精2013高考生物沖刺復習課件22細胞工程69張PPT課件

1、植物的組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng) 與選修與選修1 1的植物組織培養(yǎng)側(cè)重點不同，側(cè)重植的植物組織培養(yǎng)側(cè)重點不同，側(cè)重植物組織培養(yǎng)的原理、條件、過程和生產(chǎn)中的應(yīng)物組織培養(yǎng)的原理、條件、過程和生產(chǎn)中的應(yīng)用用 動物的細胞培養(yǎng)動物的細胞培養(yǎng)與體細胞克隆與體細胞克隆 動物細胞培養(yǎng)的條件、應(yīng)用以及體細胞克隆的動物細胞培養(yǎng)的條件、應(yīng)用以及體細胞克隆的原理、方法和應(yīng)用原理、方法和應(yīng)用 細胞融合與單克細胞融合與單克隆抗體隆抗體 理解細胞融合的原理、應(yīng)用及單克隆抗體的制理解細胞融合的原理、應(yīng)用及單克隆抗體的制備過程。單克隆抗體制備的原理、過程中的篩備過程。單克隆抗體制備的原理、過程中的篩選及單克隆抗體的特點、應(yīng)用等都是

2、考查的重選及單克隆抗體的特點、應(yīng)用等都是考查的重點點第1頁/共69頁 植物細胞工程【典例1】(2010新課標全國卷)請回答：(1)植物微型繁殖技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)的范疇。該技術(shù)可以保持品種的_，繁殖種苗的速度_。離體的葉肉細胞在適宜的條件下培養(yǎng)，最終能夠形成完整的植株，說明該葉肉細胞具有該植物的全部_。(2)把試管苗轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基上時，需要在超凈工作臺上進行，其原因是避免_的污染。第2頁/共69頁(3)微型繁殖過程中，適宜濃度的生長素單獨使用可誘導試管苗_，而與_配比適宜時可促進芽的增殖。若要抑制試管苗的生長，促使愈傷組織產(chǎn)生和生長需使用的生長調(diào)節(jié)劑是_(脫落酸、2，4-D)。第3頁/共69

3、頁(4)將某植物試管苗培養(yǎng)在含不同濃度蔗糖的培養(yǎng)基上一段時間后，單株鮮重和光合作用強度的變化如圖。據(jù)圖分析，隨著培養(yǎng)基中蔗糖濃度的增加，光合作用強度的變化趨勢是_，單株鮮重的變化趨勢是_。據(jù)圖判斷，培養(yǎng)基中不含蔗糖時，試管苗光合作用產(chǎn)生的有機物的量_(能、不能)滿足自身最佳生長的需要。第4頁/共69頁(5)據(jù)圖推測，若要在誘導試管苗生根的過程中提高其光合作用能力，應(yīng)_(降低，增加)培養(yǎng)基中蔗糖濃度，以便提高試管苗的自養(yǎng)能力。【審題視角】解答本題需明確以下兩點：(1)熟練掌握植物組織培養(yǎng)的基本條件，包括培養(yǎng)基無菌無毒，適宜濃度的營養(yǎng)等；(2)準確分析曲線，并明確衡量生長狀態(tài)的標準是單株鮮重。第5

4、頁/共69頁【精講精析】本題主要考查植物組織培養(yǎng)的原理、方法、培養(yǎng)條件的控制及有關(guān)曲線的辨析。(1)葉肉細胞具有全能性，含有該植物的全部遺傳信息，可以通過植物組織培養(yǎng)手段，培育成完整植株。(2)植物組織培養(yǎng)過程中，必須保證操作的無菌、無毒，防止微生物污染。(3)在微型繁殖過程中，不同階段要使用不同激素誘導。其中，生長素可以誘導生根，與細胞分裂素混合使用，在一定濃度比例時可促進生芽，2,4-D是一類生長素類似物，具有促進愈傷組織形成的作用。第6頁/共69頁(4)處于最佳生長狀態(tài)下，植株的鮮重達到最大值，由光合作用強度與單株鮮重變化曲線可知，蔗糖濃度為1%時植株的生長達最佳狀態(tài)。(5)要提高試管苗

