細(xì)胞生物學(xué)標(biāo)書

1、 xxxxxx 大學(xué) xxxx 學(xué)院學(xué)生細(xì)胞生物學(xué)課題項(xiàng)目申請書 項(xiàng)目名稱： 項(xiàng)目技術(shù)負(fù)責(zé)人： 項(xiàng)目申請單位： 學(xué)院：班級：姓名：學(xué)號： 一、立項(xiàng)的背景和意義 心血管流行病學(xué)調(diào)查顯示，盡管近30年來心血管病死亡率除東歐各國外的大多數(shù)國家都有不同程度的下降，但其仍是多數(shù)國家45歲以上男性第一位的死亡原因，在女性則是僅次于腫瘤的第二位死因，嚴(yán)重影響著人類的期望壽命和生存質(zhì)量（資料來源：世界衛(wèi)生組織衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)年報(bào)，1993年日內(nèi)瓦）。我國已進(jìn)入老齡化社會，是世界上老年人口最多的國家，預(yù)計(jì)到本世紀(jì)中葉，老年人口將達(dá)到4億。同時隨著人們生活水平的不斷提高、膳食不當(dāng)、生活習(xí)慣和外部環(huán)境等多種因素，近年來心血

2、管疾病已成為我國發(fā)病率和死亡率高居第一的疾病1，嚴(yán)重影響著人們的生命健康，其發(fā)病及防治受到全社會的極大關(guān)注。二、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢近年來，分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的研究成果促使心血管藥理學(xué)內(nèi)容日新月異地更新，對心血管病癥的研究相對成熟，大部分心血管相關(guān)基因研究比較清楚，藥物的作用靶點(diǎn)也相對明確2.而我國傳統(tǒng)中藥丹參及其復(fù)方在治療冠心病、動脈粥樣硬化方面以其療效確切、副作用小、安全、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)，成為臨床最常用的治療血瘀癥冠心病中藥。丹參為唇形科多年生草本植物丹參（Salvia miltiorrhiza）的根莖，始載于神農(nóng)本草經(jīng)。丹參的化學(xué)成分目前已研究得較為系統(tǒng)，主要為共軛醌、酮類化合物，酚

3、酸類物質(zhì)，具有較廣泛的藥理的作用，其中對循環(huán)系統(tǒng)的影響研究得較多3-4，大量的藥理學(xué)研究表明，丹參具有抗心肌缺血、舒張血管、保護(hù)內(nèi)皮損傷、縮小心肌梗塞面積，抗自由基、減少缺血再灌注心肌損傷，保護(hù)心肌高能磷酸化合物等廣泛的心血管活性5。藥代動力學(xué)研究結(jié)果表明，丹參素和兒茶醛可經(jīng)肌肉和胃腸道吸收入血，隱丹參酮口服吸收較差或吸收后迅速被肝臟轉(zhuǎn)化, 一部分首先轉(zhuǎn)化為丹參酮A, 后者進(jìn)一步被羥化代謝為含羥基代謝物, 并結(jié)合內(nèi)源物使極性增大而利于排出。分子藥理學(xué)的研究表明復(fù)方丹參可通過影響基因的表達(dá)調(diào)控達(dá)到治療作用，如丹參可抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞和粒細(xì)胞表達(dá)CD11b、ICAM-1、E-selectin等粘附分

4、子6-7，抑制血管平滑肌細(xì)胞表面CD54等粘附分子表達(dá)，降低血小板膜粘附分子CD41、CD62P、和P-選擇素的表達(dá)，丹參酮可以抑制心肌細(xì)胞c-jun基因的表達(dá)等8-9。國際上對其保護(hù)心血管作用的研究亦逐漸增多；日本學(xué)者研究表明，丹參提取物可抑制血小板聚集10-11；臺灣學(xué)者近期研究表明丹參提取物對TNF-所致主動脈內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子表達(dá)的抑制作用呈劑量依賴關(guān)系12。但丹參保護(hù)心血管作用的藥理研究仍不夠深入，尤其是其作用途徑、靶標(biāo)不甚明晰。王升啟教授領(lǐng)導(dǎo)的研究組對復(fù)方丹參方保護(hù)心血管作用的分子機(jī)理以及四物湯化學(xué)成分組合補(bǔ)血作用及其機(jī)理研究進(jìn)行了一定的探索13，并據(jù)此提出“化學(xué)基因組學(xué)”理論，認(rèn)為

