《分子生物學(xué)》作業(yè)及答案

1、1證爲(wèi)爲(wèi)學(xué)生考評(píng)作業(yè)分子生物學(xué)作業(yè)一、填空1. DNA雙螺旋直徑為 (1) nm ,每隔 (2) nm螺旋上升一圈。2. 大腸桿菌DNA聚合酶川的(3) 活性使之具有 (4) 功能，極大地提高了 DNA復(fù)制的保真度。3.兩條互補(bǔ)的DNA鏈中，用作指導(dǎo)RNA合成的鏈被稱為(5)，另?xiàng)l鏈叫做(6)。4.DNA變性后，紫外吸收(7)，粘度(8)。5.細(xì)菌的DNA連接酶以(9) 為能量來源，而動(dòng)物細(xì)胞和T4噬菌體的DNA連接酶則是以(10)為能源。6.真核RNA聚合酶川位于(11)中，負(fù)責(zé)(12)的合成。7.在原核細(xì)胞翻譯起始時(shí)，小亞基16S rRNA 的3'-端與mRNA5 -端的(13)之

2、間互補(bǔ)配對(duì)，確定讀碼框架,fMet- tRNA f占據(jù)核糖體的(14)位點(diǎn)。8.DNA變性后，浮力密度(15)，生物活性(16)。9.DNA復(fù)制時(shí)，連續(xù)合成的鏈稱為(17) 鏈；不連續(xù)合成的鏈稱為(18)鏈。10.真核RNA聚合酶H位于(19)中，負(fù)責(zé)(20)的合成。11.糖環(huán)上的1' C與堿基嘧啶上的(21)相連，與嘌呤上的(22)相連。12.DNA復(fù)制時(shí)，一條鏈?zhǔn)沁B續(xù)的，另-一條鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)的，稱為(23)復(fù)制;復(fù)制得到的子代分子，一條連來自親代 DNA另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?，這種方式叫(24) 復(fù)制。13. 原核生物RNA聚合酶核心酶的亞基組成為(25)中,(26)負(fù)責(zé)識(shí)別轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)。二

3、、判斷1. 地衣酚試劑可以使 DNA變成藍(lán)色，二苯胺試劑能使RNA變成綠色。2. DNA片斷越大，復(fù)性速度越慢。3. DNA復(fù)制時(shí)，前導(dǎo)鏈和后隨鏈?zhǔn)怯赏粋€(gè)DNA聚合酶的兩個(gè)活性中心催化合成的，合成方向均為 5 '宀34. 所有生物的嘧啶二聚體均可用光復(fù)活系統(tǒng)修復(fù)。5. 基因轉(zhuǎn)錄的終止信號(hào)應(yīng)位于被轉(zhuǎn)錄的序列以外的下游區(qū)。6. 大腸桿菌染色體 DNA由兩條鏈組成，其中一條鏈為模板鏈，另外一條鏈為編碼鏈。7. 生物體內(nèi)，天然存在的 DNA分子多為負(fù)超螺旋。8. 水分子可以插入天然 DNA分子雙螺旋的空隙中。9. 原核生物的DNA聚合酶I主要負(fù)責(zé)切除岡崎片段的RNA引物，并用DNA鏈填補(bǔ)缺口

4、。10. DNA損傷的錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)一旦發(fā)現(xiàn)錯(cuò)配堿基，就會(huì)切除甲基化的鏈，并以未甲基化的鏈為模板進(jìn)行修復(fù) 合成。11. 大腸桿菌的所有基因轉(zhuǎn)錄都由同一種RNA聚合酶催化。12. 真核生物基因表達(dá)的效率比原核生物高，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物不需要加工，即可作為模板用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。13. B-DNA是細(xì)胞內(nèi)DNA的基本構(gòu)象，在某些情況下還會(huì)有A型、Z型和三股螺旋的局部構(gòu)象。14. 將凝膠上的RNA轉(zhuǎn)移到硝基纖維薄膜上的技術(shù)叫Southern印跡法。15. DNA的兩條鏈反向平行，復(fù)制時(shí)，兩條新合成的鏈也按相反的方向延伸。16. 嘧啶二聚體可以通過重組修復(fù)被徹底去除。17. 真核生物的RNA聚合酶需要多種蛋白

