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文檔簡介
1、微生物資料(2010屆整理版)緒論:一、微生物是一些肉眼看不見的微小生物的總稱。是存在于自然界的一群體形微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼看不見,必須藉助光學(xué)或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、數(shù)千倍甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。· 個體微?。?lt;0.1mm),借助顯微鏡觀察形體; · 結(jié)構(gòu)簡單:簡單多細(xì)胞,單細(xì)胞或非細(xì)胞· 低等:進(jìn)化地位低。類群:· 原核類· 細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體和藍(lán)細(xì)菌(舊稱藍(lán)藻或藍(lán)綠藻)· 真核類· 真菌(酵母菌和霉菌)、原生動物和顯微藻類,· 非細(xì)胞類· 病毒、類病毒和朊病毒等。
2、 · 自然界的微生物分為五大類。· 細(xì)菌、放線菌、真菌、病毒和支原體立克次氏體。· 支原體、立克次氏和衣原體是介于細(xì)菌和病毒之間的原核生物。 二微生物有哪五大共性?其中最基本的是哪一個?為什么?微生物特點(diǎn):1.體積小,面積大;2.吸收多,轉(zhuǎn)化快;3.生長旺,繁殖快;4.適應(yīng)強(qiáng),易變異5.分布廣,種類多。其中,體積小面積大最基本。因?yàn)橐粋€小體積面積大系統(tǒng),必然有一個巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,并由此而產(chǎn)生其余4個共性。三、 柯赫法則(Kochs postulates):1. 某一種微生物,當(dāng)被懷疑是病原體時,它一定伴隨著病害而存在。2.
3、 必須能自原寄主分離出這種微生物,并培養(yǎng)成為純培養(yǎng)。3. 用已純化的純培養(yǎng)微生物,人工接種寄主,必須能誘發(fā)與原來病害相同病害。4. 必須自人工接種發(fā)病的寄主內(nèi),能重新分離出同一病原微生物并培養(yǎng)成純培養(yǎng)。 第一章:原核生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能名詞解釋1. 肽聚糖:又稱黏肽、胞壁質(zhì)或黏質(zhì)復(fù)合物,是真菌細(xì)胞壁中的特有成分。2. 磷壁酸:是結(jié)合在G+細(xì)菌細(xì)胞壁上的一種酸性多糖,主要成分為甘油磷酸或核糖醇磷酸。3L型細(xì)菌:應(yīng)專指那些實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺損菌株。4原生質(zhì)體:指在條件人為下,用溶菌酶除盡原有細(xì)胞壁或用青霉素抑制新生細(xì)胞壁合成后,所得到的僅有一層細(xì)胞膜包裹的圓
4、球狀滲透敏感細(xì)胞,他們只能用等滲或則高滲培養(yǎng)液保持或維持生長。5球狀體:指還殘留了部分細(xì)胞壁(尤其是G-細(xì)菌外膜層)的圓球形原生質(zhì)體。6羧酶體:又稱羧化體,是存在于一些自養(yǎng)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物,主要起CO2的固定作用。7糖被:包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的膠狀物質(zhì),稱為糖被 。主要成分是多糖、多肽或蛋白質(zhì),尤以多糖居多。產(chǎn)生糖被是微生物的一種遺傳特性,其菌落特征及血清學(xué)反應(yīng)是細(xì)菌分類鑒定的指標(biāo)之一。 糖被按其有無固定層次、層次厚薄可細(xì)分為莢膜(大莢膜)、微莢膜、粘液層和菌膠團(tuán)。8.莢膜:是某些細(xì)菌在細(xì)胞壁外包圍的一層粘液性物質(zhì),一般由糖和多肽組成。(指在細(xì)胞壁上有固定層次的
5、糖被組成部分)9. “詮菌”試驗(yàn):該實(shí)驗(yàn)是設(shè)法把單毛菌鞭毛的游離端用相應(yīng)抗體牢固地“栓”在載玻片上,然后在光鏡下觀察該細(xì)胞的行為,結(jié)果發(fā)現(xiàn),該菌只能在載玻片上不斷打轉(zhuǎn)而未做伸縮“揮動”,因而肯定了鞭毛“旋轉(zhuǎn)論”的正確性。10.芽孢:是指某些細(xì)菌在生長發(fā)育后期于細(xì)胞內(nèi)部形成的一個圓形、橢圓形或圓柱形的抗逆性休眠體。11.菌落:單個(或聚集在的一團(tuán))微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長群體。思考題:1.試述革蘭氏染色的機(jī)制。革蘭氏染色機(jī)理:通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+由于其細(xì)胞壁
6、較厚、肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密,故遇脫色劑乙醇處理時,因失水而使網(wǎng)孔縮小,在加上它不含類脂,故乙醇的處理不會溶出縫隙,因此能把結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi),使其保持紫色。反之,G-細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄和交聯(lián)度差,遇脫色劑乙醇后,以類脂為主的外膜迅速溶解,這時薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出,因此細(xì)胞退成無色。這時,在經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,就使G-細(xì)菌呈紅色,而G+細(xì)菌則仍保留最初的紫色?;静襟E:涂片、晾干、結(jié)晶紫色染法、水洗、媒洗、水洗、脫色、復(fù)染、水洗、晾干、鏡檢。革蘭氏染色步驟:初染:加草酸銨結(jié)晶紫一滴,約一分鐘,水洗。媒染:滴加碘液沖去殘水,