5、中藥復(fù)方是通過化學(xué)成分組合影響到信號分子組合，使紊亂的信號分子網(wǎng)絡(luò)恢復(fù)平衡，從而達(dá)到治療中醫(yī)的證和相關(guān)疾病的作用和效果14-15。本項(xiàng)研究旨在探索中藥丹參保護(hù)心血管作用的分子機(jī)理，通過化學(xué)組學(xué)、基因組學(xué)及蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)其作用的“組合靶標(biāo)”，在“化學(xué)基因組學(xué)”研究技術(shù)平臺層面上進(jìn)行成分-靶標(biāo)相互作用研究，進(jìn)而驗(yàn)證丹參保護(hù)心血管作用的靶標(biāo)以及找到療效確切、安全經(jīng)濟(jì)的單體及其組合，為高技術(shù)含量的中藥研發(fā)、產(chǎn)業(yè)現(xiàn)代化和國際化提供一些基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。三、項(xiàng)目主要研究開發(fā)內(nèi)容和技術(shù)關(guān)鍵1.主要研究開發(fā)內(nèi)容1.1 基于表達(dá)譜的生物信息學(xué)藥靶發(fā)現(xiàn)利用靶標(biāo)相關(guān)基因芯片、蛋白質(zhì)組學(xué)和基于表達(dá)譜的生物信息學(xué)藥靶發(fā)現(xiàn)技

6、術(shù)，從血淤證模型中發(fā)現(xiàn)候選靶標(biāo)。1.2 基于化學(xué)基因組學(xué)的成分-靶標(biāo)相互作用研究采用實(shí)時熒光RT-PCR、WESTERN印跡等技術(shù)，在血瘀證模型（血管內(nèi)皮、平滑肌、心肌及血小板）上觀察有效單體及組合對各作用靶標(biāo)及其通路和網(wǎng)絡(luò)的調(diào)控作用，初步確定各有效成分作用的靶分子及特異性；然后采用生物質(zhì)譜及親和色譜等技術(shù)，在分子水平上分析有效成分與靶分子的結(jié)合性能，從而驗(yàn)證成分和靶標(biāo)的可藥性；最后在動物體內(nèi)驗(yàn)證有效成分（組合）對靶標(biāo)（組合）作用的有效性。通過基因芯片及蛋白質(zhì)組技術(shù)實(shí)驗(yàn)初篩獲得8-15個潛在靶標(biāo)，并進(jìn)一步通過生物信息學(xué)篩選4-5個候選靶標(biāo)，結(jié)合反義及siRNA技術(shù)，對候選靶標(biāo)進(jìn)行特異性驗(yàn)證，獲

7、得1-2個丹參有效成分的作用靶標(biāo)。 針對上述靶標(biāo)，研究丹參有效成分及其組合（配伍）對其表達(dá)和調(diào)控的影響，獲得成分與靶標(biāo)相互作用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。2.關(guān)鍵技術(shù)基因表達(dá)譜分析：結(jié)合生物信息學(xué)分析，篩選心血管相關(guān)基因并制備相應(yīng)的表達(dá)譜分析芯片。利用該芯片研究丹參方有效成分及其組合在細(xì)胞和動物模型上對靶細(xì)胞和組織基因表達(dá)譜的影響，通過軟件分析找出差異表達(dá)基因。蛋白質(zhì)表達(dá)譜分析：將對照及模型組的蛋白質(zhì)分別進(jìn)行熒光標(biāo)記后，進(jìn)行雙向電泳，結(jié)果用掃描儀掃描并采用蛋白質(zhì)組學(xué)分析軟件（Imagemaster 2D Elite圖象分析軟件、Imagemaster 2D Database數(shù)據(jù)庫軟件）進(jìn)行分析比較，找到特異表