5、的光合作用能力，應(yīng)適當降低蔗糖濃度。答案：(1)遺傳特性 快 遺傳信息(2)微生物(3)生根 細胞分裂素 2,4-D(4)逐漸減小 先增加后下降 不能(5)降低第7頁/共69頁【命題人揭秘】命題規(guī)律：基因工程、細胞工程在植物方面的應(yīng)用最終都離不開植物組織培養(yǎng)技術(shù)，命題中也往往以植物組織培養(yǎng)為切入點考查基因工程的應(yīng)用、植物細胞工程的應(yīng)用、植物體細胞雜交等，在今后的高考中，此類考查仍會成為命題熱點。備考策略：植物組織培養(yǎng)基本知識的熟記是解答這類題目的關(guān)鍵，現(xiàn)總結(jié)如下：(1)原理：細胞發(fā)育成個體都是植物組織細胞的全能性的體現(xiàn)。(2)條件：各種條件影響植物組織培養(yǎng)的進程及結(jié)果。外植體：離體條件。第8頁

6、/共69頁培養(yǎng)基：無菌無毒；適宜的營養(yǎng)，碳源一般為蔗糖；一定濃度的激素，一般為生長素(或類似物)和細胞分裂素。其他條件：脫分化需黑暗狀態(tài)，不需光照；再分化需一定光照條件。過程：外植體脫分化為愈傷組織再分化為胚狀體試管苗。第9頁/共69頁 生物技術(shù)手段的應(yīng)用【典例2】(2011江蘇高考)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述，錯誤的是A.蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B.體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體C.植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D.動物細胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動物的培育【審題視角】解答本題的關(guān)鍵是理解各種生物技術(shù)的原理和應(yīng)用，以及各種生物技術(shù)之間的內(nèi)在聯(lián)系。第10頁/共69頁

7、【精講精析】選B。具體分析如下：選項選項內(nèi)容分析內(nèi)容分析A A項正確項正確蛋白質(zhì)工程可對現(xiàn)有蛋白質(zhì)改造，也可以合成自然界中蛋白質(zhì)工程可對現(xiàn)有蛋白質(zhì)改造，也可以合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)不存在的蛋白質(zhì) B B項錯誤項錯誤克隆動物應(yīng)用了細胞核移植、胚胎移植等生物技術(shù)，但克隆動物應(yīng)用了細胞核移植、胚胎移植等生物技術(shù)，但未利用體細胞雜交技術(shù)，體細胞雜交技術(shù)的主要應(yīng)用是未利用體細胞雜交技術(shù)，體細胞雜交技術(shù)的主要應(yīng)用是制備單克隆抗體制備單克隆抗體 C C項正確項正確 生產(chǎn)中可將莖尖培養(yǎng)成植株實現(xiàn)植物脫毒生產(chǎn)中可將莖尖培養(yǎng)成植株實現(xiàn)植物脫毒 D D項正確項正確以動物細胞為受體細胞的基因工程必須進行動物細胞的

8、以動物細胞為受體細胞的基因工程必須進行動物細胞的培養(yǎng)之后再進行胚胎移植培養(yǎng)之后再進行胚胎移植 第11頁/共69頁【命題人揭秘】命題規(guī)律：生物工程技術(shù)在生產(chǎn)中有多種應(yīng)用，與生產(chǎn)實際的聯(lián)系符合高考的命題方向?？疾闀r，常以生物技術(shù)與具體生產(chǎn)實例相結(jié)合的方式，以具體的動植物培養(yǎng)為切入點考查。備考策略：備考時要理解各種生物技術(shù)的原理和應(yīng)用的對應(yīng)關(guān)系，牢記其應(yīng)用的要點，現(xiàn)總結(jié)如下：(1)基因工程技術(shù)：農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中培育抗逆性高的植物新品種；培育動物優(yōu)良品種；第12頁/共69頁培育生物反應(yīng)器；利用生物體生產(chǎn)藥物或疫苗等。(2)蛋白質(zhì)工程：改造或創(chuàng)造新的蛋白質(zhì)，用于制造電子元件、藥物等。(3)植物組織培養(yǎng)技術(shù)：植

