2015年消毒滅菌效果監(jiān)測實施方案

1、吐哈石油醫(yī)院2015年消毒滅菌效果監(jiān)測實施方案醫(yī)院消毒是預防醫(yī)院內(nèi)感染的重要措施之一，消毒效果的監(jiān)測是評價其消毒設備運 轉是否正常、消毒藥劑是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否達標的唯一手 段。為規(guī)范消毒效果監(jiān)測， 依據(jù)衛(wèi)計委 醫(yī)院感染管理辦法 、醫(yī)院感染監(jiān)測規(guī)范 、 醫(yī)院消毒技術規(guī)范規(guī)范（2012版）特制定哈密地區(qū)中心醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測實 施方案。一、監(jiān)測項目：1.空氣消毒效果的監(jiān)測；2.手和物體表面的消毒效果監(jiān)測；3.牙科用水的監(jiān)測；4.內(nèi)鏡消毒及滅菌效果的監(jiān)測；5.使用中消毒劑及滅菌劑的監(jiān)測；6.壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測；7.血液透析用水和透析液的監(jiān)測8.滅菌物品監(jiān)測二、監(jiān)測單的填寫：

2、1.空氣監(jiān)測：采樣地點、樣品名稱（空氣） 、采樣時間、采樣人，檢驗項目：細菌總 數(shù)、致病菌（如金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌等） 。2.物表監(jiān)測：采樣地點、物表名稱（注明所采物品的名稱和部位） 、采樣人、采樣時 間、檢驗項目、細菌總數(shù)、致病菌（如金黃色葡萄球菌等） 。3.手監(jiān)測：采樣地點、被監(jiān)測人姓名、采樣人、采樣時間、檢驗項目：細菌總數(shù)、 致病菌（如金黃色葡萄球菌等） 。4.其他物品的監(jiān)測：采樣地點、樣品名稱、檢驗項目、采樣人、采樣時間等。（一）空氣消毒效果的監(jiān)測1.監(jiān)測科室：非潔凈手術室、產(chǎn)房、血透室、消毒供應室等。2.監(jiān)測頻次：重點科室每季度一次，如有疑似感染發(fā)生隨時采樣。3.采樣（沉降法

3、） 采樣時間：空氣消毒后4小時內(nèi)、操作前。 平板暴露法：（非潔凈手術室）暴露前先檢查平板是否污染，是否有氣泡及霉點。 將普通營養(yǎng)瓊脂平板（直徑為9cm）放在室內(nèi)各采樣點處，采樣高度為距地面0.8m- 1.5m，采樣時將平板蓋打開，斜扣放于平板旁，暴露15mi n,在放置、收取平皿時，手不能在暴露平皿的正上方移動。布點方法：室內(nèi)面積w3om，設內(nèi)、中、外對角線上的3點，內(nèi)、外點布點部位距 墻1M處；室內(nèi)面積30吊，設4角及中央共5點，4角的布點部位距墻壁1m處。4.注意事項 采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min進行采樣 平板擺放如取一條對角線，避免離門近的一條。 工作人員不要靠

4、近自動門，以免影響監(jiān)測結果。5.結果計算及報告 結果計算：空氣中菌落總數(shù)=cfu（皿、暴露時間） 監(jiān)測結果的判定及結果報告格式（見表1）表1非潔凈空氣監(jiān)測（II類、山 類環(huán)境）的結果報告檢驗結果圖i室內(nèi)面積w30m布點圖o o0 圖2室內(nèi)面積30m的布點圖標準樣品名稱采樣地占八細菌總數(shù)致病菌細菌總數(shù)致病菌采樣液的稀釋倍數(shù)為102判定標準及報告格式：一般醫(yī)護人員手不得檢出大腸桿菌、金黃色葡萄球菌；I類、H類區(qū)域工作人員手 不得檢出銅綠假單胞菌；母嬰同室、新生兒室及兒科病房工作人員手不得檢出沙門 氏菌，溶血性鏈球菌。結果報告及判定標準見表2。表2手衛(wèi)生的結果報告及判定標準樣品名 稱采樣地點八、檢驗

