氣相色譜和液相色譜儀的區(qū)別(共2頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上氣相色譜和液相色譜儀的區(qū)別一、分離原理：    1.氣相：氣相色譜是一種物理的分離方法。利用被測物質(zhì)各組分在不同兩相間分配系數(shù)（溶解度）的微小差異，當兩相作相對運動時，這些物質(zhì)在兩相間進行反復多次的分配，使原來只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果，而使不同組分得到分離。    2.液相：高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術上，流動相改為高壓輸送（最高輸送壓力可達4.9107Pa）;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜（每米塔板數(shù)可達幾萬或幾十萬）

2、；同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續(xù)檢測。二、應用范圍：    1.氣相：氣相色譜法具有分離能力好，靈敏度高，分析速度快，操作方便等優(yōu)點，但是受技術條件的限制，沸點太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難于應用氣相色譜法進行分析。一般對500以下不易揮發(fā)或受熱易分解的物質(zhì)部分可采用衍生化法或裂解法。    2.液相：高效液相色譜法，只要求試樣能制成溶液，而不需要氣化，因此不受試樣揮發(fā)性的限制。對于高沸點、熱穩(wěn)定性差、相對分子量大（大于 400 以上）的有機物（ 些物質(zhì)幾乎占有機物總數(shù)的 75% 80% ）原則上都可應用高效液相色

3、譜法來進行分離、分析。 據(jù)統(tǒng)計，三、儀器構造：    1.氣相：由載氣源、進樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。進樣部分、色譜柱和檢測器的溫度均在控制狀態(tài)。        1.1 柱箱：色譜柱是氣相色譜儀的心臟， 樣品中的各個組份在色譜柱中經(jīng)過反復多次分配后得到分離， 從而達到分析的目的， 柱箱的作用就是安裝色譜柱。        由于色譜柱的兩端分別連接進樣器和檢測器， 因此進樣器和檢測器的下端（ 接頭） 均插

4、入柱箱。        柱箱能夠安裝各種填充柱和毛細管柱， 并且操作方便。        色譜柱（ 樣品） 需要在一定的溫度條件下工作， 因此采用微機對柱箱進行溫度控制。并且由于設計合理， 柱箱內(nèi)的梯度很小。        對于一些成份復雜、沸程較寬的樣品， 柱箱還可進行三階程序升溫控制。且程序設定后自動運行無需人工干預， 降溫時還能自動后開門排熱。   &

5、#160;    1.2 進樣器：        進樣器的作用是將樣品送入色譜柱。如果是液體樣品， 進樣器還必須將其汽化， 因此采用微機對進樣器進行溫度控制。        根據(jù)不同種類的色譜柱及不同的進樣方式， 共有五種進樣器可供  選擇：  1.填充柱進樣器  2.毛細管不分流進樣器附件  3.毛細管分流進樣器附件  4.毛細管分流/不分流進樣器  5.六通閥氣體

6、進樣器        1.3檢測器:        檢測器的作用是將樣品的化學信號轉(zhuǎn)化為物理信號（ 電信號） 。        檢測器也需要在一定的溫度條件下才能正常工作， 因此采用微機對檢測器進行溫度控制。        根據(jù)各種樣品的化學物理特性， 共有五種檢測器可供選擇：  1.氫火焰離子化檢測器(FI

7、D)  2.熱導檢測器(TCD)  3.電子捕獲檢測器(ECD)  4.氮磷檢測器(NPD)  5.火焰光度檢測器(FPD)        1.4 數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)         該系統(tǒng)可對測試數(shù)據(jù)進行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作，使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。2.液相：高效液相色譜儀主要有進樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成。    

8、0;   2.1 進樣系統(tǒng)             一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作，進樣量是恒定的。這對提高分析樣品的重復性是有益的。         2.2 輸液系統(tǒng)             該系統(tǒng)包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l4744X10

9、7Pa，流速可調(diào)且穩(wěn)定，當高壓流動相通過層析柱時，可降低樣品在柱中的擴散效應，可加快其在柱中的移動速度，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存錯和梯度儀，可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變，包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值，或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)（即使僅有一個基團的差別或是同分異構體）都能獲得有效分離。         3.3 分離系統(tǒng)           

10、0; 該系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為1050cm（需要兩根連用時，可在二者之間加一連接管），內(nèi)徑為25mm，由"優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成，住內(nèi)裝有直徑為510m粒度的固定相（由基質(zhì)和固定液構成）固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹脂或硅膠構成，它們都有惰性（如硅膠表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔徑可達1000?）和比表面積大的特點，加之其表面經(jīng)過機械涂漬（與氣相色譜中固定相的制備一樣），或者用化學法偶聯(lián)各種基因（如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等）或配體的有機化合物。     &#

11、160;       因此，這類固定相對結構不同的物質(zhì)有良好的選擇性。例如，在多孔性硅膠表面偶聯(lián)豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。另外，固定相基質(zhì)粒小，柱床極易達到均勻、致密狀態(tài)，極易降低渦流擴散效應?；|(zhì)粒度小，微孔淺，樣品在微孔區(qū)內(nèi)傳質(zhì)短。這些對縮小譜帶寬度、提高分辨率是有益的。根據(jù)柱效理論分析，基質(zhì)粒度小，塔板理論數(shù)N就越大。這也進一步證明基質(zhì)粒度小，會提高分辨率的道理。      再者，高效液相色譜的恒溫器可使溫度從室溫調(diào)到60C，通過改善傳質(zhì)速度，縮短分

12、析時間，就可增加層析柱的效率。           2.4 檢測系統(tǒng)           高效液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。          （1）紫外檢測器           該檢測器適用于對紫外光（或可見光

13、）有吸收性能樣品的檢測。其特點：使用面廣（如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用）；靈敏度高（檢測下限為10-10gml）；線性范圍寬；對溫度和流速變化不敏感；可檢測梯度溶液洗脫的樣品。          （2）示差折光檢測器           凡具有與流動相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢測。 ，糖類化合物的檢測 使用此檢測系統(tǒng)。這一系統(tǒng)通用性強、操作簡單，但靈敏度低（檢測下限為10-7gml），流動相的變化會引起折光率的變化，因此，它既不適用于痕量分析，也不適用于梯度洗脫樣品的檢測。          （3）熒光檢測器           凡具有熒光的物質(zhì)，在一定條件下，其發(fā)射光的熒光強度與物質(zhì)的濃度成正比。因此，這一檢測器只適用于具有熒光的有機化合物（如多環(huán)芳烴、氨基酸、胺類、維生素和某些蛋白質(zhì)等）的測定，其靈敏度很高（