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文檔簡介
1、水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治學(xué)生姓名 唐豪 學(xué)號專業(yè)漁業(yè)推廣 導(dǎo)師姓名 邱盛堯?qū)W生簽名:一、背景我國水產(chǎn)生產(chǎn)自50年代起就開始了從捕撈業(yè)向養(yǎng)殖業(yè) 的轉(zhuǎn)變,改革開放以來,水產(chǎn)品產(chǎn)量迅速提高。水產(chǎn)養(yǎng)殖在 產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)和品種結(jié)構(gòu)等方面也發(fā)生深刻的變化。由傳統(tǒng)的池 塘養(yǎng)魚向基地化、工廠化、集約式、多元化及立體化等方式 發(fā)展,養(yǎng)殖品種也由傳統(tǒng)的鯉科魚類擴(kuò)大到包括魚類、甲殼 類、貝類、兩棲類、爬行類等的近百個(gè)品種。海水養(yǎng)殖業(yè)也 獲得了迅速發(fā)展,養(yǎng)殖的規(guī)模越來越大,種類越來越多,包 括魚類、甲殼類、貝類、腔腸類、藻類等數(shù)十個(gè)品種。由于 水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的高速發(fā)展,近 20年來,水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的病害 頻繁發(fā)生,經(jīng)濟(jì)損失嚴(yán)重,已成為
2、21世紀(jì)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展 的重要制約因素之一。據(jù)初步統(tǒng)計(jì),目前危害水產(chǎn)養(yǎng)殖生物的病害已達(dá)400500種,病害生物包括侵襲生物如病毒、原核生物(包括立克 次氏體、支原體、衣原體、細(xì)菌、絲狀細(xì)菌 )、真菌、藻類、 原生動(dòng)物、后生動(dòng)物(包括吸蟲、絳蟲、線蟲、棘頭蟲、蛭、 軟體動(dòng)物、甲殼動(dòng)物)和敵害生物如藻類、 腔腸動(dòng)物、軟體動(dòng) 物、甲殼動(dòng)物、昆蟲、魚類、兩棲類、爬行類、鳥類、哺乳 類等)。而大多數(shù)水產(chǎn)養(yǎng)殖生物的病害是由病毒、原核生物、 真菌和原生動(dòng)物所引起的。我國淡水和海水養(yǎng)殖魚類有草魚、青魚、鰱、鳙、鯉、 鯽、鳊、鱖、鯰、鮠、鱔、白鯧、烏鱧、叉尾鮰、羅非魚、 鰻、鱸、鯛、鲆、鰈、鮭鱒、鲪、鲀等近50
3、個(gè)品種,各類疾病達(dá)200余種。主要的病毒性疾病有草魚出血病、淋巴囊 加捺巔病毒病、河皺白口攝傳槩性胰臟壞死蘇傳 染性造血器官壞死病、歐鰻狂游癥、鱖魚暴發(fā)性病毒病、病 毒性出血性敗血癥、鯉痘瘡病等 10余種,主要的細(xì)菌性疾 病有出血性敗血癥、潰瘍病、爛鰓病、腸炎病、赤皮病、癤 瘡病、白皮病、打印病、愛德華氏病、鱧潰瘍性綜合癥等幾 十種。真菌和藻類引起的魚病有水霉病、鰓霉病、虹鱒內(nèi)臟 真菌病、鐮刀菌病、鏈壺菌病、楔形藻病、卵甲藻病、淀粉 卵甲藻病、絲狀藻類附著病等 10多種。原生動(dòng)物和后生動(dòng) 物引起的魚病有粘孢子蟲病、車輪蟲病、小瓜蟲病、指環(huán)蟲 病、三代蟲病、復(fù)口吸蟲病、腦粘體蟲眩暈病、單極蟲腸道
4、 瘤病、中華蚤病和錨頭蚤病等 50多種。還有不明原因的疾 病如鱧腹水病和不明原因大面積死亡癥。我國甲殼類養(yǎng)殖品種包括對蝦、新對蝦、羅氏沼蝦、梭 子蟹、鋸緣青蟹、中華絨螯蟹等1020種,各類病害達(dá)100 余種。病毒性疾病有對蝦白斑病、斑節(jié)對蝦桿狀病毒病、對 蝦肝胰腺細(xì)小病毒病、河蟹抖抖病、蟹類皰疹病毒病等,原 核生物性疾病有紅腿病、細(xì)菌性幼體敗血癥、黑鰓綜合癥、 瞎眼病、甲殼潰瘍病、腸道潰瘍病、屈撓桿菌病、爛鰓病、 普通變形桿菌病、羅氏沼蝦黑斑病、中華絨螯蟹步足潰瘍病、 絲狀細(xì)菌病、立克次氏體病、支原體病等。寄生蟲性疾病包 括固著纖毛蟲病、擬阿腦蟲病、微孢子蟲病等。我國貝類養(yǎng)殖品種包括扇貝、 牡
5、蠣、鮑魚、文蛤、蛙蚶、 縊蟶、毛蚶、雜色蛤、貽貝、三角帆蚌、珍珠蚌等20余個(gè)品種,各類病害有扇貝大面積死亡、扇貝支原體病、鮑魚病 毒病、鮑魚膿足病、三角帆蚌病毒病、文蛤弧菌病、三角帆 蚌氣單胞菌病、牡蠣單孢子蟲病等。兩棲類和爬行類水產(chǎn)養(yǎng)殖品種主要包括牛蛙、中華鱉、 烏龜?shù)龋『σ糙厙?yán)重。牛蛙病害有紅腿病、傳染性肝病、 腹水病、腦膜炎產(chǎn)黃桿菌病以及蝌蚪寄生原蟲病等;中華鱉 則有白斑病、腮腺炎、紅脖子病、白點(diǎn)病、腐皮穿孔、白底 板等14種以上的病害。其它養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)或觀賞品種也有病 害發(fā)生如刺參潰爛病、白豚腐皮病、海獅海豹腸炎病、 水貂新型敗血病等。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),全國每年水產(chǎn)養(yǎng)殖病害發(fā)病率達(dá)50%以
6、上,損失率20%左右,估計(jì)我國每年因水產(chǎn)養(yǎng)殖病害問題而 造成的直接經(jīng)濟(jì)損失就達(dá)百億元之巨,并且還有上升的趨 勢。1995年(據(jù)近20個(gè)省市的統(tǒng)計(jì)資料)因病害造成較大損 失的傳統(tǒng)淡水魚類發(fā)病面積約800萬畝以上,占傳統(tǒng)漁業(yè)面積的15%左右,產(chǎn)量損失約 50萬噸,直接經(jīng)濟(jì)損失估計(jì)在 13億15億元。名特優(yōu)的新興淡水養(yǎng)殖品種的發(fā)病更加嚴(yán) 重,如歐洲鰻發(fā)病率在 50%以上,死亡率為 30%40%。 珠江三角洲鱖魚養(yǎng)殖面積已達(dá)60萬畝以上,發(fā)病面積約50%,死亡率在 50%80%,經(jīng)濟(jì)損失達(dá) 2億元。1994年 至1995年,中華鱉白底板、腮腺炎等病害暴發(fā),總受害面 積為30%80%??偹劳雎使烙?jì)在 2
7、0%50%。我國正在 興起的海水魚類網(wǎng)箱養(yǎng)殖業(yè)還未在全國充分推廣,目前就已 陷入了病害重重的困境。甲殼類病害的發(fā)生形成了世界性的 趨勢,1993年以來暴發(fā)的對蝦流行病使全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)受 到嚴(yán)重?fù)p失,估計(jì)1994年的損失量就達(dá)301.9億美元,我 國70%對蝦養(yǎng)殖面積受害,減產(chǎn) 50%70%,每年的直接 經(jīng)濟(jì)損失達(dá)30億50億元。圍網(wǎng)及外蕩養(yǎng)河蟹因大批死亡 虧本者占50%以上。貝類病害的損失已開始躍居海水養(yǎng)殖業(yè) 的首位,近年來扇貝的大規(guī)模死亡連年發(fā)生,趨勢越來越嚴(yán) 重,1998年櫛孔扇貝的死亡率在山東部分海區(qū)已達(dá)到了 80%。工廠化養(yǎng)鮑在1995年以前形勢喜人,北方沿海不斷 興建和擴(kuò)建養(yǎng)鮑廠及鮑
