人教版2017年高一生物課題3分解纖維素的微生物的分離(40頁)(教學(xué)課件)

1、課題3 分解纖維素的微生物的分離一、纖維素與纖維素酶一、纖維素與纖維素酶1.纖維素：纖維素：(1)化學(xué)本質(zhì)：是一種多糖，由化學(xué)本質(zhì)：是一種多糖，由_三種元素組成。三種元素組成。(2)分布：分布：_是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。纖維素是構(gòu)成外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。纖維素是構(gòu)成_的主要成分之一。的主要成分之一。(3)種類：除天然纖維素外，還有水溶性的羧甲基纖維素鈉、種類：除天然纖維素外，還有水溶性的羧甲基纖維素鈉、不溶于水的微晶纖維素等。不溶于水的微晶纖維素等。C、H、O棉花棉花植物細(xì)植物細(xì)胞壁胞壁2.纖維素

2、酶：纖維素酶：(1)組成：一種復(fù)合酶，至少包括組成：一種復(fù)合酶，至少包括_三三種組分。種組分。(2)作用：作用：C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶酶和葡萄糖苷酶C1酶、酶、CX酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶二、纖維素分解菌的篩選二、纖維素分解菌的篩選1.方法：方法： 2.原理：原理：剛果紅剛果紅纖維素分解菌纖維素分解菌剛果剛果紅紅倒平板倒平板紅色紅色纖維纖維素分解菌素分解菌三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)三、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1.實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程： 纖維素纖維素纖維素纖維素梯度稀釋梯度稀釋選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基涂布平板涂布平板透明圈透明圈2.課題延伸：課題延伸：(1)為確定透明圈內(nèi)的菌落是否是纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)為確定透明圈內(nèi)的

3、菌落是否是纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有_和和_兩種。兩種。(2)纖維素酶的測(cè)定方法，一般是對(duì)纖維素酶分解纖維素酶的測(cè)定方法，一般是對(duì)纖維素酶分解_等纖維等纖維素后所產(chǎn)生的素后所產(chǎn)生的_進(jìn)行定量的測(cè)定。進(jìn)行定量的測(cè)定。 液體發(fā)酵液體發(fā)酵固體發(fā)酵固體發(fā)酵濾紙濾紙葡萄糖葡萄糖【思考辨析思考辨析】1.判斷正誤判斷正誤(1)纖維素是由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物。纖維素是由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物。( )(2)自然界中的各種微生物均能把纖維素分解成葡萄糖，從自然界中的各種微生物均能把纖維素分解成葡萄糖，從而作為生物體

4、的能量來源。而作為生物體的能量來源。( )【分析分析】自然界中只有部分能夠產(chǎn)生纖維素酶的微生物能把自然界中只有部分能夠產(chǎn)生纖維素酶的微生物能把纖維素分解成葡萄糖，從而作為生物體的能量來源。纖維素分解成葡萄糖，從而作為生物體的能量來源。(3)纖維素酶具有專一性和高效性等特點(diǎn)。纖維素酶具有專一性和高效性等特點(diǎn)。( )(4)培養(yǎng)纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)含有無機(jī)碳源。培養(yǎng)纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)含有無機(jī)碳源。( )【分析分析】纖維素分解菌的代謝類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中應(yīng)含有纖維素分解菌的代謝類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中應(yīng)含有有機(jī)碳源。有機(jī)碳源。2.問題思考問題思考(1)培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈一定是纖維素分解菌的作

5、用嗎？培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈一定是纖維素分解菌的作用嗎？提示：提示：不一定。剛果紅與多糖類化合物產(chǎn)生紅色復(fù)合物，若多不一定。剛果紅與多糖類化合物產(chǎn)生紅色復(fù)合物，若多糖為淀粉，產(chǎn)生淀粉酶的微生物也可使培養(yǎng)基產(chǎn)生透明圈。糖為淀粉，產(chǎn)生淀粉酶的微生物也可使培養(yǎng)基產(chǎn)生透明圈。(2)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基有什么好處？纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基有什么好處？提示：提示：液體培養(yǎng)基中菌體可以與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，并且氧氣液體培養(yǎng)基中菌體可以與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸，并且氧氣的含量也高于固體培養(yǎng)基，還可以人為地通入無菌氧氣，有利的含量也高于固體培養(yǎng)基，還可以人為地通入無菌氧氣，有利于微生物的大量繁殖。于

