食用菌液體菌種生產(chǎn)實(shí)用教案

1、 傳統(tǒng)菌種生產(chǎn)工藝，一般是由試管母種擴(kuò)繁成二級(jí)種、三級(jí)種，生產(chǎn)周期長(zhǎng)、污染率高、成本高、需大量人工、管理困難。液體菌種生產(chǎn)具有純度高、活力強(qiáng)、繁殖快的特點(diǎn)，接種到培養(yǎng)料內(nèi)有流動(dòng)性好、萌發(fā)點(diǎn)多，發(fā)菌迅速(xn s)等特種點(diǎn)。第1頁(yè)/共39頁(yè)第一頁(yè)，共39頁(yè)。 1、工藝更簡(jiǎn)便 固體菌種的生產(chǎn)工藝為一級(jí)試管(shgun)種二級(jí)原種三級(jí)栽培種，而液體菌種則沒(méi)有級(jí)的分別，也就是說(shuō)液體菌種既可以做為母種接原種，也可以做為原種或栽培種直接接栽培袋，簡(jiǎn)化了生產(chǎn)工藝。一、液體(yt)菌種八大優(yōu)勢(shì)第2頁(yè)/共39頁(yè)第二頁(yè)，共39頁(yè)。 生產(chǎn)固體菌種頻繁擴(kuò)接轉(zhuǎn)代，生產(chǎn)中煙薰火燒，使菌絲活力大大降低，極易造成污染。而液體

2、菌種生產(chǎn)需經(jīng)過(guò)篩選(shixun)、提純，屬純菌種；在生產(chǎn)過(guò)程中設(shè)備封閉運(yùn)行，屬純培養(yǎng)。這樣高純度的菌種，固體菌種怎能與之相比呢？ 2、菌種更純第3頁(yè)/共39頁(yè)第三頁(yè)，共39頁(yè)。 采用固體菌種，從制種到出菇一個(gè)周期下來(lái)至少需要45個(gè)月，甚至半年多。而采用液體菌種從制種到菌絲長(zhǎng)滿栽培袋只需15天左右(zuyu)的時(shí)間，從制種到出菇大部分品種只需1個(gè)月，整個(gè)生產(chǎn)周期一般也就是兩個(gè)月。 3、周期(zhuq)更短第4頁(yè)/共39頁(yè)第四頁(yè)，共39頁(yè)。 以前采用固體菌種的栽培戶都知道(zh do)，無(wú)論使用二級(jí)種還是三級(jí)栽培種生產(chǎn)栽培袋，菌種所占的成本都在1角錢以上，而用液體菌種無(wú)論是生產(chǎn)栽培種還是栽培袋，

3、其菌種成本就23分錢，您說(shuō)哪個(gè)更劃算？ 4、成本(chngbn)更低第5頁(yè)/共39頁(yè)第五頁(yè)，共39頁(yè)。 采用固體菌種進(jìn)行食用菌生產(chǎn)，栽培(zipi)袋的污染率大都在810。而采用液體菌種接種后6小時(shí)萌發(fā)，24小時(shí)菌絲布滿培養(yǎng)料面，菌種萌發(fā)速度超過(guò)雜菌生長(zhǎng)速度，沒(méi)有雜菌污染。 5、污染(wrn)更少第6頁(yè)/共39頁(yè)第六頁(yè)，共39頁(yè)。 固體菌種生產(chǎn)需重復(fù)備料、拌料、裝瓶（袋）、滅菌、接種、養(yǎng)菌，而液體菌種整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程都是在一個(gè)罐體內(nèi)完成，按鍵(n jin)操作，既成倍降低了生產(chǎn)、管理費(fèi)用，又節(jié)省人工，輕松制種。 6、操作(cozu)更簡(jiǎn)便第7頁(yè)/共39頁(yè)第七頁(yè)，共39頁(yè)。 采用液體菌種的產(chǎn)品可以比