8、魚池,隨后的鮑魚膿足病及其他鮑魚 病害在各地的蔓延,使養(yǎng)鮑業(yè)受到了嚴(yán)重打擊,到1998年為止,估計(jì)80%的養(yǎng)鮑廠已經(jīng)倒閉停業(yè)。其它貝類如文蛤、 牡蠣、縊蟶等的病害也對養(yǎng)殖業(yè)形成了嚴(yán)重沖擊。到目前為 止,在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的各品種中,幾乎已找不出不受病害嚴(yán)重 威脅的品種。由此可見,病害的發(fā)生已成為整個(gè)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè) 發(fā)展的一大制約因素。雖然我國水產(chǎn)品的產(chǎn)量已居世界首位,而且養(yǎng)殖產(chǎn)量已 占主導(dǎo)地位。但是,作為一個(gè)發(fā)展中國家,由于國力、財(cái)力 的原因,當(dāng)前的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)無論在管理機(jī)制、科學(xué)技術(shù)、業(yè) 者素質(zhì)和產(chǎn)業(yè)化設(shè)施等方面距離現(xiàn)代化、先進(jìn)性尚有較大差 距,因此水產(chǎn)病害的發(fā)生和流行實(shí)難避免,在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)飛 速發(fā)展的
9、背后,存在一系列問題,如養(yǎng)殖苗種與親體的國內(nèi) 地區(qū)間交流,每年的人工苗種的增殖放流,種苗的進(jìn)口和引 進(jìn),所有這些種苗的人工遷移均沒有經(jīng)過有效的檢疫;病害 防治的研究基礎(chǔ)不足及防治技術(shù)缺乏,研究工作與養(yǎng)殖業(yè)發(fā) 展需求之間有較大差距;大量使用化學(xué)藥物及抗生素,造成 正常生態(tài)平衡破壞、抗藥性微生物與病毒性疾病暴發(fā);海灣 水域超容量養(yǎng)殖造成海帶、扇貝等大規(guī)模死亡;養(yǎng)殖種苗未 經(jīng)馴化并大量依賴野生種群,使劣質(zhì)基因性狀得以保存,降 低了養(yǎng)殖品種的抗逆特性,破壞了自然生態(tài)平衡;灘涂養(yǎng)殖 發(fā)展缺乏宏觀控制造成海岸帶生態(tài)環(huán)境惡化,植被銳減;在 集約式養(yǎng)殖條件下,高密度放養(yǎng)已造成水質(zhì)二次污染、病原 傳播、 水體富
10、營養(yǎng)化, 赤潮頻繁發(fā)生, 加上飼養(yǎng)管理不當(dāng)?shù)龋?都為病害的擴(kuò)大和蔓延創(chuàng)造了有利條件,是導(dǎo)致近年來疾病 綿綿不斷、愈演愈烈的原因。對于科學(xué)研究來說,需要針對當(dāng)前水產(chǎn)病害防治的現(xiàn) 狀,加強(qiáng)病害的基礎(chǔ)性研究工作, 并從病原檢疫與病情監(jiān)測、 藥物及免疫防治、生態(tài)環(huán)境調(diào)控治理、抗病遺傳選育、健康 管理以及社會經(jīng)濟(jì)等去綜合性地尋求有效的技術(shù)解決途徑。 對水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物重大病害進(jìn)行綜合防治技術(shù)的攻關(guān),將病蟲 害問題與品種的遺傳特性、健康狀況、養(yǎng)殖工藝、所處的生 態(tài)條件、所需資源狀況以及養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)條件等各方面進(jìn)行 有機(jī)地聯(lián)系起來,建立完善檢疫及監(jiān)測手段及制度,開發(fā)有 效實(shí)用的生態(tài)與免疫防治技術(shù)及抗病苗種,開展
11、綜合防治技 術(shù)示范,健全信息咨詢服務(wù)網(wǎng)絡(luò),使我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)在 21 世紀(jì)能逐步擺脫疾病的困擾,走上可持續(xù)的健康發(fā)展之路。二、國內(nèi)外現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢 1、研究現(xiàn)狀我國水產(chǎn)動(dòng)物病害研究始于 50 年代, 60 年代以前,主 要是研究各種寄生原生動(dòng)物、 蠕蟲、甲殼動(dòng)物等寄生蟲疾病, “六五”以來,國家開始對幾種主要的水產(chǎn)動(dòng)物病害開展了較 系統(tǒng)的攻關(guān)研究。 在淡水養(yǎng)殖方面, 80 年代主要針對草魚出 血病,90 年代主要針對嗜水氣單胞菌引起的淡水魚類暴發(fā)病 等進(jìn)行了病原學(xué)及綜合防治方面的研究;在海水養(yǎng)殖方面, 80 年代末至 90 年代初主要針對對蝦常見的細(xì)菌性疾病, 1993 年以來主要針對對蝦暴發(fā)性
12、流行病等進(jìn)行了病原學(xué)及 綜合防治方面的研究。此外,部委、省市等還資助開展了眾 多的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)植物病蟲害的病原及綜合防治方面的研究 課題。經(jīng)過數(shù)十年的努力,已培養(yǎng)了一大批從事水產(chǎn)動(dòng)物病 害防治研究的技術(shù)力量,并相繼建立了一批設(shè)備比較先進(jìn)的 實(shí)驗(yàn)室,使我們對水產(chǎn)動(dòng)植物病蟲害研究總體水平有了較大 提高, 還建立了水產(chǎn)病害防治網(wǎng)絡(luò), 在經(jīng)驗(yàn)交流、 病情通報(bào)、 技術(shù)咨詢等方面發(fā)揮了一定的社會效益,為進(jìn)一步的深入研 究提供了重要的理論基礎(chǔ)及科學(xué)依據(jù),為我國漁業(yè)的發(fā)展作 出了重要的貢獻(xiàn)。水產(chǎn)養(yǎng)殖病害研究一直是世界范圍內(nèi)十分活躍的研究 領(lǐng)域,國外對魚類病毒病的研究歷史較早,也較深入,很多 研究都達(dá)到了分子生物
13、學(xué)水平,如病原結(jié)構(gòu)的分子生物學(xué)、 分子流行病學(xué)、 分子毒理學(xué)、 分子免疫學(xué)及基因工程疫苗等, 取得了豐富的成果。在病毒分子生物學(xué),對病毒基因組的研 究深入到了各基因片斷編碼的蛋白的鑒定、體內(nèi)轉(zhuǎn)錄、糖蛋 白肽的結(jié)構(gòu)和免疫試驗(yàn)、不同病毒分離株的基因組和蛋白多 肽的差異,病毒各基因組片斷的克隆、測序和表達(dá),進(jìn)而進(jìn) 行基因工程疫苗的研究等。在疾病流行病學(xué),通過對全國范 圍內(nèi)魚類種群中病毒感染的檢測來預(yù)測流行規(guī)律,從而制定 當(dāng)年的控制對策;運(yùn)用頻率分布來描述魚類寄生蟲在寄主種 群中的分布,并從其動(dòng)態(tài)中了解疾病發(fā)生的可能。甲殼類病害研究在水產(chǎn)無脊椎動(dòng)物中進(jìn)展最快。在病毒 方面,國際上已發(fā)現(xiàn)了 1516種對
14、蝦病毒、56種蟹類病 毒,包括桿狀病毒屬、細(xì)小病毒屬、虹彩病毒屬、呼腸弧病 毒、小 RNA 病毒屬、披蓋病毒、彈狀病毒屬等的成員,其 中對蝦桿狀病毒 (BP) 已得到了國際病毒分類委員會的認(rèn)可。 主要的工作在病毒的發(fā)現(xiàn)、組織病理學(xué)、分離純化、形態(tài)學(xué) 研究、核酸和多肽特性、病毒的理化因子敏感性、病毒流行 病學(xué)、病毒感染特性及病癥、 環(huán)境因子對發(fā)病的影響等方面, 有56種病毒的基因組得到了部分克隆和測序,有力地促 進(jìn)了疾病診斷和病毒檢測技術(shù)的發(fā)展。與魚類或昆蟲類的病 毒學(xué)研究比較,由于缺乏甲殼類傳代細(xì)胞株和標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng) 物,其病毒學(xué)的研究進(jìn)展受到很大影響,研究層次和深度顯 得較低。我國的魚類病毒病重
15、點(diǎn)在草魚出血病的研究,已經(jīng)在病 原學(xué)、流行病學(xué)、病理學(xué)、檢測方法、基因組結(jié)構(gòu)、免疫學(xué)、 細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗、防治方法等研究與應(yīng)用方面取得了重大 的研究成果。系統(tǒng)地研究了草魚出血病病毒的組織培養(yǎng)、分 類鑒定、基因組和多肽結(jié)構(gòu)、病毒 RNA 的轉(zhuǎn)錄酶活性、病 毒糖蛋白結(jié)構(gòu)多肽的抗原型、病毒多肽及基因組的體外翻譯 和病毒基因組的體內(nèi)轉(zhuǎn)錄、疾病與環(huán)境的關(guān)系等。國內(nèi)也報(bào) 道了鯉痘瘡病、 傳染性胰臟壞死癥、 傳染性造血器官壞死癥、 淋巴囊腫病、鱖魚病毒病、月鱧病毒病、真鯛病毒病等魚類 病毒性疾病。此外,在兩棲類和爬行類中還報(bào)道了牛蛙病毒 病、烏龜病毒病、中華鱉病毒病等,但我國的水產(chǎn)脊椎動(dòng)物 病毒病絕大部分研