8、達(dá)蛋白，并對特異蛋白進(jìn)一步采用質(zhì)譜分析其結(jié)構(gòu)和功能。候選靶標(biāo)的生物信息學(xué)篩選：采用本室開發(fā)的基于基因表達(dá)譜的基因分類系統(tǒng)Tclass和基于表達(dá)譜的樣本類型自動識別的整合方案SamCluster進(jìn)行靶標(biāo)篩選和生物信息學(xué)驗(yàn)證，結(jié)合功能基因組和疾病基因組研究成果，篩選出候選靶標(biāo)。基于化學(xué)基因組學(xué)的“成分-靶標(biāo)”相互作用關(guān)系分析：根據(jù)有效成分、靶標(biāo)選擇均勻、正交或析因等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，并對數(shù)據(jù)以簡單相關(guān)分析、典型相關(guān)分析、多元回歸分析等多種分析方法分析“成分-靶標(biāo)”相互作用關(guān)系。3.擬解決的關(guān)鍵問題3.1分子間相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建及基于表達(dá)譜和分子相互作用網(wǎng)絡(luò)的組合靶標(biāo)篩選方法心血管疾病是研究相對成

9、熟的疾病，大部分心血管相關(guān)基因研究比較清楚、藥物作用的靶點(diǎn)也相對明確。我們擬基于現(xiàn)有心血管疾病相關(guān)基因及功能、生物信息學(xué)、蛋白質(zhì)/基因表達(dá)譜、酵母雙雜交及藥理學(xué)等研究基礎(chǔ)，參考文獻(xiàn)軟件及數(shù)據(jù)庫等信息資源，構(gòu)建心血管相關(guān)基因和藥物靶標(biāo)的分子相互作用網(wǎng)絡(luò)。在我們原先建立的基于基因芯片表達(dá)譜聚類、分類軟件及算法的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步建立基于心血管疾病相關(guān)基因網(wǎng)絡(luò)的組合靶標(biāo)篩選方法。3.2丹參有效成分組合的選擇：根據(jù)前期文獻(xiàn)及本實(shí)驗(yàn)室研究工作基礎(chǔ)，采用丹參的有效部位丹參總酮、丹參總酚酸、丹參總提物及其主要有效成分丹參酮IIA、丹參素、丹酚酸B、原兒茶醛等幾種單體成分，分別在有效部位及有效單體兩個層次上進(jìn)行正

10、交或析因設(shè)計(jì)，結(jié)合細(xì)胞、血小板聚集等高通量模型，初步篩選出其候選有效成分組合2-3組。對候選組合進(jìn)一步在動物模型上進(jìn)行系統(tǒng)的藥理學(xué)驗(yàn)證，選出有效成分組合。該組合及其成分可以作為組合靶標(biāo)的發(fā)現(xiàn)和功能驗(yàn)證工具藥。3.3 有效成分-組合靶標(biāo)間交互作用關(guān)系的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及學(xué)分析采用均勻、正交或析因設(shè)計(jì)、基因芯片及Western印跡研究其不同組份的有效組合對組合靶標(biāo)表達(dá)的影響；采用“典型相關(guān)分析(canonical correlation analysis)”等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，研究各有效成分對組合靶標(biāo)表達(dá)調(diào)控的協(xié)同效應(yīng)四、項(xiàng)目預(yù)期目標(biāo)A建立“化學(xué)基因組學(xué)”研究技術(shù)平臺，并據(jù)此闡明丹參保護(hù)心血管作用機(jī)理；B發(fā)表

