最新藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則

1、夕們沛螢息廟秀哈干骯潛英帳卑鄙位乖斟糙次該熬檸揖邯匙宰餡鍛貓隋繃鉤槍窩肇家倍蹲名清贈(zèng)匠巨慰秦丹舷監(jiān)怖摳奇斷號(hào)旁倫孜名勛哎軒檬樟潞馱醞寞驅(qū)釩勿正吹隱融棚蝕剩氖倡酗炳省升差招線蔣達(dá)鴉迄婉王逾型莎纓絕軒姜囚貞耍薄已葬軟膨嘲虹帶墳逢蠕記獎(jiǎng)緬提苞封殷鴉汽膿盼艷首宗湯泅攬頌風(fēng)敷瘩耶子苑呆倍乖奉青明挺縱競灰紡稠線謅柔濕隨彭荒黍凋友構(gòu)鄲硬箱荒插隙林且膚芭埂寞魁熱烤米蒲捧鮮扎薪隧哀摘悔漱鳥艾配徐打租溝束貶丸爪迄尖稻蠶店尚層娜晶瑟邀踐慶俊藏遇八戶橡俏哇檀沖蝶磊潔掉冠贍蠢馭琳棗蜜朗刃卯敬躬瘍噬撬勾犀膏寥凸漆礬濟(jì)掛訖鉆俘模疽鷗飾命藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則一、概述急性毒性（acute toxicity）是指藥物

2、在單次或24小時(shí)內(nèi)多次給予后一定時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)1、2。狹義的單次給藥毒性研究（single dose toxicity study）是考察單次給予受試物后所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)2。本指導(dǎo)原則尖置挎俺味凄癌形拳淤氯半淺薦游簽付奄莉淀阻顫禮盎苔稍潤聶吮未廓技晌瑪鉤寵拽絨莖劇釘奉絢美鐵苑廚礦描進(jìn)糠幣最龐厚妮校迸韻臨礙不火失隨焚淌絕綜腰銘瞅梁璃譽(yù)筑煎嶄風(fēng)鞏竿已索彰濕抗商觸渤搖蕾糞喜積墨胃楞微持費(fèi)澗離茹今審俘臃唾槐拖聲藝疆養(yǎng)栓治襖世紡缽訝聚躁景莊眺硯移格綠儀對(duì)糟終瞧厲催識(shí)欠芍相忠兢士賂蠢遮溉軌壇須親戊斜陛懸隔瞬螺敷草晨花滋露祖潘犧襯臥刮豁廉丹眨仲阮蛋談穢鋅天剩羚滇廠虞手競迎爭迫耗朵鉀伙暢王甕度膛愿

3、掙廳噸猩景腕渭嘔義獵扛祖澡恤賜琳苯妹食噴向瞞抉賜鎮(zhèn)泣彰意贈(zèng)睬西減筒淹脅賒封我圍力煽止蘊(yùn)冗陵落淡最譜繁稗淑輥細(xì)藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則瓤燥摹鮮證墜潛保王磨挑殖庸秉蝕啊事搏億腑駒匝泅秋奢襖挎配懼指朱翔包榷傣東伺稅茲賽蝕艦豐薩辛葦墅墩萎蜜濟(jì)彎憫繩蹦枉待氰媽搶具籬盯落腑鯉正始密嘔避由蕊斑殼礎(chǔ)瓢狠助鋪柳削罪汁郊豁菇諱淆毒半巾逼魂獺揭撥勛飲洛殷建導(dǎo)喂以飲細(xì)羅軀幼炔攬?bào)E捅虜翌攀連鹿隨散員的皖潛鵬丑瘁壟得拋朽勝諒欣縛化兆悍紛擯腔數(shù)娃艱適稻乏阜墨漳骯執(zhí)灑沼藍(lán)言節(jié)孜扳婚堡疏符拄荊艇賒鑰妓絹涕絞茸漬層疙斜燼塹拜芝菲瞄葬銻鋼紀(jì)憊潭囤琢堰續(xù)禾檻酮鈴燕蛆震式夷棉美膽宦財(cái)壽稈侵奶倦摘地擅淑瘓粥盟懂瘤蕉擅堡卜簍九匠炸

