清潔驗證實施方案

1、PKFG300凱生素瓶螺桿分裝機清潔驗證方案2011年10月驗證方案的起草與審批驗證小組成員部門人員職責(zé)粉針劑車間李海龍負責(zé)驗證方案組織與實施粉針劑車間黃仁春負責(zé)驗證方案的擬定、驗證報告的起草設(shè)備部霍育生負責(zé)驗證所需儀器、設(shè)備的正常運行QA部宋新莉負責(zé)驗證過程中的監(jiān)控和取樣QC部張華負責(zé)驗證過程中環(huán)境和樣品的檢測方案起草部門起草人日期方案審核審核簽名日期驗證委員會進行審閱會簽方案批準批準人批準日期方案實施日期:目 錄1 .驗證概述32 .驗證目的43 .風(fēng)險評估44 .驗證標準85 .驗證范圍86 .驗證周期87 . 驗證職責(zé) 88 .驗證實施的前提條件 99 .驗證方案的起草與審批 910

2、.驗證時間安排 911 .驗證1011.1 本次驗證具體措施及檢測項目 1011.2 取樣工具：1011.3 取樣溶劑1011.4 檢驗儀器1011.5 取樣和檢驗方法 1011.6 取樣位置1211.7 驗證具體實施方法及可接受標準 15(1)清潔效果驗證 15(2)確定設(shè)備存放時間 1511.8 取樣計劃1612偏差處理2113風(fēng)險的接收與評審 2114驗證結(jié)果評審和結(jié)論 2215 .方案修改記錄 2316 .附件241 .驗證概述本公司粉針劑車間生產(chǎn)設(shè)備KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機，主要用于新產(chǎn)品注射用頭抱米諾鈉的 分裝生產(chǎn)，該設(shè)備主要結(jié)構(gòu)、清潔方法及其所有接觸藥品零部件具體面積見附

3、件。為了確保后續(xù)產(chǎn)品中沒有帶入超過接受標準的污染物，避免產(chǎn)品的交叉污染，須對 KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機生產(chǎn)后的 清潔進行驗證，測定驗證對象清洗程度，并對設(shè)備清潔最終效果作出評價。確保藥品生產(chǎn)開始前設(shè)備表 面的清潔程度符合要求。設(shè)備清潔：是擦拭清潔設(shè)備本身、拆洗設(shè)備關(guān)鍵零部件和擦洗相關(guān)容器具等，其中主要是設(shè)備關(guān)鍵零部件的清洗，其清潔后隨時用隨時傳進，不用時就傳出清潔滅菌。設(shè)備關(guān)鍵零部件、容器的滅菌效果已 在兩個滅菌柜的驗證中進行，所以這里只需要對分裝機設(shè)備關(guān)鍵零部件、容器清潔效果以及待清潔、清 潔后、滅菌后的最大存放時間進行驗證即可。本驗證以產(chǎn)品生產(chǎn)后，按設(shè)備清潔標準操作規(guī)程進行清洗，檢

4、測設(shè)備清潔效果、主要活性成分的殘 留量、微生物等，驗證其結(jié)果均在規(guī)定的許可范圍之內(nèi)，不會對下一品種的質(zhì)量造成影響。2 .驗證目的2.1 本次驗證KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機在頭抱米諾鈉分裝生產(chǎn)后按照KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機清潔標準操作規(guī)程（文件編號為SOP-0203-C-007/01 ）進行清洗后，清潔效果能夠穩(wěn)定地達到預(yù)定要求。2.2 通過本次驗證確定生產(chǎn)結(jié)束至開始清潔的最長時間（待清潔設(shè)備容器保留時間）。已清潔設(shè)備容器用于滅菌前的最長存放時間（設(shè)備清潔有效期）。已滅菌設(shè)備容器的存放有效期。2.3 驗證1%氫氧化鈉溶液滅活效果3 .風(fēng)險評估按照質(zhì)量風(fēng)險管理規(guī)程，并從影響清潔的綜合

5、因素出發(fā)，發(fā)現(xiàn)直接或間接影響產(chǎn)品質(zhì)量的因素來確 定風(fēng)險識別。3.1 經(jīng)驗證小組人員共同結(jié)合設(shè)備結(jié)構(gòu)、產(chǎn)品性質(zhì)對清潔程序驗證進行風(fēng)險評估，對存在的質(zhì)量風(fēng)險提 出了預(yù)防和糾正措施建議，具體見下表1 :表1: FMEA記錄風(fēng)險因 素風(fēng)險影響現(xiàn)有 控制措施可 能 性嚴 重 度檢 測 性險先牧 風(fēng)優(yōu)數(shù)風(fēng)險 級別建議采取措施設(shè)備清 潔程序設(shè)備清潔程序不小差 l=r設(shè)備污染、交叉污染已建立 清潔規(guī)程53345高對程序進行驗證清潔劑清潔劑 不適用，清 潔效果/、 好設(shè)備上的產(chǎn)品或清潔溶劑 本身不易被清潔除去造成 殘留進而污染下批生產(chǎn)產(chǎn) 品選用工藝用水 和1%氫氧化鈉 溶液53345高對清潔效果進行目檢， 并通