7、并覆蓋約一分鐘,水洗。脫色:將載玻片上面的水甩凈,并襯以白背景,用95酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現(xiàn)紫色時為止,約2030秒鐘,立即用水沖凈酒精。復(fù)染:用番紅液染12分鐘,水洗。鏡檢:干燥后,置油鏡觀察。革蘭氏陰性菌呈紅色,革蘭氏陽性菌呈紫色。革蘭氏染色的原理: G菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障,當(dāng)乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔障縮小,故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。G菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,番紅復(fù)染后呈紅色。 2什么是缺壁細(xì)菌?試列表比較4類缺壁細(xì)菌的形成、特點(diǎn)和實(shí)際應(yīng)用。缺壁細(xì)菌:在
8、自然界長期進(jìn)化中和實(shí)驗(yàn)室菌種的自發(fā)突變中都會產(chǎn)生少數(shù)缺細(xì)胞壁的種類,或是用人為的方法通過抑制新生細(xì)胞壁的合成或?qū)ΜF(xiàn)成細(xì)胞壁進(jìn)行酶解而獲得人工缺壁的細(xì)菌。3.試對G+細(xì)菌的鞭毛和螺旋體的周質(zhì)鞭毛在結(jié)構(gòu)、著生方式和運(yùn)動特點(diǎn)等方面作一比較。結(jié)構(gòu)著生方式運(yùn)動特點(diǎn)G+細(xì)菌的鞭毛基體,鉤形鞘,鞭毛絲生長在G+細(xì)菌的表面,波曲的蛋白質(zhì)附屬物旋轉(zhuǎn)螺旋體的周質(zhì)鞭毛(不明)螺旋方式纏繞在螺旋體細(xì)胞的表面快速旋轉(zhuǎn)4. 請繪出G+和G-細(xì)菌細(xì)胞壁的主要構(gòu)造,并簡要說明其異同。 答:一:G+菌和G-菌都含有肽聚糖,但肽聚糖的構(gòu)造不同,G+有肽橋,而G-因含有m-DAP,故沒有特殊的肽橋,肽聚糖網(wǎng)套稀疏。 二:G+菌細(xì)胞
9、壁的主要成分是肽聚糖和磷壁酸,含少量或不含脂質(zhì)和蛋白質(zhì),肽聚糖層厚,且層次多,而G-菌的主要成分則是脂質(zhì)和蛋白質(zhì),肽聚糖層薄且層次少三:G-菌細(xì)胞壁層次則相對于G+菌多,成分也復(fù)雜,機(jī)械強(qiáng)度弱于G+5.什么上菌落?試討論細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間的相關(guān)性。答:菌落即單個(或聚集在一起的一團(tuán))微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、 有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長群體。因不同形態(tài)、生理類型的細(xì)菌,在其菌落形態(tài)、構(gòu)造等特征上也有許多明顯的反映,故細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間存在明顯的相關(guān)性現(xiàn)象,如,無鞭毛、不能運(yùn)動的細(xì)菌尤其是球菌通常都形成較小、較厚、邊緣圓整的半球狀菌
10、落;長有鞭毛、運(yùn)動能力強(qiáng)的細(xì)菌一般形成而平坦、邊緣多缺刻、不規(guī)則的菌落;有糖被的細(xì)菌,會長出大型、透明、蛋清狀的菌落;有芽孢的細(xì)菌往往長出外觀粗糙、“干燥”、不透明且表面多褶的菌落等等。第二章:真核微生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能2.“9+2”型鞭毛: 中央有兩個中央微管,外圍繞一圈9個微管二聯(lián)體3溶酶體:真核細(xì)胞中的一種細(xì)胞器;為單層膜包被的囊狀結(jié)構(gòu),直徑約0.0250.8微米;內(nèi)含多種水解酶,專司分解各種外源和內(nèi)源的大分子物質(zhì)。4:子實(shí)體:是由真菌的營養(yǎng)菌絲和生殖菌絲纏結(jié)而成具有一定形狀的產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。5:分生孢子頭:產(chǎn)生無性孢子的簡單子實(shí)體。思考題:1. 試列表比較真核生物的各種細(xì)胞器在形態(tài)、構(gòu)造、
11、數(shù)量和功能方面的差別。P53比較項(xiàng)目內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體高爾基體溶酶體微體線粒體葉綠體形態(tài)囊腔細(xì)管系小顆粒狀扁平膜囊和小泡囊球形小囊泡球形小囊泡桿菌狀或囊狀扁球狀或扁橢圓球構(gòu)造有膜,分兩種:糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上有核糖體粒無膜,表層為蛋白質(zhì),內(nèi)芯為RNA有膜,由數(shù)個扁平膜囊和大小不等的囊泡組成有膜,在小囊泡內(nèi)含數(shù)十種酸性水解酶有膜,在小囊泡內(nèi)含氧化酶和過氧化酶有內(nèi)外兩層膜,內(nèi)膜可形成嵴,其上有大量的基粒ATP合酶復(fù)合體,基質(zhì)內(nèi)含TCA酶系、70S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA由內(nèi)外兩層膜以及類囊體和基質(zhì)構(gòu)成,基質(zhì)內(nèi)含70S核糖體和雙鏈環(huán)狀DNA等,類囊體數(shù)量多,常疊成基粒數(shù)量數(shù)量少數(shù)量多且變化大數(shù)量少數(shù)量較多且變化
12、大數(shù)量較多且變化大數(shù)量較多且變化大僅存在于光合生物中,不同生物細(xì)胞中的數(shù)量變化大功能糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成和運(yùn)送蛋白質(zhì),光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成磷脂合成蛋白質(zhì)濃縮蛋白質(zhì),合成糖蛋白和脂蛋白,協(xié)調(diào)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境,有包裝、分泌功能執(zhí)行細(xì)胞內(nèi)的消化功能對脂肪酸進(jìn)行氧化對葡萄糖等能源物質(zhì)進(jìn)行氧化磷酸化以產(chǎn)生ATP等能量利用CO2和H2O進(jìn)行光合作用,以合成葡萄糖和釋放O22、試列表比較真菌孢子的類型、主要特點(diǎn)和代表種屬。真菌孢子的類型和特點(diǎn) 孢子名稱染色體倍數(shù)外形數(shù)量外或內(nèi)生其他特點(diǎn)實(shí)例無性孢子游動孢子n圓、梨、腎形多內(nèi)有鞭毛,能游動壺菌孢囊孢子n近圓形多內(nèi)水生型有鞭毛根霉,青霉分生孢子n極多樣極多外少數(shù)為多細(xì)胞曲霉,青霉