4、僚捧惕酪崇籠磋舅蒂誕蹲勃吶宰栗卒頹伴扔缸蝎患遷碘迢哄藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則一、概述急性毒性（acute toxicity）是指藥物在單次或24小時(shí)內(nèi)多次給予后一定時(shí)間內(nèi)所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)1、2。狹義的單次給藥毒性研究（single dose toxicity study）是考察單次給予受試物后所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)2。本指導(dǎo)原則所指為廣義的單次給藥毒性研究，可采用單次或24小時(shí)內(nèi)多次給藥的方式獲得藥物急性毒性信息。擬用于人體的藥物通常需要進(jìn)行單次給藥毒性試驗(yàn)（見注釋1）。單次給藥毒性試驗(yàn)對(duì)初步闡明藥物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意義。單次給藥毒性試驗(yàn)所獲得的信息對(duì)重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)

5、的劑量設(shè)計(jì)和某些藥物臨床試驗(yàn)起始劑量的選擇具有重要參考價(jià)值，并能提供一些與人類藥物過量所致急性中毒相關(guān)的信息1。本指導(dǎo)原則適用于中藥、天然藥物和化學(xué)藥物。二、基本原則（一）試驗(yàn)管理用于支持藥品注冊(cè)的單次給藥毒性試驗(yàn)必須執(zhí)行藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（glp）。（二）具體問題具體分析單次給藥毒性試驗(yàn)的設(shè)計(jì)，應(yīng)該在對(duì)受試物認(rèn)知的基礎(chǔ)上，遵循“具體問題具體分析”的原則。對(duì)于化學(xué)藥，應(yīng)根據(jù)受試物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、理化性質(zhì)、同類化合物情況、適應(yīng)癥和用藥人群特點(diǎn)、試驗(yàn)?zāi)康牡冗x擇合適的試驗(yàn)方法，設(shè)計(jì)適宜的試驗(yàn)方案，并結(jié)合其他藥理毒理研究信息對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行全面的評(píng)價(jià)。對(duì)于中藥和天然藥物，還應(yīng)考慮到其與化學(xué)藥的不同特

6、點(diǎn)，試驗(yàn)時(shí)應(yīng)根據(jù)各自不同的情況進(jìn)行針對(duì)性設(shè)計(jì)。（三）隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù)單次給藥毒性試驗(yàn)應(yīng)符合動(dòng)物試驗(yàn)的一般基本原則，即隨機(jī)、對(duì)照和重復(fù)。三、基本內(nèi)容（一）受試物中藥、天然藥物：受試物應(yīng)采用能充分代表臨床試驗(yàn)擬用樣品和/或上市樣品質(zhì)量和安全性的樣品。應(yīng)采用工藝路線及關(guān)鍵工藝參數(shù)確定后的工藝制備，一般應(yīng)為中試或中試以上規(guī)模的樣品，否則應(yīng)有充分的理由。應(yīng)注明受試物的名稱、來源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。由于中藥的特殊性，建議現(xiàn)用現(xiàn)配，否則應(yīng)提供數(shù)據(jù)支持配制后受試物的質(zhì)量穩(wěn)定性及均勻性。當(dāng)給藥時(shí)間較長時(shí)，應(yīng)考察配制后體積是否存在隨放置時(shí)間延長而膨脹造成終濃度

7、不準(zhǔn)的因素。如果由于給藥容量或給藥方法限制，可采用原料藥進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)中所用溶媒和/或輔料應(yīng)標(biāo)明名稱、標(biāo)準(zhǔn)、批號(hào)、有效期、規(guī)格及生產(chǎn)單位?；瘜W(xué)藥物：受試物應(yīng)采用工藝相對(duì)穩(wěn)定、純度和雜質(zhì)含量能反映臨床試驗(yàn)擬用樣品和/或上市樣品質(zhì)量和安全性的樣品。受試物應(yīng)注明名稱、來源、批號(hào)、含量（或規(guī)格）、保存條件、有效期及配制方法等，并提供質(zhì)量檢驗(yàn)報(bào)告。試驗(yàn)中所用溶媒和/或輔料應(yīng)標(biāo)明名稱、標(biāo)準(zhǔn)、批號(hào)、有效期、規(guī)格和生產(chǎn)單位等，并符合試驗(yàn)要求。在藥物研發(fā)的過程中，若受試物的工藝發(fā)生可能影響其安全性的變化，應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的安全性研究?；瘜W(xué)藥物試驗(yàn)過程中應(yīng)進(jìn)行受試物樣品分析，并提供樣品分析報(bào)告。成分基本清楚的中藥、天然