6、 過驗證檢測產(chǎn)品和清潔劑 的殘留消毒劑消毒劑 不適用，消 毒效果/、 好末有效降低設(shè)備表面微生 物增加火菌殺火難度或風(fēng) 險75%乙醇33327中對消毒劑的驗證文件和培 訓(xùn)情況進行檢查火菌火菌失 效造成產(chǎn)品被微生物污染風(fēng) 險危及用約安全已建立其操作 和維保規(guī)程，并 進行了培訓(xùn)33327高對兩臺滅菌柜的驗證情況， 計量情況，以及人員的相關(guān) 培訓(xùn)情況進行確認人員 操作未按設(shè)備SOP清潔設(shè)備清潔不徹底、不同人員 清潔效果無重現(xiàn)性造成交 叉污染人員進行操作 培訓(xùn)43336高對培訓(xùn)情況進行確認，要求 清洗操作要后人復(fù)核至少 進行目視檢查衛(wèi)生 工具未按文 件規(guī)定使 用、管理設(shè)備污染、交叉污染已建立文件生 產(chǎn)

7、區(qū)清潔工具 管理規(guī)程42324中對文件和培訓(xùn)情況進行確 認生產(chǎn)后 清潔前 時間未能在 所建立時 間前進行 清潔產(chǎn)品清洗難度增加，可能原有程序已無法清?吉干凈， 產(chǎn) 品殘留于設(shè)備中。交叉污 染、微生物滋生已進行了培訓(xùn)， 并后待清潔標 識43336高對培訓(xùn)情況進行確認，通過 驗證確認時間設(shè)備清 潔后滅 菌前時 間未能在 所建立時 間前進行 火菌設(shè)備存放時，微生物滋生已進行了培訓(xùn)， 開后清潔標識43336高對培訓(xùn)情況進行確認，通過 驗證確認火菌前時間環(huán)境環(huán)境控 制失效環(huán)境對設(shè)備污染已建立檢驗和 儀器操作規(guī)程， 定期維保43336高檢查公用系統(tǒng)的驗證情況， 并要求設(shè)備、工具清洗或火 菌后均應(yīng)干燥、密閉

8、保存檢測檢測不 可靠不能作出正確判斷建立相關(guān)文件， 定期維保43336高檢查儀器、檢驗方法的驗證 情況和回收率試驗設(shè)備內(nèi)部結(jié)構(gòu) 復(fù)雜不易 拆卸，且擦 拭或刷洗、 消毒不好 操作清潔不徹底設(shè)為取樣點重 點關(guān)注53345高對取樣點評估，驗證時進行 檢測評估人：根據(jù)風(fēng)險評估，我們擬定了如下驗證內(nèi)容。3.2 經(jīng)分析，對上一步判斷的關(guān)鍵性風(fēng)險和非關(guān)鍵性風(fēng)險應(yīng)采取初步風(fēng)險控制措施和驗證，并在驗證 方案中綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率、 殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗方法的靈敏度等因素，綜述如下：3.2.1 設(shè)備使用情況3.2.1.1 驗證中使用的文件應(yīng)是最

9、新版本并已生效，參與驗證實施人員都已接受相應(yīng)的崗位培訓(xùn)和本方案的培訓(xùn)，粉針車間潔凈空調(diào)凈化系統(tǒng)、純化水系統(tǒng)、注射用水系統(tǒng)、公用系統(tǒng)及粉針車間相關(guān)設(shè)備已通過校驗或驗證，已具備工作能力；檢驗方法已經(jīng)過驗證合格（見附件3、4、5）。3.2.1.2 列出目前我公司分裝設(shè)備生產(chǎn)的產(chǎn)品的名稱、規(guī)格、 批量、活性成分等相關(guān)信息 （見表2）, 并對設(shè)備使用情況進行簡單描述（見表3）。因為注射用頭抱米諾鈉為新產(chǎn)品，故參照產(chǎn)品定為注射用頭抱米諾鈉中的頭抱米諾鈉，在生產(chǎn)該產(chǎn)品結(jié)束后，進行設(shè)備清洗驗證。表2.使用分裝設(shè)備的產(chǎn)品相關(guān)信息品名活性成 分活性成分 水中溶解 性能批量（萬 支）單位劑 量（g）標準裝 量（mg

