飼料非常規(guī)檢測手冊

1、非常規(guī)項目檢測方法手冊二00八年九月目 錄一、 飼料中粗纖維含量的測定-3二、 中性洗滌纖維檢測方法-5三、 油脂TBA值的測定方法-6四、 KOH溶解度的測定方法-7五、 尿素酶活性(快速簡單的估測方法)-8六、 揮發(fā)性鹽基氮(半微量定氮法) -9七、 枸溶磷含量的測定-11八、 水溶液磷含量的測定-12九、 油脂中過氧化值的測定-12十、 皂化價的測定-13十一、 油脂酸價的測定-15十二、 玉米脂肪酸值測定方法-15十三、 油脂碘價的測定-19十四、 真蛋白的測定-21十五、 糊化度的測定-22十六、 配合飼料混合均勻度的測定-25十七、 玉米酒精糟漿液測定判斷-26一、飼料中粗纖維含量

2、的測定1、原理用濃度準(zhǔn)確的酸和堿，在特定條件下消煮樣品，再用乙醇除去可溶物，經(jīng)高溫灼燒扣除礦物質(zhì)的量，所余量為粗纖維，它不是一個確切的化學(xué)實體，只是在公認(rèn)強(qiáng)制規(guī)定的條件下測出的概略成分，其中以纖維素為主，還有少量半纖維素和木質(zhì)素。2、試劑本方法試劑使用分析純，水為蒸餾水。標(biāo)準(zhǔn)溶液按GB601制備。2.1硫酸(GB 625)溶液0.128±0.005mol/L：氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定，7ml/1000。2.2氫氧化鈉(GB 629)溶液，0.313±0.005mol/L：鄰苯二甲酸氫鉀法標(biāo)定13.04g/1000ml。2.3酸洗石棉HG 3-1062。2.4 95%乙醇(GB

3、679)。2.5乙醚(HG 3-1002)。2.6正辛醇(防泡劑)。3、儀器設(shè)備3.1實驗室用樣品粉碎機(jī)。 分樣篩：孔徑1mm，(18目)。3.3分析天平：感量0.0001g。3.4電加熱器(電爐)，可調(diào)節(jié)溫度。3.5電熱恒溫箱(烘箱)：可控制溫度在130。3.6高溫爐：有高溫計可控制溫度在500600。3.7消煮器：有冷凝球的600mL高型燒杯或有冷凝管的錐形瓶。3.8抽濾裝置：抽真空裝置，吸濾瓶和漏斗。(濾器使用200目不銹鋼網(wǎng)或尼龍濾布)。3.9古氏坩堝：30mL，預(yù)先加入酸洗石棉懸浮液30mL(內(nèi)含酸洗石棉0.20.3g)再抽干，以石棉厚度均勻，不透光為宜。上下鋪兩層玻璃纖維有助于過濾

4、。3.10干燥器，以氯化鈣或變色硅膠為干燥劑。3.11粗纖維測定儀器：國內(nèi)外生產(chǎn)的符合本標(biāo)準(zhǔn)測定原理，且測定結(jié)果一致的儀器。4、操作步驟稱取12g試樣，準(zhǔn)確至0.0002g，用乙醚脫脂，(含脂肪大于10%必須脫脂，含脂肪不大于10%，可不脫脂)，放入消煮器(3.7)，加濃度準(zhǔn)確且已沸騰的硫酸溶液(2.1)200mL和1滴正辛醇，立即加熱，應(yīng)使其在2min內(nèi)沸騰，調(diào)整加熱器，使溶液保持微沸，且連續(xù)微沸30min，注意保持硫酸濃度不變。試樣不應(yīng)離開溶液沾到瓶壁上。隨后抽濾，殘渣用沸蒸餾水洗至中性后抽干。用濃度準(zhǔn)確且已沸騰的氫氧化鈉溶液(2.2)將殘渣轉(zhuǎn)移至原容器中并加至200mL，同樣準(zhǔn)確微沸30

5、min，立即在鋪有石棉的古氏坩堝上過濾，先用25mL硫酸溶液洗滌，殘渣無損失地轉(zhuǎn)移到坩堝(3.9)中，用沸蒸餾水洗至中性，再用15mL乙醇(2.4)洗滌，抽干。將坩堝(3.9)放入烘箱(3.5)，于130±2下烘干2h，取出后在干燥器(3.10)中冷卻至室溫，稱重，再于550±25高溫爐中(3.6)灼燒30min，取出后于干燥器中(3.10)冷卻至室溫后稱重。推薦方法：稱12g試樣(脫脂步驟同手工方法)于G2玻璃沙漏斗中，用坩堝夾將漏斗插入熱萃取器；從頂部加入預(yù)先煮沸的硫酸溶液200mL和兩滴正辛醇，將加熱旋扭開到最大位置，待溶液沸騰后，將旋扭調(diào)到合適位置，使溶液保持微沸3

6、0min，抽濾，用沸蒸餾水洗至中性，加入預(yù)先煮沸的氫氧化鈉溶液200mL，同樣準(zhǔn)確微沸30min，抽濾，用沸蒸餾水洗至中性，將坩堝(3.9)轉(zhuǎn)移至冷萃取器，加入25mL95%乙醇，抽干，將漏斗轉(zhuǎn)移到烘箱(3.5)，于130±2下烘干2h，取出后在干燥器(3.10)中冷卻至室溫，稱重。再放入500±25高溫爐(3.6)中灼燒1h，干燥器(3.10)中冷卻至室溫后稱重。型號不同的儀器具體操作步驟見該儀器使用說明書。5、計算粗纖維(%)(m1-m2)/m式中：m1130烘干后坩堝及試樣殘渣重，g；m2550(或500)灼燒后坩堝及試樣殘渣重，g；m試樣(未脫脂)質(zhì)量，g。6、注意

