稀釋后接種CRFK (貓腎細(xì)胞株)單層細(xì)(貓腎細(xì)胞株)單層細(xì)胞。胞。37培養(yǎng)培養(yǎng)7296h,當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn),當(dāng)
17、細(xì)胞出現(xiàn)80%以上以上CPE時(shí)收獲病時(shí)收獲病毒。凍融毒。凍融3次,次,3000r/min離心離心20min,取上清,除去細(xì)胞,取上清,除去細(xì)胞碎片。用碎片。用BEI(二乙烯亞胺)滅活病毒。加(二乙烯亞胺)滅活病毒。加5%氫氧化鋁氫氧化鋁膠混合,制成膠混合,制成CPV異源滅活疫苗。異源滅活疫苗。 .27(3)疫苗檢驗(yàn):)疫苗檢驗(yàn):一次免疫后一次免疫后1015dHI抗體效價(jià)在抗體效價(jià)在1:40以上,以上,2次免疫后效價(jià)可達(dá)次免疫后效價(jià)可達(dá)1:80以上,并能經(jīng)以上,并能經(jīng)受強(qiáng)毒口服的攻擊。受強(qiáng)毒口服的攻擊。(4)保存與使用:)保存與使用:于于4保存,有效期保存,有效期1年。年。6周周齡和齡和14周齡
18、犬分別免疫接種一次,每次皮下注射周齡犬分別免疫接種一次,每次皮下注射23ml,間隔,間隔34周。妊娠犬產(chǎn)前周。妊娠犬產(chǎn)前20d注射一次,可注射一次,可獲得良好的免疫效果。獲得良好的免疫效果。 .283、CPV細(xì)胞培養(yǎng)活疫苗:細(xì)胞培養(yǎng)活疫苗:(1)種毒:種毒:CPV-780916弱毒株,為弱毒株,為CPV強(qiáng)毒株在犬腎原代細(xì)強(qiáng)毒株在犬腎原代細(xì)胞上傳代胞上傳代80115代代,經(jīng)篩選獲得的適應(yīng)弱毒。,經(jīng)篩選獲得的適應(yīng)弱毒。(2)制苗:制苗:疫苗用犬腎原代細(xì)胞或疫苗用犬腎原代細(xì)胞或MDCK細(xì)胞(犬腎細(xì)胞株)細(xì)胞(犬腎細(xì)胞株)生產(chǎn)病毒,加保護(hù)劑凍干而成。生產(chǎn)病毒,加保護(hù)劑凍干而成。疫苗安全有效,免疫接種疫
19、苗安全有效,免疫接種后后4d即可產(chǎn)生高滴度的即可產(chǎn)生高滴度的HI抗體。抗體。(3)保存與使用:保存與使用:疫苗于疫苗于15保存,保存期保存,保存期1年,皮下注年,皮下注射射1ml,免疫,免疫2次,間隔時(shí)間次,間隔時(shí)間23周周,妊娠犬產(chǎn)前,妊娠犬產(chǎn)前20d免疫一免疫一次,免疫期次,免疫期1年。年。 .29(二)免疫程序:(二)免疫程序:首免:首免:7-87-8周齡(斷奶周齡(斷奶6060日齡)免疫接種一次日齡)免疫接種一次弱毒苗;弱毒苗;二免:二免:間隔間隔2 2周加強(qiáng)免疫接種一次滅活苗。周加強(qiáng)免疫接種一次滅活苗。以后每年加強(qiáng)免疫接種一次。以后每年加強(qiáng)免疫接種一次。 .30第三節(jié)第三節(jié) 犬傳染性
20、肝炎犬傳染性肝炎(ICH) 一、病況與病原概述:一、病況與病原概述:1、病況:、病況:概念:概念:ICH是由是由ICHV(犬(犬型腺病毒)引起的一種急性、型腺病毒)引起的一種急性、高度接觸性、敗血性的傳染病。高度接觸性、敗血性的傳染病。流行特點(diǎn):流行特點(diǎn):主要感染犬和狐貍,可發(fā)生于任何季節(jié),無(wú)主要感染犬和狐貍,可發(fā)生于任何季節(jié),無(wú)年齡和品種差異。該病常見(jiàn)于年齡和品種差異。該病常見(jiàn)于1歲以?xún)?nèi)的幼犬,剛斷奶的小歲以?xún)?nèi)的幼犬,剛斷奶的小犬最易發(fā)病,幼犬病死率高達(dá)犬最易發(fā)病,幼犬病死率高達(dá)2540%。幼犬患病時(shí),常于。幼犬患病時(shí),常于12天內(nèi)突然死亡,如耐過(guò)天內(nèi)突然死亡,如耐過(guò)48小時(shí),多能康復(fù)。成年