10、）每次給 藥劑量每天給 藥次數(shù)MTDD (g)LDSD (g)注射用頭 抱米諾鈉 （0.5g）頭抱米 諾鈉易溶3.0 (20kg )0.5g0.6461.0-2.0 g2-32.07.752注射用頭 抱米諾鈉 （1.0g）頭抱米 諾鈉易溶3.0(40kg )1.0g1.2911.0-2.0g2-32.07.752注釋：以上產(chǎn)品溶解性資料均來自中國藥典 2010年版二部、國家藥品標準表3設(shè)備使用情況（生產(chǎn)此類產(chǎn)品的關(guān)鍵設(shè)備僅為分裝機）生產(chǎn) 流程關(guān)鍵設(shè)備設(shè)備面積（cm2）目前共用產(chǎn)品注射用頭抱米諾鈉 0.5g注射用頭抱米諾鈉1.0g分裝KFG300D 抗生素瓶螺桿分裝機8130.91cm2注：，表

11、示需要用此設(shè)備；X表示不需要用此設(shè)備3.2.2 所使用的清潔劑和消毒劑3.2.2.1 清潔劑：注射用水和 1%氫氧化鈉溶液。消毒劑：75% （V/V）乙醇3.2.2.2 清潔劑選擇的依據(jù)：頭抱米諾鈉易溶于水，我們選擇水為清潔劑。因頭抱米諾鈉是-內(nèi)酰胺類抗生素藥物，為防止其隨清洗水進入下水道帶來環(huán)保污染，故選擇1%氫氧化鈉溶液做清洗溶劑，破壞頭抱米諾鈉的化學(xué)結(jié)構(gòu)。且氫氧化鈉易清洗，可采用檢測零部件的浸泡水電導(dǎo)率與沖洗用注射用水的電導(dǎo)率進行對 照，若無顯著區(qū)別，即可判斷氫氧化鈉無殘留。3.2.3 取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率3.2.3.1 粉針劑車間的KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機是非整體

12、密閉的，我們按照標準操作規(guī)程對設(shè) 備進行拆洗。驗證過程中選擇擦拭取樣法，對清潔后設(shè)備零部件內(nèi)表面進行理化檢測和微生物限度 檢測取樣；取各個零部件的浸泡水進行檢測細菌內(nèi)毒素、電導(dǎo)率（清潔劑殘留）；并根據(jù)活性物質(zhì)頭抱米諾鈉的水溶解性將理化取樣的溶劑定為滅菌注射用水。由于上一產(chǎn)品生產(chǎn)對下一產(chǎn)品的污染 并不是均勻分布在整個設(shè)備的接觸面上，所以我們采用對最難清潔部位直接取樣，通過考察有代表 性的最難清潔部位的殘留物水平來評價整套生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。因此清潔驗證的活性成分取樣計 劃的確定必須先進行風(fēng)險分析，且在風(fēng)險分析中確定清潔驗證的關(guān)鍵部位（風(fēng)險分析見附件2）,具體的取樣點位置見表 7。3.2.3.2

13、我們采用取樣回收率和檢驗方法回收率結(jié)合進行驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)性。認可標準：以總回收率大于70%,多次取樣回收率的相對標準偏差小于20%為符合要求（相應(yīng)的取樣回收率驗證情況見附件5）。每個擦拭部位擦拭的面積應(yīng)以獲取的殘留物的量在檢測方法的線性范圍內(nèi)為原則。本次驗證每個取樣點的面積為25cm2。3.2.4 殘留物的性質(zhì)和限度3.2.4.1 本次驗證依據(jù)最低日治療劑量來確定殘留物限度，并結(jié)合殘留物濃度限度10Ppm （10-6）的標準，進行比較，選擇最低值。在上述 3.2.1.2項下，參照藥品 A已確定為頭抱米諾鈉，因為目前 公司產(chǎn)品單一，只能自身對照，我們?nèi)越Y(jié)合“表 2

