第三章血液分析儀PPT課件

1、第三章第三章血液分析儀血液分析儀Hematologic AnalyzersKEY POINTSKEY POINTS1.Basic content of hematologic analyzers.2.Principles of hematologic analyzer based on one or two classic methods:electrical impedance and (or) optical detection.3.Parameters from hematologic analyzers and their clinical values.4.Characteristi

2、cs and significances of blood cell histograms and scattergram.5. Function assessment of hematologic analyzer. 血液分析儀血液分析儀, ,臨床血液一般檢查最常用儀器。臨床血液一般檢查最常用儀器。5050年代，美國(guó)庫(kù)爾特（年代，美國(guó)庫(kù)爾特（W.H.CoulterW.H.Coulter）發(fā)明）發(fā)明電子血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀并申請(qǐng)專利。電子血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀并申請(qǐng)專利。血液分析儀優(yōu)勢(shì)血液分析儀優(yōu)勢(shì)檢測(cè)項(xiàng)目多檢測(cè)項(xiàng)目多速度快速度快精度高精度高易操作易操作第一節(jié) 檢 驗(yàn) 原 理一、儀器基本結(jié)構(gòu)一、儀器基本結(jié)構(gòu)1、

3、機(jī)械系統(tǒng)、機(jī)械系統(tǒng) 2、電學(xué)系統(tǒng)、電學(xué)系統(tǒng) 3、光學(xué)系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng) 二、電阻抗法1、電阻抗原理，又稱庫(kù)爾特原理、電阻抗原理，又稱庫(kù)爾特原理2 2、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)原理、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)原理儀器將體積為儀器將體積為3535450fL450fL的血細(xì)胞，分為的血細(xì)胞，分為256256個(gè)通道（個(gè)通道（channelchannel）。每個(gè)通道：）。每個(gè)通道：1.64fl1.64fl。根據(jù)細(xì)胞大小，分別置于不同的通道中，顯根據(jù)細(xì)胞大小，分別置于不同的通道中，顯示血細(xì)胞體積分布直方圖示血細(xì)胞體積分布直方圖(Histogram)(Histogram)。 經(jīng)溶血素處理脫水后，血細(xì)胞體積大小發(fā)生經(jīng)溶血素

4、處理脫水后，血細(xì)胞體積大小發(fā)生了變化！了變化！第一群（第一群（353590fl90fl）小細(xì)胞區(qū)：淋巴細(xì)胞小細(xì)胞區(qū)：淋巴細(xì)胞（體積最?。w積最小）。第二群（第二群（9090160fl160fl）單個(gè)核細(xì)胞區(qū)，（中單個(gè)核細(xì)胞區(qū)，（中間細(xì)胞）：?jiǎn)魏思?xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿間細(xì)胞）：?jiǎn)魏思?xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、原始、幼稚細(xì)胞、異常細(xì)胞等。性粒細(xì)胞、原始、幼稚細(xì)胞、異常細(xì)胞等。第三群（第三群（160fl160fl以上）以上）大細(xì)胞區(qū)：嗜中性粒細(xì)大細(xì)胞區(qū)：嗜中性粒細(xì)胞（體積最大）胞（體積最大）。三分群血液分析儀三分群血液分析儀正常白細(xì)胞分類模式圖（直方圖）正常白細(xì)胞分類模式圖（直方圖） %3

5、5 90 160 300 400 450(fl)3 3、紅細(xì)胞檢測(cè)原理、紅細(xì)胞檢測(cè)原理 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血細(xì)胞比容測(cè)定與白細(xì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血細(xì)胞比容測(cè)定與白細(xì)胞計(jì)數(shù)相似。胞計(jì)數(shù)相似。 100 200 300 400 (fl)%4 4、血小板檢測(cè)原理、血小板檢測(cè)原理血小板計(jì)數(shù)（血小板計(jì)數(shù)（platelet, PLTplatelet, PLT）：）：隨紅細(xì)胞在一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)隨紅細(xì)胞在一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)。直方圖在228fl（不同儀器不一）。 10 20 30(fl)10 20 30(fl)%三、光散射法血液分析儀檢測(cè)原理三、光散射法血液分析儀檢測(cè)原理 組合應(yīng)用組合應(yīng)用 電學(xué)電學(xué) 光學(xué)光學(xué) 細(xì)胞化學(xué)等細(xì)