9、物繁殖新途徑：微型繁殖、作物脫毒、人工種子等；作物新品種的培育：單倍體培育、突變體的利用；細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(4)動物細胞培養(yǎng)技術(shù)：生物制藥；有毒物質(zhì)的檢測；生理、病理、藥理等方面的研究。第13頁/共69頁 動物細胞工程【典例3】(2010福建高考)紅細胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，目前臨床使用的紅細胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細胞生成素(rhEPO)。其簡要生產(chǎn)流程如圖，請據(jù)圖回答：第14頁/共69頁第15頁/共69頁(1)圖中所指的是_技術(shù)。(2)圖中所指的物質(zhì)是_，所指的物質(zhì)是_。(3)培養(yǎng)

10、重組CHO 細胞時，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細胞產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害，應(yīng)定期更換_。(4)檢測rhEPO的體外活性需用抗rhEPO單克隆抗體。分泌單克隆抗體的_細胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成。第16頁/共69頁【審題視角】解答本題的關(guān)鍵點如下：(1)準確掌握生產(chǎn)流程圖示內(nèi)容。圖示包括了cDNA文庫的構(gòu)建、PCR擴增、目的基因的篩選導入、檢測和表達以及目標產(chǎn)物rhEPO的分離。(2)構(gòu)建cDNA文庫時，利用的模板是相應(yīng)的mRNA。第17頁/共69頁【精講精析】(1)獲取目的基因常用的方法有從基因文庫中獲取、PCR技術(shù)擴增、化學合成法。由圖中以核DNA為模

11、板獲得目的基因可知為PCR技術(shù)。(2)進行反轉(zhuǎn)錄的模板是mRNA。由題意可知重組CHO細胞適用于生產(chǎn)重組人紅細胞生成素(rhEPO)，所以重組CHO細胞能夠表達出重組人紅細胞生成素(rhEPO)。(3)培養(yǎng)動物細胞是用液體培養(yǎng)基，即培養(yǎng)液，細胞從培養(yǎng)液中吸收營養(yǎng)，并同時向培養(yǎng)液中排放代謝廢物，當代謝廢物積累時會危害細胞，因此要定期更換培養(yǎng)液。第18頁/共69頁(4)制備單克隆抗體是讓B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，然后由雜交瘤細胞來分泌抗體。答案：(1)PCR(2)mRNA rhEPO(3)培養(yǎng)液(4)雜交瘤第19頁/共69頁【閱卷人點撥】失失分分警警示示 (1)(2)(1)(2)易忽

12、視圖中信息，錯填基因文庫、化學合成等其易忽視圖中信息，錯填基因文庫、化學合成等其他方法。解答此類題目，需牢記獲取目的基因方法的要點，他方法。解答此類題目，需牢記獲取目的基因方法的要點，PCRPCR擴增目的基因、逆轉(zhuǎn)錄法是由擴增目的基因、逆轉(zhuǎn)錄法是由RNARNA得到得到DNADNA，基因文庫，基因文庫中直接提取、化學方法直接合成。中直接提取、化學方法直接合成。 第20頁/共69頁備備考考策策略略 動物細胞培養(yǎng)的知識儲備動物細胞培養(yǎng)的知識儲備在對細胞培養(yǎng)進行記憶時，理解其根本目的是為了盡可能在對細胞培養(yǎng)進行記憶時，理解其根本目的是為了盡可能方便、快捷地培養(yǎng)細胞。注意以下幾點：方便、快捷地培養(yǎng)細胞。

13、注意以下幾點：(1)(1)取材：健康的幼齡動物的組織、細胞。取材：健康的幼齡動物的組織、細胞。(2)(2)處理：酶解法處理：酶解法( (胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶) )將組織分散為將組織分散為單個細胞，不能選擇胃蛋白酶，因其最適單個細胞，不能選擇胃蛋白酶，因其最適pHpH過低。過低。(3)(3)培養(yǎng)條件：無菌無毒的環(huán)境、營養(yǎng)培養(yǎng)條件：無菌無毒的環(huán)境、營養(yǎng)( (有機物、無機物、有機物、無機物、血清、血漿血清、血漿) )、溫度、溫度(36.5 (36.5 0.5 )0.5 )和和pHpH、氣體環(huán)境、氣體環(huán)境(5%(5%的的COCO2 2) )。有時會添加抗生素，避免雜菌的污染。有時會