11、3-5篇高水平SCI論文，申請1-2項(xiàng)專利，培養(yǎng)4-5名本科生。五、項(xiàng)目實(shí)施方案、技術(shù)路線、組織方式與課題分解1.項(xiàng)目實(shí)施方案：利用生物芯片技術(shù)結(jié)合蛋白質(zhì)組學(xué)、化學(xué)組學(xué)、生物信息學(xué)及統(tǒng)計(jì)學(xué)等技術(shù)，在分子、器官及整體水平上發(fā)現(xiàn)丹參作用的心血管疾病相關(guān)基因和蛋白表達(dá)調(diào)控靶標(biāo)以及功能驗(yàn)證，進(jìn)一步將作用不同靶標(biāo)的有效成分進(jìn)行配伍，并利用上述技術(shù)平臺進(jìn)行驗(yàn)證，以期發(fā)現(xiàn)丹參有效成分為基礎(chǔ)的最佳“分子配伍”。從而實(shí)現(xiàn)多層次、多靶點(diǎn)、多學(xué)科地研究、闡明丹參保護(hù)心血管作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及分子機(jī)制，并為探討配伍的科學(xué)內(nèi)涵提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。1.1丹參有效成分的分子作用通路的篩選選擇丹參提取物及其有效成分，采用細(xì)胞和動物模型

12、，用基因芯片和蛋白質(zhì)組學(xué)等高通量分析技術(shù)，研究其對基因和蛋白表達(dá)譜的影響，采用生物信息學(xué)軟件(Image 4.0、Arraysight、Imagemaseter 2D Elite圖象分析軟件、Imagemaster 2D Database 數(shù)據(jù)庫軟件) 進(jìn)行差異比較分析。結(jié)合表達(dá)譜數(shù)據(jù)及文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫構(gòu)建心血管相關(guān)基因網(wǎng)絡(luò)。采用開發(fā)的Tclass和Samclass進(jìn)行聚類和分類分析，結(jié)合功能和疾病基因組學(xué)手段和知識篩選出丹參有效成分作用的分子作用通路。1.2丹參有效成分的分子作用通路的功能驗(yàn)證對發(fā)現(xiàn)的候選組合靶標(biāo)進(jìn)行分析，如果是已知功能基因或蛋白質(zhì)則直接進(jìn)行組合篩選；如果是新基因或蛋白質(zhì)則首先進(jìn)行

13、結(jié)構(gòu)和功能研究；然后采用反義核酸、siRNA技術(shù)，RT-PCR技術(shù)，Western 印跡技術(shù)等在細(xì)胞和動物模型上對丹參有效成分的分子作用通路進(jìn)行組合功能驗(yàn)證。1.3丹參有效成分最佳“分子配伍”的篩選進(jìn)一步用丹參有效單體的不同成分、不同劑量、不同比例的配伍依次在細(xì)胞和動物模型上對候選組合靶標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，在“化學(xué)基因組學(xué)”研究技術(shù)平臺層面上進(jìn)行有效成分配伍研究，以期找到療效確切、安全經(jīng)濟(jì)的單體及其組合。2.技術(shù)路線（課題分解）：2.1 設(shè)計(jì)并制備人心血管相關(guān)芯片：根據(jù)心血管疾病相關(guān)文獻(xiàn)，設(shè)計(jì)并制成低密度的寡核苷酸芯片。從Cardio 數(shù)據(jù)庫(Cardiovascular Disease Relate

14、d Database )中找出大約400種心血管疾病相關(guān)基因，這些基因的人類mRNA 序列來自GenBank。 使用大規(guī)模探針設(shè)計(jì)軟件Mprobe來設(shè)計(jì)寡核苷酸探針，芯片質(zhì)控方法采用陽性對照結(jié)合看家基因和陰性對照，對逆轉(zhuǎn)錄、雜交過程進(jìn)行監(jiān)測和結(jié)果分析。2.2 建立損傷的細(xì)胞模型：動脈粥樣硬化(atherosclerosis, AS)的形成涉及許多環(huán)節(jié)，包括脂質(zhì)代謝紊亂，血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，平滑肌細(xì)胞增殖，從中層遷移到內(nèi)膜下，單核和巨噬細(xì)胞的遷移、增生和分化，泡沫細(xì)胞的形成，細(xì)胞的壞死和脂質(zhì)沉積等。本項(xiàng)研究擬建立以TNF- (2ng/ml)、oxLDL (12.5g/ml)損傷的血管內(nèi)皮、平滑肌、