4、采用固體菌種的早上市2個(gè)月以上(yshng)，早上市與晚上市在效益上差的可就大了。此外，采用液體菌種的栽培袋菌齡短，出菇整齊一致，適合出口要求，在價(jià)格上占優(yōu)勢(shì)。 7、出菇整齊(zhngq)上市早第8頁(yè)/共39頁(yè)第八頁(yè)，共39頁(yè)。 采用固體菌種袋內(nèi)菌絲菌齡不一致，加之受自然條件的制約，需多潮出菇多茬管理，有的沒(méi)出完菇還要越夏或越冬管理。而采用液體菌種養(yǎng)菌時(shí)間短，出菇集中，適合工廠化、標(biāo)準(zhǔn)化全年候生產(chǎn)(shngchn)，代表產(chǎn)業(yè)發(fā)展方向。 8、適宜(shy)工廠化標(biāo)準(zhǔn)化全年候生產(chǎn)第9頁(yè)/共39頁(yè)第九頁(yè)，共39頁(yè)。 任何一種食用菌自身的生長(zhǎng)必須滿足其對(duì)溫度、濕度、需氧量、養(yǎng)分等的需要，同時(shí)必須避免雜

5、菌感染。在深層發(fā)酵技術(shù)上稱之為選擇性發(fā)酵技術(shù)，如啤酒生產(chǎn)技術(shù)當(dāng)屬此例，而白酒生產(chǎn)則是生物菌群發(fā)酵技術(shù)。 液體菌種發(fā)酵設(shè)備包括四大系統(tǒng)，溫控系統(tǒng)由控制器、電熱管等組成；供氣系統(tǒng)由空氣壓縮機(jī)、輸送管道(gundo)、空氣過(guò)濾器等組成；冷卻系統(tǒng)由熱交換器、進(jìn)出水管道(gundo)組成；攪拌系統(tǒng)由射流器、提升管等組成。 二、液體(yt)菌種設(shè)備基本原理 第10頁(yè)/共39頁(yè)第十頁(yè)，共39頁(yè)。 1、溶氧量 液體菌種生產(chǎn)中最關(guān)鍵的是培養(yǎng)液中氧的溶解量，因?yàn)樵诰z生長(zhǎng)過(guò)程中，必須不斷(bdun)的吸收溶解其中的氧氣來(lái)維持自身的新陳代謝，氧氣在液體（水）中的溶解量與壓力、溫度有關(guān)，同時(shí)與培養(yǎng)液的接觸面積、滲透壓

6、有很大的關(guān)系。 因此我們?cè)O(shè)計(jì)發(fā)酵設(shè)備時(shí)有效地解決了這些問(wèn)題，如安裝射流器使氣泡細(xì)碎度增加等。三、液體(yt)菌種生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù) 第11頁(yè)/共39頁(yè)第十一頁(yè)，共39頁(yè)。 技術(shù)的關(guān)鍵就是保證進(jìn)入的空氣無(wú)菌度高，因此必須選擇孔徑小、材料先進(jìn)的過(guò)濾膜。一般細(xì)菌直徑在0.5-5um,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400mu，所以選擇過(guò)濾膜時(shí)應(yīng)綜合考慮以上因素。當(dāng)然(dngrn)如果選的太小，成本將大幅度提高。另外環(huán)境對(duì)于空氣影響很大,在空氣壓縮機(jī)房、制種車間必須保持環(huán)境清潔。 2、空氣(kngq)過(guò)濾第12頁(yè)/共39頁(yè)第十二頁(yè)，共39頁(yè)。 培養(yǎng)液是菌絲生長(zhǎng)發(fā)育的營(yíng)養(yǎng)源，要求營(yíng)養(yǎng)全面(qunmin

7、)均衡。不同的菌種對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求偏重不同。配制原料有糖、麩皮、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培養(yǎng)液時(shí)，先將土豆片、麩皮一起煮熟，將汁液濾出，后加入其它輔料混勻即可。 3、培養(yǎng)液第13頁(yè)/共39頁(yè)第十三頁(yè)，共39頁(yè)。 培養(yǎng)器上端有接種口，也是裝料口，將母種并瓶后加入抑菌劑，而后必須在火焰圈的保護(hù)下倒入罐體內(nèi)(t ni)，要求動(dòng)作快、操作準(zhǔn)確。 4、接種(jizhng) 第14頁(yè)/共39頁(yè)第十四頁(yè)，共39頁(yè)。 如前所述，環(huán)境對(duì)菌種生產(chǎn)影響很大，過(guò)濾器本身不可能把雜菌百分之百地濾掉，減少環(huán)境中的雜菌基數(shù)是非常重要的，液體菌種母種接入到經(jīng)滅菌的培養(yǎng)液中只要能形成對(duì)雜菌的生長(zhǎng)優(yōu)

