第九章 球菌-1

1、濟 寧 醫(yī) 學 院教 案 20092010學年 第 二 學期所在單位 基礎(chǔ)醫(yī)學與法醫(yī)學院 教 研 室 病原生物學 課程名稱 醫(yī)學微生物學 授課對象 08級臨床本科 授課教師 楊媛媛 職 稱 講師 教材名稱 醫(yī)學微生物學 （第七版） 2010年3月教案首頁章節(jié)第九章球菌-1講授內(nèi)容葡萄球菌屬 奈瑟菌屬學時分配2學時教學目的1.掌握各類化膿性球菌的形態(tài)染色、培養(yǎng)特性、致病物質(zhì)和所致疾病。2.熟悉球菌的微生物學檢查方法3了解其防治原則教學重點掌握SPA概念；掌握病原性球菌的致病物質(zhì)，所致疾病教學難點SPA-IgG復合物的生物學意義教學方法講述法、啟發(fā)法、教學互動法、多媒體輔助法、比較法教具準備多媒體

2、課件、教案、教材、教鞭教學參考資料醫(yī)學微生物學（第7版）李凡主編 人民出版社醫(yī)學免疫學（第5版）陳慰峰主編 人民出版社教學后記教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【引言】【板書】【講述】【提問】【講述】【幻燈顯示】【幻燈顯示】【提問】球菌是細菌中的一個大類，其中對人類有致病性的致病性的球菌包括葡萄菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬和奈瑟菌屬四個菌屬的一些細菌。根據(jù)革蘭染色性的不同，球菌分為革蘭陽性菌和革蘭陰性菌兩類。前者有葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌和腸球菌等；后者有腦膜炎奈瑟球菌、淋病奈瑟球菌等。通常把引起機體化膿性炎癥的球菌稱為化

3、膿性球菌。這節(jié)課我們首先學習葡萄球菌屬。同學們在實驗課上通過革蘭染色，在光學顯微鏡下已經(jīng)觀察到了葡萄球菌，其染色性和形態(tài)特點是什麼？葡萄球菌分布廣泛，少數(shù)致病，稱為病原性球菌，其特點概括為四個“之最”最常見的化膿性細菌；最常見的引起醫(yī)院內(nèi)感染的致病菌之一；最易產(chǎn)生耐藥性變異；在無芽胞細菌中，對理化因素的抵抗力最強。首先，學習一、生物學性狀1、形態(tài)染色 革蘭染色陽性球菌，葡萄串狀排列無鞭毛，不形成芽胞，體外培養(yǎng)不形成莢膜。講解圖片（光學顯微鏡、掃描電鏡）回答：革蘭染色陽性球菌，聚集呈葡萄串樣排列問：細胞壁受損仍在高滲環(huán)境下存活的變異型是？答：細菌L型回顧實驗課內(nèi)容，使學生從形態(tài)學對葡萄球菌有了感

4、性認識。5分鐘讓學生注意形態(tài)、染色、結(jié)構(gòu)在發(fā)生變異時的改變教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【提問】【教鞭指示】【板書】【講述】【動畫演示】2、培養(yǎng)特性 營養(yǎng)要求不高，在液體培養(yǎng)基呈均勻混濁生長；在固體培養(yǎng)基上，形成S型菌落，出現(xiàn)脂溶性色素，致病菌株的菌落周圍形成溶血環(huán)。 講解圖片（菌落圖片）、抗原構(gòu)造：葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A, SPA）存在于細胞壁上的表面蛋白（多見于致病菌） SPA可與人及多種哺乳動物的IgG 抗體Fc段結(jié)合，結(jié)合后IgG抗體的Fab段仍可以和相應抗原特異性結(jié)合

5、。結(jié)合示意圖講解SPA結(jié)構(gòu)，并復習免疫相關(guān)內(nèi)容。形成SPA-IgG復合物的生物學意義：（1）削弱吞噬細胞的吞噬能力依次放映兩幅動畫問：菌落為？答：S型菌落問：色素為？答：脂溶性色素問：菌落周圍什么樣的溶血環(huán)？答：溶血環(huán)素將實驗課觀察到的現(xiàn)象上升到理性認識回顧免疫課相關(guān)內(nèi)容Flash動畫有聲音，注意打開音響。教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【幻燈顯示】【講述】【幻燈顯示】（2）檢測微生物抗原SPA協(xié)同凝集試驗3、分類金黃色葡萄球菌（致病菌）色素 表皮葡萄球菌（條件致病菌）腐生葡萄球菌凝固酶 凝固酶陽性（致病菌）凝固酶陰性（

6、條件致病菌）噬菌體分型DNA基因型近年來臨床和實驗室檢測結(jié)果表明，CNS已成為醫(yī)源性感染的常見病原菌，可引起泌尿系統(tǒng)感染、細菌性心內(nèi)膜炎、敗血癥和術(shù)后感染等，應引起臨床注意。4、抵抗力無芽胞菌中抵抗力最強對堿性染料敏感；最易產(chǎn)生耐藥性變異(耐青霉素G菌株和耐甲氧西林菌株)提示學生聯(lián)想實驗課觀察不同菌種的菌落呈現(xiàn)不同顏色15分鐘理論與實驗密切結(jié)合，要求學生熟悉常用分類法提示：注意CNS致病性介紹對CNS的新近研究結(jié)論。10分鐘教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【講述并引入本章重點內(nèi)容】【幻燈顯示】【講述】【幻燈顯示】【啟發(fā)】