15、心肌及血小板模型。2.3 丹參主要單體對人血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞等藥理作用的篩選：選擇藥理試驗(yàn)劑量范圍；凋亡保護(hù)試驗(yàn)；白細(xì)胞粘附試驗(yàn)；凝血纖溶物質(zhì)（PAI-1, tPA）分泌；NO分泌；內(nèi)皮素-1分泌；平滑肌細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)。2.4 丹參有效成分保護(hù)心血管作用的表達(dá)譜及蛋白質(zhì)組學(xué)研究： 丹參有效成分孵育內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等6-12小時，再以TNF-、oxLDL刺激6小時，提取細(xì)胞的RNA及總蛋白進(jìn)行表達(dá)譜及蛋白質(zhì)組學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)差異表達(dá)基因及蛋白，作為丹參有效成分的潛在靶標(biāo)。2.5 丹參有效成分保護(hù)心血管作用的機(jī)理研究及靶標(biāo)驗(yàn)證：以反義核酸、siRNA技術(shù)，Q-RT-PCR、Weste

16、rn Blot及通路抑制劑等技術(shù)研究丹參有效成分及其組合保護(hù)心血管作用的分子機(jī)制及功能驗(yàn)證。2.6 丹參有效成分保護(hù)心血管作用的動物試驗(yàn)及臨床觀察：2.6.1 觀察丹參活性組分對實(shí)驗(yàn)性動脈粥樣硬化家兔的治療作用。雄性新西蘭兔高血脂飼養(yǎng)1216周形成實(shí)驗(yàn)性的動脈粥樣硬化，給予高脂飲食同時給予丹參活性成分，4，8，12，16周末采血檢測血流變、血脂情況，于16周時處死，測定血脂變化TC、TG、LDL-C，血清和血管壁中NO和ET1的含量變化。測定頸動脈受損內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子VCAM1的變化。與陽性對照藥復(fù)方丹參方及辛伐他汀比較。2.6.2 觀察丹參活性組分對實(shí)驗(yàn)性高血脂癥家兔的治療作用。雄性新西蘭兔

17、高血脂飼養(yǎng)2周形成實(shí)驗(yàn)性的高血脂癥，然后分組連續(xù)給予高脂飲食和丹參活性成分，4周后高脂給量減半，繼續(xù)給予丹參動脈粥樣硬化活性成分至6周，測定給藥后4和6周時的血脂變化TC、TG、LDL-C，血清和血管壁中NO和ET1的含量變化。測定頸動脈受損內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子VCAM的變化。與陽性對照藥復(fù)方丹參方及辛伐他汀比較。2.6.3 觀察丹參活性組分對大鼠缺血再灌注(Ischemic reperfusion injury，IRI)的影響，對血栓烷2和前列環(huán)素(TXA2/PGI2)比值的調(diào)節(jié)作用，以及一氧化氫(NO)、內(nèi)皮素(ET1)、纖維蛋白原(Fig)水平，改善血液流變性等作用，改善的病理生理。與陽性藥

18、物復(fù)方丹參方比較。2.6.4 觀察丹參活性組分對高黏滯血癥家兔和急性高黏滯血癥模型大鼠血管內(nèi)皮分泌功能的影響，采用復(fù)合因素（高分子右旋糖酐、腎上腺素、牛血清白蛋白）、長時間(11d)造成高黏滯血癥慢性模型；采用次性靜脈注射高分子右旋糖酐，皮下注射腎上腺素造成急性高黏滯血癥模型。分別用丹參活性組分進(jìn)行治療，觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌功能的變化及丹參活性組分的干預(yù)效果。檢測指標(biāo)：紅細(xì)胞變形能力, 紅細(xì)胞比容、紅細(xì)胞聚集指數(shù), 紅細(xì)胞電泳時間；血液流變性；全血比黏度、血漿纖維蛋白原；血小板聚集和黏附性及TXB2、6KetoPGF1的含量的影響；血管細(xì)胞黏附因子VCAM、ICAM、ESLECTIN的表達(dá)。陽

