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文檔簡介
1、選擇:1HPLC是哪種色譜的簡稱( C ) A離子交換色譜 B.氣相色譜 C.高效液相色譜 D.凝膠色譜2針對配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是( C )A.凝膠過濾 B.離子交換層析C.親和層析 D.紙層析3鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是( B )A.降低蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)B.中和電荷,破壞水膜C.與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白D.調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液pH到等電點(diǎn)4從組織中提取酶時(shí),最理想的結(jié)果是( C )A.蛋白產(chǎn)量最高B.酶活力單位數(shù)值很大C.比活力最高D.米氏常數(shù)Km最小5適合于親脂性物質(zhì)的分離的吸附劑是( B )A活性炭 B.氧化鋁 C.硅膠 D.磷酸鈣6下列哪項(xiàng)酶的特性對利用酶作為親和層析固定相
2、的分析工具是必需的?( B )A.該酶的活力高B.對底物有高度特異親合性C.酶能被抑制劑抑制D.最適溫度高E.酶具有多個(gè)亞基7用于蛋白質(zhì)分離過程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是( C )A離子交換色譜 B.親和色譜 C.凝膠過濾色譜 D.反相色譜8蛋白質(zhì)分子量的測定可采用( C )方法。A離子交換層析 B.親和層析 C.凝膠層析 D.聚酰胺層析9人血清清蛋白的等電點(diǎn)為4.64,在pH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電,清蛋白質(zhì)分子向(A)A :正極移動(dòng);B:負(fù)極移動(dòng);C:不移動(dòng);D:不確定。10使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑( D )A:氯化鈉;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸銨11凝膠色譜分離的依據(jù)是( B
3、 )。A、固定相對各物質(zhì)的吸附力不同 B、各物質(zhì)分子大小不同C、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分配系數(shù)不同 D、各物質(zhì)與專一分子的親和力不同12下列哪一項(xiàng)是強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂的活性交換基團(tuán)( A )A 磺酸基團(tuán)(-SO3H) B 羧基-COOH C 酚羥基C6H5OH D 氧乙酸基-OCH2COOH13依離子價(jià)或水化半徑不同,離子交換樹脂對不同離子親和能力不同。樹脂對下列離子親和力排列順序正確的有( A )。A、Fe3+Ca2+Na+ B、Na+Ca2+Fe3+C、Na+Cs+Rb+ D、Cs+Rb+Na+14在蛋白質(zhì)初步提取的過程中,不能使用的方法( C )。A、雙水相萃取 B、超臨界流體萃取
4、 C、有機(jī)溶劑萃取 D、反膠團(tuán)萃取15在液膜分離的操作過程中,( B )主要起到穩(wěn)定液膜的作用。A、載體 B、表面活性劑 C、增強(qiáng)劑 D、膜溶劑16離子交換法是應(yīng)用離子交換劑作為吸附劑,通過( A )將溶液中帶相反電荷的物質(zhì)吸附在離子交換劑上。A、靜電作用 B、疏水作用 C、氫鍵作用 D、范德華力17陰離子交換劑( C )。A、可交換的為陰、陽離子 B、可交換的為蛋白質(zhì) C、可交換的為陰離子 D、可交換的為陽離子18洗脫體積是( C )。A、凝膠顆粒之間空隙的總體積 B、溶質(zhì)進(jìn)入凝膠內(nèi)部的體積C、與該溶質(zhì)保留時(shí)間相對應(yīng)的流動(dòng)相體積 D、溶質(zhì)從柱中流出時(shí)所用的流動(dòng)相體積19吸附色譜分離的依據(jù)是(
5、 A )。A、固定相對各物質(zhì)的吸附力不同 B、各物質(zhì)分子大小不同C、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相的分配系數(shù)不同 D、各物質(zhì)與專一分子的親和力不同20下面哪一種是根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化方法( A )。A. 親和層析 B. 凝膠層析 C. 離子交換層析 D. 鹽析21下列關(guān)于固相析出說法正確的是( B )A.沉淀和晶體會(huì)同時(shí)生成 B析出速度慢產(chǎn)生的是結(jié)晶 C.和析出速度無關(guān) D.析出速度慢產(chǎn)生的是沉淀22有機(jī)溶劑沉淀法中可使用的有機(jī)溶劑為( D )A.乙酸乙酯 B正丁醇 C.苯 D.丙酮23有機(jī)溶劑為什么能夠沉淀蛋白質(zhì)( B )A.介電常數(shù)大 B介電常數(shù)小 C.中和電荷 D.與蛋白質(zhì)相互反應(yīng)24若兩
6、性物質(zhì)結(jié)合了較多陰離子,則等電點(diǎn)pH會(huì)( B )A.升高 B降低 C.不變 D.以上均有可能25那一種膜孔徑最小( C )A.微濾 B超濾 C.反滲透 D. 納米過濾26吸附劑和吸附質(zhì)之間作用力是通過( A )產(chǎn)生的吸附稱為物理吸附。A. 范德華力 B庫倫力 C.靜電引力 D.相互結(jié)合27那一種活性碳的吸附容量最小( B )A.粉末活性碳 B錦綸活性碳 C.顆?;钚蕴?28那一種凝膠的孔徑最小( A )A. SepHadex G-25 B SepHadex G-50 C. SepHadex G-100 D. SepHadex G-20029氣相色譜的載氣不能用( C )A. 氫氣 B氦氣 C.