7、事項：每個試樣取兩平行樣進(jìn)行測定，以算術(shù)平均值為結(jié)果。粗纖維含量在10%以下，絕對值相差0.4。粗纖維含量在10%以上，相對偏差為4%。二、中性洗滌纖維檢測方法1、試劑（1）中性洗滌劑（3%十二烷基硫酸鈉）準(zhǔn)確稱取18.6g乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2O8Na2·2H2O ）和6.8g硼酸鈉（Na2B4O7·10H2O ），一同放入1000mL燒杯中，加入600mL蒸餾水，加熱溶解后，加入30g十二烷基硫酸鈉(C12H25NaO4S )和10mL乙二醇乙醚,攪拌并微熱使其溶解;另稱取4.56g無水磷酸氫二鈉，置于另一燒杯中，加200mL蒸餾水微微加熱溶解后，倒入第一個

8、燒杯中，在容量瓶中稀釋至1000mL。此溶液PH值在6.9-7.1左右。（PH值一般不需要調(diào)整）（2）無水亞硫酸鈉 AR2、步驟（1） 稱量0.5-1.0g(準(zhǔn)確至0.001g)樣品于250mL三角燒瓶中(樣品粉碎20-40目)。（2）向三角燒瓶中加入事先煮沸的中性洗滌劑100mL,消泡劑3滴，加約0.5無水亞硫酸鈉。（3）在三角燒瓶上放置一個漏斗，將三角燒瓶放在電爐上保持微沸1h.其間要多次適量的向三角瓶中補(bǔ)充一些蒸餾水(保持100mL)。（4）煮沸完畢后冷卻10min,將已恒重的G1(G0)砂芯坩堝安在抽濾瓶上，將三角瓶內(nèi)的物質(zhì)全部移入砂芯坩堝中，抽濾，并用適量的沸水沖洗2次。（5）用20

9、mL丙酮沖洗兩次，抽濾。（6）取下坩堝在105ºC烘干到恒重(約3-4h),冷卻后稱重。 3、計算NDF%=(烘干后總重量空坩堝重量)/樣品質(zhì)量*100指標(biāo)：NDF<32% 質(zhì)量佳， NDF<35% 合格。 三、油脂TBA值的測定方法1、原理油脂受到光、熱、空氣中氧的作用，發(fā)生酸敗反應(yīng)，分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種，它能與TBA（硫代巴比妥酸）作用生成粉紅色化合物，在532nm波長處有吸收高峰，利用此性質(zhì)即能測出丙二醛含量，從而推導(dǎo)出油脂酸敗的程度。2、試劑2.1 TBA水溶液：準(zhǔn)確稱取TBA0.288g溶于水中，并稀釋至100mL（如TBA不易溶解

10、，可加熱至全溶澄清，然后稀釋至100mL），相當(dāng)于0.02M；2.2 三氯乙酸混合液：準(zhǔn)確稱取三氯乙酸（分析純）7.5g及0.1gEDTA，用水溶解，稀釋至100mL；2.3 氯仿（分析純）；2.4 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.315g1，1，3，3-四乙氧基丙烷，溶解后稀釋至1000mL，此溶液每mL相當(dāng)于丙二醛100g，置于冰箱內(nèi)保存。準(zhǔn)確吸取10mL，稀釋至100mL，此溶液每mL相當(dāng)于丙二醛10g，備用。3、操作步驟（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制準(zhǔn)確吸取每相當(dāng)于丙二醛10g的標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mL置于納氏比色管中，加水至總體積為5mL，加入5mLTBA溶液

11、，然后按樣品測定步驟進(jìn)行，測得光密度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（2）樣品測定：準(zhǔn)確稱取融化均勻的油脂樣品30g，置于100mL有蓋三角瓶內(nèi)，加入50mL三氯乙酸混合液，振搖半小時（保持油脂融溶狀態(tài)，如冷結(jié)即在70水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖）用雙層濾紙過濾，除去油脂。濾液重復(fù)用雙層濾紙過濾一次。準(zhǔn)確移取上述濾液5mL置于25mL比色管內(nèi)，加入5mLTBA溶液，混勻，加塞，置于90水浴內(nèi)保溫40min，取出，冷卻1h，搖勻，靜置，分層，吸出上清液于532nm波長比色，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線得到微克數(shù)（同時作空白試驗）。4、計算 丙二醛含量（mg/kg）=C×50 5×m式中C從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得丙二

12、醛的微克數(shù)(ug) m-樣品質(zhì)量（g）四、KOH溶解度的測定方法1、試劑 （1）0.2%的氫氧化鉀(KOH)溶液，相當(dāng)于0.042當(dāng)量,pH為12.5。 （2）其它試劑為凱氏定氮所需的試劑。 （3）稱取2.360g KOH于溶量瓶中，加水溶解并稀釋至1000mL。 注意補(bǔ)充KOH試劑的純度。2、測定步驟 （1）稱取1.5g過 60目篩的豆粕，置于 250mL燒杯中，加入 75mL0.2%的KOH溶液，在磁力攪拌器上攪拌20分鐘； （2）之后，移入50mL溶液于離心管中，以2700轉(zhuǎn)分的速度離心10分鐘。 （3）取15mL上清液進(jìn)行凱氏定氮。 （4）用標(biāo)準(zhǔn)定氮法測定15mL溶液中的蛋白質(zhì)含量，若

13、按此法測定，該15mL上清液相當(dāng)于0.3g原樣本。3、計算方法 蛋白溶解度(%)=0.3g樣本的粗蛋白含量原樣本的粗蛋白含量。 注：當(dāng)比較不同豆粕樣品時，它們的粒度應(yīng)一致的，樣品在0.2% KOH溶液中攪拌的時間也應(yīng)一致。五、尿素酶活性（快速簡單的估測方法）一、尿素苯酚磺法1、原理：在有指示劑酚紅存在的條件下，豆粕（餅）中的尿素酶活性可按尿素轉(zhuǎn)變成氨的方法定性測定。2、設(shè)備 （1）稀硫酸（H2SO4)0.2N或更稀些，帶滴管。 （2）尿素一苯酚磺試劑。 a 將1.2克苯酚磺溶解于30mL0.2N的NaOH中。 b 用蒸餾水將之稀釋至約300mL。 c 加入10g尿素并溶解之。 d 用蒸餾水稀釋

