2019屆高三生物二輪復習學案專題八生物技術(shù)實踐

1、專題八生物技術(shù)實踐第 15 講生物技術(shù)實踐1.微生物的分離和培養(yǎng)2.某種微生物數(shù)量的測定3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用4.利用微生物發(fā)酵來生產(chǎn)特定的產(chǎn)物5.運用發(fā)酵加工食品的基本方法6.微生物在其他方面的應用7.從生物材料中提取某些特定的成分(1)倒平板時，應將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上。(×)(2)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害。()(3)用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時，只要稀釋度足夠高，就能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。()(4)對細菌進行計數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線法。(×)(5)醋酸菌在無氧條

2、件下利用乙醇產(chǎn)生醋酸。(×)(6)酵母菌是嗜溫菌，所以果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵溫度。(×)(7)將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，底層和近瓶口處需加大用鹽量。(×)(8)提煉玫瑰精油的玫瑰花應在花開的初期采收，因為此階段的花含玫瑰精油最高。(×)(9)油水混合物中加入無水硫酸鈉，有利于分離油層。(×)(10)萃取是利用了芳香油易溶于有機溶劑的特性進行提取的一種方法。(),1利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)為什么往往比活菌的實際數(shù)目低？提示：是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示。

3、2怎樣準確鑒定某種細菌能夠分解尿素？提示：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果 pH 升高，指示劑將變紅。3說出利用水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油的原理。提示：利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會重新分出油層和水層。全1(2018· 國，T37)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：(1)在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具_(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是_

4、。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能_，在照射前，適量噴灑_，可強化消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過 _(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀” )消毒的。(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度，最可能的原因是_。解析：(1)能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)煮沸消毒法即在 100煮沸 56 min 可以殺死微生物細胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在 7075煮 30

5、60;min或在 80煮 15min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)因紫外線能破壞 DNA 結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強化消毒效果。(4)通常乙醇消毒是 75% 的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；因此水廠供應的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。(5)采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空

6、氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達到設定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度的現(xiàn)象。答案：(1)可以(2)在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞 DNA 結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡全2(2018· 國，T37)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M 培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：(1)M 培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制_的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)M 培養(yǎng)基中的

7、馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有_(答出兩點即可)。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有_(答出兩點即可)。(3)若在 M 培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是_，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_。(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學涂布了 3 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是 110、140 和 149，取平均值 133；乙同學

8、涂布了 3 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是 27、169 和 176，取平均值 124。有人認為這兩位同學的結(jié)果中，乙同學的結(jié)果可信度低，其原因是_。解析：(1)M 培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明 M 培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其它微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)微生物生長需要多種營養(yǎng)物質(zhì)除氮源外，還需要碳源、無機鹽、水以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進入細胞后，可參與合成的生物大

9、分子有蛋白質(zhì)和核酸。(3)淀粉遇碘液會變成藍色，篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物，依據(jù)淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。(4)乙同學結(jié)果不合理，因為 1 個平板的計數(shù)結(jié)果與另 2 個相差懸殊，結(jié)果的重復性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。答案：(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈(4)乙同學的結(jié)果中，1 個平板的計數(shù)結(jié)果與另 2 個相差懸殊，結(jié)果的重復性差全3(2014· 國

10、，T39)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將 1mL 水樣稀釋 100 倍，在 3 個平板上用涂布法分別接入 0.1mL 稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后， 3 個平板上的菌落數(shù)分別為39、38 和 37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為_。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌，操

11、作時，接種環(huán)通過 _滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_。(3)示意圖 A 和 B 中，_表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。4(2017· 國，T37)某些土壤細菌可將尿素分解成 CO  2 和 NH  3，供植物吸收和利用。(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中

12、_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_的利用率。解析：(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，通過隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成，用來進行對照。三個培養(yǎng)基上平均數(shù)為 38，所以每升水樣中活菌數(shù)為 38×10×100×10003.8×107。(2)接種環(huán)用灼燒進行滅菌。在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做的目的是：通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。(3)A 是平板劃線法，B 是稀釋涂布平板法。(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧

13、氣含量，促進好氧型微生物的生長；同時還能使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。答案：(1)檢測培養(yǎng)基平板無菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B (4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)全回答下列問題：(1)有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生 _。能分解尿 素 的 細 菌 不 能 以 尿 素 的 分 解 產(chǎn) 物 CO2 作 為 碳 