7、氧氣 D. 氮?dú)?0單寧沉析法制備菠蘿蛋白酶實(shí)驗(yàn)中,加入1%的單寧于鮮菠蘿汁中產(chǎn)生沉淀,屬于( D )沉析原理。A鹽析 B有機(jī)溶劑沉析 C等電點(diǎn)沉析 D有機(jī)酸沉析31在高效液相色譜中,下列哪種檢測器不適合于在梯度洗脫時(shí)使用. ( D ) A 紫外檢測器 B熒光檢測器 C蒸發(fā)光散射檢測器 D示差折光檢測器32下列哪個(gè)不屬于初步純化:( C )A .沉淀法 B. 吸附法 C. 離子交換層析 D. 萃取法33高效液相色譜儀的種類很多,但是無論何種高效液相色譜儀,基本上由( D )組成。A 高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、過濾系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分B進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系
8、統(tǒng)或色譜工作站四大部分C高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)四大部分D高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分34在凝膠過濾(分離范圍是5000400000)中,下列哪種蛋白質(zhì)最先被洗脫下來( B )A細(xì)胞色素C(13370)B肌球蛋白(400000)C過氧化氫酶(247500)D血清清蛋白(68500)E肌紅蛋白(16900)35“類似物容易吸附類似物”的原則,一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)( B ) A極性溶劑 B非極性溶劑 C水 D溶劑36能夠除去發(fā)酵液中鈣、鎂、鐵離子的方法是 ( C ) A 過濾 B 萃取 C 離子交換 D 蒸餾3
9、7當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時(shí),蛋白質(zhì)溶解度 ( C )A、增大 B、減小 C、先增大,后減小 D、先減小,后增大38超濾膜截留的顆粒直徑為( B )A 0.0210µm B 0.0010.02µm C <2nm D < 1nm39陰離子樹脂易受有機(jī)物污染,污染后,可用( B )處理A檸檬酸 B 10%NaCl+2%5%NaOH混合溶液 C 氨基三乙酸 D EDTA40分子篩層析純化酶是根據(jù)( C )進(jìn)行純化。A.根據(jù)酶分子電荷性質(zhì)的純化方法 B.調(diào)節(jié)酶溶解度的方法C.根據(jù)酶分子大小、形狀不同的純化方法 D.根據(jù)酶分子專一性結(jié)合的純化方法41用于蛋白質(zhì)分離過程
10、中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是( C )A離子交換色譜 B親和色譜 C凝膠過濾色譜 D反相色譜42微濾膜所截留的顆粒直徑為( A )A 0.0210µm B 0.0010.02µm C <2nm D < 1nm43適合于親脂性物質(zhì)的分離的吸附劑是( B )。A活性炭 B.氧化鋁 C.硅膠 D.磷酸鈣44按分離原理不同,電泳可分為( A )A 區(qū)帶電泳、自由界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳 B 紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳C 區(qū)帶電泳、自由界面電泳、紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳D 等速電泳、等電聚焦電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳45