5、結果標準細菌總 數(shù)致病菌細菌總數(shù)致病菌張z(z( |7|7手三衛(wèi)生手消毒w10cfu/ cm2不得檢出某某科cfu/ cm2未檢出外科手消毒w5cfu/ cm2不得檢出檢測結果為“0”或細菌菌落總數(shù)不足“1”時：應報告為v1cfu/ cm2;當細菌菌落 總數(shù)有小數(shù)時，按四舍五入計數(shù)。女口1.2cfu/ cm2報1cfu/ cm,1.5cfu/ cvm報2cfu/ cvm注意事項：1洗手后不要接觸未消毒的物品。2用消毒巾擦干，或控干手上的水分。II類環(huán)境 某某空cfu/ 15min.90氣皿未檢出4cfu/15min .90不得檢皿出III類環(huán)某某空境氣cfu/5min.90皿4 cfu/5mi

6、n皿90不得檢出4.物體表面消毒效果的監(jiān)測 物體表面的采樣：用5cmx5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，采樣面積100 cm2,連續(xù)采樣4個，用浸有含相應中和劑或生理鹽水采樣液的棉拭 子1支， 在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返涂擦各5次，并隨之轉動棉拭子，剪去手接觸部位后，將棉拭 子投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)。門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣。注意事項1被采樣本表面積v100cm2取全部表面；被采樣本表面積100cm2，取100cm2。2不規(guī)則物體表面的采樣，盡量準確估算實際面積。3小型物體表面的結果計算，用cfu/件表示，（國家現(xiàn)無評價標準，可估計面積計算 菌落總數(shù)，參照一般

7、物表的標準進行評價）。4若消毒因子為化學消毒劑，米樣液中應加入相應中和劑。結果判定及報告1結果計算：采樣液的稀釋倍數(shù)為10;物體表面面積100cmf的物表，按照100cm?計算。2判定標準及報告格式：一般的物體表面不得檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌；母嬰同室、早產(chǎn)兒室 新生兒室及兒科病房的物體表面不得檢出沙門氏菌。結果報告及判定標準見表3。表3物體表面的結果報告及判定標準檢驗結果標準樣品名 稱采樣地點八、細菌總數(shù)致病 菌細菌總數(shù)致病菌I類環(huán)境w5cfu/ cm?治療臺 面某某科2cfu/ cm未檢 出n類環(huán)境w5cfu/ cm?不得檢出皿類環(huán)境w10cfu/ cm?W類環(huán)境w15cfu/ c

8、m2檢測結果為“0”或細菌菌落總數(shù)不足“1”時：應報告為v1cfu/ cm2;當細菌菌落 總數(shù)有小數(shù)時，按四舍五入計數(shù)。女口1.2cfu/ cm2報1cfu/ cn,1.5cfu/ cvm報2cfu/ cmL（三）滅菌物品的監(jiān)測1、滅菌物品不做常規(guī)監(jiān)測，如懷疑醫(yī)院感染與滅菌物品有關時，可按下列方法進行 監(jiān)測。2、采樣: 采樣時間：在滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。 采樣方法：用無菌操作打開器械包（敷料包），用沾有無菌洗脫液的棉拭子反復 涂抹手術鉗、鑷子等醫(yī)療器械（手術敷料），將棉拭子投入10ml無菌洗脫液中，將 采樣液混勻。 檢驗方法：吸取被檢樣液1.0mL接種15m需一厭氧培養(yǎng)管（共6管，其中

9、1管作陽 性對照），接種量為1ml/管，30C-35C培養(yǎng)5天。再取1.0mL接種15m霉菌培養(yǎng)管（共4管，其中1管作陽性對照）25C培養(yǎng)7天。結果判定：陽性對照在24h內(nèi)應有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應無菌生長，如 需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖顯混濁但經(jīng)證明并非有菌生長，判為滅菌合 格；如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中任何1管顯混濁并證實有菌生長，應重新取樣，分 別同法復試2次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格。注意事項：1送檢時間不得超過6h，若樣品保存于0C4C,則不得超過24h。2滅菌物品采樣，應嚴格遵守無菌操作，避免微生物污染。3無菌檢驗應該在潔凈度為100