6、微生物的大量繁殖。 一、纖維素與纖維素酶一、纖維素與纖維素酶纖維素纖維素纖維素酶纖維素酶組成組成由葡萄糖組成的多聚體由葡萄糖組成的多聚體至少由至少由C C1 1酶、酶、C CX X酶和葡酶和葡萄糖苷酶組成萄糖苷酶組成分布分布棉花、木材、作物秸稈等棉花、木材、作物秸稈等微生物細(xì)胞內(nèi)微生物細(xì)胞內(nèi)作用作用與果膠構(gòu)成植物的細(xì)胞壁與果膠構(gòu)成植物的細(xì)胞壁水解纖維素水解纖維素【易錯(cuò)提醒易錯(cuò)提醒】(1)(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶，是多種酶的總稱，纖維素酶是一種復(fù)合酶，是多種酶的總稱，并非僅指一種酶。并非僅指一種酶。(2)(2)該酶也具有專一性，只能分解含纖維素的物質(zhì)。該酶也具有專一性，只能分解含纖維素的物質(zhì)。

7、(3)(3)酶發(fā)揮作用需要一定的條件，不僅僅是溫度、酶發(fā)揮作用需要一定的條件，不僅僅是溫度、pHpH等，其他等，其他物質(zhì)的存在也會(huì)降低酶的活性，如木質(zhì)素會(huì)降低纖維素酶的活物質(zhì)的存在也會(huì)降低酶的活性，如木質(zhì)素會(huì)降低纖維素酶的活性。性?！镜淅?xùn)練典例訓(xùn)練1】下列關(guān)于纖維素酶的敘述中，錯(cuò)誤的是下列關(guān)于纖維素酶的敘述中，錯(cuò)誤的是( )A.纖維素酶只有一種，只能將纖維素分解為葡萄糖纖維素酶只有一種，只能將纖維素分解為葡萄糖B.纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶和葡萄糖苷酶三種組分酶三種組分C.纖維素可被纖維素酶水解成葡萄糖，為微生物提供營養(yǎng)物質(zhì)纖維

8、素可被纖維素酶水解成葡萄糖，為微生物提供營養(yǎng)物質(zhì)D.分解纖維素的細(xì)菌、真菌和放線菌，都是通過產(chǎn)生纖維素酶分解纖維素的細(xì)菌、真菌和放線菌，都是通過產(chǎn)生纖維素酶來分解纖維素的來分解纖維素的【解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵】解答本題的關(guān)鍵是明確纖維素酶的組成、功能和解答本題的關(guān)鍵是明確纖維素酶的組成、功能和分解纖維素的微生物。分解纖維素的微生物?！窘馕鼋馕觥窟x選A A。纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為至少包括三。纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為至少包括三種組分種組分C C1 1酶、酶、C CX X酶和葡萄糖苷酶，其中酶和葡萄糖苷酶，其中C C1 1酶和酶和C CX X酶將纖維酶將纖維素分解為纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維

9、二糖分解為葡萄糖。素分解為纖維二糖，葡萄糖苷酶將纖維二糖分解為葡萄糖?！咀兪接?xùn)練變式訓(xùn)練】纖維素酶的測(cè)定方法一般是纖維素酶的測(cè)定方法一般是( )A.對(duì)纖維素進(jìn)行定量測(cè)定對(duì)纖維素進(jìn)行定量測(cè)定B.對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定C.對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的纖維二糖進(jìn)行定量測(cè)定對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的纖維二糖進(jìn)行定量測(cè)定D.對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行定量測(cè)定對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行定量測(cè)定【解析解析】選選B B。得到鑒別培養(yǎng)基上形成的透明圈中的菌落只是。得到鑒別培養(yǎng)基上形成的透明圈中的菌落只是對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行初步篩選，為確定得到的

10、是纖維素對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行初步篩選，為確定得到的是纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，并且進(jìn)行纖維素酶分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，并且進(jìn)行纖維素酶的測(cè)定。測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)的測(cè)定。測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。二、纖維素分解菌的篩選二、纖維素分解菌的篩選1.實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：即可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。即可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。2.兩種剛果紅兩種剛果紅(CR)染色法的比較：染色法的比較：方法一方法一方法二方法二過程過程培養(yǎng)基經(jīng)涂布培養(yǎng)長出菌落培養(yǎng)基