21、犬多能小時(shí),多能康復(fù)。成年犬多能耐過(guò),產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力。耐過(guò),產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力。.31、臨床癥狀和病理變化特征:、臨床癥狀和病理變化特征: 表現(xiàn)為高熱稽留、貧血、血液不易凝結(jié)而出表現(xiàn)為高熱稽留、貧血、血液不易凝結(jié)而出血不止,肝小葉中心壞死,肝實(shí)質(zhì)和內(nèi)皮細(xì)胞出血不止,肝小葉中心壞死,肝實(shí)質(zhì)和內(nèi)皮細(xì)胞出現(xiàn)核內(nèi)包涵體,康復(fù)犬的一眼或兩眼呈暫時(shí)性角現(xiàn)核內(nèi)包涵體,康復(fù)犬的一眼或兩眼呈暫時(shí)性角膜色素炎癥稱(chēng)肝炎性藍(lán)眼病??祻?fù)犬長(zhǎng)期帶毒,膜色素炎癥稱(chēng)肝炎性藍(lán)眼病。康復(fù)犬長(zhǎng)期帶毒,并獲得免疫力。并獲得免疫力。.322、病原:、病原:ICHV。分類(lèi)地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征:分類(lèi)地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征:該病毒屬于腺病毒科哺乳
22、動(dòng)該病毒屬于腺病毒科哺乳動(dòng)物腺病毒屬犬腺病毒物腺病毒屬犬腺病毒型病毒(型病毒(CAV-I),核酸為雙股),核酸為雙股DNA,球形,正球形,正20面體對(duì)稱(chēng),大小直徑面體對(duì)稱(chēng),大小直徑80100nm,無(wú)囊膜,衣殼,無(wú)囊膜,衣殼頂角上有頂角上有1根纖絲向外突出,長(zhǎng)約根纖絲向外突出,長(zhǎng)約2050nm。該病毒與引起。該病毒與引起犬傳染性支氣管炎(犬窩咳)的犬腺病毒犬傳染性支氣管炎(犬窩咳)的犬腺病毒型(型(CAV-)具有共同的抗原決定簇,但在毒力、抗原結(jié)構(gòu)和致病性等具有共同的抗原決定簇,但在毒力、抗原結(jié)構(gòu)和致病性等方面都不同,兩者具有方面都不同,兩者具有70%的相同基因,所以在免疫上能的相同基因,所以在
23、免疫上能交叉保護(hù)。交叉保護(hù)。.33、生長(zhǎng)繁殖特征:、生長(zhǎng)繁殖特征:該病毒能在犬、猴、豬、該病毒能在犬、猴、豬、豚鼠和水貂等腎、肺原代細(xì)胞中增殖,易形成豚鼠和水貂等腎、肺原代細(xì)胞中增殖,易形成蝕斑和核內(nèi)包涵體。通過(guò)細(xì)胞傳代可導(dǎo)致毒力蝕斑和核內(nèi)包涵體。通過(guò)細(xì)胞傳代可導(dǎo)致毒力減弱。減弱。、凝集特征:、凝集特征:能凝集人能凝集人O O型、雞、豚鼠紅細(xì)胞,型、雞、豚鼠紅細(xì)胞,但不能凝集犬紅細(xì)胞。但不能凝集犬紅細(xì)胞。 .34二、疫苗和免疫:二、疫苗和免疫:(一)疫苗:(一)疫苗:用于預(yù)防犬傳染性肝炎的疫苗有滅活疫苗和用于預(yù)防犬傳染性肝炎的疫苗有滅活疫苗和弱毒疫苗。弱毒疫苗。1、組織滅活疫苗:、組織滅活疫苗
24、:(1)種毒:種毒:為為CAV-I標(biāo)準(zhǔn)毒株,也可選擇經(jīng)分離鑒定的犬傳標(biāo)準(zhǔn)毒株,也可選擇經(jīng)分離鑒定的犬傳染性肝炎病毒強(qiáng)毒株。種毒稀釋后,靜脈接種易感犬,發(fā)染性肝炎病毒強(qiáng)毒株。種毒稀釋后,靜脈接種易感犬,發(fā)病后出現(xiàn)典型臨床癥狀時(shí),捕殺,無(wú)菌采取肝、脾組織,病后出現(xiàn)典型臨床癥狀時(shí),捕殺,無(wú)菌采取肝、脾組織,用高速組織搗碎機(jī)搗碎,用用高速組織搗碎機(jī)搗碎,用PBS制成制成20%懸液,加入懸液,加入0.1%0.2%甲醛,甲醛,37滅活滅活24h,制成組織滅活疫苗。,制成組織滅活疫苗。 .35(2)疫苗檢驗(yàn):疫苗檢驗(yàn):按常規(guī)進(jìn)行。按常規(guī)進(jìn)行。安全檢驗(yàn):安全檢驗(yàn):選擇選擇15g左右健康小鼠左右健康小鼠10只,