14、至2L。 e 加入7mL 1.0N的H2SO4或70mL 0.1N的H2SO4。 f 用蒸餾水稀釋至最后體積3L。 g 溶液應(yīng)具明亮的琥珀色。3、測定步驟 （1）在一個150ml的燒杯中倒入少量試劑，注意溶液必須呈明亮的琥珀色。若溶液已轉(zhuǎn)變?yōu)樯罱奂t色，滴人稀硫酸深液并攪拌之，直至溶液再度呈境拍色。 （2）量一場匙粉碎很好的豆餅粉，放置于陪替氏（petri）培養(yǎng)皿中。 （3）在樣品上加入兩場匙試劑，輕輕攪拌，將樣品平鋪于培養(yǎng)皿中。若仍有干豆餅斑點(diǎn)，則再加入試劑，直至將豆餅浸濕。 （4）放置5分鐘后觀察： a.沒有任何紅點(diǎn)出現(xiàn)：再任其放置25分鐘，若仍無紅點(diǎn)出現(xiàn)，說明豆餅過熟。 b.有少量紅點(diǎn)：少

15、量尿素酶活性，豆餅可用。 c.豆餅表面約有25為紅點(diǎn)覆蓋：少量尿素酶活性；豆餅可用。 d.豆餅表面約有50為紅點(diǎn)覆蓋：有尿素酶活性。 e.豆餅表面的75100為紅點(diǎn)覆蓋：尿素酶活性很高，不應(yīng)接受這種原料，因為豆餅過生。 二、酚紅法1、適用范圍：適用于大豆制品,但不能作為仲裁法2、原理：酚紅指示劑在pH6.4-8.2時由黃變紅,大豆制品中所含的尿素酶,在室溫可將尿素水解產(chǎn)生氨.釋放的氨可使酚紅指示劑變紅,根據(jù)變紅時間的長短來判斷尿酶活性的大小.3、儀器和試劑(1)粉碎裝置 (2)天平 感量0.01g (3)試管 (4)尿素 (5)0.1酚紅乙醇溶液4、測定步驟:將試樣研細(xì),稱取0.02g,轉(zhuǎn)入試

16、管中,加入0.02g結(jié)晶尿素及2滴酚紅指示劑,加20mL至30mL蒸餾水,搖動10s.觀察溶液顏色,記下呈紅色的時間。5、尿素酶活性的測定結(jié)果表示1min內(nèi)呈粉紅色為:活性很強(qiáng)；1-5min 活內(nèi)呈粉紅色為:活性強(qiáng)5-15min內(nèi)呈粉紅色為:有點(diǎn)活性；15-30min內(nèi)呈粉紅色為:沒有活性注: 通常10min以上不顯粉紅或紅色的大豆制品,其尿素酶活性認(rèn)為合格。六、揮發(fā)性鹽基氮(半 微 量 定 氮 法 )1、原理 揮發(fā)性鹽基氮是指動物性食品由于酶和細(xì)菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)。此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，在堿性溶液中蒸出后，用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定計算含量。2、試劑 2.1

17、氧化鎂混懸液（ 10g/L ）：稱取 1.0g 氧化鎂，加 100mL 水，振搖成混懸液。 2.2 硼酸吸收液（ 20g/L ）。 2.3 鹽酸 c(HCl)=0.01mol/L 或硫酸 c(1/2H2 SO4 )=0.01mol/L 的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。 2.4 甲基紅乙醇指示劑（ 2g/L ）。2.5 次甲基藍(lán)指示劑（ 1g/L ）。 3、儀器 3.1 半微量定氮器 3.2 微量滴定管：最小分度 0.01mL 。 4、分析步驟 樣品處理：精確取 10g 試樣（粉碎好的樣品）于 200mL 磨口三角瓶中，加 100.0mL(V總) 蒸餾水于振蕩器上振蕩 30 分鐘， 4000 轉(zhuǎn)離心。 蒸餾滴定

18、：將盛有 2 0.0 mL 吸收液及 5-6 滴混合指示液的錐形瓶置于冷凝管下端，并使其下端插入吸收液的液面下，準(zhǔn)確吸取 10.0mL （ V 分取 ）上述樣品上清液于蒸餾器反應(yīng)室內(nèi)，加 10 mL 氧化鎂混懸液（ 10g/L ），迅速蓋塞，并加水以防漏氣，通入蒸汽，進(jìn)行蒸餾，蒸餾 5min 即停止，吸收液用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液（ 0.01mol/L ）或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定，終點(diǎn)至藍(lán)紫色。同時做試劑空白試驗。 5、計算式及結(jié)果表述： 揮發(fā)性鹽基氮（ W ）以每 100g 樣品含氮毫克數(shù)表示。W 樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量， mg/100g; V1 測定用樣液消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積， mL; V

19、2 試劑空白消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積 ,mL; C 鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的實際濃度， mol/L; 14 與 1.00mL 標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 c(HCl)=1.000mol/L 或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 c(1/2H2SO4 )=1.000mol/L 相當(dāng)?shù)牡馁|(zhì)量， mg；m 樣品質(zhì)量， g 。 結(jié)果的表述：報告算術(shù)平均值的三位有效數(shù)。 6、允許差 相對誤差 10% 。七、枸溶磷含量的測定1、原理：用中性檸檬酸銨溶液溶解和提取試樣中的磷酸根，按42磷含量測定方法測定磷，當(dāng)磷含量大于13%時被認(rèn)為該樣品是磷酸氫鈣。2、試劑: 檸檬酸 無水乙醇 氨水中性檸檬酸銨溶液: 溶解74g檸檬酸于300mL水中