16、究集中在疾病的描述、病原的分離和初步 鑒定、超薄切片電鏡觀察等方面。國外在貝類病毒病方面發(fā)現(xiàn)了約 45種病毒,我國目 前至少報(bào)道了兩種病毒:三角帆蚌瘟病和皺紋盤鮑病毒病, 研究的水平一般。國外在水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性疾病研究有較全面、系統(tǒng)的報(bào) 道,研究主要集中在嗜水氣單胞菌、愛德華氏菌、魯氏耶爾 森氏菌、鰻弧菌、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌等細(xì)菌病原的快速 鑒定系統(tǒng)、選擇性培養(yǎng)基、血清學(xué)快速檢測技術(shù)、細(xì)菌性疾 病的病理學(xué)、細(xì)菌的致病因子的致病機(jī)理及其基因結(jié)構(gòu)和表 達(dá)、亞單位細(xì)菌疫苗、細(xì)胞壁多糖的免疫活性等的研究,在 細(xì)菌耐藥性方面從魚類病原菌各種耐藥性的發(fā)生、發(fā)展到其 機(jī)理研究均已逐步深入,分離并深入分析了耐
17、藥性的遺傳因 子:抗性質(zhì)粒的基因結(jié)構(gòu)、抗性譜等。此外,細(xì)菌的鑒定除 快速鑒定系統(tǒng)外,還在 16S rRNA 、質(zhì)粒等方面發(fā)展了一系 列分子生物學(xué)鑒定技術(shù)。近些年,國外在水產(chǎn)動(dòng)物寄生蟲的離體培養(yǎng)和疫苗研制 等方面做了一些工作,特別是利用重組 DNA 技術(shù)研究寄生 蟲病的基因工程疫苗,顯示出了較大的潛力。開始了對小瓜 蟲膜蛋白的純化及特性研究,進(jìn)一步探討這種抗原作為免疫 原在免疫應(yīng)答中的作用;建立了鮭虱腸道蛋白抗原的基因文 庫并進(jìn)行了表達(dá),研究了該蛋白的免疫原性,在鮭虱腸道蛋 白重組疫苗方面取得重大進(jìn)展,通過抗體破壞虱腸道功能, 達(dá)到控制鮭虱病的目的。國內(nèi)在水產(chǎn)動(dòng)物寄生蟲病的研究,主要集中在病原的
18、形 態(tài)描述、分類地位確定、生活史及微生態(tài)學(xué)、流行病學(xué)以及 防治方法等方面;我國在魚類單吸蟲等抗原及基因組的分子 生物學(xué)研究比較深入,確定了抗原蛋白及其定位,構(gòu)建了部 分基因文庫,研究了 PCR 和核酸探針檢測方法,為檢測和 免疫防治提供了一定的理論基礎(chǔ)和實(shí)際應(yīng)用技術(shù)。水產(chǎn)動(dòng)物疾病診斷技術(shù)的發(fā)展與相應(yīng)的病原研究的深 入程度密切相關(guān),近 20 年來,用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)檢測病毒、 細(xì)菌性病害的發(fā)展迅速, 主要有熒光抗體技術(shù)、 免疫酶技術(shù)、 單克隆抗體技術(shù)、核酸雜交技術(shù)、聚合酶鏈反應(yīng) (PCR) 技術(shù) 等。由于上述檢測技術(shù)的靈敏度高、特異性強(qiáng)、實(shí)用性好等 特點(diǎn),在國外已成為多種水產(chǎn)動(dòng)物病毒、細(xì)菌等病害的
19、常規(guī) 診斷方法。對鮭鱒魚、對蝦的主要病毒和細(xì)菌病原的相應(yīng)免 疫學(xué)或分子生物學(xué)病原檢測技術(shù)多數(shù)都開發(fā)成了商品化的 試劑盒。我國對虹鱒傳染性胰臟壞死癥、傳染性造血器官壞死 癥、草魚出血病病毒、對蝦白斑綜合癥病毒、肝胰腺細(xì)小病 毒、嗜水氣單胞菌毒素等進(jìn)行了單克隆抗體研制和相應(yīng)的酶 聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) 或乳膠凝集實(shí)驗(yàn)等快速檢測技術(shù)。 對魚蝦貝類的一些病原細(xì)菌也建立了 ELISA 、熒光抗體、 SPA 協(xié)同凝集等檢測技術(shù)。對蝦病毒 WSSV 的核酸探針檢 測技術(shù)及 PCR 檢測技術(shù)已形成了商品化的檢測試劑盒。在魚類免疫學(xué)研究領(lǐng)域,近些年來國外的研究十分活躍 并取得了極大的進(jìn)展,特別在抗原分子
20、結(jié)構(gòu)(包括病毒抗原、細(xì)菌抗原和寄生蟲抗原等 )、免疫應(yīng)答機(jī)理、 細(xì)胞免疫活性以 及基因工程疫苗的研制方法和技術(shù)等方面取得了豐碩的研 究成果。同時(shí)國外在魚蝦類免疫刺激劑及營養(yǎng)因素對特異性 或非特異性免疫的影響也做了一些開創(chuàng)性的研究工作。 40 年代,國外就開始應(yīng)用殺鮭氣單胞菌菌苗預(yù)防魚病。 1975 年癤瘡病疫苗首次在美國獲準(zhǔn)進(jìn)入商品化生產(chǎn)。近年來國外 魚類疫苗發(fā)展十分迅速,日本研制了虹彩病毒的特效疫苗, 美國成功研制出傳染性造血器官壞死癥基因工程疫苗,弧菌 疫苗、癤瘡病菌苗、腐皮病菌苗、香魚假單胞菌疫苗、多子 小瓜蟲病疫苗等均已商品化。到目前為止,國外已批準(zhǔn)上市 的魚類疫苗有近 30 種,在魚
21、類病害的防治中發(fā)揮了極其重 要的作用。國內(nèi), 60 年代開展了水產(chǎn)免疫學(xué)技術(shù)的研究。 1969 年, 珠江所首次研制出滅活組織漿疫苗注射免疫草魚三大?。ǔ嗥げ?、腸炎病、爛鰓病 )獲得成功以來, 我國魚類免疫防治在 這近 30 年來有了一定的發(fā)展。 陸續(xù)開展了草魚呼腸弧病毒、 嗜水氣單胞菌、柱狀曲撓桿菌等病原體免疫學(xué)特性的研究, 研制了淡水魚類細(xì)菌性敗血癥、草魚出血病、鱖魚爛鰓病、 甲魚紅脖子病等的疫苗,并進(jìn)行了生產(chǎn)性防病試驗(yàn),獲得了 一定的成功。全菌苗、菌細(xì)胞苗、滅活疫苗、弱毒疫苗、亞 單位苗、 基因工程疫苗、 DNA 疫苗等多種類型得到不斷深入 的研究。除疫苗開發(fā)外,免疫途徑、免疫復(fù)活劑、營
22、養(yǎng)與免 疫的關(guān)系、抗病毒干擾素的誘生和檢測等方面的研究也已開 展。目前已進(jìn)行草魚出血病病毒滅活細(xì)胞疫苗和減毒細(xì)胞疫 苗的工廠化生產(chǎn), 免疫草魚成活率達(dá) 85% 以上,免疫力保持 13 個(gè)月以上,產(chǎn)生一定的經(jīng)濟(jì)效益。在無脊椎動(dòng)物免疫學(xué)研究方面,蝦貝類的免疫學(xué)研究較 為突出,目前公認(rèn)蝦貝類無特異性免疫機(jī)制。國外報(bào)道的蝦 貝類非特異性免疫能力包括血淋巴凝結(jié)、黑化、細(xì)胞粘附、 抗菌作用、活性氧形成、細(xì)胞吞噬作用等,體液的免疫因子 報(bào)道的有酚氧化酶、溶菌酶等多種酶活力及凝集素、抗菌肽 等,細(xì)胞免疫包括不同類型的淋巴細(xì)胞的發(fā)生和作用等。在 免疫器官方面,對蝦淋巴器官的作用已逐步揭示,最新的研 究觀察到了淋
23、巴器官在 TSV 慢性感染過程中對病毒的消除 作用。利用免疫促進(jìn)劑,如葡聚糖、肽聚糖等激活免疫系統(tǒng) 的活性從而起到疾病預(yù)防的作用已在生產(chǎn)上得到越來越多 的應(yīng)用。國內(nèi)對蝦貝類生物抗病力研究開展得較晚, 最早在 1990 年黃海所對對蝦弧菌進(jìn)行了初步的疫苗研制和免疫研究,觀 察到一定的免疫增強(qiáng)效果。近年來,我國研究者已初步明確 了對蝦免疫的機(jī)制,掌握了血液中酚氧化酶、溶菌酶等的活 力、血細(xì)胞吞噬活力等幾種非特異性免疫生理指標(biāo)。還開展 了多糖類免疫活性物質(zhì)的研究,觀察到了一定的免疫促進(jìn)作 用,其中幾種多糖類產(chǎn)品作為免疫增強(qiáng)劑已初步推向市場。 此外,在對蝦健康生理與環(huán)境因子關(guān)系、干擾素或干擾素誘 生劑