14、添加抗生素，避免雜菌的污染。預測今后考查多以細胞工程的基本要點為主要內(nèi)容，綜合預測今后考查多以細胞工程的基本要點為主要內(nèi)容，綜合考查細胞培養(yǎng)和單克隆抗體的基本知識?？疾榧毎囵B(yǎng)和單克隆抗體的基本知識。第21頁/共69頁 植物組織培養(yǎng)與體細胞雜交高考指數(shù):1.(2012廣東高考)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是( )A.組織培養(yǎng) B.細胞雜交C.顯微注射 D.核移植【解題指南】解答本題的關(guān)鍵是：熟練掌握組織培養(yǎng)、細胞雜交、顯微注射、核移植技術(shù)在生產(chǎn)上的應(yīng)用。第22頁/共69頁【解析】選A。草莓植株分生區(qū)細胞含病毒的量比較少甚至無病毒，可以利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)出脫毒幼苗；細胞雜交是培育存在生殖

15、隔離的雜種生物的技術(shù)；顯微注射常用于外源基因?qū)雱游锛毎?；核移植技術(shù)則用于動物的克隆培養(yǎng)。第23頁/共69頁2.(2012江蘇高考)下列事實能體現(xiàn)細胞全能性的是(多選)( )A.棉花根尖細胞經(jīng)誘導形成幼苗B.單細胞的DNA在體外大量擴增C.動物雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體D.小鼠體細胞經(jīng)誘導培育成小鼠第24頁/共69頁【解析】選A、D。細胞的全能性是指高度分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。棉花根尖細胞經(jīng)誘導形成幼苗和小鼠體細胞經(jīng)誘導培育成小鼠都是將高度分化的細胞培育成了完整個體，因而可以體現(xiàn)細胞的全能性。單細胞的DNA 在體外大量擴增體現(xiàn)的是DNA 分子的克隆。動物雜交瘤細胞產(chǎn)生單克隆抗體是

16、動物細胞融合技術(shù)的應(yīng)用，沒有形成新個體，不符合細胞全能性的定義。第25頁/共69頁3.(2010浙江高考)將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)基中，在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是( )第26頁/共69頁【解析】選B。本題主要考查植物生命活動調(diào)節(jié)中激素產(chǎn)生部位和在組織培養(yǎng)中的應(yīng)用。(1)植物有五大類激素，其中細胞分裂素和生長素在組織培養(yǎng)過程中，可以調(diào)節(jié)外植體的分化和再分化。(2)細胞分裂素和生長素分別調(diào)控著長芽和生根。(3)題目中雖然培養(yǎng)基中沒有植物激素，但是植物幼苗本身可以產(chǎn)生生長素，促進外植體生根；而細胞分裂素的產(chǎn)生部位在根尖，所以細胞分裂素不能產(chǎn)生，植物能夠在一

17、段時間后長出少量的根而沒有長出新芽。第27頁/共69頁4.(2009全國卷)下列關(guān)于植物體細胞雜交或植物細胞質(zhì)遺傳的敘述，錯誤的是( )A.利用植物體細胞雜交技術(shù)可克服生殖隔離的限制，培育遠緣雜種B.不同種植物原生質(zhì)體融合的過程屬于植物體細胞雜交過程C.兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型一致D.兩個不同品種的紫茉莉雜交，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的第28頁/共69頁【解析】選C。植物體細胞雜交可以用兩種不同的植物體細胞通過細胞融合，經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到完整植株，從而可克服生殖隔離的限制；植物體細胞雜交的過程，實際上是不同植物體細胞的原生質(zhì)體融合的過程。紫茉莉枝葉顏色性