8、勢(shì)就可以抑制(yzh)雜菌感染，也就是說(shuō)，液體菌種培養(yǎng)不是建立在絕對(duì)無(wú)菌的前提下相反是建立在相對(duì)無(wú)菌的前提下。就此意義上說(shuō)，保持環(huán)境清潔，減少空氣中雜菌基數(shù)，對(duì)于提高菌種培養(yǎng)成功率意義較大。 5、環(huán)境(hunjng) 第15頁(yè)/共39頁(yè)第十五頁(yè)，共39頁(yè)。 工藝流程圖： 空氣壓縮過(guò)濾 配料裝罐滅菌冷卻接種培養(yǎng)液體種 試管斜面(ximin)種 三角瓶顆粒種 四、 液體(yt)菌種生產(chǎn)流程 第16頁(yè)/共39頁(yè)第十六頁(yè)，共39頁(yè)。液體菌種培養(yǎng)基的主要(zhyo)原料是土豆、麥麩、玉米粉、黃豆粉等第17頁(yè)/共39頁(yè)第十七頁(yè)，共39頁(yè)。液體菌種沒(méi)有(mi yu)“級(jí)”的分別，制種時(shí)間平均3天左右第18頁(yè)

9、/共39頁(yè)第十八頁(yè)，共39頁(yè)。液體菌種的接種采用(ciyng)接種槍，兩人配合每小時(shí)可接800袋以上第19頁(yè)/共39頁(yè)第十九頁(yè)，共39頁(yè)。接種后6小時(shí)萌發(fā)(mngf)，24小時(shí)菌絲布滿培養(yǎng)料面，菌種萌發(fā)(mngf)速度比雜菌快，因此沒(méi)有雜菌污染機(jī)會(huì)第20頁(yè)/共39頁(yè)第二十頁(yè)，共39頁(yè)。采用液體菌種，栽培(zipi)袋養(yǎng)菌時(shí)間僅為15天左右第21頁(yè)/共39頁(yè)第二十一頁(yè)，共39頁(yè)。采用液體菌種菌齡短，出菇整齊，比采用固體(gt)菌種的上市早第22頁(yè)/共39頁(yè)第二十二頁(yè)，共39頁(yè)。用液體(yt)菌種制做菌種，菌絲潔白粗壯，同樣獲得好效益第23頁(yè)/共39頁(yè)第二十三頁(yè)，共39頁(yè)。液體菌種為工廠化標(biāo)準(zhǔn)化全

10、年候生產(chǎn)食用菌打下(d xi)了良好的基礎(chǔ)第24頁(yè)/共39頁(yè)第二十四頁(yè)，共39頁(yè)。 配料時(shí)先將土豆去皮切片，與麩皮混合后用不銹鋼鍋煮熟并取汁，在將輔料KH2PO4、MgSO4等溶入，混勻后裝入罐中加熱，至121.3并維持40分鐘左右進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后用冷水冷卻至培養(yǎng)溫度(wnd)，而后將并瓶后的三角瓶種接上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)根據(jù)不同的菌種，設(shè)定適宜的溫度(wnd)。 第25頁(yè)/共39頁(yè)第二十五頁(yè)，共39頁(yè)。 培養(yǎng)期間應(yīng)注意觀察，并做好記錄。包括溫度、壓力、氣流量、排出氣體的氣味等。如遇到停電，排氣閥自動(dòng)關(guān)閉或人工關(guān)閉來(lái)保持罐中處于正壓狀態(tài)(zhungti)。來(lái)電后重新啟動(dòng)，并打開(kāi)排氣閥繼續(xù)培養(yǎng)

