中藥對視損傷

1、中藥對視神經(jīng)損傷修復(fù)的影響項目簡介 實驗背景 目前的治療手段 實驗?zāi)康?研究內(nèi)容和擬解決的問題 實驗步驟 實驗結(jié)果預(yù)測 實驗意義 本實驗創(chuàng)新之處實驗背景 自1982年已有報道視神經(jīng)切斷的再生實驗，將青蛙的視神經(jīng)切斷，3個月內(nèi)，視神經(jīng)再生，視力恢復(fù)。以及1985年aguago動物實驗和1987年vidal等動物實驗均證實視神經(jīng)具有再生功能?？墒怯捎谝暽窠?jīng)損傷的病理過程復(fù)雜，再生過程受到諸多因素的影響。近10年已從起解剖、生理、生物化學(xué)等方面進行研究，并已經(jīng)得到一些明確的結(jié)論。 有實驗表明，復(fù)明中藥可能通過其擴張血管增血流動功能，促進組織的新陳代謝，從而改善是神經(jīng)組織的內(nèi)環(huán)境，加強神經(jīng)細(xì)胞的合成，

2、促進視神經(jīng)的再生。 通過測定某些藥物對視神經(jīng)損傷修復(fù)的作用，篩選出來的具有促進作用的藥物。并且通過這個實驗有助于了解中藥的作用機制，為中藥的臨床應(yīng)用提供現(xiàn)代理論依據(jù)。視神經(jīng)損傷修復(fù)的重要性視神經(jīng)損傷導(dǎo)致： 1、視力下降甚至是失明 2、直接光反射消失、間接光反射正?，F(xiàn)象 3、雙眼的視力受損和視野缺損癥狀 所以，視神經(jīng)損傷有效的治療就顯得急需和迫切。目前主要治療手段 早期藥物治療： 脫水劑、糖皮質(zhì)激素、血管擴張劑、鈣離子通道阻滯劑以及維生素c、e、b等藥物，以及維生素b1、atp以及輔酶a，地巴唑、菸酸、維生素e、復(fù)方丹參、維腦路通等等。實驗?zāi)康?探究并測定哪些中藥單體對視神經(jīng)損傷具有修復(fù)作用，以

3、及篩選出對視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞再生最具促進作用的新藥。為正處在視神經(jīng)損傷造成的視力下降，甚至喪失視力的患者帶來福音。研究內(nèi)容和擬解決的問題 研究內(nèi)容： 1、用視神經(jīng)橫斷傷法將老鼠的視神經(jīng)自視交叉前任一部位切斷，以至所有視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（rgc）軸突完全斷離。 2、分別給各組老鼠注射幾種不同的中藥，分35期進行觀察記錄各組老鼠的視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的再生情況，以及視力恢復(fù)情況。 擬解決的問題1、明確視交叉的解剖位置，為斷離視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突，制備動物模型提供解剖學(xué)依據(jù)。 2、熟悉各種直接或間接檢測老鼠視力情況的科學(xué)方法。1、動物分組 1、選取條件相似的小鼠設(shè)為對照組及實驗組1、2、3 指標(biāo) 組視神經(jīng)纖維積光密度視

4、神經(jīng)髓鞘積光密度視神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞對照組實驗組1實驗組2實驗組32、視神經(jīng)損傷鼠模型的建立視神經(jīng)橫斷傷法建立視神經(jīng)損傷動物模型概念： 此法是將視神經(jīng)沿眶上切跡切斷，使視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（rgc）和中樞神經(jīng)系統(tǒng)完全斷離。優(yōu)點： 各實驗動物致傷量一致，觀察再生時不會受殘留未受損的軸突影響，并且試驗具有可重復(fù)性，各組間可進行對照，期間，藥物可進行平行篩選。視神經(jīng)損傷鼠模型的建立結(jié)扎剪斷上直?。河诮Y(jié)膜穹窿部93點鐘位剪開結(jié)膜，向上分離暴露上直肌，用5-縫線結(jié)扎上直肌肌止端，剪斷上直肌。暴露視神經(jīng)：用眼臉拉鉤牽拉上臉，向框外和下方牽拉上直肌殘端的縫線，同時用斜視鉤伸向球后，向框外球下方輕拉眼球，以暴露視神經(jīng)。