11、在酸性條件下用下列哪種樹脂吸附氨基酸有較大的交換容量 ( C ) A羥型陰 B氯型陰 C氫型陽 D鈉型陽46超臨界流體萃取法適用于提取( B )A、極性大的成分 B、極性小的成分 C、離子型化合物 D、能氣化的成分 E、親水性成分47分離純化早期,由于提取液中成分復(fù)雜,目的物濃度稀,因而易采用 ( A )A、分離量大分辨率低的方法 B、分離量小分辨率低的方法C、分離量小分辨率高的方法 D、各種方法都試驗(yàn)一下,根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果確定48活性炭在下列哪種溶劑中吸附能力最強(qiáng)? ( A )A、水 B、甲醇 C、乙醇 D、三氯甲烷49將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復(fù)合物,該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)
12、合,在一定條件下沉淀出來,此方法稱為 ( A )A、親和沉淀 B、聚合物沉淀 C、金屬離子沉淀 D、鹽析沉淀50在超濾過程中,主要的推動(dòng)力是 ( C )A、濃度差 B、 電勢差 C、壓力 D、重力51鹽析法與有機(jī)溶劑沉淀法比較, 其優(yōu)點(diǎn)是 ( B ) A分辨率高 B變性作用小 C雜質(zhì)易除 D沉淀易分離 判斷:1溶劑萃取中的乳化現(xiàn)象一定存在。(×)2液膜能把兩個(gè)互溶但組成不同的溶液隔開。()3流動(dòng)相為氣體則稱為氣相色譜。()4溶劑的極性從小到大為丙醇乙醇水乙酸。(× )5吸附劑氧化鋁的活性與其含水量無關(guān)。( × )6. 活性氧化鋁可分三種類型:堿性氧化鋁、中性和酸性
13、氧化鋁。( )7. 蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì),改變pH可改變其荷電性質(zhì),pHpI蛋白質(zhì)帶正電。(× )8蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì),改變pH可改變其荷電性質(zhì),pHpI蛋白質(zhì)帶負(fù)電。( )9蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì),改變pH可改變其荷電性質(zhì),pHpI蛋白質(zhì)帶負(fù)電。(× )10蛋白質(zhì)為兩性電解質(zhì),改變pH可改變其荷電性質(zhì),pHpI蛋白質(zhì)帶正電。( )11超臨界流體溫度不變條件下,溶解度隨密度(或壓力)的增加而增加,而在壓力不變時(shí),溫度增加情況下,溶解度有可能增加或下降。( )12鹽析是利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度的差異,向溶液中加入一定量的中性鹽,使原溶解的物質(zhì)沉淀析出的分離技術(shù)。( )1
14、3硫酸銨在堿性環(huán)境中可以應(yīng)用。(× )14在低鹽濃度時(shí),鹽離子能增加生物分子表面電荷,使生物分子水合作用增強(qiáng),具有促進(jìn)溶解的作用。( )15向含有生化物質(zhì)的水溶液中加入一定量親水性的有機(jī)溶劑,能使生化物質(zhì)沉淀析出。( )16氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽、酶、核酸等兩性物質(zhì)可用等電點(diǎn)沉析。( )17同時(shí)含有酸、堿兩種基團(tuán)的樹脂叫兩性樹脂( )18氧化鋁和硅膠都為親水性吸附劑,由于對極性稍大的成分吸附力大,所以極性大的成分難以解吸附,Rf小,極性小的成分容易被解吸附,Rf大。( )19鹽析一般可在室溫下進(jìn)行,當(dāng)處理對溫度敏感的蛋白質(zhì)或酶時(shí),鹽析操作要在低溫下(如04)進(jìn)行。 ( )20蛋白質(zhì)類的
15、生物大分子在鹽析過程中,最好在高溫下進(jìn)行,因?yàn)闇囟雀邥?huì)增加其溶解度。(× )22若兩性物質(zhì)結(jié)合了較多陽離子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等),則等電點(diǎn)pH升高。( )23樹脂使用后不可再回收。(×)24多肽和蛋白質(zhì)類藥物的純化包括兩部分內(nèi)容,一是蛋白質(zhì)與非蛋白質(zhì)分開,二是將不同蛋白質(zhì)分開。()25. 分子間氫鍵的形成能增強(qiáng)待分離物與聚酰胺層析柱的吸附作用() 26. 分子內(nèi)氫鍵的形成能增強(qiáng)待分離物與聚酰胺層析柱的吸附作用(×)填空:1. 影響離子交換速度的因素有(樹脂粒度)、(交聯(lián)度)、(溶液流速)、(溫度)、(離子的大?。ⅲx子的化合價(jià))和(離子濃度)。2.