24、與對蝦病毒感染關(guān)系等方面也開展了初步的探討。水產(chǎn)養(yǎng)殖病害的綜合防治對于疾病控制極為重要。北歐 的鮭鱒魚養(yǎng)殖的發(fā)展歷史較早,其疾病的防治工作進(jìn)行得較 為深入,他們從苗種免疫等角度加強(qiáng)魚體的抗病力和從養(yǎng)殖 環(huán)境的改良、水質(zhì)調(diào)控、優(yōu)質(zhì)餌料、病原監(jiān)控方面開展了綜 合的健康管理工作。泰國在對蝦的病害方面進(jìn)行的綜合防治 也頗具特色,形成了一套圍繞提高對蝦健康狀況、減少病原 入侵機(jī)會、保證養(yǎng)殖環(huán)境清潔穩(wěn)定等的健康管理技術(shù),使泰 國的對蝦養(yǎng)殖未受到病毒病的干擾,產(chǎn)量躍居世界首位。當(dāng) 前,多種用于水質(zhì)、環(huán)境改良的微生物制劑已在國際市場上 越來越流行,國外水產(chǎn)養(yǎng)殖在起到疾病綜合防治作用的池塘 改造和養(yǎng)殖設(shè)施等方面
25、的固定資產(chǎn)投入已成為擴(kuò)大生產(chǎn)的 首要部分之一。我國養(yǎng)殖魚類和對蝦病害的綜合防治工作也已開展。經(jīng) 過45年的攻關(guān),在對蝦病毒病暴發(fā)依然猖獗的地區(qū),采 用水車式增氧機(jī)、高位水池蓄水式養(yǎng)殖在現(xiàn)階段對蝦養(yǎng)殖中 取得了一定的預(yù)防疾病和實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值的效果。病害綜合防治技 術(shù)重點(diǎn)是通過應(yīng)用免疫技術(shù)、優(yōu)質(zhì)飼料、生態(tài)環(huán)境優(yōu)化和穩(wěn) 定技術(shù)以提高宿主的抗病能力,同時(shí)在苗種、病原、環(huán)境等 方面加強(qiáng)病原控制,以減少感染機(jī)會,達(dá)到對病害的防治目 的。養(yǎng)殖品種的抗病力一直是水產(chǎn)動(dòng)植物病害防治和種質(zhì) 培育研究所共同關(guān)注的問題。由于水產(chǎn)動(dòng)植物增養(yǎng)殖業(yè)的發(fā) 展歷史極短,其種群馴化程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于農(nóng)業(yè)的種植和畜牧 業(yè),從嚴(yán)格意義上來說,
26、目前全世界的水產(chǎn)養(yǎng)殖的各種品種 很大程度上都仍然是野生種群。而由于水相系統(tǒng)的特殊性, 水產(chǎn)動(dòng)植物在家系、品系等的隔離保存技術(shù)方面的難度大大 高于種植和畜牧業(yè),使水產(chǎn)動(dòng)植物抗病育種工作的難度增 加。因此,水產(chǎn)動(dòng)植物抗病育種方面的任何研究和技術(shù)進(jìn)展 都顯得十分可貴。國外對主要魚蝦類進(jìn)行了遺傳多樣性分析,在種群差異 性研究方面工作較為深入,同時(shí)還研究了魚類對某些病原細(xì) 菌或病毒的先天抗性的產(chǎn)生機(jī)理,在水生生物抗病的遺傳力 方面找到了一定的科學(xué)依據(jù)。歐美國家還對鮭鱒魚和對蝦等 水生生物相繼開展了無特定病原 (SPF) 、抗特定病原 (SPR) 和家系選育等方面的研究,以此為基礎(chǔ),相應(yīng)的海水養(yǎng)殖業(yè) 正向
27、高健康系統(tǒng) (High Health System) 發(fā)展。我國在草魚的抗性細(xì)胞的篩選和抗病因子分析進(jìn)行了 初步研究,通過基因轉(zhuǎn)移技術(shù)將團(tuán)頭魴總 DNA 導(dǎo)入草魚受 精卵獲得抗出血病草魚子代及其抗病力分析初步結(jié)果。也已 初步開展了轉(zhuǎn)基因技術(shù)在其它淡水魚類抗病育種方面的應(yīng) 用探索。海洋生物抗病種質(zhì)培育與篩選,國內(nèi)也開展了一些 研究工作,通過定向交配,篩選出的耐高溫、抗腐爛、生長 快、含碘量高的海帶新品系,其養(yǎng)殖范圍已由我國北方擴(kuò)展 到福建沿海,單產(chǎn)量穩(wěn)定提高。國家海洋高技術(shù)研究計(jì)劃 (863 計(jì)劃 )已對對蝦、扇貝、牡蠣、鮑魚、珠母貝、海洋魚 類的多倍體育種進(jìn)行資助,櫛孔扇貝經(jīng)過 2 年的初步選
28、育, 已見明顯效果, 產(chǎn)量提高 20左右, 在出現(xiàn)大面積死亡的海 區(qū),成活率提高 50 ;同一海區(qū)養(yǎng)殖的三倍體櫛孔扇貝試驗(yàn) 群體成活率明顯高于普通的二倍體。中國對蝦高健康種群選 育技術(shù)連續(xù)幾年的研究,階段性成果已通過專家驗(yàn)收,選育 出的高健康群體具有一定的抗逆能力。病害研究的實(shí)驗(yàn)?zāi)P蛯τ趯W(xué)科和技術(shù)的發(fā)展極為重要, 醫(yī)學(xué)和陸生動(dòng)植物已建立了包括動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、組織培養(yǎng)和病原 保藏中心等在內(nèi)的數(shù)百種標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,有力地促進(jìn)了醫(yī)學(xué) 和陸生動(dòng)植物病害研究的發(fā)展,而水生生物標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)?zāi)P?包括組織培養(yǎng)模型、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型和病原庫相對來說為數(shù)極 少。國外建立了 60 余株魚類細(xì)胞系, 有近 40 種病毒采用細(xì) 胞
29、培養(yǎng)分離成功,多數(shù)水生生物的病原細(xì)菌也有標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物 得到保存,已有近交 50 代以上的純系魚。而甲殼類等沒有 傳代細(xì)胞系或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)?zāi)J絼?dòng)物建立,而國外某些權(quán)威實(shí)驗(yàn) 室對對蝦病毒病原已有較為全面的保存。我國長江水產(chǎn)研究所、珠江水產(chǎn)研究所等研究單位在草 魚的組織培養(yǎng)方面已先后建立了 ZC7901 、CIK 、CP88 、PSF 等對草魚出血病病毒敏感的細(xì)胞株,魚類實(shí)驗(yàn)?zāi)J絼?dòng)物的研 究工作正在進(jìn)行,珠江水產(chǎn)研究所已將劍尾魚純化培育到第 18 代,對蝦組織培養(yǎng)的研究也經(jīng)歷了近十年的努力, 但其傳 代細(xì)胞系仍未建立成功。2. 存在問題由于研究經(jīng)費(fèi)不足,且投入過于分散,造成了研究資源 分散而薄弱和研究機(jī)構(gòu)
30、重復(fù)性建設(shè)的局面,使我國整體的水 產(chǎn)病害研究力量薄弱,導(dǎo)致了該領(lǐng)域的一系列缺陷,如研究 者的創(chuàng)新思維受到研究條件局限和經(jīng)費(fèi)短缺的約束,多數(shù)研 究者進(jìn)行的是國內(nèi)外已報(bào)道的工作,造成低水平的重復(fù)研 究。研究工作與實(shí)際生產(chǎn)需要存在一定差距,使研究成果實(shí) 用性能及在生產(chǎn)上的應(yīng)用效果不理想,與國外相比,成果的 實(shí)用化和商品化工作還很不完善。主要水產(chǎn)動(dòng)植物品種的病 害研究水平差距較大,一些養(yǎng)殖品種如對蝦、淡水魚類等的 重大病害研究有較好的基礎(chǔ),但另一些養(yǎng)殖品種如海水魚 類、貝類、藻類等的重大病害研究幾乎還是空白。魚蝦病害 防治化學(xué)藥物的濫用不僅在生產(chǎn)中存在,而且研究中也存 在,只注重藥物的開發(fā),而在藥物進(jìn)