11、。培養(yǎng)過(guò)程中，可隨時(shí)無(wú)菌操作采樣分析，幾天后待菌球密度合適（從視鏡觀察）即可接種。 第26頁(yè)/共39頁(yè)第二十六頁(yè)，共39頁(yè)。 液體菌種的搖瓶培養(yǎng)，其主要設(shè)備是搖床(搖瓶機(jī))，有往復(fù)式和旋轉(zhuǎn)式兩種。將液體培養(yǎng)基裝入500毫升三角瓶?jī)?nèi)，每瓶裝量為100毫升，加入(jir)15粒左右的小玻璃珠或小塊的玻璃碎片，用棉塞封口后置1.5千克壓力下滅菌30分鐘，取出冷至30時(shí)接種。每瓶接入1.52平方厘米的斜面菌種一塊，讓其懸浮于液體培養(yǎng)基表面且使菌絲朝上，在適溫下靜置培養(yǎng)48小時(shí)。當(dāng)菌絲長(zhǎng)至液體培養(yǎng)基中時(shí)，置搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。往復(fù)式搖床振蕩頻率為80100次分，振幅610厘米；旋轉(zhuǎn)式搖床偏心距為4毫米，

12、振蕩頻率為150220轉(zhuǎn)分。旋轉(zhuǎn)式搖床因旋轉(zhuǎn)速度過(guò)快，菌絲球一般較大，且菌絲球表面絨毛狀菌絲少，一般不能用作菌種。五、液體(yt)菌種的搖瓶培養(yǎng)第27頁(yè)/共39頁(yè)第二十七頁(yè)，共39頁(yè)。 液體菌種接種的培養(yǎng)液的培養(yǎng)溫度一般控制在2426，培養(yǎng)時(shí)間7296小時(shí)。培養(yǎng)結(jié)束(jish)后，因菌種不同，培養(yǎng)液出現(xiàn)不同色澤。 平菇、金針菇的培養(yǎng)液呈淺黃色；香菇、猴頭的培養(yǎng)液呈棕色； 而蜜環(huán)菌則會(huì)有熒光現(xiàn)象； 木耳的培養(yǎng)液呈青褐色、粘稠、有香甜味。 若出現(xiàn)培養(yǎng)液混濁，并伴有腐敗及酸味，多為細(xì)菌性污染所致。 液體菌種需鏡檢后方可應(yīng)用于生產(chǎn)。第28頁(yè)/共39頁(yè)第二十八頁(yè)，共39頁(yè)。 搖床培養(yǎng)的液體菌種數(shù)量較少，

13、一般只適用(shyng)于固體菌種的接種。也可作為發(fā)酵罐種源，或接種于三角瓶?jī)?nèi)，每瓶接種菌液10毫升，繼續(xù)進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)。因菌絲球正處于旺盛生長(zhǎng)狀態(tài)，菌絲球分散性好，能縮短搖瓶培養(yǎng)時(shí)間，快者2天即可終止培養(yǎng)。 液體菌種在4左右溫度下可保存12個(gè)月，在1520室溫下可保存710天，使用時(shí)對(duì)接種成功率、產(chǎn)量均無(wú)不良影響。第29頁(yè)/共39頁(yè)第二十九頁(yè)，共39頁(yè)。 1. 用于原種或栽培種生產(chǎn) 液體菌種可以作為母種和原種使用。就目前國(guó)內(nèi)現(xiàn)有水平來(lái)說(shuō)，用深層發(fā)酵(f jio)方法大規(guī)模生產(chǎn)液體菌種還有困難，大多用搖瓶培養(yǎng)或小型通氣發(fā)酵(f jio)方法生產(chǎn)，以液體菌種代替母種較為理想。用液體菌種制出的原種，

14、生活力強(qiáng)，上下菌齡一致，用于接種栽培種，定植快，污染率低。用搖瓶方法培養(yǎng)液體菌種，周期短，可連續(xù)多次擴(kuò)大培養(yǎng)(一般不超過(guò)5代)，對(duì)生長(zhǎng)速度、菌種質(zhì)量均無(wú)不良影響。六、液體(yt)(yt)菌種使用方法第30頁(yè)/共39頁(yè)第三十頁(yè)，共39頁(yè)。 2. 用于磚狀菌種生產(chǎn) 在棉籽BFQ殼等培養(yǎng)料內(nèi)，按50%100%的量加入液體菌種，拌勻后，裝入消毒的紙盒、木箱、塑料箱內(nèi)，用塑料薄膜包好，37天菌絲充分發(fā)育連接成菌塊，作為栽培(zipi)種使用?？捎糜谄焦?、鳳尾菇、金頂蘑生產(chǎn)，不適用于香菇、黑木耳。第31頁(yè)/共39頁(yè)第三十一頁(yè)，共39頁(yè)。 3. 用于菌床播種 床栽：適用于平菇、鳳尾菇、香菇栽培，每平方米用菌