14、源 ， 原 因 是 _，但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_ 答出兩點即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇_(填“尿素”“NH4NO 3”或“尿素 NH 4NO 3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是 _。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有 KH 2PO 4 和 Na 2HPO 4，其作用有_(答出兩點即可)。解析：(1)細菌分解尿素是由于細菌體內(nèi)合成脲酶的結(jié)果，尿素

15、是有機物，分解尿素的細菌是分解者，而不是生產(chǎn)者，只能生產(chǎn)者才能利用 CO2 作為碳源合成有機物。葡萄糖通常既作為碳源，也可作為能源，作為碳源可轉(zhuǎn)變成其它有機物。(2)篩選分解尿素的細菌，通常只能用尿素作為唯一氮源，對于 “NH 4NO 3”或“尿素NH 4NO 3”均含有無機氮源。(3)KH 2PO 4 和 Na 2HPO 4 為微生物培養(yǎng)可提供 P 元素和無機鹽離子如鉀離子和鈉離子。答案：(1)脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物，不能利用

16、 CO 2 來合成有機物為細胞生物生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有 NH 4NO 3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH 4NO 3，不能起到篩選作用(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中 pH 穩(wěn)定全5(2014· 國，T39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解，回答下列問題：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由 3 種組分組成的復合酶，其中葡萄糖苷酶可將_分解成_

17、。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR 可與纖維素形成_色復合物。用含有 CR 的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)(成分見下表)：培養(yǎng)基甲酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR 溶液水培養(yǎng)基乙據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_。解析：(1)葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖

18、維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 (3)纖維素分解菌分離和鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，而培養(yǎng)基甲中沒有瓊脂，是液體培養(yǎng)基，要分離和鑒別纖維素分解菌， 需要以纖維素為主要碳源的培養(yǎng)基， 培養(yǎng)基乙不具有選擇的作用。答案：(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成 CR 纖維素紅色復合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌全6(2016· 國，T39)某同學用新鮮的泡菜濾液為實驗材

19、料分離純化乳酸菌。分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}：(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用 _對泡菜濾液進行梯度稀釋，進行梯度稀釋的理由是_。(2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有 _和_。分離純化時應挑選出_的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在20 長期保存時，菌液中常需要加入一定量的_(填“蒸餾水”、“甘油”或“碳酸鈣”)。解析：(1)分離純化乳酸菌時，首先需要用無菌水對泡菜濾液進行梯度稀釋；進行梯度稀釋的理由是在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表

20、面形成單個的菌落。若直接培養(yǎng)，由于泡菜濾液中菌的濃度高，則很難分離得到單菌落。(2)由題意可知，分離純化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。由此可推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有中和乳酸菌代謝過程中產(chǎn)生的乳酸和鑒別能產(chǎn)生乳酸的乳酸菌；根據(jù)產(chǎn)酸菌在含 CaCO 3 的培養(yǎng)基上產(chǎn)生透明圈的原理，分離純化時應挑選出具有透明圈的菌落作為候選菌，然后用平板劃線法進一步分離純化。(3)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。即將 1mL 培養(yǎng)的菌種轉(zhuǎn)移到已滅菌的盛有 1mL 

21、;甘油的甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在20的冷凍箱中保存。所以乳酸菌在20長期保存時，菌液中常需要加入一定量的甘油。答案：(1)無菌水泡菜濾液中菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸具有透明圈(3)甘油全7(2015· 國，T39)已知微生物 A 可以產(chǎn)生油脂，微生物 B 可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P問題：(1)顯微觀察時，微生物 A 菌體中的油脂通?？捎糜赺染色。微生物 A 產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用_(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法

22、”)從菌體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物 B 的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物 B 的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用_直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用_法進行計數(shù)。(4)為了確定微生物 B 產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學測得相同時間內(nèi)，在 35、40、45溫度下降解 10g 油脂所需酶量依次為 4mg 、1mg 、6mg ，則上述三個溫度中，_條件下該酶活力最小。