18、狀的遺傳是細胞質(zhì)遺傳，兩個不同品種的紫茉莉雜交，正交、反交所得F1的表現(xiàn)型應(yīng)與母本一致，F(xiàn)1的遺傳物質(zhì)來自母本的多于來自父本的，因為受精卵中的細胞質(zhì)幾乎全部來自母本。 第29頁/共69頁 動物細胞培養(yǎng)和體細胞克隆技術(shù)高考指數(shù):5(2010浙江高考)下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是( )A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變C.二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D.惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)第30頁/共69頁【解題指南】本題解題的關(guān)鍵主要有兩點：(1)弄清動物細胞培養(yǎng)的條件、過程，特別是原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的異同；(2)知道

19、惡性增殖的癌細胞的培養(yǎng)屬傳代培養(yǎng)，遺傳物質(zhì)發(fā)生變化。第31頁/共69頁【解析】選D。本題主要考查細胞工程的有關(guān)知識。動物細胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)到一定程度后要進行傳代培養(yǎng),因為細胞有接觸抑制現(xiàn)象,當細胞相互接觸時就會停止分裂，在細胞培養(yǎng)過程中進行有絲分裂,所以培養(yǎng)出來的多數(shù)細胞基因型相同。細胞在傳代培養(yǎng)過程中,傳代次數(shù)是有限的,一般在傳至1050代左右時，增殖會逐漸緩慢，以至完全停止，少數(shù)不死亡的細胞發(fā)生了突變,遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,具有不死性,所以仍屬傳代培養(yǎng)。第32頁/共69頁6.(2009浙江高考)用動植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)，下列敘述正確的是( )A.都需用CO2培

20、養(yǎng)箱B.都需用液體培養(yǎng)基C.都要在無菌條件下進行D.都可體現(xiàn)細胞的全能性【解析】選C。用動植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)都必須在無菌條件下進行。用植物成體的體細胞進行離體培養(yǎng)獲得新個體體現(xiàn)的是細胞的全能性，而動物體細胞離體培養(yǎng)主要是獲得細胞的代謝產(chǎn)物。只有動物細胞培養(yǎng)需在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。第33頁/共69頁7.(2012浙江高考)請根據(jù)以下提供的實驗材料，完善生物制劑W對動物不同細胞的分裂具有促進作用的實驗思路，并預測實驗結(jié)果。實驗材料：培養(yǎng)液、正常體細胞、癌細胞、W、胰蛋白酶。(要求與說明：答題時不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細胞均具有分裂能力，只進行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜)請回答：

21、(1)實驗思路：取培養(yǎng)瓶若干個，分組如下：_。每組設(shè)置若干個重復樣品。第34頁/共69頁各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時間后，各取其中的幾個樣品，加入_，搖勻，在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板分別計數(shù)并記錄細胞數(shù)。重復若干次。_。(2)預測實驗結(jié)果(用坐標系和細胞數(shù)變化曲線示意圖表示)：【解題指南】解答本題的關(guān)鍵是：(1)注意題干中的關(guān)鍵詞“提供的細胞具有分裂能力”。(2)根據(jù)提供的材料“正常體細胞、癌細胞及W物質(zhì)”可推知該實驗需分為4組。(3)預測實驗結(jié)果時需注意關(guān)鍵詞“促進作用”。 第35頁/共69頁【解析】本題考查實驗設(shè)計的有關(guān)知識，實驗設(shè)計步驟時重點考查對照原則、單一變量原則。(1)實驗思路

22、是設(shè)置對照，從實驗?zāi)康募八o實驗材料可知要用不同細胞，并且要區(qū)分是否加生物制劑W，所以要設(shè)置4組。動物細胞培養(yǎng)一段時間后需要用胰蛋白酶將它們分散成單個細胞來計數(shù)。多次重復后要統(tǒng)計并分析所得數(shù)據(jù)。(2)根據(jù)題干信息可預測4組細胞分裂由快到慢依次為D組、C組、B組、A組。用坐標圖表示為：第36頁/共69頁第37頁/共69頁答案：(1)A組：培養(yǎng)液中加入體細胞；B組：培養(yǎng)液中加入體細胞，加入W；C組：培養(yǎng)液中加入癌細胞；D組：培養(yǎng)液中加入癌細胞，加入W胰蛋白酶統(tǒng)計并分析所得數(shù)據(jù)(其他合理答案均可)第38頁/共69頁(2) (其他合理答案均可)第39頁/共69頁 細胞融合與單克隆抗體高考指數(shù):8.(2