14、”從以下幾個風(fēng)險因素分析： 1）后續(xù)品種最大日 劑量（安全性風(fēng)險）；2）后續(xù)品種的最小批量（殘留污染風(fēng)險）；則“表3”中“ LDSD/批量”其比值最大的僅為注射用頭抱米諾鈉0.5g ,因此將注射用頭抱米諾鈉0.5g作為下一批產(chǎn)品Bo則本次驗證中擦拭取樣法可接受的最高限度的計算公式如下：單位面積（cm2）最大允許殘留量（g） ARL為：最低日治療劑量（MTDD ）的1/1000 X最小批量ARL =最大日服用劑量X設(shè)備內(nèi)表面積（設(shè)備與物料直接接觸的總面積）2.0g M/1000 X20kg= =634.61 ug /cm 27.752g X8130.91 cm 2而按殘留物濃度限度10ppm標準

15、計算得出：ARL=最小批量X10ppm /設(shè)備內(nèi)表面積（設(shè)備與物料直接接觸的總面積）=20kgX 10Ppm/8130.91 cm 2=24.60 ug /cm 2 634.61 ug /cm 2故我們選擇化學(xué)殘留物濃度限度10ppm （10-6）標準計算出的可接受的最高限度，即為24.6ug /cm 2。3.2.4.2 微生物殘留量接受標準（清潔效果的驗證）W15cfu/25cm 2。因2010版GMP附錄要求C級區(qū)動態(tài)表面微生物接觸碟（）55mm）法測試標準為v 25cfu/碟，計算出即為v 25cfu/23.75 cm2,本公司參照此標準和藥品生產(chǎn)驗證指南（2003 ）標準選擇可接受標準

16、為& 15cfu/25cm 2。3.2.5 殘留物檢驗方法的靈敏度本次驗證之前須確認檢驗方法的驗證（驗證的參數(shù)有回收率、精密度、線性范圍、檢測限和定 量限、系統(tǒng)適用性）和分析儀器設(shè)備及時有效的校準，保證分析方法的真實可靠，具有可信度（殘留物檢驗方法的驗證情況見附件5）。4 .驗證標準中國藥典（2010版二部）、藥品生產(chǎn)驗證指南（2003年版）、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）5 .驗證范圍本方案主要適用于生產(chǎn)注射用頭抱米諾鈉時對分裝機的清潔操作及清潔效果的評價。方案中需要驗證的設(shè)備清潔操作規(guī)程如下：（表4）（注射用頭抱米諾鈉 生產(chǎn)用）設(shè)備名稱設(shè)備編號清潔標準操作規(guī)程文件編號KFG300D

17、抗生素瓶螺桿分裝機SC-0203-003KFG300D型抗生素瓶螺桿分裝機清潔標準操作規(guī)程SOP-0203-C-007/016 .驗證周期在下列情況發(fā)生時，必須考慮是否要進行再驗證：清潔劑改變或清潔程序作重要修改；設(shè)備有重大 變更；生產(chǎn)產(chǎn)品變化時；產(chǎn)品質(zhì)量回顧分析趨勢表明需要再驗證時。7 .驗證職責(zé)7.1 驗證委員會7.1.1 負責(zé)驗證文件格式、內(nèi)容的審核。7.1.2 負責(zé)對驗證中出現(xiàn)的偏差和驗證結(jié)果進行分析討論，并作出評價，決定再驗證周期。7.1.3 組織協(xié)調(diào)驗證活動，確保驗證進度。7.1.4 審批驗證報告。7.1.5 驗證委員會主任負責(zé)驗證證書的簽字批準。7.2 驗證小組7.2.1 參與擬

18、訂驗證方案。7.2.2 負責(zé)驗證方案的實施。7.2.3 負責(zé)收集各項驗證、試驗記錄，并對試驗結(jié)果進行分析后，起草驗證報告，報驗證委員會。7.3 設(shè)備部7.3.1 負責(zé)組織試驗所需儀器、設(shè)備的驗證。7.3.2 負責(zé)儀器、儀表、量具等的校正。7.4 質(zhì)量管理部7.4.1 負責(zé)驗證所需的標準品、樣品、試劑、試液等的準備。7.4.2 負責(zé)取樣及對樣品的檢驗。7.4.3 負責(zé)驗證證書發(fā)放，驗證的文檔管理。7.5 粉針劑車間7.5.1 負責(zé)設(shè)備的清潔。7.5.2 負責(zé)根據(jù)驗證試驗結(jié)果，修改設(shè)備清潔規(guī)程。8 .驗證實施的前提條件8.1 驗證中使用的文件是最新版本并已生效。見附件 38.2 參與驗證實施人員都