25、只,5只腦內(nèi)接種只腦內(nèi)接種0.03ml,5只腹腔接種只腹腔接種0.5ml,觀察,觀察7d應(yīng)無(wú)異常反應(yīng);也應(yīng)無(wú)異常反應(yīng);也可選擇敏感犬可選擇敏感犬5只,只,3只皮下接種只皮下接種5.0ml,2只作對(duì)照,觀只作對(duì)照,觀察察21d無(wú)異常反應(yīng)。無(wú)異常反應(yīng)。效力檢驗(yàn):效力檢驗(yàn):取免疫犬取免疫犬3只和對(duì)照犬只和對(duì)照犬2只,用強(qiáng)毒攻擊,只,用強(qiáng)毒攻擊,觀察觀察14d,免疫犬應(yīng)健活,對(duì)照犬出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀至少,免疫犬應(yīng)健活,對(duì)照犬出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀至少1只只死亡。死亡。.36(3)保存與使用:)保存與使用: 于于4保存,有效期保存,有效期1年。體重年。體重3kg以下犬皮下以下犬皮下接種接種3ml,3kg以上犬皮下接種以
26、上犬皮下接種5ml,免疫保護(hù)期,免疫保護(hù)期6個(gè)月。個(gè)月。 .372、細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗:、細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗:制苗過(guò)程:制苗過(guò)程:(1)種毒:種毒:用用CAV-I強(qiáng)毒株。強(qiáng)毒株。(2)制苗:制苗:毒種稀釋后接種毒種稀釋后接種MDCK(犬腎傳代細(xì)胞株)單層(犬腎傳代細(xì)胞株)單層細(xì)胞,細(xì)胞,37吸附吸附30min,加入,加入EME維持液,繼續(xù)培養(yǎng)維持液,繼續(xù)培養(yǎng)4872h,出現(xiàn)出現(xiàn)80%以上以上CPE時(shí)收獲病毒,時(shí)收獲病毒,TCID5010-6.0/ml。凍融。凍融3次,次,3000r/min離心離心20min取上清,加入取上清,加入0.2%0.3%甲醛甲醛37滅活滅活24h。滅活后進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn),合格
27、后加入。滅活后進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn),合格后加入5%7%的氫氧化鋁的氫氧化鋁膠,即成犬傳染性肝炎細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗。膠,即成犬傳染性肝炎細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗。 .38(3)疫苗檢驗(yàn):)疫苗檢驗(yàn):常規(guī)檢驗(yàn):常規(guī)檢驗(yàn):進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn),應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。進(jìn)行無(wú)菌檢驗(yàn),應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。安全檢驗(yàn):安全檢驗(yàn):選選12月齡未經(jīng)免疫健康犬月齡未經(jīng)免疫健康犬3只,其只,其CAV-I抗體效價(jià)小于抗體效價(jià)小于1:4,每只皮下注射疫苗,每只皮下注射疫苗2ml,在在1周內(nèi)應(yīng)無(wú)體溫升高、白細(xì)胞減少及注射部位紅周內(nèi)應(yīng)無(wú)體溫升高、白細(xì)胞減少及注射部位紅腫等不良反應(yīng)。腫等不良反應(yīng)。.39(4)保存與使用:)保存與使用: 在在48保存期保存期1年。妊娠犬產(chǎn)