13、節(jié)孢子n柱形多外各孢子同時形成白地霉厚垣孢子n近圓形少外在菌絲頂或中間形成總狀毛霉芽孢子n近圓形較多外在酵母細(xì)胞上出芽形成假絲酵母擲孢子n鐮,豆,腎形少外成熟時從母細(xì)胞射出擲孢酵母有性孢子卵孢子2n近圓形1至幾內(nèi)厚壁,休眠德氏腐霉接合孢子2n近圓形1內(nèi)*厚壁,休眠,大,深色根霉,毛霉子囊孢子n多樣一般8內(nèi)長在各種子囊內(nèi)脈孢菌,紅曲霉擔(dān)孢子n近圓形一般4外長在特有的擔(dān)子上蘑菇,香菇3.什么是鎖狀聯(lián)合?其生理意義如何?試圖示其過程。P64答:鎖狀聯(lián)合即形成狀突起而連合兩個細(xì)胞的方式不斷使雙核細(xì)胞分裂,從而使菌絲尖端向前延伸(圖略)第三章:病毒和亞病毒因子名詞解釋:1、病毒粒:指的是成熟的、結(jié)構(gòu)完整
14、的和有感染性的單個病毒。2、包膜:位于核殼體最外圍的一層脂質(zhì)膜,具典型的單位膜結(jié)構(gòu)。4、包含體:表達(dá)外源基因的宿主細(xì)胞5、噬菌斑:由于噬菌體的作用而使布滿細(xì)菌細(xì)胞的菌苔上,出現(xiàn)肉眼可見的一個個透亮的小圓斑。6、烈性噬菌體:噬菌體在短時間內(nèi)能連續(xù)完成吸附侵入增殖(復(fù)制 與生物合成)成熟(裝配)裂解(釋放)五個階段而實(shí)現(xiàn)其繁殖的噬菌體,稱為烈性噬菌體。7、裂解性周期:經(jīng)20min后可釋放約100個子代 入噬菌體的周期。9、噬菌斑形成單位:若將噬菌體按一定倍數(shù)稀釋,通過噬斑計(jì)數(shù),可測知一定體積內(nèi)的噬斑形成單位數(shù)目,即噬菌體的數(shù)量。10、一步生長曲線:定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線11、裂解量:
15、平均每個宿主細(xì)胞裂解后產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)。12、溶源性:當(dāng)溫和噬菌體侵入宿主細(xì)胞后,DNA整合到宿主基因組上, 隨著宿主 DNA 復(fù)制而復(fù)制,但不合成蛋白質(zhì),宿主細(xì)胞不裂解,繼續(xù)進(jìn)行正常的分裂現(xiàn)象。13、前噬菌體:整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組。14、擬病毒:擬病毒又稱類類病毒或病毒的病毒,是指包含在“真病毒”的顆粒中的小的環(huán)狀RNA分子,是有缺陷的類病毒。15、朊病毒:又稱蛋白侵染子,是一類不含核酸的傳染性蛋白質(zhì)分子。問答題:1、 什么是烈性噬菌體?試簡述其裂解性增殖周期。噬菌體在短時間內(nèi)能連續(xù)完成吸附侵入增殖(復(fù)制 與生物合成)成熟(裝配)裂解(釋放)五個階段而實(shí)現(xiàn)其繁殖的噬菌體,稱為烈
16、性噬菌體。裂解性生活史:尾絲與宿主細(xì)胞特異性吸附;病毒核酸侵入宿主細(xì)胞內(nèi);病毒核酸和蛋白質(zhì)在宿主細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制和合成;病毒核酸和蛋白質(zhì)裝配;大量子代噬菌體裂解釋放到宿主細(xì)胞外。2、什么是一步生長曲線?它可分哪幾個期?各期又有何特點(diǎn)?(課件)用高倍稀釋或抗血清辦法來中和未吸附病毒,使病毒感染數(shù)降低后,達(dá)到適量的病毒懸液,然后感染標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件下的高濃度的細(xì)胞溶液,在不同時間段采樣,測定溶液感染效價,以時間為X軸,效價為Y軸,得到曲線,稱為一步生長曲線。(作業(yè))定量描述烈性噬菌體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線,稱為一步生長曲線。它包括潛伏期:細(xì)胞內(nèi)已經(jīng)開始裝配噬菌體粒子并可用電鏡觀察到;裂解期:宿主細(xì)胞迅速裂解溶
17、液中噬菌體粒子急劇增多;平穩(wěn)期:感染后的宿主細(xì)胞已全部裂解,溶液中的噬菌體效價達(dá)到最高點(diǎn)。3、什么是溶源菌?它有何特點(diǎn)?如何檢出溶源菌?溶源菌即溶源性細(xì)菌,是含有溫和噬菌體 DNA的宿主細(xì)菌。溶源性細(xì)菌的特性:(1)自發(fā)裂解:在沒有任何外來噬菌體感染的情況下,極少數(shù)溶源細(xì)胞中的原噬菌體偶爾也可恢復(fù)活動,進(jìn)行大量的復(fù)制成為營養(yǎng)噬菌體核酸,并接著成熟為噬菌體粒子,引起宿主細(xì)胞裂解。(2)誘發(fā)裂解:理化因子如紫外線、絲裂霉素 C 等處理溶源性細(xì)菌能導(dǎo)致原噬菌體活化(3)免疫性:溶源性細(xì)菌對其本身產(chǎn)生的噬菌體或外來的同源噬菌體不敏感。(4)復(fù)愈性:溶源性細(xì)胞有時消失了其中的原噬菌體,變成非溶源性細(xì)胞,
18、(5)溶源轉(zhuǎn)變 檢驗(yàn)是否為溶源菌的方法,是將少量溶源菌與大量的敏感性指示菌相混合,然后與瓊脂培養(yǎng)基混勻后倒入一個平板,經(jīng)培養(yǎng)后溶源菌就一一長成菌落。由于溶源菌在細(xì)胞分裂過程中有極少數(shù)個體會引起自發(fā)裂解,其釋放的噬菌體可不斷侵染溶源菌菌落周圍的指示菌菌苔,于是就形成了一個個中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈圍著的這種獨(dú)特噬菌斑。補(bǔ)充:1、 病毒。P67特點(diǎn):個體極小。大多數(shù)直徑小于150納米。專性寄生。沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu),只有一種核酸類型,化學(xué)組成和繁殖方式都較簡單。沒有或缺乏完整的酶和能量合成系統(tǒng),也沒有核糖體。在寄主細(xì)胞內(nèi)的病毒對各種化學(xué)藥劑和抗菌素不敏感(對干擾素敏感)。經(jīng)提純的病毒結(jié)晶能保持侵