16、 色譜的基本構(gòu)成要素有(載體)、(固定相)和(流動(dòng)相)。3. 分子篩色譜也稱(凝膠色譜)的主要應(yīng)用是(脫鹽)和(分級分離)4. 根據(jù)膜結(jié)構(gòu)的不同,常用的膜可分為(對稱性膜)、(非對稱膜)和(復(fù)合膜)三類;5. 固體可分為(結(jié)晶)和(無定型)兩種狀態(tài)6. 場流分級最大的特點(diǎn)是可以實(shí)現(xiàn)(連續(xù)分離),實(shí)現(xiàn)更高程度的自動(dòng)化操作??梢詰?yīng)用磁場、電場、介電場、聲、光、重力、流體力、界面相互作用力等。7. 泡沫浮選法有(離子浮選),(沉淀浮選),(溶劑浮選)1. 簡述生物活性物質(zhì)分離純化的主要原理?答: 生物大分子分離純化的主要原理是:1)根據(jù)分子形狀和大小不同進(jìn)行分離,如差速離心與超離心、膜分離、凝膠過濾
17、等;2)根據(jù)分子電離性質(zhì)(帶電性)差異進(jìn)行分離,如離子交換法、電泳法、等電聚焦法;3)根據(jù)分子極性大小及溶解度不同進(jìn)行分離,如溶劑提取法、逆流分配法、分配層析法、鹽析法、等電點(diǎn)沉淀及有機(jī)溶劑分級沉淀等;4)根據(jù)物質(zhì)吸附性質(zhì)的不同進(jìn)行分離,如選擇性吸附與吸附層析等;5)根據(jù)配體特異性進(jìn)行分離,如親和層析法等。2、簡述分離技術(shù)的分類及其分離原理。² 機(jī)械分離(不涉及傳質(zhì)過程)名稱分離因子分離原理舉例沉降重力密度差水處理離心離心力密度差油精制、牛乳脫脂旋風(fēng)分離慣性流動(dòng)力密度差噴霧干燥壓榨機(jī)械力壓力下液體流動(dòng)油脂生產(chǎn)過濾過濾介質(zhì)粒子大小除菌、噴霧干燥/果汁澄清、顆粒分離² 傳質(zhì)分離
18、是指在分離過程中,有物質(zhì)傳遞過程的發(fā)生。分為兩大類:平衡分離過程和速率控制分離過程。 平衡分離過程:為借助分離媒介(如熱能、溶劑、吸附劑等)使均相混合物系統(tǒng)變?yōu)閮上嘞到y(tǒng),再以混合物中各組分在處于相平衡的兩相中不等同的分配為依據(jù)而實(shí)現(xiàn)分離。名稱原料相態(tài)分離因子分離原理工業(yè)應(yīng)用舉例蒸發(fā)液體熱量蒸汽壓差液體濃縮蒸餾液體熱量蒸汽壓差芳香物質(zhì)回收結(jié)晶液體冷卻或蒸發(fā)利用過飽和度/熔點(diǎn)糖精制、凍結(jié)產(chǎn)品干燥含濕的固體熱量、氣體水分蒸發(fā)食品脫水冷凍干燥液體熱量、減壓凍結(jié)/升華食品干燥萃取固體、液體萃取劑溶解度不同脂肪天然產(chǎn)物萃取浸提固體溶劑溶解度油提取、蔗糖抽提吸附液體、氣體固體吸附劑吸附勢油脂脫色、水分吸附離
19、子交換液體固體樹脂離子親和力乳清脫鹽、水的吸附速率控制分離過程:是指借助某種推動(dòng)力,如濃度差、壓力差、溫度差、電位差等的作用,某些情況下在選擇性透過膜的配合下,利用各組分?jǐn)U散速度的差異而實(shí)現(xiàn)混合物的分離操作。 (1)膜分離:膜分離是利用流體中各組分對膜的滲透速率的差別而實(shí)現(xiàn)組分分離的單元操作。過程的推動(dòng)力可以是壓力差、濃度差或電位差。 (2)場分離:場分離是利用電磁場、重力場、溫度場等物理場作為推動(dòng)力,對物質(zhì)進(jìn)行分離的過程。 名稱原料相態(tài)分離因子分離原理舉例反滲透液體壓力/膜膜滲透性果汁濃縮、海水淡化超濾液體壓力/膜膜滲透性乳清粉生產(chǎn)、牛奶濃縮液膜液體、氣體濃度/膜膜滲透與化學(xué)反應(yīng)污水處理、生