5、質(zhì)因子協(xié)助，才能與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)結(jié)合。18. 原核生物轉(zhuǎn)錄生成的 mRNA多數(shù)不需要加工，但 rRNA是由初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工而成的。19. 解開DNA的負(fù)超螺旋，會(huì)使雙螺旋局部解開形成單鏈區(qū)。20. 將凝膠上的DNA轉(zhuǎn)移到硝基纖維薄膜上的技術(shù)叫Southern印跡法。21. DNA聚合酶可以從頭合成單鏈模板的互補(bǔ)鏈。22. 嘧啶二聚體指DNA兩條鏈上的嘧啶共價(jià)連接而成的二聚體。23. 原核生物和真核生物的 RNA聚合酶亞基組成差別很大，空間結(jié)構(gòu)卻很相似。24. 負(fù)責(zé)hnRNA剪接的剪接體是由多種蛋白質(zhì)和多種snRNR構(gòu)成的。三、名詞解釋1. Southern 印跡雜交 2.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)3.移框突變（

6、移碼突變） 4. Tm 5. 內(nèi)含子與外顯子 6. Klenow 片段7.增色效應(yīng) 8 分子雜交 9. 復(fù)制體1.拓?fù)洚悩?gòu)酶 10. Cot 1/2 11. 單 鏈結(jié)合蛋白 四、簡(jiǎn)答題和計(jì)算題1. 何謂核酸的變性？哪些因素可以影響Tm的大小。2. DNA復(fù)制的精確性、持續(xù)性和協(xié)同性是通過怎樣的機(jī)制實(shí)現(xiàn)的？3. 某哺乳動(dòng)物的細(xì)胞中，每個(gè)細(xì)胞的DNA長(zhǎng)1.2 m,細(xì)胞生長(zhǎng)周期中的 S期約為5小時(shí)，如果這種細(xì)胞 DNA延長(zhǎng)的速度與 E.coli相同，即16卩m/min，那么染色體復(fù)制時(shí)需要有多少?gòu)?fù)制叉同時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)？4. 如果下面的DNA雙鏈從右向左進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。（1）哪條是有意義鏈？ （ 2）產(chǎn)生什么樣的

7、mRNA順序？ （ 3） mRNA順序和DNA的反意義鏈順序之間的關(guān)系是怎樣的？5' A-T-T-C-G-C-A-G-G-C-T 3' 鏈 13' T-A-A-G-C-G-T-C-C-G-A 5' 鏈 25.如果人體有1014個(gè)細(xì)胞，每個(gè)體細(xì)胞的DNA含量為6.4 X 10 9個(gè)堿基對(duì)。試計(jì)算人體 DNA的總長(zhǎng)度是多少？是太陽(yáng)-地球之間距離（2.2 X 10 9 km）的多少倍？已知雙鏈 DNA每1000個(gè)核苷酸重1 X 10 -18 g，求人體的DNA的總質(zhì)量。6. 若使15N標(biāo)記的大腸桿菌在14N培養(yǎng)基中生長(zhǎng)三代，提取DNA并用平衡沉降法測(cè)定DNA密度，其1

8、4N-DNA分子與14N-15N雜合DNA分子之比應(yīng)為多少？7. 那些因素能引起DNA損傷？生物體有哪些修復(fù)機(jī)制？8. 一個(gè)基因如何產(chǎn)生多種不同類型的mRNA分子？9. 概述影響變性 DNA復(fù)性速度的因素。10. 真核生物DNA聚合酶有哪幾種？它們的主要功能是什么？11. 概述PCR的基本過程？12. 原核生物的啟動(dòng)子和真核生物的三類啟動(dòng)子各有何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)?13. 肽鏈合成后的加工修飾有哪些途徑？14. 概述分子雜交的概念和應(yīng)用領(lǐng)域。15. 已知DNA的序列為：W: 5 ' -AGCTGGTCAATGAACTGGCGTTAACGTTAAACGTTTCCCAG-3C: 3 ' -T