28、前年。妊娠犬產(chǎn)前20d免疫,仔犬在免疫,仔犬在7周齡和周齡和9周齡各免疫周齡各免疫1次,皮下或肌肉注射次,皮下或肌肉注射1ml/只。只。 .403、犬傳染性肝炎活疫苗:、犬傳染性肝炎活疫苗: 種毒選用已適應(yīng)犬腎原代細(xì)胞的種毒選用已適應(yīng)犬腎原代細(xì)胞的CAV-I弱毒株。將種毒弱毒株。將種毒稀釋后接種稀釋后接種MDCK(犬腎傳代細(xì)胞株)細(xì)胞,(犬腎傳代細(xì)胞株)細(xì)胞,37吸附吸附30min,加入,加入MEM維持液,培養(yǎng)至維持液,培養(yǎng)至CPE達(dá)達(dá)85%以上時(shí)收獲以上時(shí)收獲病毒,凍融病毒,凍融3次后,離心除去細(xì)胞碎片,加入次后,離心除去細(xì)胞碎片,加入5%蔗糖脫脂蔗糖脫脂乳保護(hù)劑,凍干制成凍干疫苗。效力檢驗(yàn)
29、,可取疫苗稀釋乳保護(hù)劑,凍干制成凍干疫苗。效力檢驗(yàn),可取疫苗稀釋后做后做TCID50測(cè)定,測(cè)定,TCID5010-4.0/ml。 .41(二)免疫程序:(二)免疫程序:用弱毒苗。用弱毒苗。 首免:首免:9周齡斷奶犬接種一次。周齡斷奶犬接種一次。 二免:二免:15周齡加強(qiáng)免疫一次。周齡加強(qiáng)免疫一次。 以后每半年加強(qiáng)免疫一次。以后每半年加強(qiáng)免疫一次。 犬犬型腺病毒弱毒苗接種后會(huì)出現(xiàn)型腺病毒弱毒苗接種后會(huì)出現(xiàn)111天輕度角膜混天輕度角膜混濁水腫反應(yīng)。也可用濁水腫反應(yīng)。也可用犬犬型腺病毒弱毒苗接種,既可預(yù)防型腺病毒弱毒苗接種,既可預(yù)防該病,又不會(huì)發(fā)生角膜水腫該病,又不會(huì)發(fā)生角膜水腫。犬傳肝的免疫預(yù)防在
30、獸醫(yī)實(shí)。犬傳肝的免疫預(yù)防在獸醫(yī)實(shí)踐中是見(jiàn)效的,原因是疫苗弱毒被接種犬排放到環(huán)境,其踐中是見(jiàn)效的,原因是疫苗弱毒被接種犬排放到環(huán)境,其它犬與之接觸而獲得免疫,造成了它犬與之接觸而獲得免疫,造成了高水平的群體免疫高水平的群體免疫。 .42第四節(jié)第四節(jié) 貓泛白細(xì)胞減少癥(貓泛白細(xì)胞減少癥(FPFP).43第四節(jié)第四節(jié) 貓泛白細(xì)胞減少癥(貓泛白細(xì)胞減少癥(FPFP)一、病況與病原概述:一、病況與病原概述:1 1、病況:、病況:概念:概念:貓泛白細(xì)胞減少癥也叫貓泛白細(xì)胞減少癥也叫貓瘟熱貓瘟熱、貓傳染性腸炎貓傳染性腸炎、貓細(xì)小病毒感染貓細(xì)小病毒感染, ,此病是由此病是由貓泛白細(xì)胞減少癥病毒貓泛白細(xì)胞減少癥
31、病毒(feline (feline panleukopenia virus,FPV)panleukopenia virus,FPV)引起的貓?zhí)貏e是引起的貓?zhí)貏e是幼齡貓幼齡貓的一種的一種發(fā)熱性、高度接觸性、致死性傳染病。該病以體溫升高、發(fā)熱性、高度接觸性、致死性傳染病。該病以體溫升高、嘔吐、腹瀉和嘔吐、腹瀉和白細(xì)胞減少白細(xì)胞減少為主要特征為主要特征, ,傳染性極強(qiáng)。傳染性極強(qiáng)。 .44流行特點(diǎn)流行特點(diǎn) 家貓對(duì)家貓對(duì)FPVFPV易感,斷奶不久的易感,斷奶不久的幼貓最敏感幼貓最敏感。除此之外,。除此之外,大多數(shù)貓科動(dòng)物大多數(shù)貓科動(dòng)物( (如山貓、豹貓、野貓、豹、虎、獅如山貓、豹貓、野貓、豹、虎、獅)