19、染力大小:可以通過細(xì)菌過濾器較大的病毒直徑為300-450nm,較小的病毒直徑僅為18-22nm 病毒:細(xì)菌:真菌1:10:100病毒的形態(tài)和大小必須借助電子顯微鏡。2.病毒粒的對稱體制。P68螺旋對稱:煙草花葉病毒 二十面體對稱:腺病毒 復(fù)合對稱:T偶數(shù)噬菌體第四章 微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基名詞解釋:1、 PTS系統(tǒng):由熱穩(wěn)載體蛋白(Hpr)、酶1、酶2這三部分組成,用于運(yùn)送各種糖類、核苷酸、丁酸、和腺嘌呤等物質(zhì)的系統(tǒng)。2、 生長因子:一類調(diào)節(jié)微生物正常代謝所必須的、但不能從簡單的碳、氮源自行合成的所需極微量的有機(jī)物。3、 單純擴(kuò)散:又稱被動運(yùn)送,指營養(yǎng)物質(zhì)依靠疏水性雙分子層的細(xì)胞膜內(nèi)外物質(zhì)濃度
20、差,不需要載體蛋白參與下,順濃度梯度運(yùn)輸,不消耗代謝能,無特異性的被動物質(zhì)運(yùn)輸方式。4、 促進(jìn)擴(kuò)散:借助特異性載體蛋白,在消耗能量的情況下,將營養(yǎng)物質(zhì)從高濃度向低濃度梯度運(yùn)輸?shù)奶禺愋晕镔|(zhì)運(yùn)輸方式。5、 主動擴(kuò)散:指需要消耗能量并且需借助細(xì)胞膜上特異性載體蛋白的構(gòu)象變化,將營養(yǎng)物質(zhì)從膜外的低濃度溶質(zhì)運(yùn)輸?shù)礁邼舛鹊倪\(yùn)送方式。6、 基因移位:指被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)在膜特異性載體蛋白參與和消耗能量的條件下,進(jìn)行化學(xué)修飾(定向磷酸化),并以被修飾的形式進(jìn)入細(xì)胞的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。7、 培養(yǎng)基:是人工配制的,適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。8、 選擇性培養(yǎng)基:指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)
21、、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。9、 鑒別性培養(yǎng)基:是在培養(yǎng)基中加入某種特殊試劑或化學(xué)藥品,培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化,從而區(qū)別不同類型的微生物。9.伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基(EMB):即EMB培養(yǎng)基,是為了觀察某種糖被分解后是否產(chǎn)生酸的一種培養(yǎng)基。問答題:1、 試以能源為主、碳源為輔對微生物的營養(yǎng)方式進(jìn)行分類,并舉例說明之。 有機(jī)物:化能異養(yǎng)微生物(絕大多數(shù)原核生物,全部真菌和原生動物) 化學(xué)物質(zhì)(化能營養(yǎng)型)能源 無機(jī)物:化能自養(yǎng)微生物(硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌、鐵細(xì)菌、氫細(xì)菌、硫磺細(xì)菌)光能自養(yǎng)微生物(紫硫細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌、綠硫細(xì)菌、藻類) 輻射能(光能營養(yǎng)性) 光能異養(yǎng)微生物(紅螺菌科的細(xì)菌)2、 什么是自
22、養(yǎng)微生物?它有幾種類型?試舉例說明。答:自養(yǎng)微生物是能以CO2為主要或唯一碳源。自養(yǎng)微生物一般分為光能自養(yǎng)型(有光和色素能進(jìn)行光合作用)例如:藍(lán)細(xì)菌 和 化能自養(yǎng)型(利用化學(xué)能,將二氧化碳等無機(jī)物合成自身需要的有機(jī)物)例如:硝化細(xì)菌。3、 試述通過基因移位運(yùn)送營養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制。其運(yùn)送機(jī)制只要靠磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)酶(PTS)即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)進(jìn)行。此系統(tǒng)由24種蛋白質(zhì)組成,運(yùn)送某一具體糖至少需要4種蛋白質(zhì)參與。其特點(diǎn)是每輸入一個葡萄糖分子,就要消耗一個ATP的能量。具體運(yùn)送分為兩步進(jìn)行:(1)熱穩(wěn)定性載體蛋白(heat stable carrier protein ,HPr) 的激
23、活:酸烯醇式丙酮酸的高能磷酸基團(tuán)通過酶I激活HPr(2)糖磷酸化后運(yùn)入膜內(nèi):糖分子與膜上底物特異性酶IIc結(jié)合,接著被由逐級傳遞來的磷酸基團(tuán)激活,最后通過IIc送到細(xì)胞質(zhì)中。補(bǔ)充:1、 微生物的六類營養(yǎng)要素及其功能。P87碳源:能滿足微生物生長繁殖所需碳元素。氮源:提供微生物生長繁殖所需氮元素。能源:能為微生物生命活動提供最初能量來源。生長因子:調(diào)節(jié)微生物正常代謝所必需無機(jī)鹽:為微生物提供除碳、氮源以外的營養(yǎng)物質(zhì)水:維持各種生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,良好的溶劑,參與化學(xué)反應(yīng)2、 營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式。P92a) 單純擴(kuò)散(不需能量,被動)b) 促進(jìn)擴(kuò)散(不需能量,被動)c) 主動運(yùn)送(需能量,