9、CGACCAGTTACTTGACCGCAATTGCAATTTGCAAAGGGTe-5上鏈和下鏈分別用 W和C表示，箭頭表明DNA復(fù)制時(shí)復(fù)制叉移動(dòng)的方向。試問： （1）哪條鏈?zhǔn)呛铣蓽箧湹?模板？（ 2）試管中存在單鏈 W要合成新的C鏈，需要加入哪些成分 ？（ 3）如果需要合成的 C鏈被32P標(biāo)記，核第3頁(yè)共6頁(yè)在您完成作業(yè)過程中，如有疑難，請(qǐng)登錄學(xué)院網(wǎng)站“輔導(dǎo)答疑”欄目，與老師進(jìn)行交流討論!遠(yuǎn)程教肓字瞬1.(1)2.(3)3.(5)4.(7)2 （ 2） 3.43 5'外切酶，（4）校對(duì)（-鏈或反意義鏈），（6）非模板鏈（+鏈，或有意義鏈，（8）下降5.模板鏈增大naD或編碼連）6.7

10、.8.(9)(11)核質(zhì)(13) SD序列(15)升高(17)前導(dǎo)鏈(10) ATP(12) tRNA、5SrRNA和一些小 RNA(14) P(16)喪失(18)后隨鏈10.(19)核質(zhì)(:20)hn RNA和一些小RNA11.(21)1 (22)912.(23)半不連續(xù)（24）半保留13.(25)a 2 3 3(26) Z）判斷1.錯(cuò)2.對(duì)3.錯(cuò)4.錯(cuò)5.錯(cuò)6.錯(cuò)9.7.對(duì) 8.錯(cuò)9.對(duì)10.錯(cuò)11. 對(duì)12. 錯(cuò)13.對(duì) 14. 錯(cuò) 15. 錯(cuò)16. 錯(cuò)17.（三）名詞解釋1. 將DNA羊品經(jīng)內(nèi)切酶降解后，對(duì)18. 對(duì)19.對(duì)20.用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離,對(duì)21.錯(cuò)22.在堿溶液中變性

11、,錯(cuò)23. 對(duì)24. 對(duì)后轉(zhuǎn)移到合適的膜上固定,學(xué)生考評(píng)作業(yè)32苷三磷酸中的哪一個(gè)磷酸基團(tuán)應(yīng)帶有P? （4）如果箭頭表明DNA的轉(zhuǎn)錄方向，哪一條鏈?zhǔn)呛铣蒖NA勺模板？16. DNA和RNA各有幾種合成方式，各由什么酶催化新鏈的合成？17. 真核生物基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控因子有哪些重要的結(jié)構(gòu)模體？18. （1）不考慮合成氨基酸、mRNAtRNA或核糖體所需的能量，計(jì)算合成由600個(gè)氨基酸殘基組成的大腸桿菌某蛋白需水解多少個(gè)磷酸酐鍵？（2）蛋白質(zhì)的合成為什么需要消耗這樣多的自由能？分子生物學(xué)作業(yè)答案（一）填空再與放射性同位素標(biāo)記的變性探針雜交，數(shù)小時(shí)后洗滌，進(jìn)行放射自顯影。2. 擴(kuò)增樣品中的DNA富集眾多