10、級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進行采樣，對單向流向空氣區(qū)域 及工作臺面，必須進行潔凈度驗證。4.檢測結果判定及報告可參考以下格式表4敷料樣品名稱采樣地點檢驗結果標準包、器械包的監(jiān)測報告（四）內(nèi)鏡 消毒、滅菌效 果的監(jiān)測需厭氧菌霉菌需厭氧菌霉菌敷料包百級手術間未檢出未檢出無菌生長無菌生長1.監(jiān)測時間：每季度進行2.采樣器械包百級凈化臺未檢出未檢出無菌生長無菌生長采樣時 間：在消毒滅 菌后、使用前 進行采樣。采樣方法：消毒后內(nèi)鏡內(nèi)腔面：取清洗消毒后內(nèi)鏡，采用無菌注射器抽取50ml含相應中和劑的洗脫液，從內(nèi)鏡活檢口注入沖洗內(nèi)鏡管路，并全量收集進行檢驗。3.檢驗方法：吸取1.0mL被檢樣液接種平皿；將剩余洗脫液在

11、無菌條件下采用濾膜（0.45微米）過濾濃縮，將濾膜接種于營養(yǎng)瓊脂平板上。4.結果判定及報告菌落數(shù)/鏡=2個平皿菌落數(shù)的平均值X20消毒后的內(nèi)鏡：細菌總數(shù)w20cfu/件，并未檢出致病菌為合格。表5消毒后內(nèi)鏡的檢驗結果及報告樣品名稱米樣地點檢驗結果標準 20 cfu/件cfu/件未檢出件不得檢出注：致病菌指金黃色葡萄球菌、沙門氏菌，并不得檢出大腸桿菌。 平板菌落數(shù)為“0”時，細菌菌落總數(shù)應報告為v10cfu/件。 滅菌后內(nèi)鏡：未檢出任何微生物為合格。(五)使用中消毒、滅菌劑的監(jiān)測1.監(jiān)測時間 化學監(jiān)測：根據(jù)消毒、滅菌劑的性能設定監(jiān)測時間，如含氯消毒劑、過氧乙酸等 易揮發(fā)產(chǎn)品每日監(jiān)測；戊二醛監(jiān)測每

12、周不少于一次。生物監(jiān)測：消毒劑與滅菌劑每季度一次。2.結果的報告可參考以下格式：表6戊二醛有效含量的結果報告樣品名稱采樣地點檢驗項目檢驗結果(%)3.使用中消毒 液染菌量測定2%戊二醛口腔科有效含量2.0監(jiān)測樣品： 碘伏、安爾碘、戊二醛、含氯消毒液等。采樣方法:1用無菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入9.0ml含有相應中和劑混勻。醇類與酚類消毒 劑用普通營養(yǎng)肉湯中和，含氯消毒劑、含碘消毒劑和過氧化物消毒劑用含0.1%硫代硫酸鈉中和劑，醛類消毒劑用0.3%甘氨酸中和劑。2用無菌吸管吸取一定稀釋比例的中和后混合液1.0ml接種平皿，將冷至40C細菌總數(shù) 致病菌 細菌總數(shù)致病菌胃鏡內(nèi)腔內(nèi)鏡室45C的熔

13、化營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml20ml,36C士1C恒溫箱培養(yǎng)72h,計數(shù) 菌落數(shù)。結果計算及報告：結果的計算：消毒液染菌量（cfu/ml）二平均每皿菌落數(shù)x10X稀釋倍數(shù)表7消毒液的監(jiān)測結果報告及判定標準樣品名稱采樣地點八、細菌染菌 量標準消毒液染菌量致病菌滅菌用消毒液某某科無菌生長無菌生長不得僉出使用中皮膚黏膜消毒液染菌量某某科cfu/mL10 cfu/mL其他使用中消毒液染菌量某某科cfu/mL100 cfu/mL（七）壓力蒸汽滅菌效果監(jiān)測1、監(jiān)測頻次物理監(jiān)測：每鍋進行，并詳細記錄：滅菌壓力、溫度（波動范圍在+3C內(nèi)）、時間、鍋號、鍋次、滅菌操作者簽名等項。 化學監(jiān)測：每包進行外用化學