20、，加69 mL氨水，在酸度計上用氨水調(diào)節(jié)pH值為70，用比重計測其相對密度為109(20)。將溶液貯存于密閉的瓶中備用(如長期使用，用前校正其酸度)。3、儀器: 酸度計：分度值為02pH，配有玻璃電極和飽和甘汞電極，比重計。4、步驟:稱取1g試樣(精確至0.0002g)，置于250mL容量瓶中，加入100mL中性檸檬酸銨溶液，將容量瓶置于(65±1)的水浴中保溫1 h，時常打開瓶塞，每隔15 min搖動一次，每次搖動約30 s，取出容量瓶，冷卻至室溫，加水至刻度，搖勻。干過濾，棄去初始的30mL濾液，用移液管移取20mL試驗溶液A和空白溶液分別置于250mL燒杯中，加入10 mL硝酸

21、溶液，加水至總體積約100mL，加熱煮沸5min后，加入50mL喹鉬檸酮溶液，蓋上表面皿，保溫30s(在加入試劑和加熱過程中，不得使用明火，不得攪拌，以免凝結(jié)成塊)冷卻。在冷卻過程中攪拌34次，用預(yù)先在(180±5)下烘干至恒重的玻璃砂坩堝抽濾。先將上層清液過濾，用傾瀉法洗滌沉淀6次，每次用水約30 mL，最后將沉淀移人玻璃砂坩堝中過濾，再用水洗滌沉淀3次，將玻璃砂坩堝連同沉淀置于電烘箱中從溫度穩(wěn)定時計時，在(180±5)下干燥45 min，取出稍冷后，置于干燥器中冷卻至室溫，稱量。5、計算:C(P)= (m1-m2)×0.01400/(m×20/250

22、)×100 = 17.5(m1-m2)/m式中：m1試驗溶液生成磷鉬酸喹啉沉淀的質(zhì)量，g；      m2空白溶液生成磷鉬酸喹啉沉淀的質(zhì)量，g；      m試樣的質(zhì)量，g；      001400磷鉬酸喹啉換算成磷的系數(shù)。注意事項: 測得磷含量應(yīng)大于13%,平行測定結(jié)果的絕對差值不大于0.1%。八、水溶液磷含量的測定1、原理: 試樣用水溶解后，測定水溶液中的磷含量。2、試劑和材料：同測磷3、步驟: 稱取0.5g試樣（精確至0.0002

23、g），置于60mm的研缽中，用少量的水研磨助溶，每次約用25mL水，連續(xù)研磨4次，水溶液全部移入250mL容量中瓶中，振蕩30min，用水稀釋到刻度 ，搖勻。干過濾，棄去初始30mL濾液。用移液管移取20mL試驗溶液置于300mL 燒杯中，加入10 mL硝酸溶液，加水至總體積約100mL，加熱煮沸5min后，加入50mL喹鉬檸酮溶液，蓋上表面皿，保溫30s(在加入試劑和加熱過程中，不得使用明火，不得攪拌，以免凝結(jié)成塊)冷卻。在冷卻過程中攪拌34次，用預(yù)先在(180±5)下烘干至恒重的玻璃砂坩堝抽濾。先將上層清液過濾，用傾瀉法洗滌沉淀6次，每次用水約30 mL，最后將沉淀移人玻璃砂坩堝

24、中過濾，再用水洗滌沉淀3次，將玻璃砂坩堝連同沉淀置于電烘箱中從溫度穩(wěn)定時計時，在(180±5)下干燥45 min，取出稍冷后，置于干燥器中冷卻至室溫，稱量.4、計算:C(P)= (m1-m2)×0.01400/(m×20/250)×100 = 17.5(m1-m2)/m式中：m1試驗溶液生成磷鉬酸喹啉沉淀的質(zhì)量，g；      m2空白溶液生成磷鉬酸喹啉沉淀的質(zhì)量，g；      m試樣的質(zhì)量，g；     

25、; 0.01400磷鉬酸喹啉換算成磷的系數(shù)。九、油脂中過氧化值的測定1 原理油脂氧化過程中產(chǎn)生過氧化物，與碘化鉀作用，生成游離碘，以硫代硫酸鈉溶液滴定，計算含量。2 要求指標(biāo)名稱指標(biāo)mmol/Kg過氧化值 10.003、過氧化值的測定3.1 試劑和溶液3.1.1飽和碘化鉀溶液：稱取14g碘化鉀，加10mL水溶解，必要時微熱使其溶解，冷卻后貯于棕色瓶中；3.1.2 三氯甲烷冰乙酸混合液：量取40mL三氯甲烷，加60mL冰乙酸，混勻； 3.1.3 0.01mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液； 3.1.4 1%淀粉試劑：將淀粉0.5g用少許冷水調(diào)成糊狀，倒入50mL沸水中調(diào)勻，煮沸，臨時用現(xiàn)配；3.2 測

26、定方法稱取2-3g樣品（稱準(zhǔn)至0.0002g）于碘量瓶中，加30mL三氯甲烷冰乙酸混合液，使樣品完全溶解。加入1mL飽和碘化鉀溶液，緊密,塞好瓶蓋，并輕輕振搖0.5min，然后在暗處放置3min，取出加100mL水，搖勻，立即以淀粉試液為指示劑，用0.01mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至藍(lán)色消失為終點(diǎn)。同時做空白試驗。3.3 結(jié)果計算過氧化值按下式計算：·(0)m×10001100010001000011100077710000100001000 式中：C硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L；V試樣消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液之體積，mL；V0空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液之體積，

27、mL；m 樣品質(zhì)量，g。十、皂化價的測定皂化價（皂化值）系指中和1g油脂中所含全部游離脂肪酸和結(jié)合脂肪酸（甘油脂）所需氫氧化鉀的毫克數(shù)。1、原理油脂與氫氧化鉀乙醇溶液共熱時，發(fā)生皂化反應(yīng)，剩余的堿可用標(biāo)準(zhǔn)酸液進(jìn)行滴定，從而可計算出中和油脂所需的氫氧化鉀毫克數(shù)。反應(yīng)式如下：RCOOH + KOH RCOOK + H2OC3H5(COOR)3 + 3KOH 3RCOOK + C3H5(OH)3KOH（過剩的）+HCl KCl + H2O2、測定方法2.1 試劑和溶液2.1.1 0.5mol/L的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；2.1.2 1%酚酞指示劑；2.1.3 無水乙醚；2.1.4 0.5mol/L氫氧化鉀乙醇

