核酸提取常見試劑的作用原理

1、異硫氰酸胍強(qiáng)用力的蛋白質(zhì)變性劑，能迅速溶解蛋白質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎，核蛋白由于其二級(jí)結(jié)構(gòu)的破壞消失而迅速與核酸分離。胍鹽是破壞蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的離液劑，在通常使用的 蛋白質(zhì)變性劑中作用最強(qiáng)的是異硫氰酸胍，它們可以使多數(shù)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換成一隨機(jī)的卷曲狀 態(tài)。含有強(qiáng)力的陰離子和陽離子基團(tuán)，它們可以形成較強(qiáng)的氫鍵。 在還原劑存在的情況下， 異硫氰酸胍可以斷裂氫鍵，而去垢劑，如SDS 存在的情況下，可以破壞疏水作用。鹽酸胍、尿素鹽酸胍是一個(gè)核酸酶的強(qiáng)抑制劑， 它并不是一種足夠強(qiáng)的變性劑， 可以允許完整的 RNA 從 富含 RNase 的組織中提取出來。4-8M 可斷裂氫鍵，有兩種可能機(jī)制： 1 變性蛋白和鹽酸

2、胍、尿素優(yōu)先結(jié)合，形成變性 蛋白 -變性劑復(fù)合物，當(dāng)復(fù)合物被除去，從而引起N-D 反應(yīng)平衡向右移動(dòng)，隨著變性劑濃度增加，天然狀態(tài)的蛋白不斷轉(zhuǎn)變?yōu)閺?fù)合物，最終導(dǎo)致蛋白質(zhì)完全變性； 2 鹽酸胍、尿素對(duì)氨基酸的增溶作用，能形成氫鍵，當(dāng)濃度高時(shí)，能破壞水的氫鍵結(jié)構(gòu)，結(jié)果鹽酸胍、尿素 就稱為非極性殘基的較好溶劑，使蛋白質(zhì)內(nèi)部的疏水殘基伸展和溶解性加強(qiáng)，鹽酸胍、尿 素引起的變性往往是不可逆的。高濃度尿素使蛋白質(zhì)變性并抑制 Rn ase 活性十二烷基肌氨酸鈉使蛋白質(zhì)解體變性 巰基試劑1 防止蛋白質(zhì)或酶等（如輔酶A ）分子中SH 基團(tuán)氧化成二硫鍵， 2 在某些酶反應(yīng)過程中 維持體系的還原環(huán)境。 DTT DDT

3、E 巰基乙醇應(yīng)用最廣，谷胱甘肽也常應(yīng)用，由于他是生物 體內(nèi)的還原劑，同時(shí)氧化后能被谷胱甘肽還原酶原位釋放。 DNA 提取中，常使用巰基乙醇， 維持緩沖液的還原環(huán)境，防止多酚類氧化，由于具有一定的毒性，濃度不應(yīng)高于 2% 。巰基乙醇的主要作用是破壞RNase 蛋白質(zhì)中的二硫鍵（肽和蛋白質(zhì)分子中的殘基中的鍵）。1 還原蛋白質(zhì)二硫鍵，使Rna 酶變性2 抑制酚類氧化，若氧化，核酸會(huì)變成灰黑色，苯酚的氧化產(chǎn)物苯醌等氧化物引起磷酸二 酯鍵的斷裂及導(dǎo)致RNA 和 DNA 勺交聯(lián)3 保護(hù)蛋白質(zhì)的巰基蛋白質(zhì)提取中需要巰基乙醇還原二硫鍵，使RNAB 失活化學(xué)變性劑 SDS 尿素、鹽酸胍能破壞疏水鍵、鹽鍵、氫鍵、

4、范德華力使蛋白質(zhì)變性但不 影響肽鍵和二硫鍵，不能使蛋白質(zhì)徹底變性加上還原劑巰基乙醇或 DTT 能還原二硫鍵，使 RNA 徹底變性DTT 二硫蘇糖醇刺激性氣味要小很多，毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT 比巰基乙醇的濃度低7 倍時(shí)，兩者效果相近，但DTT 價(jià)格略高一些。由于容易被空氣，因此 DTT 的穩(wěn)定性較差；但冷凍 保存或在中處理能夠延長它的使用壽命。由于質(zhì)子化的硫的親核性較低，隨著 pH 值的降低 , DTT 的有效還原性也隨之降低； DTT 或含有 DTT 的溶液不能進(jìn)行高壓處理。抑制 Rnase 活性TCEP 三（ 2- 甲酰乙基 ） 膦鹽酸鹽半胱氨酸Trizol苯酚、異硫氰酸胍、8