12、DNA分子中的一個(gè)特定的 DNA序列的一種技術(shù)。在該反應(yīng)中，使用與目的DNA兩端序列互補(bǔ)的一對(duì)寡核苷酸作為引物，進(jìn)行多輪的DNA合成。其中包括 DNA變性，弓I物退火和在 Tap DNA聚合酶催化下的 DNA合成，每一輪循環(huán)使目的DNA勺量增長(zhǎng)一倍。3. 由于堿基的缺失或插入突變導(dǎo)致三聯(lián)體密碼的閱讀方式改變，造成蛋白質(zhì)氨基酸排列順序發(fā)生改變，從 而翻譯出完全不同的蛋白質(zhì)，這種突變稱為移框突變，或移碼突變。4. 通常把加熱變性DNA使增色效應(yīng)達(dá)到最大增量一半時(shí)的溫度稱為該DNA的熔點(diǎn)或熔解溫度，用 Tm表示。5. 內(nèi)含子是指結(jié)構(gòu)基因中存在于外顯子之間的非編碼序列，也是基因中不表達(dá)的序列。外顯子是

13、指基因中 編碼蛋白質(zhì)的序列。6. E.COli DNA聚合酶I經(jīng)部分水解生成的 C末端605個(gè)氨基酸殘基的大片段。該片段保留了DNA聚合酶I的5't 3 /聚合酶和3 J 5 /外切酶活性，但缺少 53 /外切酶活性。7. 核酸從雙鏈變?yōu)閱捂湹臒o規(guī)則卷曲狀態(tài)時(shí)，在260nm處的吸光度增加，稱"增色效應(yīng)。8. 不同的DNA片段之間，DNA片段與RNA片段之間，如果彼此間的核苷酸排列順序互補(bǔ)也可以復(fù)性，形成遠(yuǎn)程教肓字瞬學(xué)生考評(píng)作業(yè)新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種按照互補(bǔ)堿基配對(duì)而使不完全互補(bǔ)的兩條多核苷酸相互結(jié)合的過程稱為分子雜交。9. 一種多蛋白復(fù)合體，包含 DNA聚合酶，引發(fā)酶，解旋酶，

14、單鏈結(jié)合蛋白和其它輔助因子。復(fù)制體位于每 個(gè)復(fù)制叉處，促進(jìn)染色體 DNA復(fù)制的有關(guān)反應(yīng)。10. 拓?fù)洚悩?gòu)酶是通過切斷 DNA的條或兩條鏈中的磷酸二酯鍵， 然后重新纏繞和封口來改變 DNA連環(huán)數(shù)的酶。拓?fù)洚悩?gòu)酶I通過切斷DNA中的一條鏈減少負(fù)超螺旋，增加一個(gè)連環(huán)數(shù)；而拓?fù)洚悩?gòu)酶II切斷DNA的兩條鏈增加負(fù)超螺旋，減少 2個(gè)連環(huán)數(shù)。某些拓?fù)洚悩?gòu)酶 II也稱之DNA促旋酶。11. 表示DNA復(fù)性一半的Cot值，其中Co為變性DNA復(fù)性時(shí)的初始濃度，以核酸的摩爾濃度表示，t為時(shí)間，以秒表示。12. 一種與單鏈DNA結(jié)合緊密的蛋白，它的結(jié)構(gòu)可以防止復(fù)制區(qū)的單鏈DNA重新折疊成雙鏈區(qū)。（四）簡(jiǎn)答題和計(jì)算題

15、1. 核酸在加熱等理化因素的影響下，雙鏈區(qū)的氫鍵斷裂，變?yōu)閱捂?，生物學(xué)功能喪失，紫外吸收值增高，黏度下降，這一過程稱作變性。 使核酸變性的常用方法是加熱，使紫外吸收值的增加量達(dá)到最大增量一半時(shí)的溫度稱Tm值，影響Tm值的因素有：（1） G-C對(duì)含量越高，Tm值越大。（G+C % = （Tm-69.3 ）X 2.44 ; （2）溶液 的離子強(qiáng)度過低會(huì)使 Tm下降；（3）溶液的pH高，則Tm低，超過11.3則DNA完全變性，低于5則DNA會(huì)脫嘌呤；（4 ）變性劑：甲酰胺、尿素、甲醛等使Tm下降。2. DNA聚合酶III具有復(fù)雜的亞基結(jié)構(gòu)。其 3'宀5'外切酶活性起到校對(duì)作用，不對(duì)稱