20、化反應(yīng)電滲析液體電場/膜電位差與膜滲透性氨基酸脫鹽、葡萄糖精制電泳液體電場力帶電粒子擴(kuò)散遷移氨基酸、核酸、酶分離色譜分離氣體、液體固相載體分配濃度差難分離物質(zhì)的分離分子蒸餾液體氣體擴(kuò)散分子擴(kuò)散甘油單酯分離、從油中分離維生素A、E 分離有時(shí)是自發(fā)過程、混合有時(shí)也不能自發(fā)進(jìn)行3. 理解電泳,電滲,電滲流,電泳淌度等幾個(gè)基本概念?電泳:是指溶液中帶電粒子(離子、膠團(tuán))在電場中定向移動(dòng)的現(xiàn)象電滲:是驅(qū)動(dòng)電解質(zhì)運(yùn)動(dòng)的第二種作用力,它使毛細(xì)管中的溶劑在直流電場作用下發(fā)生定向運(yùn)動(dòng)。電滲流:由于處在壁表面擴(kuò)散層中的離子的溶劑化作用,它在電場中發(fā)生遷移時(shí),將帶動(dòng)整個(gè)溶液向陰極移動(dòng)。電泳淌度:單位電場強(qiáng)度下電解質(zhì)
21、的電泳遷移速度。4. 影響電泳分離的主要因素?1、大分子的性質(zhì)2、電場強(qiáng)度3、溶液的pH 4、溶液的離子強(qiáng)度5、 電滲6、溫度7、支持物的影響5描述毛細(xì)管電泳分離的基本原理不同荷電性質(zhì)的粒子在毛細(xì)管中受到電泳和電滲等作用力的合力作用下產(chǎn)生遷移速度的差異而實(shí)現(xiàn)分離。6. 氣相色譜的條件選擇?1、固定相的選擇2、載氣流速的選擇3、柱溫的選擇4、進(jìn)樣量與進(jìn)樣時(shí)間的影響5、色譜柱形、柱內(nèi)徑及柱長的選擇7高效液相色譜:是指選用顆粒極細(xì)的高效耐壓新型固定相,借助高壓泵來輸送流動(dòng)相,并配有實(shí)時(shí)在線檢測器,實(shí)現(xiàn)色譜分離過程全部自動(dòng)化的液相色譜法。8正相色譜:是指固定相的極性高于流動(dòng)相的極性,因此,在這種層析過
22、程中非極性分子或極性小的分子比極性大的分子移動(dòng)的速度快,先從柱中流出來。9反相色譜:是指固定相的極性低于流動(dòng)相的極性,在這種層析過程中,極性大的分子比極性小的分子移動(dòng)的速度快而先從柱中流出。10疏水層析:是利用表面偶聯(lián)弱疏水性基團(tuán)(疏水性配基)的疏水性吸附劑為固定相,根據(jù)蛋白質(zhì)與疏水性吸附劑之間的弱疏水性相互作用的差別進(jìn)行分離純化的層析技術(shù)。11.何謂親和吸附,有何特點(diǎn)?答:親和吸附是吸附單元操作的一種,它是利用親和吸附劑與目標(biāo)物之間的特殊的化學(xué)作用實(shí)現(xiàn)的高效分離手段。親和吸附劑的組成包括:惰性載體、手臂鏈、特異性親和配基。親和吸附的特點(diǎn)是高效、簡便、適用范圍廣、分離速度快、條件溫和,但載體制
23、備難度大,通用性差,成本較高。 12離子交換:利用離子交換樹脂作為吸附劑,將溶液中的待分離組分,依據(jù)其電荷差異,依靠庫侖力吸附在樹脂上,然后利用合適的洗脫劑將吸附質(zhì)從樹脂上洗脫下來,達(dá)到分離的目的13.離子交換選擇性的因素有哪些?水合離子半徑:半徑越小,親和力越大;離子化合價(jià):高價(jià)離子易于被吸附;溶液pH:影響交換基團(tuán)和交換離子的解離程度,但不影響交換容量;離子強(qiáng)度:越低越好;有機(jī)溶劑:不利于吸附;會(huì)降低樹脂對有機(jī)離子的選擇性,而容易吸附無機(jī)離子。交聯(lián)度、膨脹度、分子篩:交聯(lián)度大,膨脹度小,篩分能力增大;交聯(lián)度小,膨脹度大,吸附量減少; 樹脂與粒子間的輔助力:除靜電力以外,還有氫鍵和范德華力等