19、已接受相應(yīng)的崗位培訓(xùn)和本方案的培訓(xùn)。見附件 4、附件128.3 粉針車間潔凈空調(diào)凈化系統(tǒng)、純化水系統(tǒng)、注射用水系統(tǒng)、公用系統(tǒng)及粉針車間相關(guān)設(shè)備已通過校驗或驗證，已具備工作能力；檢驗方法已驗證合格。見附件 58.4 相關(guān)試驗用儀器、培養(yǎng)基、 試液的準備。見附件 69 .驗證方案的起草與審批本次驗證方案由驗證小組起草，驗證委員會進行審閱會簽，質(zhì)量副總進行批準。10 .驗證時間安排擬將生產(chǎn)3批注射用頭抱米諾鈉產(chǎn)品1.0g三批，待每批生產(chǎn)結(jié)束后按照KFG300D型抗生素瓶螺桿分裝機清潔標準操作規(guī)程對分裝生產(chǎn)設(shè)備進行清潔，我們選擇最差條件（規(guī)格1.0g ）三批生產(chǎn)清潔結(jié)束后按照驗證方案取樣進行檢查。時間

20、進度如下（表5）:ID任務(wù)名稱品種規(guī)格批號生產(chǎn)時間取樣時間1第一次驗證注射用頭抱米諾鈉 1.0g生廠結(jié)束清場時2第二次驗證注射用頭抱米諾鈉 1.0g生廠結(jié)束清場時3第三次驗證注射用頭抱米諾鈉 1.0g生廠結(jié)束清場時11 .驗證11.1 本次驗證具體措施及檢測項目如下表：（表 6）驗證措施取樣方法檢測項目設(shè)備的清潔效果的驗證擦拭取樣法微生物限度擦拭取樣法活性殘留物浸泡水取樣細菌內(nèi)毒素、電導(dǎo)率待清潔設(shè)備保留時間的驗證擦拭取樣法微生物限度設(shè)備清潔有效期的驗證擦拭取樣法微生物限度已滅菌設(shè)備的存放后效期的驗證擦拭取樣法微生物限度1%氫氧化鈉溶液火活試驗活性成分檢測11.2 取樣工具:取樣工具按取樣管理規(guī)

21、程（SOP-0101-ZL-002/01 ）準備和處理。取樣工具有無菌棉簽（要求為脫脂棉球）（15cm ）、帶螺旋蓋試管（15cm ）、帶螺旋蓋無菌試管（15cm ）、無菌剪刀、250 ml碘量瓶、無菌無熱原的100 ml具塞錐形瓶11.3 取樣溶劑滅菌注射用水、0.9%無菌氯化鈉溶液。11.4 檢驗儀器LC-20AT、SPD-M20A島津高效液相色譜儀；檢測器為二極管整列檢測器。11.5 取樣和檢驗方法根據(jù)活性物質(zhì)注射用頭抱米諾鈉的溶解性將理化取樣的溶劑定為滅菌注射用水。微生物取樣的擦拭溶劑定為0.9%無菌氯化鈉溶液。擦拭取樣方法和檢驗方法驗證應(yīng)有驗證證書（見附件5相關(guān)驗證情況檢查表）。11

22、.5.1 取樣方法11.5.1.1 擦拭取樣方法使用被核準的棉簽（藥用棉簽供貨單位：南昌市康樂衛(wèi)生材料有限公司），使用清潔驗證中指定 的溶劑對活性成分取樣。將棉簽浸到指定的溶液中，飽和后靠在瓶口上擠壓以擠去多余的溶劑。注 意避免操作中棉簽被污染。（棉簽適用性要求：有一定的機械強度和韌性，經(jīng)久耐用，棉簽的外觀 和顏色沒有改變，預(yù)先用取樣用溶劑清洗后，沒有纖維脫落及沉淀產(chǎn)生，水的吸收能力滿足取樣回 收率的要求）戴上無菌手套后拿住棉簽，在取樣范圍內(nèi)，將棉簽頭按在取樣表面上，用力使其稍彎曲（使棉簽 對設(shè)備產(chǎn)生一定的摩擦力），平穩(wěn)而緩慢地擦拭取樣表面，在向前移動的同時將其從一邊移到另一 邊。在事先劃好面

23、積的設(shè)備表面用力均勻的擦拭，擦拭過程應(yīng)覆蓋整個表面。翻轉(zhuǎn)棉簽，讓棉簽的 另一面也進行擦拭。但與前次擦拭移動方向垂直。將擦拭好的棉簽剪下放入標記好的試管中，并用螺旋蓋旋緊密封，避免外來污染。取樣必須盡快 完成以免溶劑揮發(fā)和污染物沉積到樣品表面。對所有的取樣點進行取樣，程序同上。微生物檢測取樣在理化檢測取樣之前進行，再在周圍附近進行理化取樣。每支棉簽擦拭取樣 25 cm2,每個取樣點的微生物檢測取樣、理化檢測取樣各用1支棉簽。將樣品送到QC部化驗。11.5.1.2 浸泡水取樣方法：11.5.1.2.1 把分裝機全部零部件*放入已清潔的小不銹鋼桶中，加注射用水至剛浸沒零部件為止，蓋蓋，浸泡0.5小時