16、二聚體相互協(xié)調(diào)，兩個(gè)B亞基形成滑動(dòng)夾子， 維持了 DNA合成的持續(xù)性。復(fù)制叉有多種蛋白質(zhì)協(xié)同作用，使DNA復(fù)制的各個(gè)環(huán)節(jié)能夠協(xié)調(diào)進(jìn)行。3. 每個(gè)復(fù)制叉 5小時(shí)復(fù)制 DNA片段的長(zhǎng)度為16卩m/min X 300 min = 4800卩m=每個(gè)細(xì)胞內(nèi) DNA長(zhǎng)1.2 m6 6=1.2 X 10卩m,染色體復(fù)制時(shí)應(yīng)當(dāng)有1.2 X 10 m十4800卩m = 250個(gè)復(fù)制叉。4. （1） mRNA是沿 5'3'方向合成的，因此，沿DNA模板移動(dòng)的方向是 3'5'。因?yàn)轭}中合成過程是從右向左進(jìn)行的，所以鏈 1是模板鏈（即-鏈或反意義鏈），鏈2是+鏈或有意義鏈。（2） m

17、RNA順序與DNA模板 鏈互補(bǔ)，不過互補(bǔ)鏈中以U取代T,因此產(chǎn)生的順序是，3' U-A-A-G-C-G-U-C-C-G-A 5 ' 。（3）兩者都與反意義鏈的順序互補(bǔ)。因此，二者的核苷酸序列是相同的。5. 每個(gè)體細(xì)胞的 DNA的總長(zhǎng)度為：0.34 nm X 6.4 X 109 = 2.176 X 109 nm = 2.176 m , 人體內(nèi)所有體細(xì)胞的DNA的總長(zhǎng)度為：2.176 m X 10 = 2.176 X 10 km這個(gè)長(zhǎng)度與太陽(yáng)-地球之間距離（2.2 X 109 km）相比為：2.176 X 1 011/2.2 X 10 9 = 99倍，每個(gè)核苷酸重 1 X18212

18、321210- g/1000 = 10 - g，所以，總 DNA 6.4 X 10 X 10- = 6.4 X 10 = 640 g6. 15N標(biāo)記的大腸桿菌利用培養(yǎng)基中的14N合成DNA第一代DNA雙鏈都是14N-15N雜合DNA分子。第二代分別是以第一代中的14N和15N鏈作為母鏈合成新的 DNA所以14N-DNA分子與14N-15N雜合DNA分子之比為1 : 1。第三1415141415代中的 N和 N母鏈的分子之比是 3 : 1，所以 N-DNA分子與 N- N雜合DNA分子之比應(yīng)為3 : 1。7. 引起DNA損傷的途徑有：生物因素如復(fù)制差錯(cuò)或病毒整合；物理因素如紫外線和電離輻射；化學(xué)

19、因素如各種化學(xué)誘變劑。目前已知細(xì)胞有五種對(duì)DNA損傷的修復(fù)系統(tǒng)：錯(cuò)配修復(fù)、直接修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)、易錯(cuò)修復(fù)（SOS修復(fù)）。8. 一個(gè)基因產(chǎn)生一種以上 mRNA勺方式主要有兩種。第一種是：一個(gè)原初轉(zhuǎn)錄物含有一個(gè)以上的多腺苷化位點(diǎn)，就能產(chǎn)生一種以上的具有不同3 /末端的mRNA第二種是：如果一個(gè)原初轉(zhuǎn)錄物含有幾個(gè)外顯子，那么，會(huì)發(fā)生不同的剪接，就會(huì)產(chǎn)生多種mRNA此外，RNA編輯可以通過某些核苷酸的修飾，插入或缺失，產(chǎn)生不同類型的 mRNA學(xué)生考評(píng)作業(yè)9. 影響復(fù)性速度的因素主要有：復(fù)性的溫度，復(fù)性時(shí)單鏈隨機(jī)碰撞，不能形成堿基配對(duì)或只形成局部 堿基配對(duì)時(shí)，在較高的溫度下兩鏈重又分離，經(jīng)過多次