7、病原性球菌（金黃色葡萄球菌）侵襲力強，產(chǎn)生的毒素、酶多，毒力強，下面重點學習其致病物質(zhì)與所致疾病二、致病性（一）致病物質(zhì)1 凝固酶2 葡萄球菌溶素3殺白細胞素4腸毒素5表皮剝脫毒素6毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）7其它：SPA、耐熱核酸酶等1凝固酶：使含抗凝劑的人或兔的血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)。多由致病株產(chǎn)生，是鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標游離凝固酶 (試管法檢測)種類 結(jié)合凝固酶 (玻片法檢測)解釋凝固酶作用機理為何金黃色葡萄球菌引起的化膿性感染局限化？思考讓學生對致病物質(zhì)有一個整體認識后，再分別細講提醒學生實驗課時注意觀察 教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等

8、、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【分析講解】【幻燈顯示】【講述】 【動畫演示】【講解】凝固酶與致病性有關(guān)：抗吞噬作用;免受體液殺菌物質(zhì)殺傷；與感染局限化和形成血栓有關(guān)2葡萄球菌溶素：分、等五種；其中溶素毒性最強，對多種哺乳動物紅細胞有溶血作用；對白細胞、血小板等均有損傷。3殺白細胞素：作用于中性粒細胞和巨噬細胞的細胞膜，膜穿孔和膜通透性增高；抗吞噬作用，增強致病菌侵襲力4腸毒素：是一組熱穩(wěn)定的可溶性蛋白，耐100 30min；抗胃蛋白酶分解；刺激嘔吐中樞，導致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒5表皮剝脫毒素：使表皮層細胞脫落，引起剝脫性皮炎。6毒性休克綜合征毒素-1（ TSST-1）

9、 （toxic shock syndrom toxin 1）刺激單核吞噬細胞釋放活性物質(zhì)，作用于血管內(nèi)皮細胞，導致血管通透性增加，血液中液體成分外滲，回心血量減少，出現(xiàn)低血壓性休克Flash動畫啟發(fā)學生理解凝固酶的致病作用10分鐘10分鐘教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【幻燈顯示】【講述】【圖片總結(jié)】【提出問題】【比較】【講述】【幻燈顯示】（二）所致疾?。?. 侵襲性疾病：通過多種途徑侵入機體，引起以化膿性炎癥為主的感染。（1）皮膚軟組織感染：毛囊炎、癤、癰、 傷口化膿、麥粒腫、甲溝炎等。金黃色葡萄球菌引起化膿性感染特點

10、膿汁黃而粘稠，化膿灶多局限，與周圍組織界限明顯。為何感染灶局限化？與致病性鏈球菌引起的化膿性感染特點相區(qū)別（2）內(nèi)臟器官感染：氣管炎、肺炎、膿胸、中耳炎。（3）全身感染：敗血癥、膿毒血癥等。病原性球菌產(chǎn)生多種毒素，由此引起多種毒素性疾病2、毒素性疾病（1）食物中毒： 進食腸毒素污染的食物導致的以嘔吐為主的急性胃腸炎。（2）燙傷樣皮膚綜合征： 引導學生觀察、思考這幾張圖片感染的特點答：與凝固酶有關(guān)回顧前面所學致病物質(zhì)10分鐘教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【圖片】【圖片】【講述】【幻燈顯示】【動畫演示】由表皮剝脫毒素引起，

11、 多見于嬰幼兒（3）毒性休克綜合征： 由TSST-1引起， 高熱、低血壓、 嚴重時出現(xiàn)休克三、免疫性人類對致病性葡萄球菌有一定的天然抵抗力；感染恢復后，可獲得一定的免疫力，但不強， 難以防止再次感染。四、微生物學檢查標本采集 直接鏡檢 分離培養(yǎng)鑒定 藥敏實驗 腸毒素檢查檢測腸毒素的方法？：小貓實驗病原性葡萄球菌生物學特點:產(chǎn)生金黃色色素，產(chǎn)生溶血環(huán)，產(chǎn)生血漿凝固酶，能分解甘露醇，具有SPA蛋白和耐熱核酸酶微生物學檢查時，以上可作為參考提示學生思考為何會有這些特點，注意其致病物質(zhì)與所致疾病的關(guān)系10分鐘回顧復習，并區(qū)別天然免疫與特異性免疫教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、

12、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【總結(jié)】【圖片】五、防 治 原 則加強衛(wèi)生宣傳教育，注意個人衛(wèi)生，及時正確處理傷口避免感染。 應根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選用細菌敏感的抗生素，皮膚有化膿性感染者，不宜從事食品制作或飲食服務行業(yè)。病原性葡萄球菌是最常見的化膿性細菌，掌握其主要致病物質(zhì)及疾病特點，對于更好地防治疾病有重要臨床意義。第四節(jié)奈瑟菌屬（因課時安排，提前講授）腦膜炎奈瑟菌流行性腦脊髓膜炎形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應抗原構(gòu)造與分類致病性微生物學檢查防治原則淋病奈瑟菌淋病形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應提醒學生注意和腦膜炎奈瑟球菌對比10分鐘10分鐘教學過程（課程教學實施方案）教師活動（講解、板書、演示等、提問）教學內(nèi)容學生活動（回答、思考、動手等）備注【圖片】【總結(jié)】【課后復習題】【板書設(shè)計】致病性：淋病新生兒淋球菌性結(jié)膜炎微生物學檢查防治原則特點：1、 革蘭陰性雙球菌，疾病急性期可在膿液標本涂片鏡下觀察到中性粒細胞內(nèi)外有革蘭陰性雙球菌。2、 菌毛是主要致病物質(zhì)3、 標本注意保溫保濕立即送檢，培養(yǎng)基用巧克力培養(yǎng)基。4、 流腦飛沫傳播，莢膜多糖疫苗5、 淋病性傳播，產(chǎn)道傳播概念:SPA、凝固酶、TSST-1思考題(1) 如何鑒定致病性葡萄球菌?(2)致病性葡萄球菌有哪些致病物質(zhì)?