鐵皮石斛研究進(jìn)展

1、-作者xxxx-日期xxxx鐵皮石斛研究進(jìn)展【精品文檔】鐵皮石斛分子鑒定的研究進(jìn)展劉靜靜 （安徽中醫(yī)藥大學(xué)）摘要：鐵皮石斛是中國特有的名貴藥材, 生長較慢、自然繁衍率很低的蘭科附生植物，一直以來和靈芝、人參和冬蟲夏草等被列為上品中藥,道家養(yǎng)生經(jīng)典道藏譽(yù)其為“中華九大仙草之首”,藥用價(jià)值非常高，有“救命仙草”、“藥中黃金”的美稱。鐵皮石斛作為我國傳統(tǒng)滋陰名貴中藥，其保健價(jià)值為人們所熟知。本文從鐵皮石斛的分子鑒定、化學(xué)成分、功能活性研究等方面進(jìn)行分類綜述。關(guān)鍵詞：鐵皮石斛、分子鑒定、進(jìn)展與展望鐵皮石斛為蘭科石斛屬植物鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo

2、)的干燥莖1，因表皮呈鐵綠色而得名。自古以來被認(rèn)為是滋陰補(bǔ)益的珍品 ,具有益胃生津 、滋陰清熱 、明目利嗓等功效 。鐵皮石斛是中國特有的名貴藥材, 生長較慢、自然繁衍率很低的蘭科附生植物，一直以來和靈芝、人參和冬蟲夏草等被列為上品中藥,道家養(yǎng)生經(jīng)典道藏譽(yù)其為“中華九大仙草之首”,藥用價(jià)值非常高，有“救命仙草”、“藥中黃金”的美稱。鐵皮石斛作為我國傳統(tǒng)滋陰名貴中藥，其保健價(jià)值為人們所熟知。這些年來許多學(xué)者都在探索從分子水平尋找鑒定鐵皮石斛的有效方法，如基于PCR的DNA分子標(biāo)定技術(shù)、基于DNA序列分析的分子標(biāo)記技術(shù)、基因芯片技術(shù)等。1 基于 PCR 的 DNA 分子標(biāo)定技術(shù) 如限制性內(nèi)切酶片段長

3、度多態(tài)性( RFLP)、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA( RAPD)、擴(kuò)增酶切片段多態(tài)性( AFLP)、PCRRFLP 等2。張銘等3 用 RAPD 技術(shù)對石斛屬內(nèi) 26個(gè)品種和金石斛的 1 個(gè)品種進(jìn)行了基因組 DNA 多態(tài)性分析, 設(shè)計(jì)成的特異性引物能方便快捷地鑒別出鐵皮石斛。丁鴿等4 采用 RAPD 技術(shù)對鐵皮石斛8個(gè)野生居群的遺傳多樣性、親緣關(guān)系以及分子鑒別等進(jìn)行研究, 結(jié)果表明, 鐵皮石斛居群間遺傳差異明顯, 具有較豐富的遺傳多樣性。虞泓等5 用AFLP 技術(shù)對石斛屬內(nèi)石斛組4個(gè)品種和1個(gè)外類群種進(jìn)行基因組 DNA 多態(tài)性分析, 構(gòu)建了藥用石斛的DNA分子指紋圖譜。 AFLP 方法較之 RAPD

4、方法在可信度、靈敏度和經(jīng)濟(jì)實(shí)用等方面具有較大的優(yōu)勢。2 基于 DNA 序列分析的分子標(biāo)記技術(shù) 目前用于該測序的基因主要有葉綠體基因組的 rbcL、matK、rpoC, 核基因組的 rRNA、 ITS( 植物類) , 線粒體基因組的 cyt-b( 動(dòng)物類)2 。張銘等6 用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA (RAPD) 技術(shù)對石斛屬內(nèi) 26 個(gè)種和金石斛屬的 1 個(gè)種進(jìn)行基因組 DNA 多態(tài)性分析，設(shè)計(jì)出了能方便快捷地鑒別出鐵皮石斛成的特異性引物。這項(xiàng)技術(shù)為各種藥材的分子鑒定提供了一個(gè)全新的思路。 丁鴿等7 采用RAPD分子標(biāo)記技術(shù),對中國特有瀕危植物鐵皮石斛的遺傳多樣性進(jìn)行了研究。方法篩選隨機(jī)引物進(jìn)行R