14、指示物監(jiān)測，高度危險性物品包內(nèi)應放置包內(nèi)化學 指示物。生物監(jiān)測：每周進行，對新滅菌器使用前或擬采用新包裝容器、擺放方式、排氣 方式及特殊滅菌工藝，都必須進行生物監(jiān)測，合格后才能采用。滅菌植入型器械應 每批次進行生物監(jiān)測。B-D試驗：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器，每日進行一次B-D試驗。 可選擇具有代表性的PC進行消毒滅菌效果監(jiān)測。2、化學監(jiān)測法 化學指示卡：高危險性物品包內(nèi)應放置化學指示卡，置于最難滅菌的部位； 化學指示膠帶：將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外，如果透過包裝材料 可直接觀察包內(nèi)化學指示卡顏色變化，則包外不必貼化學指示膠帶；B-D試紙：預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器，每天滅

15、菌前進行； 結果判定：通過觀察化學指示物顏色變化，判斷是否達到滅菌合格要求。3、生物監(jiān)測法 指示菌株： 耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽孢（ATCC795）3制備的壓力蒸汽滅菌生物指 示劑。 檢測方法:將1支生物指示劑管，置于標準試驗包中心部位。1下排氣壓力蒸汽滅菌器的監(jiān)測：在下排氣壓力蒸汽滅菌器滅菌柜室內(nèi) ，排氣口上方 放置一個標準試驗包（由3件平紋長袖手術衣 ，4塊小手術巾，2塊中手術巾，1塊大 毛巾，30塊10cm 10cm8層紗布敷料包裹成25cmx30cm30cm大小）；2預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器的監(jiān)測： 預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌器滅菌 柜室內(nèi)，排氣口上方放置一個標準測試包 （由16條

16、41cmx 66cm全棉手術巾制成，將每 條手術巾的長邊先折成3層，短邊折成2層然后疊放，制成23cnX23cnX15cm大小的測 試包）；3小型壓力蒸汽滅菌器應選擇常用的有代表性的滅菌包作為生物測試包，包內(nèi)放置1支生物指示管，且滅菌器處于滿載狀態(tài)；4快速壓力蒸汽滅菌器應直接將1支生物指示管置于空載的滅菌器內(nèi)；5經(jīng)一個滅菌周期后，取出指示劑管，夾破管內(nèi)安瓿，放于56C培養(yǎng)箱中，同時放1支未滅菌的指示管，夾破管內(nèi)安瓿，做陽性對照；培養(yǎng)48h，觀察結果。 結果報告：每個指示劑管的溴甲酚紫蛋白胨水培養(yǎng)基都不變色， 判定為滅菌合格； 若由紫色變?yōu)辄S色時，則滅菌過程不合格。（八）血液透析系統(tǒng)的監(jiān)測1、監(jiān)

17、測頻次對入、出透析器的透析液：每月監(jiān)測一次 對透析液內(nèi)毒素：每季度監(jiān)測一次。 對透析用水化學污染物：每年一次。 疑有透析液污染或有嚴重感染病例時：應及時進行監(jiān)測，并增加采樣點，如原水 口、軟化水出口、反滲水出口、透析液配液口等。檢查結果超標，必須復查。2、樣品采集 對使用中的透析機入口液和出口液進行抽查采樣。單一透析系統(tǒng)：采樣點為透析液入口及出口，消毒后用無菌試管接原液5ml即可3、檢測方法：吸取原液0.2ml標本加入血瓊脂平皿中均勻涂布，置36C孵育箱培養(yǎng)48h,鑒定細菌 級計算每ml標本中的細菌菌落數(shù)。4、監(jiān)測結果的判定及結果報告結果計算： 細菌總數(shù)（cfu/ml）二平皿上的細菌菌落數(shù)X5