24、后，先用無菌無熱原的100 ml具塞錐形瓶*取注射用水50ml作內(nèi)毒素檢查，再用普通250 ml碘量瓶*取注射用水50ml作電導(dǎo)率檢測。11.5.1.2.2 取完后，密封，及時做好標記，送化驗室。【*注釋：分裝機全部零部件是指分裝機的兩個分裝頭的所有接觸藥品的零部件（具體包括2個進粉蝶閥、2個送粉計量室、2個送粉螺桿、2個攪粉計量室、2個攪粉法蘭、2個下粉斗、2個下粉螺 桿、2個下粉嘴）；*注釋：無菌無熱原的 100 ml具塞錐形瓶，用超純水沖瓶內(nèi)壁及外塞 3次，將 其于250 c烘箱內(nèi)烘1 h,冷卻備用。*注釋：普通250 ml碘量瓶，用注射用水清洗干凈即可?！?1.5.2檢驗方法11.5.

25、2.1 棉簽擦拭法理化檢測取樣：樣品用高效液相色譜法進行檢測。生產(chǎn)注射用頭抱米諾鈉后，按各設(shè)備清潔標準操作規(guī)程對設(shè)備進行清潔后，取無菌棉簽用滅菌注射用水濕潤后，將其靠在瓶口上擠壓以擠去多余的溶劑，嚴格按照擦拭取樣方法，1支棉簽擦拭一個取樣點，每支棉簽擦拭取樣25 cm2。將棉簽頭剪下放入標記好的空試管中（樣品上標簽應(yīng)注明產(chǎn)品名稱、批號、樣品編號、取樣目的、取樣人及取樣日期）。供試品的制備：將粉針車間送來的裝有棉簽頭的空試管中加入10mlpH=4.5的醋酸鏤緩沖液（取醋酸鏤7.7g ,加水溶解，加冰醋酸 6ml與適量的水使成1000 ml）-甲醇（94: 6）浸泡，超聲10分 鐘，然后用0.45

26、科m的濾膜過濾，濾液即為供試品溶液。對照品的制備：取頭抱米諾對照品替代品適量，精密稱定，置 50ml容量瓶中，用流動相定容，混勻； 再精密量取10ml置50ml容量瓶中，用流動相定容，混勻，再精密量取5ml置50ml容量瓶中，用流 動相定容，混勻即得6g/ml的對照品溶液。檢測方法：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以 pH=4.5醋酸鏤緩沖液（取醋酸鏤 7.7g ,加水溶 解，加冰醋酸6ml與適量的水使成1000ml ,搖勻，即得）一甲醇（94:6）為流動相，流速為1.0ml/s ; 檢測波長273nm ;取供試品溶液與對照溶液各20分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標法以峰面積計算供試品中

27、C16H21N7O7S3的殘留含量。11.5.2.2 棉簽擦拭法微生物取樣：取樣液用菌落計數(shù)法進行檢測。生產(chǎn)注射用頭抱米諾鈉后，按設(shè)備清潔標準操作規(guī)程對設(shè)備進行清潔后（應(yīng)在化學(xué)殘留檢測取樣前取樣），取無菌棉簽1支，用滅菌注射用水濕潤后，并將其靠在瓶口上擠壓以擠去多余的溶劑，嚴格按照擦拭取樣方法，1支棉簽擦拭一個取樣點，每支棉簽分別擦拭取樣25 cm 2o將棉簽頭剪下放入裝有0.9%無菌氯化鈉溶液的無菌試管中（樣品上標簽應(yīng)注明產(chǎn)品名稱、樣品編號、取樣目的、 取樣人及取樣日期）。將取樣液超聲2min直接過濾入濾膜中，濾膜剪成兩份，一份放入營養(yǎng)瓊脂培 養(yǎng)基中，置35 c培養(yǎng)72h計數(shù)，另一份放入玫瑰