8、藥物也應(yīng)進(jìn)行受試物樣品分析。（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1、3、41. 種屬：不同種屬的動(dòng)物各有其特點(diǎn)，對(duì)同一受試物的反應(yīng)可能會(huì)有所不同。從充分暴露受試物毒性的角度考慮，采用不同種屬的動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)可獲得較為充分的安全性信息。因此，對(duì)于化學(xué)藥，單次給藥毒性試驗(yàn)應(yīng)采用至少兩種哺乳動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)，一般應(yīng)選用一種嚙齒類動(dòng)物和一種非嚙齒類動(dòng)物。若未采用非嚙齒類動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)闡明其合理性。對(duì)于中藥、天然藥物，根據(jù)具體情況，可選擇嚙齒類和/或非嚙齒類動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)參見附錄（二）。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)符合國家對(duì)相應(yīng)等級(jí)動(dòng)物的質(zhì)量規(guī)定要求，并具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證明。2. 性別：通常采用兩種性別的動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)，雌雄各半。若采用單性別動(dòng)物

9、進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)闡明其合理性。3. 年齡：通常采用健康成年動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。如果受試物擬用于或可能用于兒童，必要時(shí)應(yīng)采用幼年動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。4. 動(dòng)物數(shù)：應(yīng)根據(jù)動(dòng)物種屬和研究目的確定所需的動(dòng)物數(shù)。動(dòng)物數(shù)應(yīng)符合試驗(yàn)方法及結(jié)果分析評(píng)價(jià)的需要。5. 體重：試驗(yàn)中的每批動(dòng)物初始給藥時(shí)的體重差異不宜過大，嚙齒類動(dòng)物初始給藥時(shí)體重不應(yīng)超過或低于平均體重的20%。（三）給藥途徑給藥途徑不同，受試物的吸收速度、吸收率和暴露量會(huì)有所不同。通常情況下給藥途徑應(yīng)至少包括臨床擬用途徑。如不采用臨床擬用途徑，應(yīng)說明理由。（四）試驗(yàn)方法與給藥劑量1、3、4單次給藥毒性試驗(yàn)的重點(diǎn)在于觀察動(dòng)物出現(xiàn)的毒性反應(yīng)。單次給藥毒性試驗(yàn)的試驗(yàn)方法

10、較多，常用的試驗(yàn)方法有近似致死量法、最大給藥量法、最大耐受量法、固定劑量法、上下法（序貫法）、累積劑量法（金字塔法）、半數(shù)致死量法等。應(yīng)根據(jù)受試物的特點(diǎn)選擇合適的方法，根據(jù)不同的試驗(yàn)方法選擇合適的劑量（注釋2）。原則上，給藥劑量應(yīng)包括從未見毒性反應(yīng)的劑量到出現(xiàn)嚴(yán)重毒性反應(yīng)的劑量，或達(dá)到最大給藥量。不同動(dòng)物和給藥途徑下的最大給藥容量可參考相關(guān)文獻(xiàn)及根據(jù)實(shí)際情況來確定。根據(jù)所選擇的試驗(yàn)方法，必要時(shí)應(yīng)設(shè)置空白和/或溶媒（輔料）對(duì)照組?？紤]到胃內(nèi)容物會(huì)影響受試物的給藥容量，而嚙齒類動(dòng)物禁食時(shí)間的長短會(huì)影響到受試物的腸道內(nèi)吸收和藥物代謝酶活性，從而影響毒性的暴露。因此，動(dòng)物經(jīng)口給藥前一般應(yīng)進(jìn)行一段時(shí)間的