23、為了進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞_設計后續(xù)實驗。解析：(1)油脂可被蘇丹染液(或蘇丹)染液染成橘黃色(或紅色)。由于微生物 A 產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，故采用萃取法。(2)能產(chǎn)生脂肪酶的微生物 B 可以分解脂肪，故可以以脂肪為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，不產(chǎn)生脂肪酶的微生物無法生存。(3)微生物 B 的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)；活菌用稀釋涂布平板法，只有活的菌體才能形成菌落。(4)45降解 10g 油脂所需酶量最大，故酶活性最??；40溫度下，降解 10g 油脂所需酶量最小，故酶活

24、性最大，由此可知要想探究該酶的最適溫度需要圍繞 40溫度設置溫度梯度進行實驗。答案： (1)蘇丹 (或者蘇丹 ) 萃取法(2)油脂(3)血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板(4)45 40考點一微生物的應用1微生物純化培養(yǎng)的方法比較(1)平板劃線操作(2)稀釋涂布平板操作：先將菌液進行一系列梯度稀釋后涂布平板，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。如圖所示：(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學實驗一般會設置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上

25、是否有菌落生成。(2)觀察菌落需用固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基要添加瓊脂。(3)倒平板的溫度一般在 50 左右適宜，溫度過高會燙手，溫度過低培養(yǎng)基又會凝固。(4)平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成培養(yǎng)基污染。(5)平板劃線法只適用于微生物的提純，不適合進行計數(shù)，并且在最后一次劃線的末端處的菌種最純。(6)利用平板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌數(shù)：C/V ×M( 稀釋倍數(shù))。(7)菌種用甘油管藏法長期保存，保存時菌液中常添加一定量的甘油。2把握微生物分離與計數(shù)的兩個實例(1)土壤中分解尿素的細菌的

26、分離與計數(shù)篩選菌株：利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。測定微生物數(shù)量的常用方法：活菌計數(shù)法和顯微鏡直接計數(shù)。過程：土壤取樣樣品稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察。鑒定方法：含酚紅指示劑以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基細菌出現(xiàn)紅色透明圈，則該菌能分解尿素。(2)分解纖維素的微生物的分離實驗原理：即：可通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。流程：土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑選菌落。微生物的分離與計數(shù)(1)篩選微生物的“兩”種選擇培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基：篩選尿素分解菌。富含纖維素的培養(yǎng)基：篩選纖維素分解菌。(2)鑒別微生物的“兩”種鑒別培養(yǎng)基添加酚紅指示劑的培養(yǎng)基：尿素分解菌可使該培養(yǎng)基變紅。添加剛果紅的培養(yǎng)基：纖

27、維素分解菌的菌落周圍產(chǎn)生透明圈。(3)微生物計數(shù)的“兩”種方法直接計數(shù)法：顯微鏡直接計數(shù)法。間接計數(shù)法：稀釋涂布平板法(活菌計數(shù)法)，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。全1(2016· 國，T39)空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：配制培養(yǎng)基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl 、X 、H 2O)；制作無菌平板；設置空白對照組和若干實驗組，進行相關操作；將各組平板置于 37 恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌

28、落的平均數(shù)。回答下列問題：(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于 _。若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分 X 通常是_。(2)步驟中，實驗組的操作是_。(3)若在某次調(diào)查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為 36 個/平板，而空白對照組的一現(xiàn)個平板上出現(xiàn)了 6 個菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了 _象。若將30(即 36 6)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法 _(填“正確”或“不正確”)。解析：(1)依據(jù)配制培養(yǎng)基的成分可知，該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于牛肉膏、蛋白胨。因為該實驗是&

29、#160;“用平板收集教室空氣中的微生物”，所使用的培養(yǎng)基應為固體培養(yǎng)基，配制時，需加入凝固劑，據(jù)此推知，該培養(yǎng)基中的成分 X 通常是瓊脂。(2)依題意可知，該實驗的目的是，用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。所以步驟中，實驗組的操作是，將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間，以收集教室不同高度空氣中的微生物。(3)設置的空白對照組，在整個實驗過程中沒有用來收集空氣中的微生物，若空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了 6 個菌落，說明培養(yǎng)基的配制是不成功的，在此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象，所以若將 

