亞慢性毒性作用及其試驗方法

1、亞慢性毒性作用及其試驗方法一、概念和試驗?zāi)康囊桓拍顏喡远拘允侵笇嶒瀯游镞B續(xù)多日接觸較大劑量的外來化合物所出現(xiàn)的中 毒效應(yīng).所謂較大劑量,是指小于急性 LD50的劑量.二試驗?zāi)康膩喡远拘栽囼灥哪康?主要是探討亞慢性毒性的閾劑量或閾濃度和在亞 慢性試驗期間未觀察到毒效應(yīng)的劑量水平,且為慢性試驗尋找接觸劑量及觀察 指標(biāo).二、亞慢性毒性試驗設(shè)計一亞慢性試驗期限亞慢性毒性試驗的期限 多日確實切天數(shù),至今尚無完全統(tǒng)一的熟悉.一 般認(rèn)為在環(huán)境毒理學(xué)與食品毒理學(xué)中所要求的連續(xù)接觸為36個月,而在工業(yè)毒理學(xué)中認(rèn)為13月即可.這是考慮到人類接觸大氣、水和食品污染物的持續(xù) 時間一般較久,而在工業(yè)生產(chǎn)過程中接觸化

2、合物僅限于人一生中的工作年齡階 段,且每日工作不超過8小時之故.現(xiàn)有學(xué)者主張進(jìn)行實驗動物90天喂飼試驗為亞慢性毒性試驗,即將受試物 混合物飼料或飲水中,動物自然攝取連續(xù) 90天.這是由于有研究報道認(rèn)為動物 連續(xù)接觸外來化合物3個月,其毒性效應(yīng)往往與再延長接觸時間所表現(xiàn)的毒性 效應(yīng)根本相同,故不必再延長接觸期限.相應(yīng)地主張呼吸道接觸可進(jìn)行30天或90天試驗,每天6小時,每周5天.經(jīng)皮膚試驗進(jìn)行30天.二實驗動物和染毒途徑1、實驗動物的選擇亞慢性毒性作用研究一般要求選拔兩種實驗動物,一種為嚙齒類,另一種 為非嚙齒類,如大鼠和狗,以便全面了解受試物的毒性阿特征.由于亞慢性毒性試驗期較長,所以選擇被動

3、物的體重 年齡應(yīng)較小,如小鼠 應(yīng)為15g左右,大鼠100g左右.2、染毒途徑亞慢性毒性試驗接觸外來化合物途徑的選擇,應(yīng)考慮兩點：一是盡量模擬人類在環(huán)境中接觸該化合物的途徑或方式,二是應(yīng)與預(yù)期進(jìn) 行慢性毒性試驗的接觸途徑相一致.具體接觸途徑主要有經(jīng)口、經(jīng)呼吸道和經(jīng) 皮膚三種.三劑量選擇與劑量分組亞慢性試驗的上限劑量,需限制在實驗動物接觸受試化合物的整個過程 中,不發(fā)生死亡或僅有個別動物死亡,但有明顯的中毒效應(yīng),或靶器官出現(xiàn)典 型的損傷.此劑量確實定可參考兩個數(shù)值,一是以急性毒性的閾劑量為亞慢性試驗的 最高劑量；一是以此化合物L(fēng)D50的為最高劑量.化合物亞慢性毒性試驗應(yīng)求出具劑量-反響關(guān)系,只有求

4、出劑量-反響關(guān) 系才能說明受試化合物的亞慢性毒作用特征,并為慢性毒性試驗打下根底.為 此,亞慢性試驗至少應(yīng)設(shè)計三個染毒劑量組及一個正常動物對照組,必要時再 加一個受試化合物的溶劑對照組.最低劑量組的劑量應(yīng)相當(dāng)于亞慢性的閾劑量 水平或未觀察到作用水平,中間劑量組動物以出現(xiàn)稍微中毒效應(yīng)為度.組內(nèi)動 物個體體重相差應(yīng)不超過平均體重的 10%,組間平均體重相差不超過 5%o小動 物每組不應(yīng)少于20只,大動物不少于68只.四觀察指標(biāo)1、一般性指標(biāo)1） .一般綜合性觀察指標(biāo)這類指標(biāo)是非特異性觀察指標(biāo),它是外來化合物對 機(jī)體毒性作用的綜合性總體反映.動物體重實驗動物在亞慢性方式接觸外來化合物過程中,有多種因

5、素均 可影響動物體重的增長,包括食欲變化、消化功能變化、代謝和能量消耗變化等.體重變化的表示方式,可將接觸組與對照組同期體重絕對增長的重量加以 比擬和統(tǒng)計學(xué)處理.也可將接觸組與對照組同期體重百分增長率以接觸化合物開始時動物體重為100%世行統(tǒng)計和比擬.食物利用率亞慢性試驗期間必須注意觀察并記錄動物的飲食情況,在此 根底上計算食物利用率,即動物每食入 100g飼料所增長的體重克數(shù).分析比擬 接觸組與對照組食物利用率,有助于分析受試化合物對實驗動物的生物學(xué)效 應(yīng).病癥實驗動物在接觸外來化合物過程中所出現(xiàn)的中毒病癥及出現(xiàn)各病癥 的先后次序、時間均應(yīng)記錄和分析.臟器系數(shù)或稱臟/體比值,是指某個臟器的濕重與單位體重的比值,通常 以100g體重計.如肝/體比,即全肝濕重/體重100此指標(biāo)的意義是實驗動物 在不同年齡期,其各臟器與體重之間重量比值有一定規(guī)律；假設(shè)受試化合物使某 個臟器受到損害,那么此比值就會發(fā)生改變,可以增大或縮小,因此,臟/體比值是一個靈敏、有效和經(jīng)濟(jì)的指標(biāo).2） .一般化驗指標(biāo)主要指血象和肝、腎功能的檢測,在亞慢性試驗中研究外 來化合物對實驗動物的毒性作用,使用這類指標(biāo),一般為篩檢性和探討性.通 常血象檢測包括紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)和分類、血紅蛋白定量等.肝、腎功 能也是一種常規(guī)指標(biāo),如 SGOT SGPT血清尿素氮