28、溶液：稱取化學(xué)純氫氧化鉀30g，溶于95%乙醇中使成1L，搖勻，靜置24h，傾出上層清液，貯于裝有蘇打石灰球管的玻璃瓶中。2.2 操作步驟稱取5g樣品（稱準(zhǔn)至0.0002g），用索氏提取法提取出粗脂肪，蒸干乙醚溶劑，準(zhǔn)確加入0.5mol/L氫氧化鉀乙醇溶液25ml，在水浴上加熱回流30min，不時搖動。取下冷凝管，冷卻后加入數(shù)滴酚酞指示劑，用0.5mol/L的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至紅色消失。同時做空白試驗。2.3 結(jié)果計算皂化價按下式計算：56.1×·(0)m式中：C0.5mol/L的鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol/L；V試樣耗用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液之體積，mL；V0空白試驗消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶

29、液之總體積，mL；m試樣之質(zhì)量，g；56.11mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液1ml相當(dāng)于氫氧化鉀的克數(shù)；一般植物油的皂化價如下：棉子油189198，花生油188195，大豆油190195，菜子油170180，芝麻油188195，葵子油188194，茶子油188196。皂化率的計算：×100皂化率=脂肪皂化價-酸值理論皂化值理論皂化值魚油酸值一般為： 0.7mgKOH/g 理論皂化值一般為：200-210mgKOH/g豆油酸值一般為： 0.7mgKOH/g 理論皂化值一般為：190-195 mgKOH/g花生油酸值一般為：3.5mgKOH/g 理論皂化值一般為：188195mgKOH/g十一、油

30、脂酸價的測定油脂酸價又稱油脂酸值，是表示油脂中游離脂肪酸含量,檢驗結(jié)果以中和1克油脂中的游離脂肪酸所需氫氧化鉀的毫克數(shù)表示（毫克KOH克油）1、原理：用中性乙醚-乙醇混合溶液溶解油脂及其脂肪酸，再用堿標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。2、試劑準(zhǔn)備（1） 中性乙醚-乙醇混合溶液：乙醚（2份）與乙醇（1份）2：1混合，臨用前以酚酞為指示劑，用0.1N氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至中性。（2） 0.1N的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液3、測定稱量2-5g混合均勻的樣品于錐形瓶中加入中性乙醚-乙醇混合液50mL再加2滴酚酞指示劑用0.1N氫氧化鉀滴定至中性（淡粉紅色）。4、數(shù)據(jù)處理氫氧化鉀溶液濃度C×消耗氫氧化鉀體積V×5

31、6.1酸價=-試樣的質(zhì)量M56.1氫氧化鉀的摩爾質(zhì)量十二、玉米脂肪酸值測定方法A.1 范圍本方法規(guī)定了玉米中脂肪酸值的測定原理、試劑、儀器和設(shè)備、分析步驟、結(jié)果計算和結(jié)果表述等。本方法適用于一般玉米的儲存品質(zhì)。A.2 原理在室溫下用無水乙醇提取玉米中的脂肪酸，用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鉀溶液滴定，計算脂肪酸值。A.3 試劑除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。A.3.1 無水乙醇。A.3.2 酚酞-乙醇溶液（10g/L）：1.0g酚酞溶于100mL95（VV）乙醇。A.3.3 不含二氧化碳的蒸餾水：將蒸餾水燒沸，加蓋冷卻。A.3.4 c（KOH）=0.01mol/L氫氧化鉀-95乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液A.3.4.1 c

32、（KOH）=0.5mol/L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制稱取28g氫氧化鉀，置于聚乙烯容器中，先加入少量無CO2的蒸餾水（約20mL）溶解，再將其稀釋至1000mL，密閉放置24h。吸取上層清液至另一聚乙烯塑料瓶中。A.3.4.2 c（KOH）=0.5mol/L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液的標(biāo)定稱取在105烘2h并在干燥器中冷卻后的鄰苯二甲酸氫鉀2.04g，精確到0.0001g，溶于50mL不含CO2蒸餾水中，滴加酚酞-乙醇指示劑(A 3.2)35滴，用配制的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液滴定至微紅色，以30s不褪色為終點(diǎn)，記下所耗氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液mL數(shù)（V1），同時做空白試驗（不加鄰苯二甲酸氫鉀，同上操作），記下所

33、耗氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液mL數(shù)（V0），按式（1）計算氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液濃度。c（KOH）=(1)式(1)中：c（KOH）氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液濃度，mol/L；1000換算系數(shù)；稱取鄰苯二甲酸氫鉀的質(zhì)量，g ；V1滴定所耗氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液體積，mL ；V0空白試驗所耗氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液體積，mL ；204.22鄰苯二甲酸氫鉀的摩爾質(zhì)量g/mol 。注：氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液按要求定時復(fù)標(biāo)。A.3.4.3 c（KOH）=0.01mol/L氫氧化鉀-95乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液準(zhǔn)確移取20.0mL已經(jīng)標(biāo)定好的0.5mol/L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用95（V/V）乙醇稀釋定容至1000mL，盛放于聚乙烯塑料瓶中。臨