31、入機(jī)體后的藥理學(xué)、代 謝動(dòng)力學(xué)、藥物安全使用等的研究考慮較少。3. 發(fā)展趨勢(1) 病毒學(xué)研究將成為水產(chǎn)動(dòng)物病原生物學(xué)的研究重點(diǎn) 在許多魚蝦貝藻的疾病中,更多的病毒種類將被發(fā)現(xiàn)和 認(rèn)識。除了對病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)、病原性、傳播途徑、核酸組 成以及體外培養(yǎng)等方面開展研究外,病毒的感染機(jī)理、病毒 基因組的結(jié)構(gòu)功能等將成為學(xué)科的前沿研究領(lǐng)域。病原微生 物學(xué)致病因子的分離、克隆與表達(dá)、致病機(jī)理、致病因子產(chǎn) 生的內(nèi)外條件等研究;病原微生物耐藥質(zhì)粒的分離、克隆、 流行規(guī)律、質(zhì)粒消除劑或質(zhì)粒轉(zhuǎn)移抑制劑開發(fā)等也將成為研 究的重點(diǎn);分子生物學(xué)技術(shù)在病原生物的分類鑒定將得到更 為廣泛的應(yīng)用。(2) 疾病的檢疫與病原的快
32、速檢測技術(shù)將規(guī)范化和商品 化國際上正在著手建立水產(chǎn)病害檢疫網(wǎng)絡(luò)和規(guī)范,其相關(guān) 的病原快速檢測技術(shù)將得到不斷完善并規(guī)范化?,F(xiàn)代免疫 學(xué)、分子生物學(xué)和生物化學(xué)等高新生物技術(shù),如核酸探針、 PCR 、熒光抗體檢測技術(shù)、酶聯(lián)免疫技術(shù)等在疾病診斷和病 原生物檢測中將得到廣泛應(yīng)用,技術(shù)的商品化程度將大大提 高。對病原生物核酸序列的掌握為核酸探針和 PCR 引物的 人工合成提供越來越多的便利?;蚬こ炭贵w庫在水生生物 病原的免疫學(xué)技術(shù)方面的應(yīng)用也將顯示出越來越明顯的優(yōu) 勢。借助上述手段,檢測技術(shù)將能精細(xì)到對病原分類分型鑒 定和致病因子的測定。(3) 綠色生物漁藥及免疫防治技術(shù)將進(jìn)一步獲得發(fā)展 基于改善養(yǎng)殖生
33、態(tài)環(huán)境和宿主健康狀況的綠色生物漁 藥或生物制劑在水產(chǎn)中的開發(fā)和應(yīng)用將逐步取代目前藥物 濫用的局面,為水生生物病害防治提供重要的關(guān)鍵技術(shù)及產(chǎn) 品,這類新型漁藥將主要包括有益微生物制劑、 免疫促進(jìn)劑、 疫苗、干擾素、抗菌肽、抗病毒多肽、中草藥制劑等等。對 水生生物的免疫機(jī)制、抗感染機(jī)制、健康生理,病原抗原決 定簇基因結(jié)構(gòu)以及有益微生物區(qū)系等的研究為上述新型漁 藥開發(fā)提供重要理論依據(jù),以基因工程、細(xì)胞工程、發(fā)酵工 程和酶工程為主體的現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用為上述產(chǎn)品的實(shí) 用化生產(chǎn)提供技術(shù)依托。藻類、餌料生物、有益微生物、病 毒等的轉(zhuǎn)基因技術(shù)可能將為藥物使用提供一條嶄新的給藥 途徑。(4) 抗病苗種將成為水
34、產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的主體 提高品種的抗病力將是 21 世紀(jì)品種選育和馴化工作的 重點(diǎn)。家系保存、數(shù)量性狀遺傳選育、病原檢測、抗病力檢 驗(yàn)、遺傳標(biāo)記、遺傳多樣性檢驗(yàn)等技術(shù)將是抗病品種選育和 馴化工作的基礎(chǔ)。轉(zhuǎn)基因技術(shù)在水生植物遺傳育種方面可能 實(shí)現(xiàn)實(shí)用化,轉(zhuǎn)基因技術(shù)在水生動(dòng)物抗病育種的應(yīng)用研究也 將會受到越來越多的關(guān)注。(5) 健康管理技術(shù)將進(jìn)一步加強(qiáng) 在提高苗種健康質(zhì)量和加強(qiáng)對病害的監(jiān)測預(yù)警的同時(shí), 對優(yōu)化養(yǎng)殖系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、保護(hù)養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境、提高餌料質(zhì)量及 其利用率、合理使用新型漁藥和疫苗等將進(jìn)行深入研究,這是可持續(xù)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康管理技術(shù)的核心,也是水產(chǎn)病害防 治研究的重要發(fā)展趨勢。(三)要解決的主要科學(xué)問
35、題1. 水產(chǎn)動(dòng)物病害實(shí)驗(yàn)?zāi)P偷难芯?1) 特種水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)胞庫的建立 在原有魚類細(xì)胞系的工作基礎(chǔ)上,重點(diǎn)建立新興養(yǎng)殖品 種細(xì)胞系,特別是要探索目前國內(nèi)外還沒有成功的對蝦、鋸 緣青蟹細(xì)胞系的建立技術(shù),找到最適培養(yǎng)基和促生長因子等 組織培養(yǎng)條件,以突破甲殼類組織細(xì)胞長期傳代的技術(shù)難 關(guān),進(jìn)而建立其傳代細(xì)胞系。對扇貝、鮑魚、牛蛙等的組織 培養(yǎng)工作也應(yīng)該視其病害研究的工作進(jìn)度,特別是病毒學(xué)研 究的進(jìn)度,盡早開展組織培養(yǎng)的基本緩沖系統(tǒng)、培養(yǎng)基、生 長因子及其細(xì)胞傳代的研究工作。(2) 水生實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化研究 以純系培育到第 18 代的劍尾魚為模型,對其生物學(xué)、 生理學(xué)、免疫學(xué)特性、病毒敏感性等的研究,建立
36、標(biāo)準(zhǔn)化的 水生實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。(3) 水生生物病原庫建立研究 該項(xiàng)研究包括病原的收集整理、分離和純培養(yǎng)、分類鑒 定等一系列病原生物學(xué)研究工作。根據(jù)現(xiàn)代生物學(xué)發(fā)展的要 求,進(jìn)一步開展病原的核酸序列分析、基因結(jié)構(gòu)、特異性核 酸片斷、免疫原性基因等研究,以建立水生生物的病原庫。 這是一項(xiàng)基礎(chǔ)性研究,為以后水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的疾病防治和建 立專家咨詢系統(tǒng)打基礎(chǔ),十分重要。2. 水產(chǎn)動(dòng)物主要疾病的病原生物學(xué)及流行病學(xué)研究(1) 水產(chǎn)動(dòng)物主要疾病的病原生物學(xué)研究 繼續(xù)對對蝦病毒性暴發(fā)病、草魚出血病和主要淡水養(yǎng)殖 魚類出血性敗血癥病原的基因組結(jié)構(gòu)與功能及致病機(jī)理等 進(jìn)行較深層次的研究。 開展對扇貝大面積死亡、 鮑魚膿足
37、病、 對蝦蚤狀幼體綜合癥、海魚弧菌病、海魚病毒病、中華鱉病 毒病、鱖魚病毒病、中華絨螯蟹病毒病、月鱧病毒病、烏龜 病毒病、歐鰻雙極蟲病,蝦蟹聚縮蟲病、魚類粘孢子蟲和微 孢子蟲病等病原的分離鑒定、 致病性和致病條件、 體外培養(yǎng)、 病原生物學(xué)特性及分子生物學(xué)結(jié)構(gòu)等的研究。加強(qiáng)對水產(chǎn)養(yǎng) 殖生物新發(fā)現(xiàn)的疾病或病原的發(fā)生與發(fā)展檢測,及時(shí)確認(rèn)新 病原的的危險(xiǎn)級別,進(jìn)而對新病原進(jìn)行深入的病原生物學(xué)研 究。(2) 水產(chǎn)動(dòng)物主要疾病的流行病學(xué)研究 開展水產(chǎn)動(dòng)物主要疾病流行過程中的病原體、寄主、環(huán) 境三者之間相互作用的動(dòng)力學(xué)研究,探索病原體從寄主到寄 主的傳播以及群體內(nèi)疾病流行的規(guī)律。 研究宿主、 中間宿主、 病