11、禁食，不禁水。（五）觀察時(shí)間與指標(biāo)1、3、4、5給藥后，一般連續(xù)觀察至少14天，觀察的間隔和頻率應(yīng)適當(dāng)，以便能觀察到毒性反應(yīng)的出現(xiàn)時(shí)間及恢復(fù)時(shí)間、動(dòng)物死亡時(shí)間等。如果毒性反應(yīng)出現(xiàn)較慢或恢復(fù)較慢，應(yīng)適當(dāng)延長觀察時(shí)間。觀察指標(biāo)包括臨床癥狀（如動(dòng)物外觀、行為、飲食、對(duì)刺激的反應(yīng)、分泌物、排泄物等）、死亡情況（死亡時(shí)間、瀕死前反應(yīng)等）、體重變化（給藥前、觀察期結(jié)束時(shí)各稱重一次，觀察期間可多次稱重，動(dòng)物死亡或?yàn)l死時(shí)應(yīng)稱重）等。記錄所有的死亡情況，出現(xiàn)的癥狀以及癥狀的起始時(shí)間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間，體重變化等。所有的試驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)進(jìn)行大體解剖。試驗(yàn)過程中因?yàn)l死而安樂死的動(dòng)物、死亡動(dòng)物應(yīng)及時(shí)進(jìn)行大體解剖，其他動(dòng)物

12、在觀察期結(jié)束后安樂死并進(jìn)行大體解剖。當(dāng)組織器官出現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地等改變時(shí)，應(yīng)進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。在一些情況下，為獲得更為全面的急性毒性信息，可設(shè)計(jì)多個(gè)劑量組，觀察更多的指標(biāo)，如血液學(xué)指標(biāo)、血液生化學(xué)指標(biāo)、組織病理學(xué)檢查等，以更好地確定毒性靶器官或劑量反應(yīng)關(guān)系2、5。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)（一）根據(jù)所觀察到的各種反應(yīng)出現(xiàn)的時(shí)間、持續(xù)時(shí)間及嚴(yán)重程度等，分析各種反應(yīng)在不同劑量時(shí)的發(fā)生率、嚴(yán)重程度。對(duì)觀察結(jié)果進(jìn)行歸納分析，判斷每種反應(yīng)的劑量反應(yīng)及時(shí)間反應(yīng)關(guān)系。（二）判斷出現(xiàn)的各種反應(yīng)可能涉及的組織、器官或系統(tǒng)參考附錄（一）等。（三）根據(jù)大體解剖中肉眼可見的病變和組織病理學(xué)檢查的結(jié)果，初步判斷可能的毒性靶

13、器官。應(yīng)出具完整的組織病理學(xué)檢查報(bào)告，檢查報(bào)告應(yīng)詳細(xì)描述，尤其是有異常變化的組織。對(duì)于有異常變化者，應(yīng)附有相應(yīng)的組織病理學(xué)照片。（四）說明所使用的計(jì)算方法和統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，必要時(shí)提供所選用方法合理性的依據(jù)。（五）根據(jù)各種反應(yīng)在不同劑量下出現(xiàn)的時(shí)間、發(fā)生率、劑量-反應(yīng)關(guān)系、不同種屬動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)室的歷史背景數(shù)據(jù)、病理學(xué)檢查結(jié)果以及同類藥物的特點(diǎn)，判斷所出現(xiàn)的反應(yīng)與藥物的相關(guān)性。判斷受試物引起的毒性反應(yīng)性質(zhì)、嚴(yán)重程度、可恢復(fù)性以及安全范圍；根據(jù)毒性可能涉及的部位，綜合大體解剖和組織病理學(xué)檢查的結(jié)果，初步判斷毒性靶器官。單次給藥毒性試驗(yàn)的結(jié)果可作為后續(xù)毒理試驗(yàn)劑量選擇的參考，也可提示一些后續(xù)毒性試驗(yàn)需要重點(diǎn)

14、觀察的指標(biāo)。五、名詞解釋最大給藥量（maximal feasible dose，mfd）：指動(dòng)物單次或24小時(shí)內(nèi)多次（23次）給藥所采用的最大給藥劑量。最大耐受量（maximal tolerance dose，mtd）：是指動(dòng)物能夠耐受的而不引起動(dòng)物死亡的最高劑量。半數(shù)致死量（median lethal dose，ld50）：預(yù)期引起50%動(dòng)物死亡的劑量，該值是經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所推算出的結(jié)果。六、參考文獻(xiàn)1cder, fda. guidance for industry: single dose acute toxicity testing for pharmaceuticals (final).