34、用前稀釋。注：稀釋用乙醇應(yīng)事先調(diào)整為中性。A.4 儀器與設(shè)備A.4.1 具塞磨口錐形瓶：250mL。A.4.2 移液管：50.0mL、25.0 mL。A.4.3 微量滴定管：5mL，最小刻度為0.02mL；10mL，最小刻度為0.05mL。A.4.4 天平：感量為0.01g以上。A.4.5 振蕩器：往返式，振蕩頻率為100次/min。A.4.6 粉碎機(jī)：錘式旋風(fēng)磨，具有風(fēng)門可調(diào)和自清理功能，以避免樣品殘留和出樣管堵塞。在粉碎樣品時，磨膛不能發(fā)熱。A.4.7 電動粉篩：按GB/T 5507要求。A.4.8 玻璃短頸漏斗。A.4.9 中速定性濾紙。A.4.10 錐形瓶：150mL。A.5 分析步驟

35、A.5.1 試樣制備取混合均勻樣品約80100g，用錘式旋風(fēng)磨粉碎，要求粉碎細(xì)度能一次性達(dá)95%以上過CQ16(相當(dāng)于40目)篩，粉碎樣品充分混合后（篩上、篩下的全部篩分范圍樣品）裝入磨口瓶中備用。注1:按GB/T 5507檢驗樣品粉碎細(xì)度，使用其它類型粉碎機(jī)可以達(dá)到細(xì)度要求，粉碎樣品也只能選用錘式旋風(fēng)磨。一次粉碎達(dá)不到細(xì)度要求的，該錘式旋風(fēng)磨不能使用。注2:粉碎樣品時，應(yīng)按照設(shè)備說明書要求，合理調(diào)節(jié)風(fēng)門大小，并控制進(jìn)樣量，防止和減少出料管留存樣品，為避免出料管堵塞，減少磨膛發(fā)熱，引起樣品中脂肪酸值的變化，每粉碎10個樣品應(yīng)將出料管拆下清理。注3:制備好的樣品應(yīng)盡快完成測定，如需較長時間存放，

36、應(yīng)存放在冰箱中，全部過程不得超過24h。A.5.2 試樣處理稱取制備試樣約10g，精確到0.01g，于250mL具塞磨口錐形瓶中，并用移液管準(zhǔn)確加入50.0mL無水乙醇(A3.1)，置往返式振蕩器上振搖30min，振蕩頻率為100次/min。靜置12min，在玻璃漏斗中放入折疊式的濾紙過濾，并加蓋濾紙。棄去最初幾滴濾液，收集濾液25mL以上。A.5.3 測定精確移取25.0mL濾液于150mL錐形瓶中，加50mL不含CO2的蒸餾水，滴加34滴酚酞-乙醇指示劑后，用0.01mol/L的氫氧化鉀-95乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(A3.4.3)滴定至呈微紅色，30s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀-95乙醇溶液

37、體積（V1）。注:樣品提取后一定要及時滴定；滴定應(yīng)在散射日光或日光型日光燈下對著光源方向進(jìn)行；提取液顏色較深，滴定終點(diǎn)不易判定時，可用一已加入去CO2蒸餾水后尚未滴定的提取液作參照，當(dāng)被滴定液顏色與參照相比有色差時，即可視為已到滴定終點(diǎn)。若上述參照比色法，仍無法準(zhǔn)確判定滴定終點(diǎn)時，可在濾紙錐頭放入0.5g粉末活性炭,褪色后滴定。A.5.4 空白試驗取25.0mL無水乙醇于150mL錐形瓶中，加50mL不含CO2的蒸餾水，滴加34滴酚酞-乙醇指示劑，用0.01mol/L的氫氧化鉀-95乙醇溶液滴定至呈微紅色，30s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀-95乙醇溶液體積（V0）。注:提取、滴定過程的環(huán)境

38、溫度應(yīng)控制在1525。A.6 結(jié)果的計算和表述A.6.1 脂肪酸值以中和100g干物質(zhì)試樣中游離脂肪酸所需氫氧化鉀毫克數(shù)表示。按式（2）計算：脂肪酸值（KOHmg/100g干基） （2）式（2）中：V1滴定試樣所耗氫氧化鉀-95乙醇溶液體積，mL ；V0滴定空白所耗氫氧化鉀-95乙醇溶液體積，mL；C氫氧化鉀-95乙醇溶液的準(zhǔn)確濃度，mol/L；50提取試樣用無水乙醇的體積，mL；25用于滴定的濾液的體積，mL； 100 換算為100g（干）試樣的質(zhì)量，g；試樣的質(zhì)量，g；試樣水分百分?jǐn)?shù)，即每100g試樣中含水分的質(zhì)量，g。注 : 用測定脂肪酸值的同一粉碎樣品，按GB/T 5497中105恒重

39、法測定樣品水分含量，計算脂肪酸值干基結(jié)果。此水分含量結(jié)果不得作為樣品水分含量結(jié)果報告。A.6.2 結(jié)果表示每份試樣取兩個平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為測定結(jié)果，計算結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后一位數(shù)。A.7 重復(fù)性同一分析者對同一試樣同時進(jìn)行兩次測定，結(jié)果差值不超過2mgKOH/100g。十三、油脂碘價的測定1、原理將試樣溶于惰性有機(jī)溶劑中，加入過量的氯化碘的冰醋酸溶液（韋氏碘液）與油脂中的不飽和脂肪酸起加成反應(yīng)，生成飽和的鹵素衍生物，再加過量的碘化鉀與剩余的氯化鉀（碘）作用生成游離碘，再用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定游離出來的碘，同時做空白試驗，根據(jù)空白與試樣消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液之差，可計算加成碘的數(shù)量。

40、2、測定根據(jù)試樣碘值的大小，按下表稱取試樣（m，準(zhǔn)確至0.0002g）,注入250mL碘量瓶中,加20mL四氯化碳或三氯甲烷,充分振蕩使試樣溶解,然后由滴定管精確放入25mL韋氏液(加入速度不可太快,應(yīng)掌握在2分鐘左右)立即蓋緊瓶賽(塞口和瓶口先用少量15%KI溶液潤濕,以防碘揮發(fā))搖勻后在20±5條件下于暗處靜置30分鐘（碘價在130以上的靜置60分鐘），使加成反應(yīng)完全，到時立即加入15%碘化鉀溶液20mL和水100mL，不斷振搖下用0.1N硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液由棕紅色變成淡黃色時,加入1毫升淀粉指示劑(5%),繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失為止.同時作空白試驗。碘價數(shù)值與試樣用量表碘價試