38、原載體等的病原生態(tài)學(xué),掌握水生生物病原生態(tài)學(xué)特征。 研究不同病原在同一類宿主中的分布,掌握病原宏觀的相互 作用規(guī)律;研究病原流行在不同地域和宿主種群中的變異動(dòng) 態(tài),掌握病原流行的發(fā)展趨勢。 重點(diǎn)開展對蝦、 扇貝、 草魚、 中華絨螯蟹等大宗養(yǎng)殖品種主要疾病流行病學(xué)的研究。3. 水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物重大疫病檢疫與監(jiān)測預(yù)警系統(tǒng)的技術(shù)基 礎(chǔ)研究(1) 病原早期快速檢測技術(shù)及檢測試劑盒產(chǎn)業(yè)化技術(shù) 研究水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物主要疾病病原的單克隆抗體、基因工 程抗體、基因克隆、核酸序列等,進(jìn)而發(fā)展用于病原檢測的 免疫學(xué)技術(shù) (如凝集試驗(yàn)、 沉淀試驗(yàn)、 免疫熒光抗體技術(shù)、 酶 聯(lián)免疫技術(shù)、 SPA 免疫檢測技術(shù)、免疫 PCR
39、技術(shù)、免疫轉(zhuǎn) 印技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)等 )、基因探針技術(shù)、 PCR 技術(shù)等, 實(shí)現(xiàn)對水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物病原的準(zhǔn)確靈敏檢測及疫病的早期快 速診斷,將上述技術(shù)向高度敏感性、高度準(zhǔn)確性以及試驗(yàn)電 腦化、反應(yīng)微量化、方法標(biāo)準(zhǔn)化、試劑商品化的方向發(fā)展, 生產(chǎn)出實(shí)用性強(qiáng)的快速診斷試劑盒。(2) 影響疾病流行的關(guān)鍵性生態(tài)環(huán)境因子劃定及其監(jiān)測 技術(shù)重點(diǎn)研究病原體、病原載體生物等在環(huán)境中的消長規(guī) 律,查明生態(tài)環(huán)境因子的變化與上述消長現(xiàn)象的內(nèi)在關(guān)系, 掌握影響病原生物生態(tài)分布的生態(tài)環(huán)境因子;同時(shí)研究宿主 健康與環(huán)境因子變動(dòng)的關(guān)系,掌握影響宿主健康的生態(tài)環(huán)境 因子。針對上述查明的環(huán)境因子,應(yīng)用現(xiàn)代生物學(xué)及理化、 儀器設(shè)備檢
40、測手段,建立快速監(jiān)測技術(shù)。(3) 宿主發(fā)病特征性生理生化指標(biāo)及其檢驗(yàn)技術(shù) 研究從健康狀態(tài)、潛伏感染和發(fā)病狀態(tài)的宿主免疫指 標(biāo)、生理生化指標(biāo)等的檢測入手,掌握關(guān)鍵的發(fā)病特征性指 標(biāo)。采用免疫學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)手段建立相應(yīng)的檢 驗(yàn)技術(shù)。開展群體或區(qū)域水平的苗種或親體的健康及抗病力 檢驗(yàn)4. 免疫防治技術(shù)研究和綠色生物漁藥研制及各類漁藥臨 床檢驗(yàn)和質(zhì)量檢測技術(shù)(1)水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物免疫學(xué)及免疫防治技術(shù)研究 宿主免疫機(jī)能研究是確定主要養(yǎng)殖種類免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu) 和組成,掌握免疫組織細(xì)胞的功能,闡明免疫因子的作用及 揭示免疫應(yīng)答的過程和機(jī)理等。病原體抗原性的研究是明確 引起宿主免疫識別的關(guān)鍵抗原決定簇或表面
41、大分子結(jié)構(gòu),認(rèn) 識參與中和作用的關(guān)鍵抗原及中和反應(yīng)的機(jī)理。對水產(chǎn)動(dòng)物 宿主免疫機(jī)能研究,淡水魚類有一定基礎(chǔ),海水甲殼類剛剛 開始,而爬行類、兩棲類、貝類、海水魚類等較為薄弱甚至 還是空白。對病原體抗原性研究較多的病原體是淡水魚類的 嗜水氣單胞菌,草魚呼腸弧病毒與柱狀曲撓桿菌也有一定的 研究,對蝦的病原細(xì)菌或多糖類物質(zhì)和其它對水產(chǎn)業(yè)造成較 大影響的病原體則研究較少,甚至是空白。免疫防治技術(shù)研 究的重點(diǎn),魚類主要是疫苗保護(hù)技術(shù);而甲殼類和貝類,由 于不存在特異性免疫機(jī)能,主要研究免疫促進(jìn)劑的應(yīng)用技 術(shù)。 魚病防治疫苗有細(xì)胞培養(yǎng)滅活疫苗、 弱毒疫苗、 DNA 疫 苗、亞單位疫苗、基因工程新型疫苗等,
42、目前主要解決疫苗 大規(guī)模制備技術(shù)。疫苗使用方法除已廣泛采用的注射疫苗 外,要加強(qiáng)研究生產(chǎn)上容易應(yīng)用并推廣的浸泡疫苗和口服疫苗。免疫促進(jìn)劑要深入研究作用機(jī)理、對不同生物的免疫促 進(jìn)效能、吸收率、代謝動(dòng)力學(xué)等。(2)綠色生物漁藥的研制及藥物學(xué)研究 加強(qiáng)高效、低毒、無污染、無殘留的綠色生物漁用藥物 的研究,通過基因工程、發(fā)酵工程、生化制備工程技術(shù)等手 段,開發(fā)一系列綠色的微生態(tài)環(huán)境改良劑 (光合細(xì)菌、 消化菌、 放線菌及其它生物活性劑等 )、免疫促進(jìn)劑 (肽聚糖、葡聚糖、 多肽等 )、抗微生物制劑 ( 干擾素、抗菌肽、凝集素、抗病毒 肽等 )、生物防治劑 (病毒制劑、噬菌體制劑、微生物制劑等 ) 及
43、中草藥制劑。開展綠色漁用藥物的方劑學(xué)研究。研制藥物 餌料添加劑、藥物浸浴劑、藥物活性保存復(fù)合制劑等應(yīng)用技 術(shù)。通過藥理學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)及臨床檢驗(yàn)等深入研究,明確 上述生物漁藥防治水產(chǎn)養(yǎng)殖生物疾病的機(jī)理、用法、效果, 并進(jìn)一步改善藥物存在的缺陷,減少或消除存在的毒副作 用。(3)各類漁藥管理的質(zhì)量檢驗(yàn)、臨床檢驗(yàn)及使用跟蹤檢 驗(yàn)技術(shù)針對目前濫用、亂用藥物的狀況,加強(qiáng)水產(chǎn)常用藥物管 理勢在必行。藥物管理包括藥物行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定、藥物質(zhì)量檢 驗(yàn)、臨床檢驗(yàn)、使用跟蹤檢驗(yàn)四個(gè)方面。制訂藥物行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 應(yīng)實(shí)行應(yīng)用藥物的標(biāo)準(zhǔn)化管理。對漁用藥物主要成分的含 量、主要成分應(yīng)有的純度、非藥用成分及副產(chǎn)品的含量、有 害成分的