6、胞化學(xué)等1 1、白細(xì)胞檢測(cè)、白細(xì)胞檢測(cè) （1 1）容量、電導(dǎo)、光散射）容量、電導(dǎo)、光散射（volume，conductivity， scatter, VCS）法法原理原理細(xì)胞體積技術(shù)細(xì)胞體積技術(shù)（測(cè)量（測(cè)量細(xì)胞大小）細(xì)胞大?。╇妼?dǎo)性技術(shù)電導(dǎo)性技術(shù)（測(cè)量細(xì)（測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)）胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)）光散射技術(shù)光散射技術(shù)（測(cè)量細(xì)（測(cè)量細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞核和細(xì)胞胞形態(tài)、細(xì)胞核和細(xì)胞顆粒）。顆粒）。 體積 電導(dǎo) 光散射VCSVCS可顯示可顯示3 3種細(xì)胞散點(diǎn)圖種細(xì)胞散點(diǎn)圖DF1DF1（體積值和散射光值）（體積值和散射光值）DF2DF2（體積值和電導(dǎo)值）（體積值和電導(dǎo)值）DF3DF3（體積值和電導(dǎo)值）（體積值和電導(dǎo)值）

7、（2 2）電阻抗與射頻法（能透入細(xì)胞內(nèi)，測(cè)）電阻抗與射頻法（能透入細(xì)胞內(nèi)，測(cè)量核的大小及顆粒的多少）。量核的大小及顆粒的多少）。RF:RF:射頻電流射頻電流 細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)信息DC:DC:直流電直流電 細(xì)胞大小的信息細(xì)胞大小的信息 （3 3）激光與細(xì)胞化學(xué)法）激光與細(xì)胞化學(xué)法 過氧化物酶檢測(cè)通道過氧化物酶檢測(cè)通道 嗜堿性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞/ /分葉核檢測(cè)通道分葉核檢測(cè)通道。 （4 4）多角度偏振光散射（）多角度偏振光散射（multi-angle polarized scatter separation of white cell, MAPSS）法）法 0 0：前角光散射：前角光散

8、射（1 13 3），可粗略），可粗略測(cè)定細(xì)胞大小。測(cè)定細(xì)胞大小。 1010：狹角光散射：狹角光散射（7 71111），可測(cè)），可測(cè)定細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)相對(duì)特征。定細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)相對(duì)特征。 9090：垂直光散射：垂直光散射（7070110110），測(cè)），測(cè)定細(xì)胞核分葉情況。定細(xì)胞核分葉情況。 9090：消偏振光散射：消偏振光散射（7070110110），），區(qū)分嗜酸性粒細(xì)胞與其他細(xì)胞。區(qū)分嗜酸性粒細(xì)胞與其他細(xì)胞。 2 2、光散射法紅細(xì)胞、血紅蛋白檢測(cè)原理、光散射法紅細(xì)胞、血紅蛋白檢測(cè)原理 低角度低角度(2(23 3) )：測(cè)量紅細(xì)胞體積。：測(cè)量紅細(xì)胞體積。 高角度高角度(5(51515) )：測(cè)定紅細(xì)胞

9、血紅：測(cè)定紅細(xì)胞血紅蛋白濃度。蛋白濃度。3 3、血紅蛋白檢測(cè)原理、血紅蛋白檢測(cè)原理 比色法比色法4 4、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)原理 原理：原理：用新亞甲藍(lán)染色使紅細(xì)胞用新亞甲藍(lán)染色使紅細(xì)胞RNARNA著色或用熒光染料對(duì)著色或用熒光染料對(duì)RNARNA進(jìn)行染色。進(jìn)行染色。光散射法網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)散點(diǎn)圖光散射法網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)散點(diǎn)圖 第二節(jié)第二節(jié) 血細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)參數(shù)血細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)參數(shù)一、檢測(cè)參數(shù) 中高檔儀器檢測(cè)參數(shù)：中高檔儀器檢測(cè)參數(shù)： 20項(xiàng)左右或超過項(xiàng)左右或超過40多項(xiàng)。多項(xiàng)。二、相關(guān)參數(shù)的臨床應(yīng)用二、相關(guān)參數(shù)的臨床應(yīng)用第三節(jié)第三節(jié) 血細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)圖形血細(xì)胞分析儀檢驗(yàn)圖形一、血細(xì)胞