30、;30(即 366)個/平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法不正確。答案：(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間(3)污染不正確安2(2018· 徽六校教育研究會聯(lián)考)為解決塑料袋造成的“白色污染”問題，某同學試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解的目的菌，請根據(jù)有關知識回答下列問題：(1)為培養(yǎng)該目的菌，需要配制出供其 _所需的營養(yǎng)基質(zhì)培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_。在接種前需要檢驗使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格，方法是_。(2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，我們可在接種之前進行

31、0;_培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度。實驗室常用的接種方法有_和_。(3)該同學在稀釋倍數(shù)為 104 的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)分別為 24、23、25，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是_個(涂布平板時所用稀釋液的體積為 0.2 mL)。用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目_。解析：(1)培養(yǎng)基可以為目的菌的生長繁殖提供營養(yǎng)物質(zhì)，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基是否被污染，可以將未接種的培養(yǎng)基在37(或適宜溫度)恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成。(2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，在接種之前用以聚乙烯塑

32、料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度；實驗室常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)根據(jù)題意可知，每克樣品中的菌落數(shù)平板上菌落數(shù)的平均值÷體積×稀釋倍數(shù)(242325)÷0.2×1041.2×106；由于細菌會相互重疊，因此用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少。答案： (1)生長繁殖高壓蒸汽滅菌法將未接種的培養(yǎng)基在 37(或適宜溫度)恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時間(或 12 天)，觀察是否有菌落生成(2)選擇平板劃線法稀釋涂布配制培養(yǎng)基   

33、60;  X  培養(yǎng) 觀察平板法(3)1.2×106少3對微生物進行分離培養(yǎng)，實驗基本步驟如下：滅菌、倒平板(1)圖中步驟 X 表示_。(2)某興趣小組嘗試對家庭飲用水中的大腸桿菌含量進行檢測，用濾膜對家庭飲用水過濾后，將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍培養(yǎng)基上進行檢測，若有大腸桿菌，伊紅美藍培養(yǎng)基上會出現(xiàn)_色菌落，從功能上看，伊紅美藍培養(yǎng)基被稱做_培養(yǎng)基。(3)分離幽門螺桿菌配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和 _指示劑，這是因為幽門螺桿菌含有_；若有幽門螺桿菌，則菌落周圍會出現(xiàn)_色透明圈。臨床上常讓病人喝一定量用 

34、14C 標記的尿素，檢測呼出的氣體中有無 14CO 2 來判斷是否感染了幽門螺桿菌(14C 呼氣試驗)，其基本原理是_。解析：(1)滅菌、倒平板后的 X 步驟表示接種。在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上，菌液稀釋的目的是為了獲得單一菌落。(2)測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目的方法：將已知體積的水過濾后，將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。從功能上看，伊紅美藍培養(yǎng)基被稱做鑒別培養(yǎng)基。(3)由于幽門螺桿菌在分解尿素的

35、過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，pH 升高，所以可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑和尿素，若有幽門螺桿菌，尿素被分解后產(chǎn)生氨，pH 升高，指示劑變紅，則菌落周圍會出現(xiàn)紅色透明圈。臨床上常讓病人喝一定量用 14C 標記的尿素，檢測呼出的氣體中有無 14CO 2 來判斷是否感染了幽門螺桿菌(14C呼氣試驗)，其基本原理是幽門螺桿菌能將 14C 標記的尿素分解為 NH 3 和 14CO 2。答案：(1)接種(2)黑鑒別(培養(yǎng)基) (3)

36、酚紅脲酶紅幽門螺桿菌能將 14C 標記的尿素分解為 NH 3 和 14CO2安4(2018· 徽滁州期末)科學家篩選培育良種纖維素分解菌對玉米芯進行降解，并進一步利用酵母菌發(fā)酵制備乙醇。回答下列問題：(1)篩選纖維素分解菌時，一般在以_為唯一碳源的培養(yǎng)基中添加染料，通過是否產(chǎn)生_來篩選纖維素分解菌。(2)請用文字敘述圖 1 中分解玉米芯絲菌用量與還原糖濃度的關系 _。(3)圖 2 表示酵母菌量與酒精產(chǎn)生量的關系，酵母菌接種量超過 40mL 后，酒

37、精產(chǎn)量反而減少的原因是_。為確定發(fā)酵罐內(nèi)酵母菌的數(shù)量，常用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細菌數(shù)量，統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小的原因是_。解析：(1)纖維素分解菌具有分解纖維素的能力，因此其培養(yǎng)基中一般添加纖維素作為唯一碳源；剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅纖維素的復合物就無法合成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，所以我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(2)根據(jù)圖 1 中的曲線變化分析，隨著纖維素分解菌用量的增加，還原糖濃度先增加后降低，即在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當菌用量過大時，還原