44、含量、藥物的儲運(yùn)性能、藥物的保質(zhì)期長短、藥物 的形式與包裝等應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)。對藥物的臨床藥效、藥代 動(dòng)力學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、藥物使用對水產(chǎn)品質(zhì)量安全的影 響等應(yīng)進(jìn)行臨床檢驗(yàn)。對藥物使用普及率、藥物非正常使用 率、藥物使用對環(huán)境的影響、藥物貯運(yùn)流通環(huán)節(jié)對藥物質(zhì)量 的影響、藥物的社會經(jīng)濟(jì)學(xué)作用等應(yīng)進(jìn)行漁用藥物的跟蹤檢 驗(yàn)。上述的各項(xiàng)檢驗(yàn)的某些檢驗(yàn)技術(shù)目前還需要建立或完 善,如痕量藥物成分 (包括有效成分和有害成分 )的特異性檢 測技術(shù)、藥物效用的定量檢驗(yàn)技術(shù)、藥代動(dòng)力學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)、 藥物對環(huán)境影響的評價(jià)技術(shù)等。5. 控制水產(chǎn)養(yǎng)殖生物病害大規(guī)模流行的生態(tài)環(huán)境調(diào)控技 術(shù)病害的大規(guī)模流行,環(huán)境起著重要的作
45、用,一方面它使 不同地域的宿主與同種病原有相似的接觸機(jī)會,另一方面它 使宿主的生理?xiàng)l件滿足該種病原感染的要求。因此,對病原 大規(guī)模流行的生態(tài)環(huán)境條件的研究,要從病原在環(huán)境中傳播 的生態(tài)動(dòng)力學(xué)、生態(tài)環(huán)境狀況與宿主生活質(zhì)量及抗病力的關(guān) 系、病蟲害大規(guī)模流行的可能性對區(qū)域環(huán)境生態(tài)容納量的限 制等入手。通過對工廠化養(yǎng)殖、集約式池塘養(yǎng)殖、大水面網(wǎng) 箱或放養(yǎng)等不同養(yǎng)殖方式環(huán)境條件的研究,開發(fā)出影響環(huán)境 理化狀態(tài)、微生物生態(tài)、浮游生物生態(tài)等的微觀生態(tài)環(huán)境調(diào) 控技術(shù);同時(shí)將養(yǎng)殖模式與區(qū)域經(jīng)濟(jì)計(jì)劃結(jié)合,探索區(qū)域性 環(huán)境生態(tài)容納量的宏觀優(yōu)化及調(diào)控技術(shù)。實(shí)現(xiàn)通過生態(tài)環(huán)境 調(diào)節(jié),控制環(huán)境中病原生物量,降低宿主應(yīng)激反應(yīng)
46、及增強(qiáng)宿 主抵抗力。6. 水產(chǎn)養(yǎng)殖生物抗病育種技術(shù)在魚蝦流行病暴發(fā)中觀察到,不同的養(yǎng)殖群體和個(gè)體的 發(fā)病程度有明顯差異,造成差異的原因除環(huán)境因素、營養(yǎng)因 素外,還存在遺傳因素,通過對抗病群體或個(gè)體進(jìn)行遺傳分 析,確認(rèn)其差異的遺傳分子基礎(chǔ)。采用家系選育技術(shù),通過 全人工累代的抗病選育工作,使魚蝦的抗病性狀穩(wěn)定地保持 下來。同時(shí)還可從其它野生或養(yǎng)殖群體中篩選出新的抗病群 體,擴(kuò)大抗病群體的基因池。通過選育的抗病群體的家系間 雜交選育,能進(jìn)一步加強(qiáng)種群的抗病力和改善生長特性。或 通過基因工程抗病育種技術(shù),獲得基因工程抗病品種,在這 方面藻類可能首先取得成功。(四)分階段目標(biāo)和應(yīng)用前景1.分階段目標(biāo)(
47、1)2001 2005 年完成牙鲆、真鯛、鱸魚、東方鲀、鱖魚、歐洲鰻、中華 鱉等細(xì)胞系的建立, 實(shí)現(xiàn) 2 種以上魚類組織培養(yǎng)的長期傳代, 建立 1 株以上魚類的傳代細(xì)胞系。突破對蝦、中華絨螯蟹、 鋸緣青蟹等甲殼類的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),實(shí)現(xiàn) 1 種以上甲殼類細(xì) 胞的連續(xù)傳代培養(yǎng),扇貝、鮑魚等的組織培養(yǎng)工作建立。初 步建立劍尾魚標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,開展其在病毒學(xué)、免疫學(xué)、藥 物學(xué)等方面的應(yīng)用。建立克氏原螯蝦作為對蝦及甲殼類的試 驗(yàn)?zāi)P?。建立扇貝、海水魚類、中華鱉等病原的實(shí)驗(yàn)室條件 下的感染方法。提出建立水生生物的病原庫的可行性報(bào)告。 進(jìn)行對蝦、中華絨螯蟹、櫛孔扇貝、鮑魚、牙鲆、真鯛、鱸 魚、東方鲀、鱖魚、歐洲
48、鰻、月鱧、中華鱉等病原的分離和 鑒定,鑒定并保藏 3 株以上目前已發(fā)現(xiàn)的病毒病原,分離并 鑒定 1 種以上新的水生生物病毒。分離、鑒定并保藏6 株以上的細(xì)菌病原,建立相應(yīng)的快速鑒定技術(shù)。建立魚類、貝類 主要寄生蟲病原,如小瓜蟲、孢子蟲等的離體培養(yǎng)技術(shù)。完成主要水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物 2 種暴發(fā)性疾病病原,如對蝦白 點(diǎn)病病毒、嗜水氣單胞菌等的關(guān)鍵基因結(jié)構(gòu)功能和致病機(jī)理 等研究。分離 1 個(gè)以上病原菌抗性質(zhì)粒,進(jìn)行結(jié)構(gòu)特征、抗 性譜和細(xì)菌變異的分子機(jī)理研究。掌握 3 種以上水生生物的 主要疾病,如對蝦蚤狀幼體綜合癥、中華絨螯蟹病毒病、蝦 蟹聚縮蟲病、扇貝大面積死亡、鮑魚膿足病、海魚弧菌病、 海魚病毒病、鱖魚
49、病毒病、月鱧病毒病、歐鰻雙極蟲病,魚 類粘孢子蟲和微孢子蟲病、中華鱉病毒病等病原的類型、致 病性和致病條件、體外培養(yǎng)、感染特性等病原生物學(xué)關(guān)鍵特 征。掌握主要水產(chǎn)養(yǎng)殖品種(對蝦、中華絨螯蟹、扇貝、牙 鲆、歐鰻、草魚、鱖魚、中華鱉等) 2 種以上病毒病的病原 生物學(xué)、分子流行病學(xué)特征及病原流行的發(fā)展趨勢。建立 5 種主要養(yǎng)殖生物,如對蝦、中華絨螯蟹、扇貝、 鮑魚、鱖魚、鰻魚、中華鱉、牛蛙等的關(guān)鍵病原的免疫學(xué)或 分子生物學(xué)檢測技術(shù),制備 3 種以上病原的檢測試劑盒并實(shí) 現(xiàn)商品化。建立 2 種以上烈性病原的檢疫技術(shù),檢疫技術(shù)與 國際接軌。確定影響 1 種以上疾病,如對蝦暴發(fā)病或扇貝大 面積死亡流行的
50、關(guān)鍵性生態(tài)環(huán)境因子,針對上述查明的環(huán)境 因子建立 1 套以上相應(yīng)的快速監(jiān)測技術(shù)。掌握該疾病發(fā)病的 關(guān)鍵特征性生理指標(biāo),建立 1 套以上相應(yīng)的檢驗(yàn)技術(shù)。利用 上述病原檢測、關(guān)鍵性生態(tài)環(huán)境因子監(jiān)測、關(guān)鍵性發(fā)病指針 性生理指標(biāo)檢驗(yàn)的技術(shù),初步開展群體或區(qū)域水平的病害監(jiān) 測預(yù)警。在甲殼類、貝類、魚類、兩棲類、爬行類等養(yǎng)殖動(dòng)物中 各選擇 1 個(gè)代表種,通過比較免疫學(xué)研究,初步掌握主要養(yǎng) 殖動(dòng)物的免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和組成、免疫組織細(xì)胞的功能、免疫 因子的作用、免疫應(yīng)答的過程等特點(diǎn)。掌握23種當(dāng)前水產(chǎn)養(yǎng)殖中主要病原 (包括病毒、 細(xì)菌、寄生蟲等主要魚類病原 ) 的關(guān)鍵抗原決定簇或表面大分子結(jié)構(gòu)、中和反應(yīng)的關(guān)鍵抗原