20、試探性碰撞才能形成正確的互補(bǔ)區(qū)。所以，核酸復(fù)性時(shí)溫 度不宜過低，Tm - 25 C是較合適的復(fù)性溫度。單鏈片段的濃度，單鏈片段濃度越高，隨機(jī)碰撞的頻率越高，復(fù)性速度越快。 單鏈片段的長(zhǎng)度，單鏈片段越大，擴(kuò)散速度越慢，鏈間錯(cuò)配的概率也越高。因而復(fù)性速度也 越慢，即DNA勺核苷酸對(duì)數(shù)越多，復(fù)性的速度越慢，若以Co為單鏈的初始濃度，t為復(fù)性的時(shí)間，復(fù)性達(dá)一半時(shí)的Gt值稱Cot 1/2，該數(shù)值越小，復(fù)性的速度越快。單鏈片段的復(fù)雜度，在片段大小相似的情況下，片段內(nèi)重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)越多，或者說復(fù)雜度越小，越容易形成互補(bǔ)區(qū)，復(fù)性的速度就越快，真核生物DNA的重復(fù)序列就是復(fù)生動(dòng)力學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)的。10. 真核

21、生物的DNA聚合酶主要有a、B、Y、3、£五種，均具有5'宀3 '聚合酶活性，DNA聚合酶丫、3和&有35 '外切酶活性，DNA聚合酶a和3無外切酶活性。因此設(shè)想細(xì)胞核DNA復(fù)制時(shí)，在復(fù)制叉上由DNA聚合酶a /引物酶合成 RNA引 |物和一小段 DNA DNA聚合酶3或DNA聚合酶£合成前導(dǎo)鏈和滯后鏈。不過目前 尚不清楚兩種酶哪個(gè)合成前導(dǎo)鏈，哪個(gè)合成后隨鏈。DNA聚合酶3和£主要起修復(fù)作用，DNA聚合酶丫用于線粒體DNA的合成。近年又發(fā)現(xiàn)了多種參與修復(fù)的DNA聚合酶。11. 聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reac

22、tion,PCR的基本過程是在試管內(nèi)加入含有待擴(kuò)增DNA片段的雙鏈DNA分別能與待擴(kuò)增 DNA片段兩側(cè)的特定序列互補(bǔ)的兩個(gè)寡核苷酸引物，4種dNTP,含有一定濃度 Mg+的緩沖液，和耐熱的 DNA聚合酶，通過加熱到 92C左右使DNA變性，降溫到55C左右使引物與模板結(jié)合，升溫到 72C左右合成新鏈 3個(gè)步驟的循環(huán)，可以使 DNAT增。若擴(kuò)增效率為 100%每循環(huán)1次，DNA可增加1倍，若循 環(huán)30次，貝U DNA增加230倍，若擴(kuò)增效率為 x （用小數(shù)表示，如 80%表示為0.8 ）,擴(kuò)增的次數(shù)為n,得到產(chǎn)物的 量為目的基因加入量的 y倍，則可用下列公式計(jì)算擴(kuò)增產(chǎn)物的量：y = （ 1 +

23、x ） n12. 原核生物的啟動(dòng)子在-10區(qū)有一共有序列TATAAT以發(fā)現(xiàn)者的名字命名為 Pribnow框，或被稱作-10序列。在-35區(qū)還有一個(gè)共有序列 TTGACA被稱作識(shí)別區(qū)域，或-35序列。在不同基因的啟動(dòng)子中，這兩個(gè)共有序 列的位置和序列略有區(qū)別。對(duì)上述共有序列進(jìn)行化學(xué)修飾和定位誘變證明，-35序列與聚合酶對(duì)啟動(dòng)子的特異性識(shí)別有關(guān)，-10區(qū)富含A-T對(duì)，有利于DNA局部解鏈，-10區(qū)與-35區(qū)之間的距離，明顯影響轉(zhuǎn)錄的效率。真核生物三類啟動(dòng)子分別起始RNA聚合酶I、II、山的轉(zhuǎn)錄。類別I啟動(dòng)子包括核心啟動(dòng)子和上游控制元件兩部分，需要 UBF1和SL1因子參與作用。類別II啟動(dòng)子包括四