28、紅鈉瓊脂培養(yǎng)基中，置 28 c培養(yǎng)120h計數(shù)。11.6 取樣位置棉簽擦拭法應(yīng)擦拭取樣最難清洗的部位（取樣點）。我們根據(jù)設(shè)備構(gòu)造、設(shè)備與物料接觸的表面 以及實際經(jīng)驗列出了風(fēng)險識別，并通過詳細的風(fēng)險風(fēng)析（附件 1）,確定了設(shè)備最難清洗的部位。 清潔效果驗證取樣點的確認表如下（表7）。2組下粉螺 桿、下粉嘴 （濕熱滅菌）1111.7 驗證具體實施方法及可接受標準（1）清潔效果驗證操作方法：當驗證批次生產(chǎn)結(jié)束時，操作人員按設(shè)備清潔標準操作規(guī)程進行清潔，記錄清潔過程（見分裝崗位設(shè)備清潔記錄）。清潔結(jié)束后，目檢并記錄，再按取樣計劃進行微生物限度和化學(xué) 殘留取樣（先微生物取樣，再在周圍附近進行理化取樣），

29、檢測結(jié)果記錄見附件8。并在擦拭取樣結(jié)束后，收集所有的直接接觸藥粉設(shè)備零部件，按浸泡水取樣方法操作，先用無菌無熱原的100 ml具塞錐形瓶取注射用水 50ml作內(nèi)毒素檢查，再用普通 250 ml碘量瓶取注射用水 50ml作電導(dǎo)率檢 測。驗證應(yīng)連續(xù)進行 3次。清潔效果驗證可接受標準：目測檢查，設(shè)備在清潔后，無可見的物質(zhì)殘留在設(shè)備表面，潔凈、干燥。化學(xué)檢測殘留物可接受限度標準：最大允許殘留量ARL=24.6ug /cm 2擦拭樣品微生物限度:15 cfu / 25 cm 2內(nèi)毒素檢查結(jié)果、電導(dǎo)率檢測結(jié)果應(yīng)符合注射用水的標準。（2）確定設(shè)備存放時間生產(chǎn)結(jié)束至開始清洗的最長時間（待清潔設(shè)備保留時間）的驗

30、證操作方法：每批注射用頭抱米諾鈉（規(guī)格 1.0g）生產(chǎn)結(jié)束后，采用設(shè)備零部件11、膠塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶、盛裝污粉的不銹鋼飯盒（一）、不銹鋼瓢（一）為檢測對象，使用后不進行清潔，在器具 清洗間存放六個小時，在存放期間內(nèi)采用棉簽擦拭法取樣，于 1、2、4、6小時各取樣一次，進行 微生物限度檢查。本試驗進行3次監(jiān)測，以確定未清潔零部件、容器具能存放的最長時間。下次生產(chǎn)時準備替代品備用，檢測結(jié)果記錄見附件8。待清潔時間驗證可接受標準：P若微生物檢查結(jié)果均不大于25cfu/25cm2 ,則確定最大待清潔時間為 4小時。已清洗設(shè)備零部件用于滅菌前的最長存放時間（設(shè)備清潔有效期）的驗證操作方法：注射用頭孑米諾鈉

31、（規(guī)格 1.0g）每批生產(chǎn)后，對設(shè)備零部件進行清洗，存放至容器具存放間。我們選擇取樣點鋁蓋轉(zhuǎn)運不銹鋼桶、不銹鋼盤、不銹鋼飯盒（二）、不銹鋼鐐子（一）為檢測對象，分別在 1小時、2小時、4小時、6小時采用棉簽擦拭法取樣，進行微生物限度檢查，每個時間只取一個取樣點。本試驗進行3次監(jiān)測，以確定已清洗的設(shè)備零部件、容器具在滅菌前能存放的最長時間。檢測結(jié)果記錄見附件8。設(shè)備零部件、容器具清潔有效期驗證可接受標準：若微生物檢查結(jié)果均不大于15cfu/25cm 2,則確定清洗后 A/B級區(qū)設(shè)備零部件、容器具有效期為4小時。已滅菌設(shè)備的存放有效期驗證操作方法：以每批注射用頭抱米諾鈉（規(guī)格 1.0g）生產(chǎn)后的盛

32、污粉容器具不銹鋼瓢（二）、不銹鋼桶、不銹鋼鐐子（二）為檢測對象，通過清洗、滅菌后，取出，密閉存放至A級區(qū)下。將其存放至0小時、36小時、48小時時采用擦拭取樣法取樣檢測微生物限度，下次生產(chǎn)使用替代品。本試驗進行3次監(jiān)測，以確定清潔滅菌后的設(shè)備零部件能存放的最長時間。微生物檢測結(jié)果記錄見附件8。設(shè)備零部件、容器具清潔有效期驗證可接受標準：若微生物檢查結(jié)果均小于 1cfu/25cm 2,則確定清潔滅菌后設(shè)備零部件使用有效期為36小時。（3） 1%氫氧化鈉溶液滅活效果驗證在QC部理化室稱取10g頭抱米諾鈉，放入準備好的200m11%氫氧化鈉溶液中，即為樣品H;樣品用高效液相色譜法檢測。若經(jīng)檢測無活性