5、羥基喹啉、等。TRIzol 的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細(xì)胞， 使細(xì)胞中的蛋白， 核酸物質(zhì)解聚得到釋放。 苯酚雖可有效地， 但不能完全抑制 RNA 酶活性，因此 TRIzol 中還加入了 8 羥基喹啉、異硫氰酸胍、等來抑制內(nèi)源和外源 RNase（ RNA 酶）。%的8羥基唾咻可以抑制RNase,與氯仿聯(lián)合使用可增強(qiáng)抑制作用。異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強(qiáng)力的蛋白質(zhì)變性劑，可溶解蛋白質(zhì)并使消失，導(dǎo)致細(xì)胞 結(jié)構(gòu)降解，核蛋白迅速與核酸分離。的主要作用是破壞RNase ?白質(zhì)中的二硫鍵。液氮組織破碎，裂解細(xì)胞SDS十二烷基硫酸鈉陰離子去垢劑，高溫（ 55-65 C） 裂解細(xì)胞，使染色體離析，

6、蛋白變性，形成 SDS 蛋白質(zhì) / 多糖復(fù)合物，釋放核酸，提高鹽（ KAc 或 NaAC 濃度并降低溫度（冰?。?，使SDS 蛋白質(zhì) / 復(fù)合物轉(zhuǎn)變?yōu)槿芙舛雀〉拟淃}酸形式，使蛋白質(zhì)及多糖雜質(zhì)沉淀更加完全、離心后除去沉淀，上清液中的 DNA 用酚 /氯仿抽提，乙醇沉淀水相中的DNA操作簡單，溫和，可提取到高分子量的DNA 但產(chǎn)物多糖類雜質(zhì)較多陽離子強(qiáng)表面活性劑，通常與蛋白幅K 和抗氧化劑、螯合劑一起使用可破壞細(xì)胞膜、核膜，并使組織蛋白與DNA 分離溶解膜類蛋白SDS 能裂解細(xì)胞。使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)和核酸之間常借著靜電引力或配位鍵結(jié)合，陰離子去 污劑能夠破壞這種價(jià)鍵，使染色體離析，蛋白變性，釋放核酸

7、。（ 1 ） SDS 是一種，能使蛋白質(zhì)的和疏水鍵打開，并結(jié)合到蛋白質(zhì)的疏水部位 ；（ 2 ） SDS 可引起蛋白質(zhì)構(gòu)象改變（ 3 ） SDS 是一種良好的解離劑，可使蛋白質(zhì)溶解，變性（ 4 ） 形成 SDS 蛋白質(zhì)復(fù)合物，并使復(fù)合物帶負(fù)電質(zhì)粒方面：在1%的 SDS 溶液中慢慢加入5 N 的 NaCI ，你會(huì)發(fā)現(xiàn)SDS 在高鹽濃度下是會(huì)產(chǎn)生沉淀的。因此高濃度的鹽導(dǎo)致了 SDS 的沉淀。但如果你加入的不是NaCI 而是 KCI ，你會(huì) 發(fā)現(xiàn)沉淀的量要多的多。 這其實(shí)是（ sodium dodecyIsuIfate ）遇到后變成了基（ potassiumdodecylsulfate, PDS ），

8、而 PDS 是水不溶的，因此發(fā)生了沉淀。如此看來，溶液山 加入后的沉淀實(shí)際上是置換了 SDS 中的納離子形成了不溶性的 PDS 而高濃度的鹽，使得沉淀更完全。大家知道SDS 專門喜歡和蛋白質(zhì)結(jié)合，平均兩個(gè)氨基酸上結(jié)合一個(gè)SDS 分子，鉀鈉離子置換所產(chǎn)生的大量沉淀自然就將絕大部分蛋白質(zhì)沉淀了，讓人高興的是大腸桿菌的DNA 也一起被了。基因組DNA 一旦發(fā)生斷裂，只要是50 100 kb 大小的片斷，就沒有辦法再被 PDS 了CTABCTAB 十六烷基三甲基溴乙胺，低溫時(shí)易沉淀陽離子去污劑一種在高鹽下能和核酸結(jié)合形成可溶、穩(wěn)定的復(fù)合物，低鹽濃度下可沉淀的表面活性劑是一種 , 低離子強(qiáng)度（ NaCl