24、主動)d) 基團(tuán)移位(需能量,主動)主動運(yùn)送、基團(tuán)移位在營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸中占主導(dǎo)地位。本章第三節(jié)要求掌握,多看看。第五章 微生物的新陳代謝名詞解釋:1. ED途徑:又稱糖酵解途徑或己糖二磷酸途徑。是多種微生物所具有的代謝途徑。2. 呼吸:是一種最普遍又最重要的生物氧化或產(chǎn)能方式,其特點(diǎn)是底物按常規(guī)方式脫氫后,脫下的氫(常以還原力H形式存在)經(jīng)完整的呼吸鏈又稱電子傳遞鏈傳遞,最終被外源分子氧接受,產(chǎn)生了水并釋放出ATP形式的能量的生物氧化過程。3. 發(fā)酵:廣義指任何利用好氧性或厭氧性微生物來生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物或食品、飲料的一類生產(chǎn)方式。狹義:在無氧等外源氫受體的條件下,底物脫氫后產(chǎn)生的還原力未經(jīng)呼吸
25、鏈傳遞而直接交給內(nèi)源性中間代謝產(chǎn)物接受,以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。4. 同型酒精發(fā)酵:釀酒酵母能夠通過EMP途徑進(jìn)行同型酒精發(fā)酵,即由EMP途徑代謝產(chǎn)生的丙酮酸經(jīng)過脫羧放出CO2,同時生成乙醛,乙醛接受糖酵解過程中釋放的NADH+H+被還原成乙醇異型酒精發(fā)酵:一些細(xì)菌能夠通過HMP途徑進(jìn)行異型乳酸發(fā)酵產(chǎn)生乳酸、乙醇和CO2等。5. Stickland反應(yīng)、某些專性厭氧細(xì)菌如梭狀芽孢桿菌在厭氧條件下生長時,以一種氨基酸作為氫的供體,進(jìn)行氧化脫氨,另一種氨基酸作氫的受體,進(jìn)行還原脫氨,兩者偶聯(lián)進(jìn)行氧化還原脫氨。這其中有ATP生成。6. 紫膜:為嗜鹽性細(xì)菌在厭氧條件下和明亮處生長時
26、于細(xì)胞膜上形成的斑狀紫色膜。7. 兩用代謝途徑:凡在分解代謝和合成代謝中均具有的功能的代謝途徑。代謝物回補(bǔ)順序 不同微生物在不同碳源下,代謝回補(bǔ)順序不同,與EMP途徑和TCA循環(huán)的補(bǔ)償途徑很多,但是他們都圍繞EMP中的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和TCA中的草酰乙酸(OA)這兩種關(guān)鍵性中間代謝產(chǎn)物來進(jìn)行。8、固氮酶:一種能夠?qū)⒎肿拥€原成氨的酶。9.Calvin 循環(huán):又稱核酮糖二磷酸途徑、還原性戊糖磷酸途徑,C3 cycle 。在一切光能自養(yǎng)生物,此反應(yīng)不需要光,可以在暗處進(jìn)行,也稱暗反應(yīng)。綠色植物廣泛存在。存在的微生物種類8. 轉(zhuǎn)肽作用:P143(了解):將亞單位末端的D-Ala-D-Ala
27、拆開,第四個氨基酸(D-Ala) 的游離氨基與另一亞單位的五甘氨酸的游離羧基形成肽鍵而形成甘氨酸五肽橋的交聯(lián)形式,另一個D-Ala釋放。 問答題:1. 什么是乙醛酸循環(huán)?試述它在微生物生命活動中的重要生理功能。乙醛酸循環(huán):在異檸檬酸裂解酶的催化下,異檸檬酸被直接分解為乙醛酸,乙醛酸又在乙酰輔酶A參與下,由蘋果酸合成酶催化生成蘋果酸,蘋果酸再脫氫生成草酰乙酸的過程。它是TCA循環(huán)的一條回補(bǔ)途徑,可使TCA循環(huán)不僅僅具有高效產(chǎn)能功能,而且還兼有可為許多重要生物合成反應(yīng)提供有關(guān)中間代謝物的功能。2. 試列表說明固氮酶兩個組分的特點(diǎn)。比較項(xiàng)目固二氮酶(組分)固二氮酶還原酶(組分)鐵分子有有鉬分子有無活
28、性中心鐵鉬輔因子電子活化中心功能絡(luò)合、活化和還原N2傳遞電子到組分上對O2敏感性較敏感極敏感3、使用簡圖(不用分子式)描繪肽聚糖合成的3個階段,并指出其中有哪些代謝抑制劑及其作用部位。簡圖在P141圖5-42抑制因子 抑制部位環(huán)絲氨酸 細(xì)胞質(zhì)中Park核苷酸過程中合成D-丙胺酰-D-丙氨酸兩步反應(yīng)萬古霉素 細(xì)胞膜上由太聚糖類脂到磷酸類脂的過程桿菌肽 細(xì)胞膜上由二磷酸類脂脫P(yáng)i生成一磷酸類脂的過程青霉素 細(xì)胞膜外轉(zhuǎn)肽酶的轉(zhuǎn)肽作用過程30、青霉素、環(huán)絲氨酸、萬古霉素、桿菌肽為何只能抑制代謝旺盛的細(xì)菌?其抑制機(jī)制如何?原因:青霉素抑制肽聚糖的合成過程,形成破裂的細(xì)胞壁,代謝旺盛的細(xì)菌才存在肽聚糖的合
29、成,因此此時有青霉素作用時細(xì)胞易死亡。作用機(jī)制:青霉素破壞肽聚糖合成過程中肽尾與胎橋間的轉(zhuǎn)肽作用。補(bǔ)充:1. 底物脫氫的四條途徑。P107Ø EMP途徑(Embden-Meyerhof-Parnas pathway)· 又稱糖酵解途徑(glycolysis)、己糖二磷酸途徑(hexose diphoshate pathway)Ø HMP途徑(hexose monophosphate pathway )· 又稱己糖一磷酸途徑、己糖一磷酸支路、戊糖磷酸途徑(pentose phosphate pathway)、磷酸葡萄糖酸途徑(phosphate gluco
30、nate pathway )、WD途徑(Warburg-Dickens pathway)。Ø ED途徑(Entner-Doudoroff pathway)· 又稱2-酮-3-脫氧-6-磷酸葡萄糖酸(KDPG)途徑Ø TCA循環(huán)(Tricarboxylic acid cycle)· 即三羧酸循環(huán),又稱Krebs循環(huán)或檸檬酸循環(huán)(citric acid cycle)2. 遞氫和受氫。P114根據(jù)遞氫特點(diǎn)(氫受體的性質(zhì)不同)把生物氧化分為呼吸、無氧呼吸和發(fā)酵。3. 無氧呼吸類型:(1)無機(jī)鹽呼吸:硝酸鹽呼吸,硫酸鹽呼吸,硫呼吸,鐵呼吸,碳酸鹽呼吸(2)有機(jī)物呼