24、輔助力;14.簡述凝膠色譜的分離原理?答:凝膠排阻色譜的分離介質(zhì)(填料)具有均勻的網(wǎng)格結(jié)構(gòu),其分離原理是具有不同分子量的溶質(zhì)分子,在流經(jīng)柱床時(shí),由于大分子難以進(jìn)入凝膠內(nèi)部,而從凝膠顆粒之間流出,保留時(shí)間短;而小分子溶質(zhì)可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部,由于凝膠多孔結(jié)構(gòu)的阻滯作用,流經(jīng)體積變大,保留時(shí)間延長。這樣,分子量不同的溶質(zhì)分子得以分離。15物理萃?。杭慈苜|(zhì)根據(jù)相似相溶的原理在兩相間達(dá)到分配平衡,萃取劑與溶質(zhì)之間不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。16化學(xué)萃?。簞t利用脂溶性萃取劑與溶質(zhì)之間的化學(xué)反應(yīng)生成脂溶性復(fù)合分子實(shí)現(xiàn)溶質(zhì)向有機(jī)相的分配。17. 超臨界萃取、雙水相萃取、液膜萃取、常規(guī)溶劑萃取的異同點(diǎn)比較18固相萃取與固相微
25、萃取的異同點(diǎn)都是基于色譜分離的樣品預(yù)處理方法。SPE是一種吸附劑萃取,樣品通過填充吸附劑的萃取柱,分析物和雜質(zhì)被保留在柱上,然后分別用選擇性溶劑去除雜質(zhì),洗脫出分析物,從而達(dá)到分離的目的。類似高效液相色譜。SPME采取“相似相溶”的特點(diǎn),在熔融石英纖維或其它材料為基體支持物表面涂漬不同性質(zhì)的高分子固定相薄層,通過直接或頂空方式,測物進(jìn)行提取、富集、進(jìn)樣和解析。固相微萃取法(SPME)的原理與固相萃取不同,固相微萃取不是將待測物全部萃取出來,其原理是建立在待測物在固定相和樣品所在相之間達(dá)成的平衡分配基礎(chǔ)上。19超臨界流體:超臨界流體是狀態(tài)超過氣液共存時(shí)的最高壓力和最高溫度下物質(zhì)特有的點(diǎn)臨界點(diǎn)后的
26、流體。20. 超臨界流體的性質(zhì)特征:超臨界流體的PVT性質(zhì) 稍高于臨界點(diǎn)溫度的區(qū)域,壓力稍有變化,即引起密度的很大變化,這時(shí),超臨界流體密度已接近于該物質(zhì)的液體密度,而此時(shí)的狀態(tài)仍為氣態(tài),因此,超臨界流體具有高的擴(kuò)散性,與液體溶劑萃取相比,其過程阻力大大降低超臨界流體的傳遞性質(zhì) 由于超臨界流體的自擴(kuò)散系數(shù)大,粘度小,滲透性好,與液體萃取相比,可以很快地完成傳質(zhì),達(dá)到平衡,促進(jìn)高效分離過程的實(shí)現(xiàn)超臨界流體的溶解能力 超臨界流體的溶解能力,與密度有很大關(guān)系,在臨界區(qū)附近,操作壓力和溫度的微小變化,會(huì)引起流體密度的大幅度變化,因而也將影響其溶解能力。超臨界流體的萃取選擇性對萃取劑的要求:按相似相溶原
27、則,選用的超臨界流體與被萃取物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)越相似,溶解能力就越大。21反膠團(tuán)的臨界膠團(tuán)濃度反膠團(tuán):兩性表面活性劑在非極性有機(jī)溶劑中親水性基團(tuán)自發(fā)地向內(nèi)聚集而成的,內(nèi)含微小水滴的,空間尺度僅為納米級的集合型膠體。將表面活性劑在非極性有機(jī)溶劑相中能形成反膠團(tuán)的最小濃度稱為反膠團(tuán)的臨界膠團(tuán)濃度,它與表面活性劑種類有關(guān)。22. 膜的分類:分類依據(jù)分類來源天然膜、合成膜狀態(tài)固體膜、液膜、氣膜材料有機(jī)膜、無機(jī)膜結(jié)構(gòu)對稱膜(微孔膜、均質(zhì)膜)、非對稱膜、復(fù)合膜電性非荷電膜、荷電膜形狀平板膜、管式膜、中空纖維膜制備方法燒結(jié)膜、延展膜、徑跡刻蝕膜、相轉(zhuǎn)換膜、動(dòng)力形成墨分離體系氣-氣、氣-液、氣-固、液-液、液-固