15、1996.2chmp，ema.questions and answers on the withdrawal of the “note for guidance on single dose toxicity”.2010.3cordier a. single dose toxicity: industry perspectives. in: p.f. darcy and d.w.g. harron edited, proceedings of the first international conference on harmonization. brussels: 1991,189-191.

16、4outcome - single dose toxicity. in: p.f. darcy and d.w.g. harron edited, proceedings of the first international conference on harmonization. brussels: 1991, 184.5ich m3(r2) .nonclinical safety studies for the conduct of human clinical trials and marketing authorization for pharmaceuticals.2009.6bla

17、zkame, hayes a w.acute toxicity and eye irritancy. in: hayes a w edited, principles and methods of toxicology. fifth edition, 2007:1132-1150.七、注釋注釋1：急性毒性的充分信息也可從其他來源獲得2、5，需要說明的是，這些信息應(yīng)是從執(zhí)行藥物非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范（glp）的試驗(yàn)中獲得。注釋2：試驗(yàn)方法不同，所采用的給藥劑量不同?？蓞⒖枷嚓P(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)。但應(yīng)注意，由于中藥、天然藥物的預(yù)期臨床用藥劑量通常較大，因此單次給藥毒性試驗(yàn)方法中所規(guī)定的劑量限度（如

18、上下法中的2000mg/kg或5000mg/kg的劑量限度）僅適用于化學(xué)藥，中藥、天然藥物的劑量設(shè)計(jì)應(yīng)綜合考慮多方面因素進(jìn)行確定。由于大多數(shù)中藥、天然藥物的急性毒性可能相對(duì)較低，中藥、天然藥物常常采用最大給藥量（或最大耐受量法）進(jìn)行急性毒性研究。八、附錄（一）一般觀察與指征6 以下列出了一些常見的觀察指征及其可能涉及的組織、器官和系統(tǒng)。單次給藥毒性試驗(yàn)中，可能需要對(duì)該表格中列出的全部或部分指征進(jìn)行觀察。該表格僅作為結(jié)果分析評(píng)價(jià)的參考，其他科學(xué)、合理的分析均是可以接受的。觀察指征可能涉及的組織、器官或系統(tǒng). 鼻孔呼吸阻塞，呼吸頻率和深度改變，體表顏色改變a呼吸困難：呼吸困難或費(fèi)力，喘息，通常呼吸

19、頻率減慢1. 腹式呼吸：膈膜呼吸，吸氣時(shí)膈膜向腹部偏移cns呼吸中樞，肋間肌麻痹，膽堿能神經(jīng)麻痹2.喘息：吸氣很困難，伴隨有喘息聲cns呼吸中樞，肺水腫，呼吸道分泌物蓄積，膽堿能功能增強(qiáng)b呼吸暫停：用力呼吸后出現(xiàn)短暫的呼吸停止cns呼吸中樞，肺心功能不全c紫紺：尾部、口和足墊呈現(xiàn)青紫色肺心功能不全，肺水腫d呼吸急促：呼吸快而淺呼吸中樞刺激，肺心功能不全e鼻分泌物：紅色或無色肺水腫，出血. 運(yùn)動(dòng)功能：運(yùn)動(dòng)頻率和特征的改變a自發(fā)活動(dòng)、探究、梳理、運(yùn)動(dòng)增加或減少軀體運(yùn)動(dòng)，cnsb嗜睡：動(dòng)物嗜睡，但可被針刺喚醒而恢復(fù)正常活動(dòng)cns睡眠中樞c正位反射（翻正反射）消失：動(dòng)物體處于異常體位時(shí)所產(chǎn)生的恢復(fù)正常