31、吸:延胡索酸呼吸。4. 發(fā)酵。P117按產(chǎn)物分的發(fā)酵類型· 根據(jù)葡萄糖無氧發(fā)酵產(chǎn)物可以分為5類:乙醇發(fā)酵、乳酸發(fā)酵、丁酸型發(fā)酵、丙酸型發(fā)酵和混合酸發(fā)酵同型酒精發(fā)酵:酵母在無氧條件下,通過EMP途徑,即葡萄糖 丙酮酸 乙醛 乙醇的過程,稱型發(fā)酵,又稱同型酒精發(fā)酵(Saccharomyces cerevisiae 釀酒酵母 )細(xì)菌酒精發(fā)酵:細(xì)菌通過ED途徑進(jìn)行,即葡萄糖 丙酮酸 乙醛 乙醇的過程,產(chǎn)生2分子乙醇,稱細(xì)菌(同型)酒精發(fā)酵。5. 底物水平磷酸化。P1236. 自身微生物產(chǎn)ATP的三種方式。P1247. 代謝物回補(bǔ)順序。P131· 代謝物回補(bǔ)順序:補(bǔ)救途徑 、添補(bǔ)反應(yīng)
32、 、代謝物補(bǔ)償途徑能補(bǔ)充兩用代謝途徑中因合成而消耗的中間產(chǎn)物的那些反應(yīng)。 · 不同微生物在不同碳源下,代謝回補(bǔ)順序不同,與EMP途徑和TCA循環(huán)的補(bǔ)償途徑很多,但是他們都圍繞EMP中的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)和TCA中的草酰乙酸(OA)這兩種關(guān)鍵性中間代謝產(chǎn)物來進(jìn)行。8. 自養(yǎng)微生物的CO2固定途徑。P133自養(yǎng)微生物在生物氧化(氧化磷酸化、發(fā)酵、光合磷酸化)中獲取的能量主要用來固定CO2。· 固定途徑有4條:1. Calvin 循環(huán)2. 厭氧乙酰-CoA途徑3. 逆向TCA途徑4. 羥基丙酸途徑9. 生物固氮的六要素。P138a) ATP的供應(yīng):NN存在3個共價鍵,極其
33、穩(wěn)定。把N2還原為2NH3需要消耗大量 b) 的ATP(N2:ATP=1:1824)。c) 還原力H 及其傳遞載體i. N2:H=1:8,大量還原力H 必須以NADP(H)H形式提供。ii. 氫供體:H2、丙酮酸、甲酸、異檸檬酸等。iii. 電子載體:鐵氧還蛋白(Fd)或黃素氧還蛋白(Fld)。d) 還原底物 N2:NH3存在時會抑制固氮作用e) 鎂離子f) 嚴(yán)格的厭氧微環(huán)境g) 固氮酶(Nitrogenase)10. 肽聚糖的生物合成。P1411、 在細(xì)胞質(zhì)中的合成UDP-胞壁酸五肽(Park核苷酸)A、由葡萄糖合成N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸:UDP是第一個載體 B、由N-乙酰胞壁酸合成
34、Park核苷酸:以尿嘧啶二磷酸(UDP)作為糖載體 ,逐步加上氨基酸生成“park” 核氨酸-UDP-NAM-五肽,順序?yàn)長-Ala, L-Ala,L-Lys,D-Ala,D-Ala ,其中D-Val-D-Val為環(huán)絲氨酸(惡唑霉素)阻斷。2、 細(xì)胞膜中“Park”核苷酸合成肽聚糖單體· 載體:類脂載體細(xì)菌萜醇是一種含有C55類異戊二烯醇(含11個異戊二烯單位)物質(zhì),與N-乙酰胞壁酸分子連接,接上肽橋,使糖中間產(chǎn)物出現(xiàn)強(qiáng)的疏水性,將肽聚糖單體轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外的細(xì)胞壁的生長點(diǎn)。類脂載體還參與胞外多糖、脂多糖的合成(磷壁酸、纖維素、幾丁質(zhì)、甘露聚糖等)· UDP-NAM-五肽轉(zhuǎn)至
35、膜上,與脂質(zhì)載體(細(xì)菌萜醇:C55類異戊二烯醇)結(jié)合,釋放出NAM-五肽焦磷脂,在膜內(nèi)側(cè)與UDP-NAG (NAG: N-乙酰葡萄糖胺)結(jié)合,構(gòu)成肽聚糖單體(雙糖亞單位)。并在第三位的Lys 上接上5甘氨酸。· 細(xì)菌萜醇是第二個載體。 3、在細(xì)胞膜外的合成A 肽聚糖單體(亞單位)轉(zhuǎn)移至細(xì)胞壁的長點(diǎn)上,萬古霉素、桿菌肽抑制轉(zhuǎn)移。· 糖肽類抗生素7肽的第1、2、3、6位酰胺鍵的氨基部位,第4位酰胺鍵的羰基部位分別與細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖末端D-Ala-D-Ala的相反電荷部位結(jié)合而形成氫鍵,通過抑制細(xì)菌細(xì)胞壁生物合成的轉(zhuǎn)糖基作用(肽聚糖的延伸) 和轉(zhuǎn)肽作用(交聯(lián))而阻遏細(xì)胞壁的合成,
36、最終導(dǎo)致細(xì)菌死亡。B 多糖鏈的伸長(橫向連接)和相鄰多糖鏈相聯(lián)(縱向連接):· 肽糖單體+引物(68肽糖單位)多糖鏈橫向延伸1雙糖單位。 肽聚糖單體與引物(個肽聚糖單體)相連, 即轉(zhuǎn)糖基化作用(),形成-1,4 糖苷鍵。 通過轉(zhuǎn)肽酶作用( transpeptidation),將亞單位末端的D-Ala-D-Ala拆開,第四個氨基酸(D-Ala) 的游離氨基與另一亞單位的五甘氨酸的游離羧基形成肽鍵而形成甘氨酸五肽橋的交聯(lián)形式,另一個D-Ala釋放。 第六章:微生物的生長及其控制名詞解釋:1.平板菌落計(jì)數(shù)法:是依據(jù)活菌在固體培養(yǎng)基中(內(nèi))形成菌落的原理而設(shè)計(jì)的一種活菌計(jì)數(shù)方法。1522Cf
37、u(菌落形成單位):把稀釋好的一定量菌樣通過澆注或涂布的方法,讓微生物單細(xì)胞一一分散在瓊脂平板上(內(nèi)),待培養(yǎng)后,每一個活細(xì)胞形成一個單菌落。1523同步生長:利用同步培養(yǎng)的手段使細(xì)胞群體中個體處于分裂步驟一致的生長狀態(tài)稱為同步生長。1534生長曲線:定量描述舉行液體培養(yǎng)基中微生物群體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線5生長速率常數(shù):微生物每小時分裂的次數(shù) 1536代時:細(xì)胞每分裂一次所需的時間,又叫世代時間、曾代時間。7.連續(xù)培養(yǎng):指向培養(yǎng)容器中連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)液,使微生物的液體培養(yǎng)物長期維持穩(wěn)定、高速生長狀態(tài)的一種溢流培養(yǎng)技術(shù),故又稱開放培養(yǎng)。1578.單(分)批培:又稱密閉培養(yǎng),指微生物在一定容積的培養(yǎng)