41、樣用量范圍(g)碘價試樣用量范圍(g)200.84611.58651000.25330.3173400.63460.79351200.21150.2644600.42310.52881400.18130.2666800.31730.39661600.15870.19833、計算 （V2V1）*N*0.1269碘價=- *100 M式中:V1-滴定試樣消耗的硫代硫酸鈉的量,mL;V2-滴定空白消耗的硫代硫酸鈉的量,mL;N硫代硫酸鈉溶液的當(dāng)量濃度,mol/L;M試樣重量,克;0.1269-每毫克當(dāng)量濃度硫代硫酸鈉相當(dāng)于碘的克數(shù).4、允許偏差每個試樣做兩個平等試驗,碘價在100以上不超過1,碘價在

42、100以下,不超過0.6，取平均數(shù)。5、韋氏液的配制方法1：稱取13克純碘于500mL燒杯中加200mL冰醋酸,在水浴上微熱使其溶解,冷卻后移入1000mL容量瓶中,以冰醋酸稀釋至刻度,從容量瓶中取150mL作調(diào)節(jié)韋氏液用,(其余碘液按圖裝置通入經(jīng)過洗滌和干燥的氯氣,使之與碘作用,生成氯化碘,反應(yīng)如下:鹽酸與高錳酸鉀反應(yīng)生成氯氣,經(jīng)過水洗滌除去水溶性雜質(zhì),經(jīng)濃硫酸洗后可脫水凈化.氯氣與碘反應(yīng)生成氯化碘.將氯氣通入碘冰乙酸溶液中,使碘冰乙酸溶液由濃褐色變?yōu)橥该鞯某燃t色(突變)為止.);方法2：分別稱取三氯化碘7.9克和純碘8.7克分別溶于冰乙酸中,和并兩溶液轉(zhuǎn)入容量瓶中，再用冰乙酸稀釋至1000

43、mL，貯棕色瓶中備用。 6.0.1N硫代硫酸鈉的配制(見化驗手冊第86頁)另附:測動物油、大豆磷脂、其稱量范圍是在，碘價是80其試樣用量范圍在0.31730.3966.各油脂的碘價油脂碘價魚油160豆油120豬油7080(90)棕櫚油20菜油100110大豆磷脂80碘價是測油脂中不飽和鍵的程度，主要用于油脂摻假的檢測，例將豆油摻入魚油中；因豬大油根據(jù)原材料豬的品種和飼養(yǎng)方式不同其碘價的差異幅度較大，低的碘價在30，高的達(dá)7080間，一般情況下參考碘價在7080間；相對來說意義不是太大。針對豬大油的質(zhì)量評定要結(jié)合以下幾個方面綜合評定：1 感觀，無臭味及煤油等其它動特油以外的味道2 酸價如規(guī)定在1

44、0個內(nèi)，則其相對應(yīng)的過氧化值應(yīng)在0.1內(nèi).3 動物油重要的是摻假的檢測6、油脂碘價測定的注意事項（1）須在無水的條件下操作，試驗用的儀器、碘量瓶、吸管必須是干燥無水的，不可帶有水珠，否則影響結(jié)果較大。（2）每次的空白試驗要與前一次的比較，空白試驗的耗用的硫代硫酸鈉要與則配好時韋氏液的空白作比較。因韋氏液配制后隨時間的延長會不斷發(fā)生變化。十四、真蛋白的測定 方法一：鹽析法1、試劑：I. 硫酸銅溶液：10%，稱取50.00g硫酸銅加水溶解，并稀釋到500mL。II. 氫氧化鈉溶液：2.5%，稱取12.50g氫氧化鈉，加水溶解，并稀釋到500mL。III. 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.05mol/L。2、測定

45、粗確稱取1g左右樣品置于250mL燒杯中，加50mL蒸餾水于250mL燒杯中，于電爐上加熱煮沸，加入20mL10%硫酸銅溶液，再在攪拌下緩緩加入20mL2.5%氫氧化鈉溶液，搖勻，從電爐上取下，室溫下放置2h或靜置過液。沉淀物用中速定性濾紙傾瀉法過濾。并用少量70以上熱水多次洗滌燒杯和沉淀物，直至濾液無硫酸根離子（用5%BaCl2溶液檢驗無沉淀），連沉淀物一起放入80烘箱中烘到略潮，放入凱氏定氮燒瓶中，消化，測定其中的蛋白質(zhì)含量，同時進(jìn)行空白測定。另取樣品0.5g樣品進(jìn)行粗蛋白質(zhì)的測定。方法二：測非蛋白氮（NP）法1、NP的測定稱取15g左右樣品，準(zhǔn)確加入100mL5%三氯乙酸溶液，浸泡震蕩2

46、h，靜置過濾，精確量取10-20mL濾液定氮，同時做空白實驗。2、NP計算同粗蛋白質(zhì)的計算真蛋白質(zhì)（TP）的計算：TP%=CP%-NP%真蛋白質(zhì)的比率應(yīng)=TP%/CP%*100%=（CP%-NP%）/CP%*100%一般進(jìn)口魚粉真蛋白質(zhì)的比率應(yīng)大于或等于80%，國產(chǎn)魚粉真蛋白質(zhì)的比率應(yīng)大于十五、糊化度的測定1、原理-淀粉酶在適當(dāng)?shù)腜H值和溫度下，能在一定的時間內(nèi)，將糊化淀粉轉(zhuǎn)為還原糖及-糊精，轉(zhuǎn)化的糖量與淀粉的糊化程度成正比。用鐵氰化鉀法測其還原糖量，即可計算出淀粉的糊化度。2、試劑（1）10（體積分?jǐn)?shù)）磷酸鹽緩沖液（PH值為6.8）A、甲液：溶解71.64g磷酸二氫鈉于水中，并稀釋至1L。B