38、糖含量下降。(3)圖 2 顯示，酵母菌接種量超過 40mL 后，酒精產(chǎn)量反而減少，其主要原因是酵母菌接種量過大導致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動；稀釋涂布平板法統(tǒng)計細菌數(shù)量時，由于兩個或多個細菌形成一個菌落，所以統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小。答案：(1)纖維素透明圈(2)在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當菌用量過大時，還原糖含量下降(3)酵母菌接種量過大導致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動 兩個或多個細菌形成一個菌落河5(2018· 南中原名校第六次質(zhì)考 )多氯聯(lián)苯

39、(PCB)是一種對人體有害的有機物，某科技小組欲從受 PCB 污染的土壤中分離出能分解 PCB 的細菌。請回答下列問題：(1)要從受 PCB 污染的土壤中分離出能分解 PCB 的細菌，應配制以_作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基；配制培養(yǎng)基時用到的玻璃器皿需用_進行滅菌。(2)分離前可通過選擇培養(yǎng)增加土壤中 PCB 分解菌的濃度，選擇培養(yǎng)時需要不斷震蕩錐形瓶的目的是_。(3)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計 PCB 分解菌的濃度時，常需同時培養(yǎng)空白培養(yǎng)基，其目的是_。若實驗中發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上生長

40、有 3 個菌落，為準確測定樣液中 PCB分解菌的濃度，則需要_。(4)在純化土壤中的 PCB 分解菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_，應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？_。解析：(1)分析題意可知，要從土壤中篩選出能分解 PCB 的細菌，應采用以 PCB 作為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基；實驗中的玻璃器皿一般采用干熱滅菌法進行滅菌。(2)培養(yǎng) PCB 分解菌時，需要不斷的震蕩錐形瓶，目的是為了讓 PCB 分解菌充分與培養(yǎng)液接觸，進而充分利用營養(yǎng)物質(zhì)。(3)用稀

41、釋涂布平板法統(tǒng)計 PCB 分解菌的濃度時，為了檢測所用培養(yǎng)基滅菌是否徹底，需要培養(yǎng)空白培養(yǎng)基作為對照。若實驗中發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上生長有 3 個菌落，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，為準確測定樣液中 PCB 分解菌的濃度，則需要重新配制培養(yǎng)基進行實驗。(4)若 PCB 分解菌的菌落在培養(yǎng)基上連成一片，說明菌液濃度過高，則應該對菌液進行梯度稀釋。答案：(1)多氯聯(lián)苯(PCB)干熱滅菌法(2)讓 PCB 分解菌充分利用營養(yǎng)物質(zhì)(3)檢測所用培養(yǎng)基滅菌是否徹底重新配制培養(yǎng)基進行實驗(4)菌液濃度過高對菌液進行梯度稀

42、釋(加大稀釋倍數(shù))考點二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應用1果酒和果醋的制作2腐乳的制作(1)制作原理(2)實驗流程及影響因素3.泡菜的制作1把握控制雜菌的“四大措施”(1)通過發(fā)酵條件控制雜菌。無氧發(fā)酵時的無氧環(huán)境可以抑制好氧菌。乳酸菌發(fā)酵、酒精發(fā)酵形成的酸性環(huán)境抑制雜菌繁殖。(2)利用鹽控制雜菌：如腐乳的制作。(3)利用酒精控制雜菌：如果酒、腐乳的制作。(4)利用香辛料控制雜菌：如腐乳、泡菜的制作。2乳酸菌、乳酸、亞硝酸鹽的數(shù)量隨時間變化的曲線模型構(gòu)建全1(2018· 國，T37)回答下列與酵母菌有關的問題：或(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用_(填“牛肉膏蛋白胨”“MS” “麥芽

43、汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應采用_滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后會觀察到菌落，菌落的含義是_。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，可促進_(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進行厭氧培養(yǎng)，可促進_(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是_。解析：(1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應采用高壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落。(2)酵