11、經(jīng)涂布培養(yǎng)長出菌落覆蓋質(zhì)量濃度為覆蓋質(zhì)量濃度為1 mg/mL1 mg/mL的的CRCR溶液溶液 倒去倒去CRCR溶液溶液加入物質(zhì)的量濃度為加入物質(zhì)的量濃度為1 mol/L1 mol/L的的NaClNaCl溶液溶液倒掉倒掉NaClNaCl溶液溶液出現(xiàn)透明圈出現(xiàn)透明圈配制質(zhì)量濃度為配制質(zhì)量濃度為10 mg/mL 10 mg/mL 的的CRCR溶液溶液滅菌滅菌按照每按照每200 mL200 mL培養(yǎng)基加入培養(yǎng)基加入1 mL1 mL的的比例加入比例加入CRCR溶液溶液混勻混勻倒平板倒平板接種后培養(yǎng)接種后培養(yǎng)出出現(xiàn)透明圈現(xiàn)透明圈10 min15 min 后15 min 后方法一方法一方法二方法二區(qū)別區(qū)別

12、先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)進(jìn)行顏色反應(yīng)倒平板時(shí)就加入剛果紅倒平板時(shí)就加入剛果紅優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用維素分解菌的作用操作簡便，不存在菌落混操作簡便，不存在菌落混雜問題雜問題 方法一方法一方法二方法二缺點(diǎn)缺點(diǎn)操作繁瑣，加入剛操作繁瑣，加入剛果紅溶液會(huì)使菌落果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜之間發(fā)生混雜(1)(1)由于在纖維素粉、瓊脂和土豆汁由于在纖維素粉、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)(2)(2)有些微生物

13、具有降解色素的能力，有些微生物具有降解色素的能力，長時(shí)間培養(yǎng)會(huì)降解剛果紅，從而形成長時(shí)間培養(yǎng)會(huì)降解剛果紅，從而形成明顯的透明圈，這些微生物與纖維素明顯的透明圈，這些微生物與纖維素分解菌不易區(qū)分分解菌不易區(qū)分 【易錯(cuò)提醒易錯(cuò)提醒】(1)(1)由于土壤中細(xì)菌數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌由于土壤中細(xì)菌數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌數(shù)量，因此最容易分離得到的是細(xì)菌。數(shù)量，因此最容易分離得到的是細(xì)菌。(2)(2)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，以纖維素為纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，以纖維素為唯一碳源和能源。其鑒別培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中加入唯一碳源和能源。其鑒別培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中

14、加入剛果紅染料。剛果紅染料。 【典例訓(xùn)練典例訓(xùn)練2】在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是( )A.分解尿素的細(xì)菌分解尿素的細(xì)菌 B.硝化細(xì)菌硝化細(xì)菌C.分解纖維素的細(xì)菌分解纖維素的細(xì)菌 D.乳酸菌乳酸菌【解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵】解答本題關(guān)鍵應(yīng)明確兩點(diǎn)：解答本題關(guān)鍵應(yīng)明確兩點(diǎn)：(1)(1)題目中的關(guān)鍵信息題目中的關(guān)鍵信息剛果紅；剛果紅；(2)(2)剛果紅染色法的原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。剛果紅染色法的原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象?！窘馕鼋馕觥窟x選C C。分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解，剛果紅。分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解，剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解

15、菌纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。為中心的透明圈?！净?dòng)探究互動(dòng)探究】上題中為什么會(huì)出現(xiàn)透明圈？上題中為什么會(huì)出現(xiàn)透明圈？提示：提示：分解纖維素的菌落能產(chǎn)生纖維素酶，當(dāng)纖維素被纖維素分解纖維素的菌落能產(chǎn)生纖維素酶，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅酶分解后，剛果紅- -纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。三、分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)操作三、分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)操作1.分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程：分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程： 2.分離得到的纖維素

16、分解菌的鑒定：分離得到的纖維素分解菌的鑒定：(1)鑒定原因：鑒定原因：由于形成透明圈的菌落與其他微生物菌落出現(xiàn)混雜現(xiàn)象，而且由于形成透明圈的菌落與其他微生物菌落出現(xiàn)混雜現(xiàn)象，而且產(chǎn)生透明圈的菌落可能是產(chǎn)生淀粉酶的微生物，也可能是降解產(chǎn)生透明圈的菌落可能是產(chǎn)生淀粉酶的微生物，也可能是降解剛果紅的菌種。剛果紅的菌種。(2)原理：為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)原理：為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵纖維素酶的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。兩種。(3)纖維素酶的測(cè)定方法：一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維纖維