10、直方圖一、血細(xì)胞直方圖 橫坐標(biāo)為血細(xì)胞體積大小橫坐標(biāo)為血細(xì)胞體積大小 縱坐標(biāo)為不同體積細(xì)胞的相對(duì)頻率?？v坐標(biāo)為不同體積細(xì)胞的相對(duì)頻率。1 1、白細(xì)胞直方圖、白細(xì)胞直方圖正常白細(xì)胞直方圖正常白細(xì)胞直方圖異常白細(xì)胞直方圖異常白細(xì)胞直方圖2 2、紅細(xì)胞直方圖、紅細(xì)胞直方圖（1 1）正常紅細(xì)胞分布：）正常紅細(xì)胞分布：5050200fl 200fl （2 2）異常紅細(xì)胞直方圖）異常紅細(xì)胞直方圖3 3、血小板直方圖、血小板直方圖正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布：正常血小板直方圖呈左偏態(tài)分布：2 230fl30fl分布，主要在分布，主要在2 215fl15fl。 異常血小板直方圖 第四節(jié) 儀器質(zhì)量保證 一、一、

11、 可比性可比性 (comparability(comparability) ) 指血液分析儀測(cè)定結(jié)果，與常規(guī)方法所指血液分析儀測(cè)定結(jié)果，與常規(guī)方法所 測(cè)結(jié)果相比較。顯微鏡法是血細(xì)胞檢驗(yàn)測(cè)結(jié)果相比較。顯微鏡法是血細(xì)胞檢驗(yàn)基礎(chǔ)。基礎(chǔ)。 P P0.050.05有可比性；有可比性；P P0.050.05無可比性。無可比性。 結(jié)論：結(jié)論：計(jì)數(shù)細(xì)胞越多、選用吸管、計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)細(xì)胞越多、選用吸管、計(jì)數(shù)盤越多，計(jì)數(shù)結(jié)果接近真值。盤越多，計(jì)數(shù)結(jié)果接近真值。實(shí)際工作中，鏡檢法很難達(dá)到此要求。實(shí)際工作中，鏡檢法很難達(dá)到此要求。二、準(zhǔn)確性二、準(zhǔn)確性 (accuracy)(accuracy) 準(zhǔn)確性是指測(cè)定結(jié)果與真值一致性

12、的程度。準(zhǔn)確性是指測(cè)定結(jié)果與真值一致性的程度。三、總重復(fù)性三、總重復(fù)性( (overall repeatabilityoverall repeatability) ) 指同一份標(biāo)本多次測(cè)量的結(jié)果接近的程度。指同一份標(biāo)本多次測(cè)量的結(jié)果接近的程度。重復(fù)測(cè)定重復(fù)測(cè)定1 1份抗凝靜脈血份抗凝靜脈血1010次，計(jì)算次，計(jì)算CVCV值。值。四、精密度四、精密度 (precision)(precision) 批內(nèi)批內(nèi)（within-batchwithin-batch）精密度：同一）精密度：同一批樣本重復(fù)測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)。批樣本重復(fù)測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)。批批間間(between-batch)(between-batch)精密度：對(duì)兩批精密度：對(duì)兩批或兩批以上樣本重復(fù)測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)?；騼膳陨蠘颖局貜?fù)測(cè)定結(jié)果的評(píng)價(jià)。 精確度精確度和準(zhǔn)確度和準(zhǔn)確度五、攜帶污染率五、攜帶污染率(carry over)(carry over)連續(xù)測(cè)定連續(xù)測(cè)定1 1份高值樣本份高值樣本3 3次（次（i1i1、i2i2、i3i3）再測(cè)定再測(cè)定1 1份低值樣本份低值樣本3 3次（次（j1j1、j2j2、j3j3）