44、母菌液體培養(yǎng)時，若通入氧氣，進行有氧呼吸產(chǎn)生 H 2O 和 CO 2，釋放能量多，細胞增殖快；若進行無氧培養(yǎng)，進行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和 CO 2，釋放能量少，增殖慢。(3)制作面包時，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得面包松軟多孔。答案：(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生 CO 2，CO 2 使面包松軟全2(2016

45、3; 國，T39)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}：(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程和是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細胞的_中進行，其產(chǎn)物乙醇與_試劑反應呈現(xiàn)灰綠色，這一反應可用于乙醇的檢驗；過程在酵母菌細胞的_中進行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度_。(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過程需要在_條件下才能完成。(3)在 生 產(chǎn) 過 程 中 ， 第 一 階 段 

46、和 第 二 階 段 的 發(fā) 酵 溫 度 不 同 ， 第 一 階 段 的 溫 度_(填“低于”或“高于”)第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于 _核生物，其細胞結(jié)構(gòu)中 _(填“含有”或“不含有” )線粒體。解析：(1)圖示中的過程和分別表示無氧呼吸的第一、第二階段，其場所均為細胞質(zhì)基質(zhì)；橙色的重鉻酸甲溶液在酸性條件下與乙醇(酒精)反應變成灰綠色。過程表示有氧呼吸的第二、第三階段，其場所

47、分別為線粒體基質(zhì)和線粒體內(nèi)膜，即過程在酵母菌細胞的線粒體中進行。與無氧條件相比，在有氧條件下，酵母菌的增殖速度快。(2)醋酸桿菌是一種好氧菌，在氧氣充足的條件下才能進行旺盛的生命活動，因此將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，需要在有氧條件下才能完成。(3)第一階段即果酒的制作，所控制的溫度范圍是 1825，第二階段即果醋的制作，所控制的溫度范圍是 3035，所以第一階段的溫度低于第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于原核生物，其細胞結(jié)構(gòu)中不含線粒體等復雜的細胞器。   高純度     蘋果蘋果汁

48、60;              果汁蘋果酒原醋等原料答案：(1)細胞質(zhì)基質(zhì)重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(3)低于(4)原不含有全3(2017· 國，T37)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的 A 、B 兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并在 32 h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果?；卮鹣铝袉栴}：(1)該實

49、驗的自變量是_、_。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是_。(3)如果在實驗后，發(fā)現(xiàn) 32 h 內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線上升關系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是_。(4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?#160;_，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)開。解析：(1)該實驗的自變量是菌種、發(fā)酵時間。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，說明該發(fā)酵菌是好氧菌。(3)如果在實驗后，發(fā)現(xiàn) 32 h 內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好，且隨發(fā)酵時間呈直線

50、上升關系，則無法確定發(fā)酵的最佳時間；若要確定最佳發(fā)酵時間，還需要做的事情是延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間。(4)從大豆到豆豉，大豆中的成分會發(fā)生一定的變化，其中，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榘被岷碗?，脂肪轉(zhuǎn)變?yōu)橹舅岷透视?。答案?1)菌種發(fā)酵時間(2)好氧菌(3)延長發(fā)酵時間，觀測發(fā)酵效果，最好的發(fā)酵效果所對應的時間即為最佳發(fā)酵時間(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油安4(2018· 徽江淮十校 4 月聯(lián)考)下圖為蘋果醋的工業(yè)生產(chǎn)流程，以及實驗室分離、純化發(fā)酵菌的方法步驟。請回答以下問題：鮮蘋 蘋果醋純化發(fā)酵菌的方法步驟：配制培養(yǎng)基培養(yǎng)基滅菌接種培養(yǎng)挑選符合要求的菌落。(1)在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是 _，因此需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌，空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使破壞DNA 的結(jié)構(gòu)，也能使蛋白質(zhì)_。(2)上圖中過程與過程需要接種的發(fā)酵菌分別是_。(3)某同學計劃統(tǒng)計食醋中該發(fā)酵菌的總數(shù)，他選用 104、105、106 稀釋液進行涂布，每種稀釋液都設置了3 個培養(yǎng)皿。從對照實驗的角度看，還應設置的一組對照組是_，設置對照組的目的是_。(4)對同一濃度的發(fā)酵菌稀釋液，分別用血球計數(shù)板計數(shù)和稀釋涂布平板法計