28、分離膜分離機(jī)理吸附性膜、擴(kuò)散性膜、離子交換膜、選擇性膜、非選擇性膜分離過程反滲透膜、滲透膜、氣體分離膜、電滲析膜、滲析膜、滲透蒸發(fā)膜23. 膜分離技術(shù)的類型和定義?答:膜分離過程的實(shí)質(zhì)是物質(zhì)透過或被截留于膜的過程,近似于篩分過程,依據(jù)濾膜孔徑大小而達(dá)到物質(zhì)分離的目的,故而可以按分離粒子大小進(jìn)行分類:(1)微濾:以多孔細(xì)小薄膜為過濾介質(zhì),壓力為推動(dòng)力,使不溶性物質(zhì)得以分離的操作,孔徑分布范圍在0.02514m之間;(2)超濾:分離介質(zhì)同上,但孔徑更小,為0.0010.02 m,分離推動(dòng)力仍為壓力差,適合于分離酶、蛋白質(zhì)等生物大分子物質(zhì);(3)反滲透:是一種以壓力差為推動(dòng)力,從溶液中分離出溶劑的膜
29、分離操作,孔徑范圍在0.00010.001 m之間;(由于分離的溶劑分子往往很小,不能忽略滲透壓的作用,故而稱為反滲透);(4)納濾:以壓力差為推動(dòng)力,從溶液中分離3001000小分子量的膜分離過程,孔徑分布在平均2nm;(5)電滲析:以電位差為推動(dòng)力,利用離子交換膜的選擇透過性,從溶液中脫除或富集電解質(zhì)的膜分離操作;24.膜的濃差極化(concentration polarization):在膜分離操作中,所有溶質(zhì)均被透過液傳送到膜表面上,不能完全透過膜的溶質(zhì)受到膜的截留作用,在膜表面附近濃度高于主體濃度的現(xiàn)象稱濃度/濃差極化。濃差極化特性:可逆過程(膜運(yùn)行時(shí)產(chǎn)生,停止逐漸消失)它與操作條件
30、相關(guān),可通過降低膜兩側(cè)壓差,減少物料液中溶質(zhì)濃度,改善膜表面流體力學(xué)條件(錯(cuò)流),來減輕濃差極化程度,提高膜的透過流量。25. 滲析:又稱透析。一種以濃度差為推動(dòng)力的膜分離操作,利用膜對溶質(zhì)的選擇透過性 ,實(shí)現(xiàn)不同性質(zhì)溶質(zhì)的分離。即利用半透膜能透過小分子和離子但不能透過膠體粒子的性質(zhì)從溶膠中除掉作為雜質(zhì)的小分子或離子的過程。電滲析、熱滲析、壓滲析、滲析。26. 液膜組成:膜溶劑(有機(jī)溶劑/水,構(gòu)成膜的機(jī)體)、表面活性劑(控制膜穩(wěn)定性)、添加劑/流動(dòng)載體(提高膜選擇性,實(shí)現(xiàn)分離傳質(zhì)的關(guān)鍵)。27.為什么處理含酚廢水用油包水型液膜;利用相同原理可以處理哪些工業(yè)廢水?答:所謂油包水型,就是內(nèi)相和外相
31、是油溶液,膜為水質(zhì),整個(gè)體系稱O/W/O型。處理含酚廢水是指要除去水中所含的酚,廢水中的酚通過油膜進(jìn)入萃取介質(zhì)內(nèi)部,反應(yīng)產(chǎn)物不能通過油溶液,被固定在油內(nèi)部,使廢水中的酚含量降低,所以采用O/W/O型。利用相同原理可以處理那些含有本身能溶于油質(zhì),但產(chǎn)物不溶于油質(zhì)的工業(yè)廢水。28簡述鹽析的原理及產(chǎn)生的現(xiàn)象?答:當(dāng)中性鹽加入蛋白質(zhì)分散體系時(shí)可能出現(xiàn)以下兩種情況:(1)“鹽溶”現(xiàn)象低鹽濃度下,蛋白質(zhì)溶解度增大(2)“鹽析”現(xiàn)象高鹽濃度下,蛋白質(zhì)溶解度隨之下降,原因如下:(a)無機(jī)離子與蛋白質(zhì)表面電荷中和,形成離子對,部分中和了蛋白質(zhì)的電性,使蛋白質(zhì)分子之間的排斥力減弱,從而能夠相互靠攏;(b)中性鹽的