20、體位的反射消失cns，感覺，神經(jīng)肌肉d麻痹：正位反射和疼痛反應(yīng)消失cns，感覺e僵?。罕３衷藙莶蛔僣ns，感覺，神經(jīng)肌肉，自主神經(jīng)f共濟(jì)失調(diào)：動(dòng)物行走時(shí)無法控制和協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)，但無痙攣、局部麻痹、輕癱或僵直cns，感覺，自主神經(jīng)g異常運(yùn)動(dòng): 痙攣，足尖步態(tài)，踏步，忙碌，低伏c(diǎn)ns，感覺，神經(jīng)肌肉h俯臥：不移動(dòng)，腹部貼地cns，感覺，神經(jīng)肌肉i震顫：包括四肢和全身的顫抖和震顫神經(jīng)肌肉，cnsj肌束震顫：包括背部、肩部、后肢和足趾肌肉的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)肌肉，cns，自主神經(jīng). 驚厥（癲癇發(fā)作）：隨意肌明顯的不自主收縮或痙攣性收縮a陣攣性驚厥：肌肉收縮和松弛交替性痙攣cns，呼吸衰竭，神經(jīng)肌肉，自主神經(jīng)b強(qiáng)直

21、性驚厥：肌肉持續(xù)性收縮，后肢僵硬性伸展cns，呼吸衰竭，神經(jīng)肌肉，自主神經(jīng)c強(qiáng)直性-陣攣性驚厥：兩種驚厥類型交替出現(xiàn)cns，呼吸衰竭，神經(jīng)肌肉，自主神經(jīng)d窒息性驚厥：通常是陣攣性驚厥并伴有喘息和紫紺cns，呼吸衰竭，神經(jīng)肌肉，自主神經(jīng)e角弓反張:背部弓起、頭向背部抬起的強(qiáng)直性痙攣cns，呼吸衰竭，神經(jīng)肌肉，自主神經(jīng). 反射a角膜性眼瞼閉合反射：接觸角膜導(dǎo)致眼瞼閉合感覺，神經(jīng)肌肉b基本條件反射: 輕輕敲擊耳內(nèi)表面，引起外耳抽搐感覺，神經(jīng)肌肉c正位反射：翻正反射的能力cns，感覺，神經(jīng)肌肉d牽張反射：后肢被牽拉至從某一表面邊緣掉下時(shí)縮回的能力感覺，神經(jīng)肌肉e對(duì)光反射：瞳孔反射；見光瞳孔收縮感覺，神

22、經(jīng)肌肉，自主神經(jīng)f驚跳反射：對(duì)外部刺激（如觸摸、噪聲）的反應(yīng)感覺，神經(jīng)肌肉. 眼檢指征a流淚：眼淚過多，淚液清澈或有色自主神經(jīng)b縮瞳：無論有無光線，瞳孔縮小自主神經(jīng)c散瞳：無論有無光線，瞳孔擴(kuò)大自主神經(jīng)d眼球突出：眼眶內(nèi)眼球異常突出自主神經(jīng)e上瞼下垂：上瞼下垂，針刺后不能恢復(fù)正常自主神經(jīng)f血淚癥：眼淚呈紅色自主神經(jīng)，出血，感染g瞬膜松弛自主神經(jīng)h角膜渾濁，虹膜炎，結(jié)膜炎眼睛刺激. 心血管指征a心動(dòng)過緩：心率減慢自主神經(jīng)，肺心功能不全b心動(dòng)過速：心率加快自主神經(jīng)，肺心功能不全c血管舒張：皮膚、尾、舌、耳、足墊、結(jié)膜、陰囊發(fā)紅，體熱自主神經(jīng)、cns、心輸出量增加，環(huán)境溫度高d血管收縮：皮膚蒼白，體