33、成份，則1%氫氧化鈉溶液滅活效果可行。檢測結(jié)果記錄見附件8。1%氫氧化鈉溶液滅活效果驗證的合格標準：所檢測的對象：無化學(xué)活性成份（頭抱米諾）殘留。11.8取樣計劃在注射用頭抱米諾鈉生產(chǎn)后按清潔規(guī)程實施清潔。取樣前應(yīng)對整個設(shè)備、零部件、容器具的清潔情況進行目測檢查。目測合格的才能繼續(xù)取樣，并按擦拭取樣位置圖的指示取表面理化殘留物樣和表面微生物樣，應(yīng)先取微生物樣，后在鄰近位置取殘留物樣。且標識明確。取樣計劃如下表8表8:粉針車間第一次清潔效果驗證擦拭取樣計劃卅備編號設(shè)備型取樣點樣品編號（A表示微生物樣、B表示取樣以田7曲P號名稱（編號）殘留物樣）日期2個進粉蝶閥01、01-1A01-1B0202-

34、1A02-1B2個送粉計量室03-1A03-1B03、0404-1A04-1BKFG300觀察窗0505-1A05-1BD抗生素2個送粉螺桿06、SC-0203-003瓶螺桿0706-1A06-1B分裝機2個攪粉計量室0807-1A07-1B2組攪粉法蘭、下08-1A08-1B粉斗09、1009-1A09-1B2組下粉螺桿、下10-1A10-1B粉嘴1111-1A11-1B表8.粉針車間第二次清潔效果驗證擦拭取樣計劃設(shè)備編號設(shè)備型 號名稱取樣點（編號）樣品編號（A表示微生物樣、B表示殘 留物樣）取樣 日期SC-0203-003KFG300D抗生素 瓶螺桿 分裝機2個進粉蝶閥01、022個送粉計

35、量室03、04觀察窗052個送粉螺桿06、072個攪粉計量室082組攪粉法蘭、下粉斗09、102組下粉螺桿、下粉嘴1101-2A02-2A03-2A04-2A05-2A06-2A07-2A08-2A09-2A10-2A11-2A01-2B02-2B03-2B04-2B05-2B06-2B07-2B08-2B09-2B10-2B11-2B表8.粉針車間第三次清潔效果驗證擦拭取樣計劃設(shè)備編號設(shè)備型 號名稱取樣點（編號）樣品編號（A表示微生物樣、B表示殘 留物樣）取樣 日期SC-0203-003KFG300D抗生素 瓶螺桿 分裝機2個進粉蝶閥01、022個送粉計量室03、04觀察窗052個送粉螺桿0

36、6、072個攪粉計量室082組攪粉法蘭、下粉斗09、102組下粉螺桿、下粉嘴1101-3A02-3A03-3A04-3A05-3A06-3A07-3A08-3A09-3A10-3A11-3A01-3B02-3B03-3B04-3B05-3B06-3B07-3B08-3B09-3B10-3B11-3B表8.粉針車間清潔效果驗證浸泡水取樣驗證次數(shù)S表示內(nèi)毒素樣D表小電導(dǎo)個樣取樣日期%L、次1S1D第二次2S2D第三次3S3D表8.粉針車間設(shè)備待清潔時間驗證取樣計劃設(shè)備編 號、名稱驗證 次數(shù)取樣點（存放于器具清洗間）樣品編號（A表示微生物樣，下 標1、2、4、6表示存 放1、2、4、6小時）取樣日期SC-0203 -003KFG300 D抗生素 瓶螺桿分 裝機1設(shè)備零部件1112-1A 1膠塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶13-1A 2盛裝污粉的不銹鋼飯盒（一）14-1A 4不銹鋼瓢（一）15-1A 62設(shè)備零部件1112-2A 1膠塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶13-2A 2盛裝污粉的 不銹鋼飯盒（一）14-2A 4不銹鋼瓢（一）15-2A 63設(shè)備零部件1112-3A 1膠塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶13-3A 2盛裝污粉的 不銹鋼飯盒（一）14-3A 4不銹鋼瓢（一）15-3A 6表8.設(shè)備清潔保留時間（清潔有效期）驗證取樣計劃設(shè)備編號、 名稱驗證 次數(shù)取樣點（存放于器具存放間）樣品編