47、、乙液：溶解31.21g磷酸氫二鈉于水中，并稀釋至1L。取甲液49mL與乙液51mL合并為100mL,再加入900mL即為10（體積分?jǐn)?shù)）磷酸鹽緩沖液。（2）60g/L-淀粉酶溶液：溶解6.0g-淀粉酶(PH值為6.8及40時，活力大于8萬單位，細(xì)度為80以上通過60目)于100mL10磷酸鹽緩沖液中成乳濁液（-淀粉酶儲于冰箱內(nèi)，用時現(xiàn)配）。（3）0.1mol/L堿性鐵氰化鉀溶液：溶解32.9g鐵氰化鉀和44.0g無水碳酸鈉于水中并稀釋到1L，儲于棕色瓶內(nèi)。（4）乙酸鹽溶液：溶解70.0g氯化鉀和40.0g硫酸鋅于水中，加熱溶解，冷卻至室溫，再緩緩加入冰乙酸并稀釋到1L。（5）0.1mol/L

48、硫代硫酸鈉溶液：稱取26g硫代硫酸鈉（Na2S2O3-5H2O）或16g無水硫代硫酸鈉，溶于1L水中，緩緩煮沸10 min。冷卻。放置兩周后過濾備用。標(biāo)定：精確稱取約0.15g在120干燥至恒溫的基準(zhǔn)物質(zhì)重鉻酸鉀，稱準(zhǔn)至0.0001g，置于500mL碘量瓶中，溶于50mL水。加入2g碘化鉀，輕搖使之溶解。再加入20mL20硫酸，密塞，搖勻，放置暗處10min后，用150mL水稀釋。用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴至溶液呈淺黃色近終點(diǎn)時，再加入3mL0.5淀粉指示劑，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失而顯亮綠色。反應(yīng)液及稀釋水的溫度不應(yīng)高于20。同時做試劑空白試驗。 m 硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度(mol/L)= (V1-V

49、2)×0.04903式中 m重鉻酸鉀的質(zhì)量，g; V1-硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液用量，mL; V2-試劑空白試驗中硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液用量,mL; 0.04903-與1.00mL1.00mL硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)?shù)闹劂t酸鉀的質(zhì)量，g。（6）10（體積分?jǐn)?shù)）硫酸溶液。（7）120g/L鎢酸鈉溶液。（8）100g/L碘化鉀溶液：溶解10.0g碘化鉀于100mL水中，加入幾滴飽和氫氧化鉀溶液（防氧化）。（9）1淀粉指示劑。3、儀器（1）多孔恒溫水浴鍋。（2）天平等。4、操作步驟（1）試樣的制備：取要檢測的顆粒飼料樣品50g左右，在實驗室樣品磨中粉碎，其細(xì)度通過40目編制篩，混勻，放于密閉容器內(nèi)，貼

50、上標(biāo)簽作為試樣，樣品應(yīng)低溫（410）保存。（2）分別稱取試樣1.0000±0.0003g（淀粉含量不大于0.5g）兩份，置于兩支150mL三角瓶中，標(biāo)上A、B。另取1支150mL三角瓶，不加試樣，做空白，并標(biāo)上C。在這三只三角瓶中各取50mL量筒加入40mL磷酸鹽緩沖液。（3）將A置于沸水浴中煮沸30min，使樣品全部糊化，取出快速冷卻至60以下。（4）將A、B、C置于（40±1）恒溫水浴鍋中預(yù)熱3min后，各用5mL移液管加入5mL-淀粉酶溶液，40保溫1h(每隔15min輕輕搖勻1次)。（5）1h后，將3支三角瓶取出，用移液管分別加入2mL10硫酸溶液搖勻，再加入2mL

51、鎢酸鈉溶液搖勻，并將它們?nèi)哭D(zhuǎn)移到3支100mL容量瓶中（用水洗三角瓶3刺以上，洗液也轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的容量瓶內(nèi)）。最后用水定容至100mL，貼上標(biāo)簽，搖勻。靜置2min后，用中速定性濾紙過濾，留濾液作為下面測定試樣（從碘量瓶內(nèi)液體開始沸騰計時）。（6）用5mL移液管分別吸取上述濾液5mL，放入潔凈的150mL三角瓶內(nèi)，再用15mL移液管加入15mL堿性鐵氰化鉀溶液（還原糖氧化），搖勻后置于沸水中，準(zhǔn)確加熱20min后取出，用冷水快速冷卻至室溫，用25mL移液管緩慢加入25mL乙酸鹽溶液（為中和堿性鐵氰化鉀中的堿，為滴定準(zhǔn)備一個弱酸環(huán)境），并搖勻。（7）用5mL移液管加入5mL碘化鉀溶液，搖勻，立即

52、用硫代硫酸鈉溶液滴定，當(dāng)溶液顏色變成淡黃色時，加入幾滴1淀粉指示劑，繼續(xù)滴定到藍(lán)色消失，各三角瓶分別逐一滴定，并記下相應(yīng)的滴定量。5、計算 V0-V2試樣糊化度（） V0-V1式中：V0空白液滴定量，mL； V1完全糊化樣品溶液滴定量，mL； V2樣品溶液滴定量，mL。每個試樣取兩個平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值為結(jié)果，雙試驗的相對誤差：糊化度在50以下時，不超過10；糊化度在50以上時，不超過5。6、注意事項（1）-淀粉酶在儲存期間會有不同程度的失活，一般每儲存3個月測1次酶活力。為了保證樣品酶解完全，以酶活力8萬單位，酶用量300mg為準(zhǔn)，如酶的活力降低，酶用量則按比例加大。（2）在測定時，指示劑不要過早地加入，否則會影響測定結(jié)果，同一樣品滴定時，應(yīng)在變成一樣的淡黃色時加入淀粉指示劑。 十六、配合飼料混合均勻度的測定1、方法原理本方法