5、APD分析,通過UPGMA聚類,研究了鐵皮石斛各居群及個(gè)體間的遺傳關(guān)系，結(jié)果表明鐵皮石斛居群間存在明顯遺傳差異,遺傳具有多樣性。丁小余等8在鐵皮石斛與其他 37 種石斛的 rD N A IT S 序列的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)了一對位 點(diǎn)特殊性 PC R 鑒 別引物 T PJB0 1S 和T P JB01X 鑒別鐵皮石斛， 當(dāng)退火溫度降1166 ， 只有鐵皮石斛有陽性反應(yīng)。3 基因芯片技術(shù) 由于基因芯片從遺傳的角度鑒別中藥的物種, 但中藥藥效的作用成分大多是多次代謝產(chǎn)物, 所以基因芯片鑒定的是中藥的真?zhèn)味皇侵兴幍膬?yōu)劣, 因而它不能取代中藥化學(xué)成分指紋圖譜等的鑒定, 須和其他技術(shù)結(jié)合才能在中藥學(xué)現(xiàn)代化系統(tǒng)

6、中發(fā)揮最佳作用9。4 進(jìn)展與展望 隨著分子生物學(xué)及分子生藥學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，關(guān)于鐵皮石斛分子鑒定的研究成果越來越多，研究也更加地深入。近年來，鐵皮石斛市場需求不斷擴(kuò)大，由于無節(jié)制的濫采濫挖，導(dǎo)致鐵皮石斛的野生資源遭到嚴(yán)重破壞，再加上在自然條件下種子萌發(fā)率低，生長緩慢，嚴(yán)重影響了商品鐵皮石斛質(zhì)量的穩(wěn)定性，市場上出現(xiàn)較多的鐵皮石斛的偽劣品。所以，鐵皮石斛的真?zhèn)舞b定及石斛屬不同個(gè)體鑒定的研究受到廣泛重視，建立有效的鐵皮石斛鑒定體系十分重要。除本文所述的主要方法外，像 matK 基因序列、線粒體 nad 1 內(nèi)含子序列比較等已應(yīng)用于其它藥用石斛質(zhì)量評價(jià)及真?zhèn)舞b定的新興技術(shù)將為鐵皮石斛的鑒定研究提供新的

7、途徑 10,11。在準(zhǔn)確鑒定鐵皮石斛的基礎(chǔ)上，深入開展有效成分和藥理作用的研究，建立一個(gè)鐵皮石斛化學(xué)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)體系，為推向國際市場打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)?！揪肺臋n】參考文獻(xiàn)：1.國家藥典委員會(huì). 中國藥典(一部)S.北京: 中國醫(yī)藥科技出版社, 2010.2.楊一令, 來平凡, 蔣士鵬. 鐵皮石斛的研究進(jìn)展J. 山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2008, 32(1):82-85.3.張銘, 黃華榮, 廖蘇梅, 等. 石斛屬 RAPD 分析及鑒定鐵皮石斛的特異性引物設(shè)計(jì) J . 中國中藥雜志, 2001, 26( 7) : 442-447.4.丁鴿, 丁小余, 沈潔, 等. 鐵皮石斛野生居群遺傳多樣性的RAP

8、D 分析與鑒別 J . 藥學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 40( 11) : 1028-1032.5.虞泓, 和銳, 倪念群, 等. 石斛屬 4 種植物的 AFLP 分析 J . 中草藥, 2004, 35( 7) : 808-810.6.張銘, 黃華榮, 廖蘇梅,等. 石斛屬RAPD分析及鑒定鐵皮石斛的特異性引物設(shè)計(jì)J. 中國中藥雜志, 2001, 26(7):442-447.7.丁鴿, 丁小余, 沈潔,等. 鐵皮石斛野生居群遺傳多樣性的RAPD分析與保護(hù)策略C/ 全國藥用植物和植物藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì). 2005.8. D ing XY，Wang ZT，Zhou KY ，etal A llele-specific primers for diag- nostic PCR authentication of D endrobium officinaleJ.Planta M edica，2003，69 (6):587 588.9.應(yīng)依, 徐紅, 王崢濤. DNA 分子標(biāo)記技術(shù)在中藥石斛類藥材鑒