24、類控制元件：基本啟動(dòng)子、起始子、上游元件 和應(yīng)答元件。識(shí)別這些元件的反式作用因子有通用轉(zhuǎn)錄因子、上游轉(zhuǎn)錄因子和可誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄因子。類別III啟動(dòng)子有兩類：上游啟動(dòng)子和基因內(nèi)啟動(dòng)子，分別由裝配因子和起始因子促進(jìn)轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成和轉(zhuǎn)錄。13. 蛋白質(zhì)合成后的加工修飾主要有：（1）肽鏈的剪切：如切除 N端的Met，切除信號(hào)肽，切除蛋白質(zhì)前體中的特定肽段。（2）氨基酸側(cè)鏈的修飾，如：磷酸化、糖基化、甲基化等。（3） 二硫鍵的形成。（4）與輔基的結(jié)合。14. 在退火條件下，不同來源的DNA互補(bǔ)區(qū)形成雙鏈，或DNA單鏈和RNA單鏈的互補(bǔ)區(qū)形成 DNA-RNA雜合 雙鏈的過程稱分子雜交。通常對(duì)天然或人工合

25、成的DNA或 RNA片段進(jìn)行放射性同位素或熒光標(biāo)記，做成探針，經(jīng)雜交后，檢測(cè)放射性同位素或熒光物質(zhì)的位置，尋找與探針有互補(bǔ)關(guān)系的DNA或 RNA直接用探針與菌落或組織細(xì)胞中的核酸雜交，因未改變核酸所在的位置，稱原位雜交技術(shù)。將核酸直接點(diǎn)在膜上， 再與探針雜交稱點(diǎn)雜交，使用狹縫點(diǎn)樣器時(shí)，稱狹縫印跡雜交。該技術(shù)主要用于分析基因拷貝數(shù)和轉(zhuǎn)錄水平的變化，亦可用于檢測(cè)病源微生物和生物制品中的核酸污染狀況。雜交技術(shù)較廣泛的應(yīng)用是將樣品DNA切割成大小不等的片段，經(jīng)凝膠電泳分離后，用雜交技術(shù)尋找與探針互補(bǔ)的DNA片段。由于凝膠機(jī)械強(qiáng)度差，不適合于雜交過程中較高溫度和較長(zhǎng)時(shí)間遠(yuǎn)程教肓字瞬學(xué)生考評(píng)作業(yè)的處理，S

26、outhern提出一種方法，將電泳分離的DNA片段從凝膠轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)哪?如硝酸纖維素膜或尼龍膜)上，在進(jìn)行雜交操作，稱Southern印跡法，或Southern雜交技術(shù)。隨后，Alwine等提出將電泳分離后的變性RNA吸印到適當(dāng)?shù)哪ど显龠M(jìn)行分子雜交的技術(shù)，被戲稱為Northern 印跡法，或Northern雜交。分子雜交廣泛用于測(cè)定基因拷貝數(shù)、基因定位、確定生物的遺傳進(jìn)化關(guān)系等。Southern雜交和Northern雜交還可用于研究基因變異，基因重排，DNA多態(tài)性分析和疾病診斷。雜交技術(shù)和PCR技術(shù)的結(jié)合，使檢出含量極少的DNA成為可能。促進(jìn)了雜交技術(shù)在分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。DNA芯片技術(shù)也是以核酸的分子雜交為基礎(chǔ)的。15. (1) W鏈