19、性藥物為復(fù)方丹參方和阿司匹林。2.6.5 在臨床上選擇高血脂癥患者，中醫(yī)診斷符合血瘀證標(biāo)準(zhǔn)的患者，觀察經(jīng)丹參注射液治療后血脂、血流變，血清NO和ET1含量的變化，以及頸動脈斑塊面積的變化。陽性對照藥物為復(fù)方丹參方和辛伐他汀。技術(shù)路線：2.1基于表達(dá)譜的生物信息學(xué)藥靶發(fā)現(xiàn)：加藥后加藥前血瘀證細(xì)胞/組織/血清丹參有效成分藥靶基因芯片潛在藥靶基因基因/蛋白質(zhì)表達(dá)譜分析蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)候選靶標(biāo)基于表達(dá)譜的生物信息學(xué)分析干預(yù)2.2基于化學(xué)基因組學(xué)的成分-靶標(biāo)相互作用研究血瘀癥動物模型（實(shí)驗(yàn)性動脈粥樣硬化家兔，實(shí)驗(yàn)性高血脂癥家兔，大鼠缺血再灌注）血瘀癥細(xì)胞模型（血管內(nèi)皮細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞，心肌細(xì)胞）丹參有效成

20、分及其組合潛在藥靶（受體、激酶、信號分子等）病理組織檢查生化指標(biāo)（血脂變化TC、TG、LDL-C，血清和血管壁中NO和ET1的含量變化）信號通路和藥理學(xué)驗(yàn)證（Q-RT-PCR，Western Blot，Elisa，etc.）丹參保護(hù)心血管作用的靶標(biāo)丹參有效成分作用于血瘀型冠心病模型，采用基因芯片和蛋白質(zhì)組技術(shù)分析其對基因和蛋白表達(dá)譜的影響，找出差異基因及蛋白質(zhì)，并通過PR-PCR、Western印跡等技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)該成分保護(hù)心血管的分子作用通路。進(jìn)一步用丹參有效成分的不同成分、不同劑量、不同比例的組合依次在細(xì)胞和動物模型上對候選組合靶標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，在“化學(xué)基因組學(xué)”研究技術(shù)平臺層面上進(jìn)行成分

21、-靶標(biāo)相互作用研究，進(jìn)而驗(yàn)證丹參保護(hù)心血管作用的組合靶標(biāo)以及找到療效確切、安全經(jīng)濟(jì)的單體及其組合。六、計(jì)劃進(jìn)度安排2013.6-2013.12：丹參有效成分作用靶標(biāo)的篩選及生物信息學(xué)驗(yàn)證。通過基因芯片及蛋白質(zhì)組技術(shù)初篩得到8-15個潛在靶標(biāo)，并進(jìn)一步通過生物信息學(xué)篩選4-5個候選靶標(biāo)。2014.1-2014.12：丹參有效成分作用靶標(biāo)的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。結(jié)合反義及siRNA技術(shù)，對候選靶標(biāo)進(jìn)行特異性驗(yàn)證，獲得1-2個丹參的作用靶標(biāo)，針對上述靶標(biāo)，研究丹參有效成分及其組合（配伍）對其表達(dá)和調(diào)控的影響，獲得成分與靶標(biāo)相互作用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。2015.1-2015.12：丹參有效成分與靶標(biāo)相互作用研究及驗(yàn)證。通

