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1、1會計學(xué)DNA的蛋白質(zhì)技術(shù)的蛋白質(zhì)技術(shù)DNA與蛋白質(zhì)的提取與蛋白質(zhì)的提取 DNA血紅蛋白血紅蛋白材材料料選選取取雞血細胞等雞血細胞等DNA含含量相對較高的生物量相對較高的生物組織組織哺乳動物的成熟紅哺乳動物的成熟紅細胞細胞去去除除雜雜質(zhì)質(zhì)用不同濃度的用不同濃度的NaCl溶液處理溶液處理用酒精溶液處理用酒精溶液處理用蛋白酶處理用蛋白酶處理透析處理透析處理純化處理純化處理鑒鑒定定加入二苯胺,沸水浴加入二苯胺,沸水浴SDS聚丙烯酰聚丙烯酰胺凝膠電泳法測胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)的相對定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量分子質(zhì)量PCR技術(shù)與凝膠色譜法的比較技術(shù)與凝膠色譜法的比較 PCR凝膠色譜法凝膠色譜法過過程程變性:
2、變性:90 以上高以上高溫解旋溫解旋復(fù)性:復(fù)性:50 左右引左右引物與單鏈結(jié)合物與單鏈結(jié)合延伸:延伸:72 合成子合成子鏈鏈凝膠色譜柱的制作凝膠色譜柱的制作裝填:凝膠裝填均裝填:凝膠裝填均勻,無氣泡勻,無氣泡純化純化DNA粗提取與鑒定中不同試劑的用途粗提取與鑒定中不同試劑的用途及原理比較及原理比較 試試劑劑質(zhì)量濃質(zhì)量濃度度用途用途原理原理NaCl溶溶液液2 mol/L溶解溶解DNADNA在在NaCl溶液中的溶解溶液中的溶解度隨溶液濃度的變化而改變度隨溶液濃度的變化而改變,溶解度在質(zhì)量濃度為,溶解度在質(zhì)量濃度為2 mol/L時最大、在質(zhì)量濃度時最大、在質(zhì)量濃度為為0.14 mol/L時最小時最小
3、0.14mol/L析出析出DNA2 mol/L鑒定鑒定時時的溶的溶劑劑除去除去雜雜質(zhì)以質(zhì)以提提純純DNA試劑試劑操作操作作用作用A檸檬酸檸檬酸鈉鈉與雞血混合與雞血混合溶解細胞溶解細胞中中DNAB 蒸餾水蒸餾水與雞血細胞混合與雞血細胞混合保持細保持細胞形狀胞形狀C 蒸餾水蒸餾水加入到溶解有加入到溶解有DNA的的NaCl溶液中溶液中析出析出DNA絲狀物絲狀物產(chǎn)生特定產(chǎn)生特定的顏色反的顏色反應(yīng)應(yīng)PCR技術(shù)操作注意事項技術(shù)操作注意事項 n0.14 mol/LNaCl此如果將此如果將NaCl濃度調(diào)至質(zhì)量濃度為濃度調(diào)至質(zhì)量濃度為0.14 mol/L會使會使DNA溶解度變小而呈析出狀態(tài)。溶解度變小而呈析出狀態(tài)。
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