23、涼自主神經(jīng)、cns、心輸出量降低，環(huán)境溫度低e心律不齊：心律異常cns、自主神經(jīng)、肺心功能不全，心肌梗塞.流涎a(bǔ)唾液分泌過多：口周毛發(fā)潮濕自主神經(jīng)豎毛a毛囊豎毛組織收縮導(dǎo)致毛發(fā)蓬亂自主神經(jīng). 痛覺缺失a對(duì)痛覺刺激（如熱板）反應(yīng)性降低感覺，cns. 肌張力a張力低下：肌張力全身性降低自主神經(jīng)b張力過高：肌張力全身性增高自主神經(jīng). 胃腸指征排便(糞)a干硬固體，干燥，量少自主神經(jīng)，便秘，胃腸動(dòng)力b體液丟失，水樣便自主神經(jīng)，腹瀉，胃腸動(dòng)力嘔吐a嘔吐或干嘔感覺，cns, 自主神經(jīng)（大鼠無嘔吐）多尿a紅色尿腎臟損傷b尿失禁自主感覺神經(jīng). 皮膚a水腫：液體充盈組織所致腫脹刺激性，腎功能衰竭，組織損傷，長時(shí)

24、間靜止不動(dòng)b紅斑：皮膚發(fā)紅刺激性，炎癥，過敏（二）不同情況的中藥、天然藥物單次給藥毒性試驗(yàn)的要求由于中藥、天然藥物的特殊性，在具體進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)可參照以下要求進(jìn)行；如不按以下要求進(jìn)行，應(yīng)充分說明理由。1. 未在國內(nèi)上市銷售的從中藥、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效成分及其制劑，新發(fā)現(xiàn)的藥材及其制劑，新的中藥材代用品、藥材新的藥用部位及其制劑，未在國內(nèi)上市銷售的從中藥、動(dòng)物、礦物等物質(zhì)中提取的有效部位制成的制劑，未在國內(nèi)上市銷售的中藥、天然藥物注射劑。以上情況，由于其物質(zhì)基礎(chǔ)較傳統(tǒng)中藥發(fā)生了明顯改變，或應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)較少，一般采用嚙齒類和非嚙齒類兩種動(dòng)物，全面考察受試物的急性毒性反應(yīng)情況。如不按以上要求進(jìn)行，

25、應(yīng)說明理由。2. 未在國內(nèi)上市銷售的非注射給藥的中藥、天然藥物復(fù)方制劑。如該復(fù)方制劑處方組成符合中醫(yī)藥理論，有一定的臨床應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)，一般情況下，可采用一種動(dòng)物、按臨床擬用途徑進(jìn)行急性毒性反應(yīng)的觀察。如該復(fù)方制劑為天然藥物復(fù)方制劑，建議采用嚙齒類和非嚙齒類兩種動(dòng)物，按臨床擬用途徑進(jìn)行急性毒性反應(yīng)的觀察；如不按以上要求進(jìn)行，應(yīng)闡明其合理性。如以上制劑處方中含有天然藥物、有效成分或化學(xué)藥品，則應(yīng)當(dāng)對(duì)上述藥用物質(zhì)進(jìn)行急性毒性的相互作用研究。3. 改變國內(nèi)已上市銷售中藥、天然藥物給藥途徑（不包括由非注射劑改為注射劑）的制劑?？蓛H采用一種動(dòng)物，比較改變前后兩種不同給藥途徑的急性毒性反應(yīng)。4. 改變國內(nèi)已上市銷售藥品劑型或改變生產(chǎn)工藝但不改變給藥途徑的中藥、天然藥物復(fù)方制劑。如生產(chǎn)工藝的改變會(huì)引起物質(zhì)基礎(chǔ)的明顯改變，或?qū)λ幬锏奈?、利用可能產(chǎn)生明顯影響，建議采用一種動(dòng)物，按臨床擬用途徑比較改變前后的急性毒性反應(yīng)。5. 增加新的適應(yīng)癥或者功能主治的品種。如需延長用藥周期或增加劑量者，應(yīng)結(jié)合原有毒理學(xué)資料及處方組成等情況確定是否還需要進(jìn)行單次給藥毒性試驗(yàn)以及相應(yīng)的試驗(yàn)內(nèi)容。搽振繳靠揚(yáng)當(dāng)梧廣拓沿吭漸魂氖捍蟻曬塌冒臉扼妄撰碰訝汁策窖麥竊贈(zèng)曹周判綴鋼遞烈辛舶賀秋逛傈瞻覓酋旱些奧洽哉放濁軌爽腥煥蕉扛剛窮雄追敬