32、親水性大,使蛋白質(zhì)脫去水化膜,疏水區(qū)暴露,由于疏水區(qū)的相互作用導(dǎo)致沉淀;29. 什么是等電點(diǎn)兩性電解質(zhì)在不同pH值的溶液中具有不同的解離狀態(tài),電荷情況也不同,能使兩性電解質(zhì)處于荷電性為零的pH值,為該兩性電解質(zhì)的等電點(diǎn),通常以pI表示。30.何謂等電點(diǎn)沉析法?答:兩性物質(zhì)在其質(zhì)點(diǎn)的凈電荷為零時(shí)介質(zhì)的pH值,溶質(zhì)凈電荷為零,分子間排斥電位降低,吸引力增大,能相互聚集起來,沉淀析出,此時(shí)溶質(zhì)的溶解度最低。31有機(jī)酸沉析:含氮有機(jī)酸(如苦味酸和鞣酸等)能夠與有機(jī)分子的堿性功能團(tuán)形成復(fù)合物而沉淀析出。32選擇變性沉析:是利用蛋白質(zhì)、酶與核酸等生物大分子對某些物理或化學(xué)因素敏感性不同,而有選擇地使之變性
33、沉析,以達(dá)到目的物與雜蛋白分離的技術(shù),稱為選擇變性沉析。33.簡述有機(jī)溶劑沉析的原理?答:1、概念:在含有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機(jī)溶劑,降低溶質(zhì)的溶解度,使其沉淀析出。2、原理:(1)降低了溶質(zhì)的介電常數(shù),使溶質(zhì)之間的靜電引力增加,從而出現(xiàn)聚集現(xiàn)象,導(dǎo)致沉淀。(2)由于有機(jī)溶劑的水合作用,降低了自由水的濃度,降低了親水溶質(zhì)表面水化層的厚度,降低了親水性,導(dǎo)致脫水凝聚。34. 簡述蛋白質(zhì)類藥物的分離純化方法?沉淀法 按分子大小分離的方法 按分子所帶電荷進(jìn)行分離的方法 親和層析法37. 泡沫分離的原理是什么?適用哪類體系的分離?答:泡沫分離是以氣泡作分離介質(zhì)來濃集表面活性物質(zhì)的一種新型分
34、離技術(shù)。其原理為:當(dāng)溶液中需要分離的溶質(zhì)本身為表面活性組分時(shí),利用惰性氣體在溶液中形成的泡沫,即可將溶質(zhì)富集到泡沫上,然后將這些泡沫收集起來,消泡后即可得到溶質(zhì)含量比原料液高的泡沫液。適用于熱敏性及化學(xué)不穩(wěn)定性物質(zhì)的分離和溶液中低濃度組分的分離回收。38蒸餾儀器安裝:裝置問題:溫度計(jì)水銀球位置?溫度計(jì)水銀球的上限與蒸餾頭側(cè)管的下限同處一水平線上 安裝與拆裝順序?(先下后上、先左后右) 冷凝管哪端接水管?下進(jìn)上出操作問題:料液最多不能超過燒瓶多少?三分之二,不少于三分之一 沸石的作用?沸石能否重復(fù)使用?沸騰中心,可以重復(fù)使用,需加熱烘干 停止蒸餾順序?先停熱,后停水39 氣相色譜法與高效液相色譜法的異同點(diǎn)1、流動(dòng)相GC:流動(dòng)相為惰性,氣體組分與流動(dòng)相無親合作用力,只與固定相有相互作用。HPLC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對分離起正向作用。且流動(dòng)相種類較多,選擇余地廣,改變流動(dòng)相極性和pH值也對分離起到調(diào)控作用,當(dāng)選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相也可以增大分離選擇性。2、分類(按固定相不同)GC中,按固定相不同可分為:氣-固色譜法;氣-液色譜法。HPLC中,按固定相不同可分為:液-固色譜法;液-液色譜法。3、固定相氣固(液固)色譜的固定相:多孔性的固體吸附劑
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