32、 )和部和部分鼬科動(dòng)物分鼬科動(dòng)物( (水貂、臭鼬水貂、臭鼬) )也非常易感,浣熊科動(dòng)物中的長(zhǎng)也非常易感,浣熊科動(dòng)物中的長(zhǎng)吻浣熊、密熊及小熊貓也可被感染。貓一旦被感染便可迅吻浣熊、密熊及小熊貓也可被感染。貓一旦被感染便可迅速流行,多數(shù)呈急性經(jīng)過(guò),死亡率極高速流行,多數(shù)呈急性經(jīng)過(guò),死亡率極高, ,往往形成地方性往往形成地方性流行。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)途運(yùn)輸、飼養(yǎng)條件劇變以及來(lái)源不同和不明流行。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)途運(yùn)輸、飼養(yǎng)條件劇變以及來(lái)源不同和不明的貓混合飼養(yǎng)的貓混合飼養(yǎng), ,也會(huì)引起該病的急性暴發(fā),也會(huì)引起該病的急性暴發(fā),死亡率可達(dá)死亡率可達(dá)90%90%以上以上。在母貓繁育季節(jié)。在母貓繁育季節(jié)( (冬末至春季冬末至春季)
33、 )多發(fā),特別是多發(fā),特別是1212月至月至來(lái)年的來(lái)年的3 3月發(fā)病率可占全年的月發(fā)病率可占全年的55.8%55.8%。1 1歲以?xún)?nèi)的幼貓歲以?xún)?nèi)的幼貓發(fā)病發(fā)病率很高率很高,可達(dá)可達(dá)38.5%38.5%,隨著年齡的增長(zhǎng)發(fā)病率會(huì)有所降低。,隨著年齡的增長(zhǎng)發(fā)病率會(huì)有所降低。同時(shí),全窩幼貓發(fā)病的情況非常普遍。同時(shí),全窩幼貓發(fā)病的情況非常普遍。 .45臨床癥狀臨床癥狀 潛伏期為潛伏期為 2 29 d9 d,平均為,平均為 4 d4 d。發(fā)病早期主要表現(xiàn)。發(fā)病早期主要表現(xiàn)為精神倦怠,食欲減退。體溫升高到為精神倦怠,食欲減退。體溫升高到 4040左右,持續(xù)左右,持續(xù)24 24 h h,然后恢復(fù)到正常,過(guò),然
34、后恢復(fù)到正常,過(guò) 2 23 d 3 d 又再次升高,呈現(xiàn)明顯又再次升高,呈現(xiàn)明顯的的雙相熱雙相熱。隨著病程的延長(zhǎng),病貓精神極度沉郁,。隨著病程的延長(zhǎng),病貓精神極度沉郁,食欲食欲廢絕廢絕,頻繁嘔吐頻繁嘔吐,每天嘔吐幾次到幾十次,嘔吐物病初,每天嘔吐幾次到幾十次,嘔吐物病初為食物,后轉(zhuǎn)為黃綠色胃液,呈為食物,后轉(zhuǎn)為黃綠色胃液,呈頑固性嘔吐頑固性嘔吐。3 34 d4 d后后腹瀉,后期帶血,呈咖啡色、脫水,眼球下陷,最后嚴(yán)腹瀉,后期帶血,呈咖啡色、脫水,眼球下陷,最后嚴(yán)重脫水,衰竭死亡。妊娠母貓感染后多發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、重脫水,衰竭死亡。妊娠母貓感染后多發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)死胎或畸胎,出生的仔貓表現(xiàn)共濟(jì)失