51、 及中和反應(yīng)的機(jī)理。進(jìn)一步完善草魚出血病病毒疫苗和嗜水 氣單胞菌疫苗的生產(chǎn)工藝流程和制檢規(guī)程,用基因工程手段 開發(fā) 1 種以上更為安全有效的新疫苗產(chǎn)品,如亞單位疫苗、 DNA 疫苗等,實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。對真鯛、鱸魚、牙鲆、鰻鱺、鱖 魚、牛蛙、中華鱉等疾病有一定研究的主要病原 (包括病毒、 細(xì)菌、 寄生蟲等 ),開展免疫防治研究, 掌握 2 種以上病原的 疫苗免疫保護(hù)效果、疫苗規(guī)模化生產(chǎn)技術(shù)、疫苗應(yīng)用技術(shù), 至少實(shí)現(xiàn) 1 種新的疫苗的產(chǎn)業(yè)化,病毒性疾病的疫苗保護(hù)率 在 70% ,細(xì)菌性疾病的疫苗保護(hù)率在 80% 以上。開發(fā) 2 種 以上綠色的微生態(tài)環(huán)境改良劑 (光合細(xì)菌、 消化菌、 放線菌及 其它生物
52、活性劑等 )、 2 種以上免疫促進(jìn)劑 (肽聚糖、葡聚糖、 多肽等 )、 1 種以上抗微生物制劑 (干擾素、抗菌肽、凝集素、 抗病毒肽等 )、 1 種以上生物防病添加劑、藥物浸浴劑、藥物 活性保存復(fù)合制劑等應(yīng)用技術(shù),明確其防病機(jī)理、用法、效 果。建立 5 種以上常用漁藥成分的質(zhì)量檢測技術(shù)、效用的定 量檢驗(yàn)技術(shù)、藥代動(dòng)力學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)、環(huán)境影響評價(jià)技術(shù)等; 規(guī)范 15 種以上常用漁藥的使用方法,評價(jià)使用效果;初步 明確 5 種以上消毒劑類和抗菌素類藥物對宿主及生態(tài)環(huán)境的 影響;確定水產(chǎn)品質(zhì)量控制中 10 種以上常用的漁藥成分的 殘留量和休藥期。 制訂我國漁藥管理的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、 質(zhì)量檢驗(yàn)、 臨床檢驗(yàn)、使用
53、跟蹤檢驗(yàn)的技術(shù)規(guī)范,為統(tǒng)一管理漁藥生產(chǎn) 提供依據(jù)。以 1 個(gè)養(yǎng)殖場或海灣為基地, 針對 1 種以上關(guān)鍵的疾病, 如對蝦暴發(fā)性流行病或扇貝大規(guī)模死亡開展研究,查明該疾 病的傳播途徑及病原的各種寄生宿主或載體,調(diào)查病原在寄 生宿主或載體的周年存在情況及寄生宿主或載體的生態(tài)變 動(dòng)規(guī)律,調(diào)查病原與其他微生物之間動(dòng)態(tài)消長的種群關(guān)系, 從而掌握病原傳播的生態(tài)動(dòng)力學(xué)。與此同時(shí),通過人工試驗(yàn) 找尋宿主生活質(zhì)量及抗病力與生態(tài)環(huán)境因子的相關(guān)性,并考 察驗(yàn)證上述相關(guān)性在該基地范圍內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。綜合上 述兩方面研究數(shù)據(jù),初步評估病害流行的可能性,以預(yù)測區(qū) 域環(huán)境生態(tài)容納量受病害流行的限制。開發(fā) 2 種以上水質(zhì)微
54、生態(tài)、浮游生物生態(tài)調(diào)節(jié)劑,通過調(diào)節(jié)微生態(tài)和浮游生物生 態(tài)穩(wěn)定環(huán)境理化指標(biāo),從而起到減少宿主應(yīng)激反應(yīng),避免病 害爆發(fā)流行的效果。提出通過生態(tài)調(diào)控手段,減少養(yǎng)殖生態(tài) 環(huán)境中病原攜帶生物量或病原存在機(jī)率的實(shí)用技術(shù)措施,以 至減少傳染源、降低病原的傳播機(jī)會。在示范基地使病害發(fā) 生率降低20%30%。對對蝦、扇貝、草魚等 2 個(gè)以上的自然抗病群體或幸存 群體,進(jìn)行抗病力的遺傳分析,確認(rèn)其差異的遺傳基礎(chǔ),對 其進(jìn)行遺傳差異顯示分析以篩選和克隆 1 個(gè)以上有效的分子 標(biāo)記,初步查明其抗病機(jī)理,分離相關(guān)的抗性因子,克隆其 抗性基因。開展上述抗病群體的家系培育,完成 3 代全人工 累代的抗病選育工作,確認(rèn)抗病性
55、狀的可穩(wěn)定遺傳。用上述 分子標(biāo)記從其它野生或養(yǎng)殖群體中篩選出 1 個(gè)以上新的抗病 個(gè)體,對新個(gè)體完成 1 代以上的家系累代。試驗(yàn)不同家系之 間雜交對抗病性狀的增強(qiáng)和生長的改善作用。分析 1 種以上 抗病基因序列,初步構(gòu)建 1 個(gè)以上重要水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物基因?qū)?入的表達(dá)載體,進(jìn)行其序列分析,為轉(zhuǎn)基因抗病品種培育打 下技術(shù)基礎(chǔ)。(2)2006 2015 年 建立系統(tǒng)的水產(chǎn)動(dòng)物病害研究的實(shí)驗(yàn)?zāi)P蛶?,包括?xì)胞 庫、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物庫、病原庫等。水生生物細(xì)胞庫將形成規(guī)模, 保存有 5 8種水生生物 (包括魚類、 甲殼類、貝類、兩棲類、 爬行類等 )的 1015 株傳代細(xì)胞系, 有 2 株以上的細(xì)胞系可 實(shí)現(xiàn)大規(guī)模的
56、連續(xù)發(fā)酵培養(yǎng),其中主要養(yǎng)殖動(dòng)物的傳代細(xì)胞 系將逐步建立。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物庫有 3 5 種標(biāo)準(zhǔn)化水生實(shí)驗(yàn)動(dòng)物, 并在水生生物病害、免疫、藥物等研究中得到應(yīng)用。水生生 物病原庫收集保存 40 余種歷史和當(dāng)代的國內(nèi)外水生生物主 要病原,其中部分病原進(jìn)行系統(tǒng)的分類鑒定工作。水生生物病害防治工作不斷深入,部分病害逐步得以有 效控制,多數(shù)疾病病原的基因組結(jié)構(gòu)與功能及致病機(jī)理等初 步揭開,疾病流行的動(dòng)力學(xué)過程和病原生態(tài)學(xué)特征已了解。 對新出現(xiàn)的病原,能快速確認(rèn)其危險(xiǎn)級別,掌握病原變異動(dòng) 態(tài),了解流行趨勢,并及時(shí)得到防治。與國際水產(chǎn)疫病檢疫預(yù)報(bào)網(wǎng)絡(luò)連網(wǎng),水產(chǎn)重大疫病檢疫 制度基本完善。對國內(nèi)外 1020 種水產(chǎn)疫病
57、可進(jìn)行快速檢 疫,并開展群體或區(qū)域水平的苗種或親體的健康及抗病力檢 驗(yàn)。20 余種病原的快速檢測試劑盒或檢測儀商品化,實(shí)現(xiàn)主要病原檢測、宿主健康檢驗(yàn)、生態(tài)環(huán)境監(jiān)測,建立初級水產(chǎn) 重大病害監(jiān)測預(yù)警系統(tǒng),該系統(tǒng)可在全國范圍內(nèi)跟蹤5% 以下流行度的病害,并初步預(yù)測該病害的流行趨勢。在不同水產(chǎn)養(yǎng)殖生物免疫組織細(xì)胞的功能、免疫因子的 相互作用、免疫應(yīng)答的分子機(jī)理等比較免疫學(xué)研究基礎(chǔ)上, 初步建立不同水產(chǎn)養(yǎng)殖生物的機(jī)體免疫網(wǎng)絡(luò)理論。掌握宿主 免疫識別的病原關(guān)鍵抗原決定簇、表面大分子結(jié)構(gòu)和參與中 和作用的關(guān)鍵抗原。有 5 10 種不同病毒、細(xì)菌、寄生蟲的 商品化高效疫苗, 近 10 種不同水產(chǎn)養(yǎng)殖生物的免疫促進(jìn)劑, 23 種不同病害的特效應(yīng)急生物漁藥、 系列綠色生物漁藥及 營養(yǎng)免疫劑,在加強(qiáng)宿主抗病力、修復(fù)病害損傷、穩(wěn)定和凈 化
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