23、009山東高考)人類在預防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如圖：第40頁/共69頁第41頁/共69頁請回答：(1)過程代表的是_。(2)過程構(gòu)建A基因表達載體時，必須使用_和_兩種工具酶。(3)過程采用的實驗技術(shù)是_，獲得的X是_。(4)對健康人進行該傳染病免疫預防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的_所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進行_比較；或用圖中的_進行特異性結(jié)合檢測。第42頁/共69頁【解析】(1)對于少數(shù)以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信

24、息的傳遞過程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)和RNA的復制過程，圖中過程代表的是逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)的過程。(2)基因工程的步驟是：目的基因的提取構(gòu)建基因表達載體導入受體細胞目的基因的檢測和表達，其中構(gòu)建基因表達載體時需要限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)切割(運)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過 DNA連接酶連接目的基因和(運)載體。第43頁/共69頁(3)過程是將小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的過程，獲得的雜交細胞叫雜交瘤細胞，其具備了小鼠骨髓瘤細胞無限增殖的特性和B淋巴細胞產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。(4)本題中提示該RNA病

25、毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進行核酸序列的比對，也可以通過抗A蛋白的單克隆抗體與A蛋白能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在，進一步檢測是否為目的RNA病毒。第44頁/共69頁答案：(1)逆轉(zhuǎn)錄(反轉(zhuǎn)錄)(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶、限制性內(nèi)切酶) DNA連接酶(兩空可以互換)(3)細胞融合 雜交瘤細胞(4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的單克隆抗體 第45頁/共69頁 植物細胞工程1.植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交的比較名稱名稱植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 植物體細胞雜交植物體細胞雜交 原理原理

26、細胞的細胞的全能性全能性 細胞膜具有一定的細胞膜具有一定的流動性流動性和細胞和細胞的的全能性全能性 目的目的獲得植株或大量細胞獲得植株或大量細胞 終點是培育成終點是培育成雜種植株雜種植株，而不是，而不是形成雜種細胞就結(jié)束形成雜種細胞就結(jié)束 特點特點保持親本一切遺傳性狀，保持親本一切遺傳性狀，維持性狀的穩(wěn)定性維持性狀的穩(wěn)定性 具備兩親本的遺傳特征，克服具備兩親本的遺傳特征，克服遠遠緣緣( (源源) )雜交不親和雜交不親和的障礙，擴大的障礙，擴大基因交流的范圍基因交流的范圍 第46頁/共69頁名稱名稱植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 植物體細胞雜交植物體細胞雜交 過程過程離體的植物器官、離體的植物器官、組

27、織或細胞組織或細胞愈傷組織愈傷組織根、芽或胚狀體根、芽或胚狀體植物體植物體 脫分化再分化發(fā)育第47頁/共69頁名稱名稱植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 植物體細胞雜交植物體細胞雜交 注意注意事項事項(1)(1)取材：選取有形成取材：選取有形成層的部位最容易誘導形層的部位最容易誘導形成愈傷組織成愈傷組織(2)(2)光照光照：在愈傷組織：在愈傷組織的誘導階段往往要暗培的誘導階段往往要暗培養(yǎng)，有利于細胞的脫分養(yǎng)，有利于細胞的脫分化產(chǎn)生愈傷組織。當愈化產(chǎn)生愈傷組織。當愈傷組織分化出芽和葉時，傷組織分化出芽和葉時，一定要有光照，有利于一定要有光照，有利于葉片內(nèi)葉綠素的合成葉片內(nèi)葉綠素的合成 (1)(1)酶解法去