5、橫斷視神經(jīng)：用手術(shù)剪將暴露出的視神經(jīng)剪斷術(shù)后處理：縫合結(jié)膜，同時注射慶大霉1千u，涂金霉素眼膏。術(shù)前準(zhǔn)備：術(shù)眼結(jié)膜囊沖洗，手術(shù)部位剃毛消毒鋪巾。 3、注入各種中藥 實驗組在角膜緣后睫狀體部位用性注射器向眼球內(nèi)垂直刺入，注入中藥，同時前房水放出等量的房水，以保證眼球內(nèi)壓不變，對照組不做處理注入放回籠中。 分別于3、7、14天，取實驗鼠1、2、3組的小鼠的視網(wǎng)膜作免疫熒光，以及取出視神經(jīng)，送至病理科檢查， 染色檢查以下指標(biāo)：視神經(jīng)纖維積光密度、視神經(jīng)髓鞘積光密度、視神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。4、記錄在案，并進行整理、統(tǒng)計、分析各指標(biāo)的檢測結(jié)果 分別比較視神經(jīng)纖維積光密度、視神經(jīng)髓鞘積光密度、視神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞三項

6、指標(biāo)。 視神經(jīng)損傷后應(yīng)有視神經(jīng)纖維減少、視神經(jīng)纖維脫髓鞘和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生等病理改變。 通過比較三項指標(biāo)可以確認(rèn)哪種中藥對視神經(jīng)的再生影響最大。5年度研究計劃和預(yù)期進展2011年11月2011年1月：查文獻、資料，預(yù)實驗。2012年2月2012年4月： 1、制備動物模型 2、使用免疫熒光法檢測三種中藥 3、分析數(shù)據(jù)并記錄在案2012年5月2012年6月： 1、制備動物模型 2、使用f-vep檢測三種中藥 3、分析數(shù)據(jù)并記錄在案2012年7月2012年8月 1、制備動物模型 2、使用病理形態(tài)學(xué)檢查三種中藥 3、分析數(shù)據(jù)并記錄在案2012年9月2012年11月： 補充整理資料，撰寫論文，提交總結(jié)報

7、告，請專家組驗收。（上述安排可根據(jù)實際情況適當(dāng)調(diào)整和總體安排） 實驗結(jié)果預(yù)測 某些中藥對視神經(jīng)損傷修復(fù)有促進作用；某些藥物對視神經(jīng)損傷修復(fù)有抑制作用;某些藥物對視神經(jīng)損傷修復(fù)沒有作用。 預(yù)期研究成果與提交成果方式（1） 為視神經(jīng)損傷后的再生提供科學(xué)的藥物治療。（2）爭取在省級以上期刊發(fā)表論文（3）向?qū)W院提交總結(jié)報告，請專家鑒定驗收（4）參加相關(guān)的學(xué)術(shù)交流會，推廣成果；為臨床上更好地推廣該藥物提供依據(jù)。實驗意義 通過測定某些藥物對視神經(jīng)損傷修復(fù)的影響，篩選出最有效的中藥，并為臨床治療視神經(jīng)損傷拓寬道路。這個實驗有助于了解中藥的作用機制，為中藥的臨床應(yīng)用提供現(xiàn)代理論基礎(chǔ)，還給視神經(jīng)患者一個光明的未來。 本實驗創(chuàng)新之處 區(qū)別于其他實驗者給予神經(jīng)營養(yǎng)因子、區(qū)別于其他實驗者給予神經(jīng)營養(yǎng)因子、周圍神經(jīng)移植、靶組織共培養(yǎng)、移植純化周圍神經(jīng)移植、靶組織共培養(yǎng)、移植純化的的 pn s 髓鞘細(xì)胞、運用膠質(zhì)細(xì)胞抑制劑髓鞘細(xì)胞、運用膠質(zhì)細(xì)胞抑制劑和上調(diào)和上調(diào)rgc bcl22 表達等已試用于增強軸表達等已試用于增強軸突損傷突損傷rgc 的存活的方法，本實驗通過使的存活的方法，本實驗通過使用新的中藥單體改變用新的中藥單體改變rgc生存的微環(huán)境，生存的微環(huán)境