18、表8透析機出、入口液的監(jiān)測報告采樣地檢驗結果標準樣品名稱致病占八、細菌總數(shù)致病菌細菌總數(shù)致病菌透析用水透析中心未檢100 cfu/ ml不得檢出cfu/mlr出5、注意事項：平板菌落數(shù)為“0”細菌菌落總數(shù)應報告為v100cfu/ml（九）潔凈手術室空氣監(jiān)測1.潔凈手術室空氣沉降菌濃度的測定： 采樣前的準備工作1米樣前手術室與人員的準備：凈化機組開機時間滿30分鐘后方可米樣；米樣者必 須穿著無菌工作服，采樣人員不超過2人。2采樣培養(yǎng)皿的準備：用于測定的培養(yǎng)皿必需進行空白對照試驗；培養(yǎng)皿測點數(shù)根 據(jù)手術室的面積與級別而定；采樣點可布置在地面上或不高于地面0.8米的任意高 度上。3采樣過程中的控制：

19、采樣應在手術室處于清潔、靜止、密閉的狀態(tài)下進行；培養(yǎng)皿放置妥當后人員迅速離開；采樣過程中禁止人員進入，手術室門保持關閉狀態(tài)；采樣時間嚴格按照30分鐘執(zhí)行。4采樣點的布置：送風口集中布置的手術間，應對手術區(qū)和周邊區(qū)分別檢測，當送 風口分散布置時，全室統(tǒng)一檢測，但不應布置在送風口正下方。布點方法見表9。表9沉降菌米樣布點方法參考（空態(tài)或靜態(tài)）等級空氣潔凈程度等 級布點方法最少 點數(shù)最少皿 數(shù)布點示意正常值I手術 區(qū)100級均勻布點5130.2/30min90皿周邊 區(qū)1000級每邊內(nèi)兩點850.4/30min90皿II手術 區(qū)1000級雙對角線350.75/30min90皿周邊 區(qū)10000級長邊

20、內(nèi)2點短邊內(nèi)1點631.5/30mi n90皿皿手術 區(qū)10000級單對角線332.0/30min90皿周邊 區(qū)100000級每邊內(nèi)1點434.0/30min90皿米樣注意事項1布點時應從房間的里面開始，依次向外布放。收取平板時順序由外向里依次收取。2空白對照：每次采樣設2次空白對照，第一次用于檢測培養(yǎng)皿（不打開平皿），第 二次每室或每區(qū)用一個平皿模擬操作過程（打開平皿，立刻合上） ，同其它平皿一起 送培養(yǎng)。兩次空白對照結果都必須為陰性。3靜態(tài)采樣可放置在固定設備如手術床上。4空氣潔凈級別相同的房間，應每個凈化級別至少監(jiān)測一間房間的空氣凈化狀況。 培養(yǎng)方法：培養(yǎng)皿立即置于36C士1C培養(yǎng)48h

21、,計數(shù)菌落數(shù)。菌落數(shù)的平均值四 舍五入進位到小數(shù)點后1位。結果計算手術區(qū)菌落總數(shù)手術區(qū)平均細菌數(shù)（個/皿 -放置平皿數(shù)周邊區(qū)菌落總數(shù)周邊區(qū)平均細菌數(shù)（個/皿）二-放置平皿數(shù) 結果判定：細菌最大平均濃度不超過（表9）各潔凈度等級的正常值；未檢出金 黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為合格。必要時進行空氣浮游菌監(jiān)測。2.回風口空氣動態(tài)平板法細菌菌落總數(shù)采樣 動態(tài)平板法采樣應在手術過程中進行 采樣方式應按圖的要求在距每個回風口前5cm的中部均勻擺放3個90mm培養(yǎng)皿；平皿水平夾角30o,采樣30min后，在35C37C下培養(yǎng)24h28h。 動態(tài)空氣細菌菌落總數(shù)：.回風口平板采樣：1級w4cfu/90皿30min;H級w7cfu/90皿30min;皿w8 cfu/90皿30min;W級w9 cfu/90皿30min?；仫L口空氣動態(tài)平板采樣的每皿菌落計數(shù)的