28、壁：所用的酶是酶解法去壁：所用的酶是纖維纖維素酶和果膠酶素酶和果膠酶(2)(2)人工誘導融合的方法：人工誘導融合的方法：物理法：物理法：離心離心、振動振動、電激電激等等化學法：化學法：聚乙二醇聚乙二醇等等 實例實例花藥的離體培養(yǎng)、植物花藥的離體培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)組織培養(yǎng) 白菜白菜甘藍、胡蘿卜甘藍、胡蘿卜羊角芹羊角芹第48頁/共69頁2.植物細胞工程的應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑：微型繁殖：a.概念：用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。b.特點保持優(yōu)良品種的遺傳特性高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖第49頁/共69頁作物脫毒：選取作物無毒組織(如莖尖)進行組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗。人工種子：以植物組織培

29、養(yǎng)得到的胚狀體等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。第50頁/共69頁(2)培育作物新品種：用植物的花藥進行離體培養(yǎng)形成單倍體，再經(jīng)人工誘導染色體加倍后篩選出需要的新品種；利用組織培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的突變體，培育新的品種。(3)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：用人工培養(yǎng)的愈傷組織提取細胞中的某種成分。第51頁/共69頁【名師點睛】1.生物體內(nèi)細胞沒有表現(xiàn)出全能性的原因基因在特定的時間和空間條件下選擇性表達，細胞分化為不同的組織、器官。2.細胞全能性表達的難易(1)植物細胞動物細胞(動物細胞中的細胞核具有全能性)。(2)受精卵生殖細胞體細胞。第52頁/共69頁(3)體細胞中：分化程度低的分化程度高的；幼嫩的衰

30、老的；細胞分裂能力強的細胞分裂能力弱的。3.雜種細胞形成的標志原生質(zhì)體融合后，誘導再生出細胞壁。第53頁/共69頁【狀元心得】1.植物組織培養(yǎng)的地位植物組織培養(yǎng)是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細胞雜交的最后一道工序,也是單倍體育種中的重要工序。2.植物組織培養(yǎng)的結(jié)果因用途而異(1)繁殖培育成試管苗植株；(2)生產(chǎn)人工種子培育為胚狀體；(3)生產(chǎn)細胞產(chǎn)物培育為愈傷組織。第54頁/共69頁 動物細胞培養(yǎng)和動物體細胞核移植項目項目動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng) 動物體細胞核移植動物體細胞核移植 原理原理細胞增殖細胞增殖 動物細胞核的動物細胞核的全能性全能性 第55頁/共69頁項目項目動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng) 動物

31、體細胞核移植動物體細胞核移植 過程過程動物組織塊動物組織塊細胞懸液細胞懸液原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)細胞懸液細胞懸液傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng) 剪碎、胰蛋白酶處理轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中胰蛋白酶處理分瓶、轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中第56頁/共69頁項目項目動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng) 動物體細胞核移植動物體細胞核移植 結(jié)果結(jié)果獲得細胞群獲得細胞群 獲得與供體遺傳物質(zhì)獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個體基本相同的個體 聯(lián)系聯(lián)系動物細胞培養(yǎng)是動物細胞培養(yǎng)是體細胞克隆體細胞克隆的基礎(chǔ)的基礎(chǔ)第57頁/共69頁【名師點睛】動物細胞培養(yǎng)中胰蛋白酶處理及作用動物細胞培養(yǎng)中兩次用到胰蛋白酶，第一次用胰蛋白酶處理剪碎的組織使之分散成單個細胞；第二次使貼壁細胞從瓶壁上脫落下來。第58頁/共69頁【狀元心得】動物細胞培養(yǎng)的四個條件(1)無菌、無毒的液體環(huán)境。(2)全面的營養(yǎng)合成培養(yǎng)基，加血清、血漿等。(3)適宜的溫度、pH。(4)氣體環(huán)境含5% CO2的混合氣體，維持培養(yǎng)液的pH。第59頁/共69頁 動物細胞融合與單克隆抗體制備1.原理：細胞膜的流動性2.誘導融合的因素：聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等3.意義：最重要的用途是制備單克隆抗體4.應(yīng)用單克隆抗體的制備(1)原理：一個(或一種)漿細胞(效應(yīng)B