38、基中,經(jīng)過培養(yǎng)一段時間后,最后一次性地收獲培養(yǎng)物的培養(yǎng)方式。9.滅菌:采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長繁殖能力的措施,稱為滅菌。10.消毒:就是消除毒害,是一種采用較溫和的理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體或動植物有害的病原菌或非目標(biāo)微生物,而對被消毒的對象基本無害的措施。17211.加壓蒸汽滅菌法:12.熱死溫度:指的是一定時間內(nèi)(10min)殺死某微生物(水懸浮液群體)所需要的最低溫度。13梅拉特反應(yīng):在高溫作用下,溶液中氨基化合物(氨基酸、肽、蛋白質(zhì)等)中的游離氨基與羰基化合物(糖 類)中的羰基相互反應(yīng)而產(chǎn)生深褐色產(chǎn)物的復(fù)雜反應(yīng)。問答題:1.平板菌落計(jì)
39、數(shù)法有何優(yōu)缺點(diǎn)?試對澆注平板法和涂布平板法作一比較。P1522. 延滯期有何特點(diǎn)?如何縮短延滯期?答:特點(diǎn):a.生長速率常數(shù)為零;b.細(xì)胞形態(tài)變大或增大;c.細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高,原生質(zhì)呈嗜堿性。d.合成代謝活躍;e.對外界不良條件的反應(yīng)敏感。 縮短延滯期:a. 以對數(shù)期的菌體作種子菌 ;b. 適當(dāng)增大接種量 :一般采用3%8%的接種量,根據(jù)生產(chǎn)上的具體情況而定,最高不超過1/10。c. 培養(yǎng)基的成分:種子培養(yǎng)基盡量接近發(fā)酵培養(yǎng)基 。3. 指數(shù)期有何特點(diǎn)?處于此期的微生物有何應(yīng)用? 答:特點(diǎn):1.第一生長速率常數(shù)最大、代時最短 2. 細(xì)胞進(jìn)行平衡成長,故菌體個部分的成分十分均勻
40、3. 酶系活躍,代謝旺盛 是用作代謝、生理等研究的良好材料,是增殖噬菌體的最適宿主,也是發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料。4. 穩(wěn)定期為何會到來?有何特點(diǎn)? 答:形成原因:a.營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡;b.營養(yǎng)物的比例失調(diào);c.酸、醇、毒素等有害代謝產(chǎn)物的積累;d.PH、氧化還原電勢等物理化化條件的變化。 特點(diǎn):a.生長速率常數(shù)為零;b.菌體產(chǎn)量達(dá)到最高;c.活菌數(shù)相對穩(wěn)定;d.細(xì)胞開始積累糖原、異染顆粒等內(nèi)含物;e.芽孢在這個時期形成;f.有些微生物在此時形成次生代謝產(chǎn)物。5. 什么是高密度培養(yǎng),如何實(shí)現(xiàn)好氧菌的高密度培養(yǎng)?答:是指微生物在液體培養(yǎng)中細(xì)胞群體密度超過常規(guī)培養(yǎng)10倍以上的生長
41、狀態(tài)或培養(yǎng)技術(shù)。方法主要有:1選取最佳培養(yǎng)基成分和各成分含量2適時補(bǔ)料3提高溶解氧的濃度4防止有害代謝產(chǎn)物的生成 5.保持適當(dāng)?shù)膒H。6. 利用加壓蒸氣對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時,常帶來哪些不利影響?如何避免?答:在加壓蒸汽滅菌的同時,高溫,尤其是長時間的高溫除對培養(yǎng)基中的淀粉成分有促進(jìn)糊化和分解等有利影響外,一般會對培養(yǎng)基的成分帶來很多不利影響:形成沉淀物、破壞營養(yǎng),提高色澤、改變培養(yǎng)基的pH、降低培養(yǎng)基濃度。避免方法:1、采用特殊加熱滅菌法2、過濾除菌法3、其他方法 176頁7. .影響加壓蒸汽滅菌的主要因素有哪些?在實(shí)踐中應(yīng)如何正確對待?滅菌物體含菌量:含菌量越高需要滅菌的時間越長滅菌鍋內(nèi)空氣排
42、出程度:鍋內(nèi)空氣要全部排盡滅菌對象pH:pH<6.0易死亡;pH在6.0-8.0之間不易死亡滅菌對象的體積:大容積培養(yǎng)基滅菌時必須延長滅菌時間加熱與散熱速度:會影響培養(yǎng)基成分的破壞程度,應(yīng)適當(dāng)控制。補(bǔ)充:1.微生物的生長規(guī)律。P1532.滅菌。P172第七章:微生物的遺傳變異和育種名詞解釋:1. 飾變:指外表的修飾性改變,意即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平上的表型變化。2. 附加體:3. F質(zhì)粒:決定E.coli 性別并有轉(zhuǎn)移能力的質(zhì)粒4. Col質(zhì)粒:又稱大腸桿菌素質(zhì)?;虍a(chǎn)大腸桿菌素因子,是可編碼一種對大腸桿菌素免疫的蛋白的質(zhì)粒1975. 細(xì)菌素:是許多細(xì)菌產(chǎn)生的抑
43、制或殺死其它近緣細(xì)菌或同種不同菌株的代謝產(chǎn)物,它是由質(zhì)料編碼的蛋白質(zhì),且不像抗生素那樣具有很廣的殺菌譜,所以稱為細(xì)菌素。1976. 大腸桿菌素:是一類由大腸桿菌某些菌株所產(chǎn)生的細(xì)菌素,具有通過抑制復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯或能量代謝等方式而專一的殺死它種腸道菌或同種其他菌株的能力。大腸桿菌素是由Col質(zhì)粒編碼。7營養(yǎng)缺陷型:野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后,由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變,因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長的突變菌株。8. 艾姆斯試驗(yàn):是一種利用細(xì)菌營養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡便方法。9. 瓊脂塊培養(yǎng)法:P21210. 基本培養(yǎng)基:僅能滿足某種微生物的