35、調(diào)等癥狀。幼貓產(chǎn)死胎或畸胎,出生的仔貓表現(xiàn)共濟(jì)失調(diào)等癥狀。幼貓死亡率最高,死亡率最高,可達(dá)可達(dá)90%90%,病程,病程3 37d7d。 .46病理變化病理變化 鼻、眼出現(xiàn)膿性分泌物,眼球下陷,腹部蜷縮,鼻、眼出現(xiàn)膿性分泌物,眼球下陷,腹部蜷縮,皮下組織干燥、脫水。剖檢時(shí)內(nèi)臟病變主要在消化道,皮下組織干燥、脫水。剖檢時(shí)內(nèi)臟病變主要在消化道,表現(xiàn)為表現(xiàn)為胃腸空虛,黏膜充血、出血或水腫胃腸空虛,黏膜充血、出血或水腫。腸道黏膜。腸道黏膜出血,在空腸和回腸還有纖維素性滲出物。腸道發(fā)生出血,在空腸和回腸還有纖維素性滲出物。腸道發(fā)生水腫時(shí),可見(jiàn)腸道壁增厚。腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血水腫時(shí),可見(jiàn)腸道壁增厚。腸系膜
36、淋巴結(jié)腫大、出血, ,其切面呈現(xiàn)紅、灰或白相間的大理石樣花紋。其切面呈現(xiàn)紅、灰或白相間的大理石樣花紋。胸腺有胸腺有萎縮、水腫,肝、脾僅見(jiàn)瘀血變化萎縮、水腫,肝、脾僅見(jiàn)瘀血變化。死于心肌炎綜合。死于心肌炎綜合征的病例,則見(jiàn)肺臟局部充血、出血及水腫,心肌紅征的病例,則見(jiàn)肺臟局部充血、出血及水腫,心肌紅黃相間呈虎斑狀(黃相間呈虎斑狀(虎斑心虎斑心)。)。.472 2、病原:、病原:FPVFPV。分類(lèi)地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征:分類(lèi)地位及形態(tài)結(jié)構(gòu)特征:該病毒屬于該病毒屬于細(xì)小病毒科細(xì)小細(xì)小病毒科細(xì)小病毒屬病毒屬,核酸為單股,核酸為單股DNADNA,球形,正,球形,正2020面體對(duì)稱(chēng),大小直徑面體對(duì)稱(chēng),大小直徑
37、202024nm24nm,無(wú)囊膜。,無(wú)囊膜。生長(zhǎng)繁殖特征:生長(zhǎng)繁殖特征:該病毒能在仔貓腎、肺、睪丸等細(xì)胞內(nèi)該病毒能在仔貓腎、肺、睪丸等細(xì)胞內(nèi)增殖。除貓的細(xì)胞外,還能在水貂和雪貂的組織細(xì)胞內(nèi)增增殖。除貓的細(xì)胞外,還能在水貂和雪貂的組織細(xì)胞內(nèi)增殖。殖。該病毒要在細(xì)胞形成單層以前接種病毒該病毒要在細(xì)胞形成單層以前接種病毒,才能達(dá)到病才能達(dá)到病毒大量增殖的目的毒大量增殖的目的。雖能產(chǎn)生細(xì)胞病變但不明顯。雖能產(chǎn)生細(xì)胞病變但不明顯。 血凝特性:血凝特性:僅在僅在44下對(duì)猴和豬的紅細(xì)胞有凝集作用。下對(duì)猴和豬的紅細(xì)胞有凝集作用。.48二、疫苗和免疫:二、疫苗和免疫:(一)疫苗:(一)疫苗:用于預(yù)防貓瘟熱的疫苗
38、有弱毒疫苗和滅活用于預(yù)防貓瘟熱的疫苗有弱毒疫苗和滅活疫苗。疫苗。1 1、弱毒疫苗:、弱毒疫苗: 選擇免疫原性良好的選擇免疫原性良好的強(qiáng)毒株強(qiáng)毒株在在同源或異源細(xì)胞上馴同源或異源細(xì)胞上馴化致弱化致弱, ,通過(guò)蝕斑純化通過(guò)蝕斑純化, ,篩選出免疫原性好的毒株作為種篩選出免疫原性好的毒株作為種毒生產(chǎn)疫苗。毒生產(chǎn)疫苗。 目前國(guó)外已經(jīng)研制并使用目前國(guó)外已經(jīng)研制并使用貓泛白細(xì)胞減少癥貓泛白細(xì)胞減少癥- -貓鼻氣貓鼻氣管炎管炎- -貓杯狀病毒病貓杯狀病毒病三聯(lián)疫苗三聯(lián)疫苗, ,免疫試驗(yàn)證明免疫試驗(yàn)證明, ,可使機(jī)體可使機(jī)體同時(shí)獲得對(duì)同時(shí)獲得對(duì)3 3種傳染病的免疫力種傳染病的免疫力, ,且病毒之間不存在相互且病毒之間不存在相互干擾。干擾。 .492 2、滅活疫苗:、滅活疫苗:(1 1)組織滅活疫苗)組織滅活疫苗 組織滅活苗于組織滅活苗
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