17、素酶的測(cè)定方法：一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定。素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測(cè)定?！舅季S拓展思維拓展】(1)(1)當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅- -纖維素纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈?？蓳?jù)此，通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。的透明圈?？蓳?jù)此，通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(2)(2)判斷某個(gè)選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用時(shí)，應(yīng)設(shè)立基礎(chǔ)培判斷某個(gè)選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用時(shí)，應(yīng)設(shè)立基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照；若判斷所使用的培養(yǎng)基滅菌是

18、否徹底，應(yīng)設(shè)立養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照；若判斷所使用的培養(yǎng)基滅菌是否徹底，應(yīng)設(shè)立不接菌種的該培養(yǎng)基進(jìn)行空白對(duì)照。在微生物的分離及培養(yǎng)中不接菌種的該培養(yǎng)基進(jìn)行空白對(duì)照。在微生物的分離及培養(yǎng)中經(jīng)常用到這兩種對(duì)照。經(jīng)常用到這兩種對(duì)照。【典例訓(xùn)練典例訓(xùn)練3】富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是指利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，設(shè)定環(huán)一。主要是指利用不同微生物間生命活動(dòng)特點(diǎn)的不同，設(shè)定環(huán)境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其在微生境條件，使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長，從而使其在微生物群落中的數(shù)量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離物群落中的數(shù)

19、量大大增加，人們能夠更容易地從自然界中分離到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離微生物的特點(diǎn)，到所需的特定微生物。富集條件可根據(jù)所需分離微生物的特點(diǎn)，從物理、化學(xué)、生物及綜合多個(gè)方面進(jìn)行選擇，如溫度、從物理、化學(xué)、生物及綜合多個(gè)方面進(jìn)行選擇，如溫度、pH、紫外線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等。如圖描述了采用富集方紫外線、高壓、光照、氧氣、營養(yǎng)等。如圖描述了采用富集方法從土壤中分離能降解酚類化合物對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)法從土壤中分離能降解酚類化合物對(duì)羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過程。驗(yàn)過程。(1)實(shí)驗(yàn)原理是實(shí)驗(yàn)原理是_。(2)本實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基為本實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基為_，碳源為，碳源為_。(3)重復(fù)培養(yǎng)

20、的目的是重復(fù)培養(yǎng)的目的是_。(4)的菌落中大部分是能降解的菌落中大部分是能降解_的微生物。的微生物。(5)為為_組，為組，為_組，設(shè)置的目的是組，設(shè)置的目的是_。(6)采用采用_法。法。 【解題關(guān)鍵解題關(guān)鍵】解答本題關(guān)鍵應(yīng)明確兩點(diǎn)：解答本題關(guān)鍵應(yīng)明確兩點(diǎn)：(1)(1)注意培養(yǎng)基配制的原則及成分。注意培養(yǎng)基配制的原則及成分。(2)(2)掌握實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的一般技巧：掌握實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的一般技巧：實(shí)驗(yàn)原理與選擇培養(yǎng)基用途的統(tǒng)一性；實(shí)驗(yàn)原理與選擇培養(yǎng)基用途的統(tǒng)一性；實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中對(duì)照原則的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中對(duì)照原則的應(yīng)用。【解析解析】本題通過從土壤中分離出能降解酚類化合物的微生物本題通過從土壤中分離出能降解酚類化合物

21、的微生物的過程，模擬纖維素分解菌的分離過程，其基本原理、操作過的過程，模擬纖維素分解菌的分離過程，其基本原理、操作過程及操作注意事項(xiàng)都和分離纖維素分解菌類似。本實(shí)驗(yàn)所用培程及操作注意事項(xiàng)都和分離纖維素分解菌類似。本實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基是以對(duì)羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)的微生養(yǎng)基是以對(duì)羥基苯甲酸為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)的微生物是能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物。經(jīng)過的重復(fù)培養(yǎng)，物是能降解對(duì)羥基苯甲酸的微生物。經(jīng)過的重復(fù)培養(yǎng)，增大了分解對(duì)羥基苯甲酸的微生物的比例。最后通過設(shè)立對(duì)照增大了分解對(duì)羥基苯甲酸的微生物的比例。最后通過設(shè)立對(duì)照及使用單菌落挑取法將培養(yǎng)基上的單菌落分別接種到含有對(duì)羥及使用單菌落挑取法將培養(yǎng)基上的單菌落分別接種到含有對(duì)羥基苯甲酸及不含有該物質(zhì)的培養(yǎng)基上，