44、野生型菌株生長所需要的最低成分的組合培養(yǎng)基。11完全培養(yǎng)基:可滿足某微生物一切營養(yǎng)缺陷型菌株?duì)I養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基。12補(bǔ)充培養(yǎng)基:凡只能滿足相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型突變株生長需要的組合或半組合培養(yǎng)基,符號為A或B。13. 原氧型:營養(yǎng)缺陷型突變菌株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株,其營養(yǎng)要求在表型上與野生型相同14. 生長譜法:指在混有供試菌的平板表面點(diǎn)加微量營養(yǎng)物,觀察營養(yǎng)物的周圍有否長菌來確定該供試菌的營養(yǎng)要求的一種快速、直觀的方法。15. 轉(zhuǎn)化:受體菌直接吸收供體菌的DNA片段而獲得后者部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)化作用。16.轉(zhuǎn)化因子:17. 轉(zhuǎn)導(dǎo):通過缺陷噬菌體為媒介,把供體細(xì)胞的小
45、片段DNA攜帶到受體細(xì)胞中,通過交換與整合,使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象,稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)18. 普遍轉(zhuǎn)導(dǎo):通過極少數(shù)完整缺陷噬菌體對供體菌基因組上任何小片段DNA進(jìn)行“誤包”,而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象,稱為普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)。19.完全轉(zhuǎn)導(dǎo):噬菌體病毒外殼把完全不含自身DNA的供體DNA“誤包”成完全缺陷型噬菌體。當(dāng)其感染寄主后,寄主細(xì)胞不能被溶源化,不顯示其對噬菌體的免疫性,以及發(fā)生溶菌裂解和產(chǎn)生正常的噬菌體后代。P21920:流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo):經(jīng)轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的媒介而獲得了供體菌DNA片段的受體菌,如果這段外源DNA在其內(nèi)既不進(jìn)行交換、整合和復(fù)制,也不迅速消失,而僅表現(xiàn)穩(wěn)定的轉(zhuǎn)錄、翻譯和性狀表達(dá),這一現(xiàn)象
46、就稱流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)。21.局限轉(zhuǎn)導(dǎo):指通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中,并與后者的基因組整合、重組,形成局限轉(zhuǎn)導(dǎo)子的現(xiàn)象。問答題:1. 抗生素法和菌絲過濾法為何能“濃縮”營養(yǎng)缺陷型菌株? 抗生素法:抗生素(青霉素)能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的生物合成,可殺死能正常生長繁殖的野生型細(xì)菌但無法殺死處于休止?fàn)顟B(tài)的營養(yǎng)缺陷型細(xì)菌。菌絲過濾法:適用絲狀真菌和放線菌。其原理是在基本培養(yǎng)基中,野生型菌株的孢子能萌發(fā)成菌絲,而營養(yǎng)缺陷型的孢子則不能。將誘變劑處理后的孢子放在基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)后,過濾,重復(fù)數(shù)遍,可去除野生型菌株。2. 什么叫準(zhǔn)性生殖?試以蕁麻青霉為例,說明利用準(zhǔn)性生殖進(jìn)行半知菌類真菌
47、雜交育種的一般操作。敘述真菌準(zhǔn)性生殖的過程。答:準(zhǔn)性生殖:是一種類似于有性生殖,但比它更為原始的兩性生殖方式,這是一種在同種而不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合,他可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。1.菌絲融合:在形態(tài)無區(qū)別、遺傳型有差別的同種微生物不同菌株的體細(xì)胞(單倍體)的菌絲間接觸融合。發(fā)生頻率極低。 2.形成異核體:菌絲融合后,發(fā)生質(zhì)配,使兩個單倍體核集中到同一細(xì)胞中,形成了雙相的異核體。3.雜合二倍體的形成:異核體兩個不同細(xì)胞核發(fā)生核融合(核配),產(chǎn)生雙倍體雜合子核。頻率非常低。雙倍體核一旦形成,就會很穩(wěn)定,并分裂產(chǎn)生更多的雙倍體核。 4.體細(xì)胞交換:在有絲分裂中,雙倍體核中
48、同源染色體間偶爾也會發(fā)生交聯(lián),幾率也很低,但同樣會產(chǎn)生染色體重組,體細(xì)胞交換即體細(xì)胞中染色體間的交換,也稱有絲分裂交換。5.單倍體化:雙倍體雜合子的遺傳性狀不穩(wěn)定,進(jìn)行有絲分裂時,核內(nèi)的染色體偶爾發(fā)生交換和單倍體化,形成具有新性狀的單倍體雜合子。補(bǔ)充:1飾變。P187指外表的修飾性改變,意即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)變化而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平上的表型變化。2典型質(zhì)粒簡介。P196P1983. 基因突變。P198 P2004艾姆斯試驗(yàn)。P2105.三類突變株的篩選方法。P2126.基本培養(yǎng)基。P2157.E.coil的四種接合型菌株。P2228.準(zhǔn)性雜交。P226第八章:微生物的生態(tài)名詞解釋:1. 正常菌群:生活在健康動物各部分、數(shù)量大、種類較穩(wěn)定、一般能發(fā)揮有益作用的微生物種群。1482. 富營養(yǎng)化:水體中N、P等營養(yǎng)元素大量增加,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過通常的含量,結(jié)果導(dǎo)致原有生態(tài)系統(tǒng)的破壞,使藻類和某
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