22、過靶標(biāo)的功能基因組及疾病基因組分析，設(shè)計(jì)出1-2組最佳成分組合，并在動物模型上對其藥理作用及靶標(biāo)表達(dá)和調(diào)控進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，獲得最佳成分配伍及其作用靶標(biāo)；并歸納出丹參有效成分與靶標(biāo)相互作用關(guān)系。七、現(xiàn)有工作基礎(chǔ)和條件 本研究所具有20多年從事中醫(yī)中藥研究的經(jīng)驗(yàn)和一支成熟的科研隊(duì)伍，擁有近3000平方米的實(shí)驗(yàn)室，包括中藥制劑研究室，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室、細(xì)胞培養(yǎng)室（無菌室）、蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)室、遺傳與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、微生物與免疫實(shí)驗(yàn)室、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室，由細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物與免疫、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)和中藥制劑分析等學(xué)科支撐，是浙江省中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室和國家中醫(yī)藥管理局脂代謝三級實(shí)驗(yàn)室以及省教委蛋

23、白質(zhì)組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。有配制先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)動物房，能提供實(shí)驗(yàn)用的清潔級實(shí)驗(yàn)動物。現(xiàn)有正教授2人，副教授5人，其它專業(yè)技術(shù)人員20人?？砷_展藥物制劑，蛋白檢測、生化分析等研究。有從事本研究用的相關(guān)設(shè)備，如冷凍超高速和高速離心機(jī)、蛋白液相分離層析系統(tǒng)、核酸電泳儀、雙相電泳系統(tǒng)、核酸定量測定儀、紫外分光光度計(jì)、酶標(biāo)儀、熒光分析儀、紫外凝膠成像系統(tǒng)、超凈工作臺、倒置熒光顯微鏡、超低溫冰箱、液氮罐、各種培養(yǎng)箱等等。本實(shí)驗(yàn)室與奧地利格拉茨大學(xué)生物化學(xué)研究所建有所際關(guān)系；與德國Max-Plank生物物理研究所和中科院上海生物化學(xué)與細(xì)胞生物研究所具有良好的合作關(guān)系。八、經(jīng)費(fèi)預(yù)算九、參考文獻(xiàn)1張旭靜，孔建龍，黃久儀等

24、。中藥抗動脈粥樣硬化作用研究進(jìn)展。藥學(xué)實(shí)踐研究 2004 22（6） 321-323）2林琦，陸金國，丹參抗動脈粥樣硬化的研究進(jìn)展. 山西中醫(yī)2002 18 (4) 56-58）3Lei XL, Chiou GCY. 1986. Studies on cardiovascular actions of Salvia miltiorrhiza. Am J Chinese Med 14: 26-32.4Liu GT, Zhang TM, Wang BE, Wang YW. 1992. Protective action of seven natural phenolic compounds aga

25、inst peroxidative damage to biomembranes. Biochem Pharmacol 43:147-152.5Onitsuka M, Fujiu M, Shinma N, Maruyama HB. 1983. New platelet aggregation inhibitors from Tan-Shen: radix of Salvia miltiorrhizaBunge. Chem Pharm Bull 31:1670-1675.6Wu YJ, Hong CY, Lin SJ, Wu P, Shiao MS. 1998. Increase of vita

26、min E content in LDL and reduction of atherosclerosis in cholesterol-fed rabbits by a water-soluble antioxidant- rich fraction of Salvia miltiorrhiza. Arteri Thromb Vasc Biol 18:481-486.7Yagi A, Fujimoto K, Tanonaka K, Hirai K, Takeo S. 1989. Possible active components of Tan-Shen (Salvia miltiorrhi

27、za) for protection of the myocardium against ischemiainduced derangements. Planta Med 55:51-54.8Zhou XM, Lu ZY, Wang DW. 1996. Experimental study of Salvia miltiorrhiza on prevention of restenosis after angioplasty. Chung-Kuo Chung Hsi i Chieh Ho Tsa Chih 16:480-482.9王浴生,鄧文龍,薛春生.中藥藥理與應(yīng)用.第2版.北京.人民衛(wèi)生出版