15、液3001000毫升，常用量為500毫升，以穴播法最好，條播次之，撒播最差，將穴播與撒播結(jié)合效果最好。栽培平菇、鳳尾菇20天菌絲滿床，2025天可以出菇，香菇壓塊栽培，在播種后40天出菇。 袋栽：將液體菌種由袋口注入或用混播法拌料。液體菌種用量為30%50%，播種后一般2635天出菇。 瓶栽：每千克干料用100毫升液體菌種，栽培平菇、鳳尾菇、草菇(co )、猴頭、木耳等，1525天菌絲滿瓶。第32頁(yè)/共39頁(yè)第三十二頁(yè)，共39頁(yè)。 1.液體菌種的科研、生產(chǎn)、制種和工廠化的大規(guī)模生產(chǎn)單位；2.用于多種微生物的培養(yǎng); 3.含食用菌活性成分的保健食品生產(chǎn)； 4.各種( zhn)奶制品的活性因子生產(chǎn);

16、 5.生產(chǎn)菌絲體,提取生物活性成分來(lái)生產(chǎn)各種( zhn)食品添加劑; 6.微生物發(fā)酵工程來(lái)制取農(nóng)藥、醫(yī)藥、激素等； 7.適用于科研單位、菌業(yè)公司、工業(yè)企業(yè)和從事食用菌栽培人員的菌類生產(chǎn)。 七、 應(yīng)用領(lǐng)域 第33頁(yè)/共39頁(yè)第三十三頁(yè)，共39頁(yè)。 用液體菌種培養(yǎng)器生產(chǎn)一批菌種僅需3天，是使用固體菌種周期的1/10。由于液體菌種具有流動(dòng)性，因而接入的菌種可流散(lisn)在不同的部位萌發(fā)生長(zhǎng)。接種后6小時(shí)左右即可看到菌種萌發(fā)變白，24小時(shí)就可吃料生長(zhǎng)，使雜菌沒(méi)有浸染機(jī)會(huì)。在25的條件下，養(yǎng)菌18天-20天即可長(zhǎng)滿袋，生長(zhǎng)期是使用固體菌種的50%。 八、用液體(yt)菌種栽培杏鮑菇 第34頁(yè)/共39

17、頁(yè)第三十四頁(yè)，共39頁(yè)。 杏鮑菇需要較豐富的碳源和氮源，特別是氮源越豐富菌絲生長(zhǎng)越好，產(chǎn)量也越高。 配方是：木屑65%、棉籽殼10%、麥麩(mi f)23%、石膏1%、石灰1%。 第35頁(yè)/共39頁(yè)第三十五頁(yè)，共39頁(yè)。 水分：在栽培杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)階段，要求空氣相對(duì)濕度60%左右，子實(shí)體形成和發(fā)育階段要求相對(duì)濕度在85%-90%。子實(shí)體發(fā)育和生長(zhǎng)階段，水分管理極為重要。初期菇房相對(duì)濕度要保持在90%左右，而當(dāng)子實(shí)體發(fā)育期間和接近采收時(shí)，濕度可控制在85%左右，這樣(zhyng)有利于延長(zhǎng)子實(shí)體的保質(zhì)期。不要把水噴到菇體上，特別在氣溫升高時(shí)，容易使子實(shí)體發(fā)黃，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)感染雜菌，造成腐爛，影響產(chǎn)量和質(zhì)量。第36頁(yè)/共39頁(yè)第三十六頁(yè)，共39頁(yè)。 溫度：杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)最適宜的溫度25左右，原基形成的最適溫度是10-15。子實(shí)體發(fā)育的溫度因不同菌種而異，一般適溫為15-21。 光線：杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)階段不需光線，子實(shí)體形成和發(fā)育需要散射光。 通風(fēng)：杏鮑菇菌絲生長(zhǎng)和子實(shí)體發(fā)育都需要新鮮的空氣，但在菌絲生長(zhǎng)階段，瓶（袋）中積累的二氧化碳對(duì)菌絲生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。隨著菌絲的生長(zhǎng)，培養(yǎng)料中的菌絲排出的二氧化碳逐漸增多，使培養(yǎng)料中二氧化碳濃度上升，能明顯地刺激