9、 ），沉淀核酸與酸性多聚糖，而蛋白質(zhì)和中性多聚糖仍留在溶液中。在高離子強(qiáng)度的溶液中（L NaCl） , CTAB與蛋白質(zhì)和多聚糖形成復(fù)合物，只是不能沉淀核酸。通過有機(jī)溶劑抽提，去除蛋白，多糖，酚類等雜質(zhì)后加入沉淀即可使核酸分離 出來。CTAB 可從大量產(chǎn)生黏多糖的植物及某些革蘭氏陰性菌制備純化的 DNA 這種去污劑加入調(diào)節(jié)至高離子強(qiáng)度的細(xì)菌和細(xì)胞裂解液中（NaCl）,經(jīng)過連續(xù)的酚/氯仿抽提,去除CTAB/黏多糖/蛋白質(zhì)復(fù)合體，異丙醇/無水乙醇沉淀上清即可將DNA 分離出來CTAB 還有提高 DNA 互補(bǔ)鏈復(fù)性速率及穩(wěn)定已形成的 DNA 雙螺旋的作用CTAB 法的主要特點(diǎn)是用用較廣CTAB 溶液

10、在低于 15 度會(huì)形成沉淀析出，因此在將其加入冰冷的植物材料時(shí)，必須預(yù) 熱，且離心溫度不低于 15 度EDTA酶抑制劑，螯合二價(jià)金屬，抑制金屬依賴性的酶螯合 Mg2 或 Mn24 離子，抑制細(xì)胞中 DNase 的活性，該酶可降解DNAEDTA 是去垢劑，結(jié)合離子用，而它結(jié)合的部分離子是能夠誘發(fā)或者促進(jìn)RNA 酶活性的，比 如Ca2+。EDTA是一種二價(jià)離子熬合劑，能熬合Mg2和Ca2+等二價(jià)陽離子，而多種RNA幅的 活性是需要依賴二價(jià)陽離子的 , 所以 EDTA 能通過熬合二價(jià)陽離子來抑制 RNA 酶的活性堿性條件下才能夠溶解，要和 NaOH 粉末混合后，再加水，然后用 NaOH 水溶液調(diào)節(jié)

11、pH=， DNase 酶基本失活。BSA酶抑制劑，使一些降解酶的活性的表面變性精胺或其他多胺酶抑制劑，降低核酸酶的影響氰化物酶抑制劑，降低重金屬氧化酶的影響PVP減少酚類、醌類、單寧類物質(zhì)的影響，抗氧化作用，絡(luò)合多酚和萜類物質(zhì)，防止多酚類褐變而氧化，去除多糖和色素，色素是PCF 強(qiáng)抑制劑，必須去除樣品液氮研磨及提取緩沖液中加入PVP 或 PVPP 等能絡(luò)合多酚和萜類物質(zhì)，離心或氯仿抽提 出去，有效防止多酚氧化成醌類，避免溶液變褐色而具有抗氧化能力提取液中加入適量的 PVP 或 PVPP 能提高 DNA 的純度，用量根據(jù)雜質(zhì)而定（ 1-6% ） , PVP 同時(shí)能去除多糖，因此將PVP 和巰基乙

12、醇配合使用并調(diào)整用量，能有效防止多酚污染PVP 聚乙烯吡咯烷酮） 是酚的絡(luò)合物，能與多酚形成一種不溶的絡(luò)合物質(zhì)，有效去除多酚， 減少DNA 中酚的污染；同時(shí)它也能和多糖結(jié)合，有效去除多糖。Triton-x100Triton?X100 之類的去垢劑有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，所以在280nm 有很強(qiáng)的吸收。蛋白酶 K蛋白酶 K: 切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，切割脂族和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵，將 蛋白質(zhì)降解成小肽或氨基酸，使DNA 分子完整地分離出來。蛋白酶 K 在較廣的 pH 范圍內(nèi)均有活性（ pH ）溫度范圍 37-60 度 鹽濃度 3MGuHCI 或 4M 尿 素中均有活性在一些去污劑： Twee n20

13、 （5%） Trit on X-100 （1%）和 SDS （1%條件下也 有活性。蛋白酶 K 消化裂解法適用于所有標(biāo)本的消化處理，尤以 DNA 羊品為佳.如組 織細(xì)胞 （ 包 括石蠟包埋組織 ） 絨毛、毛發(fā)、精斑、血液（ 血清、血漿、全血） 局部分泌 物、尿，糞便等.蛋白酶K的一般工作濃度是50100 P g/ml蛋白酶（蛋白酶K 或鏈酶蛋白酶） 可以降解蛋白質(zhì),滅活核酸酶（ DNase 和RNase） ,DNase 和 RNase 也用于去除不需要的核酸，有人使用蛋白酶替代DEP （處理水的，但有些人說效果不好。蛋白酶K ，威力巨大的廣譜蛋白酶，95C 加熱 10 分鐘，則完全失活。數(shù)年前

14、首次使用 它替代 DEPC 處理 RNA 抽提用的離心管和槍頭，效果不錯(cuò)；后來又用于處理RNase-Free 的水，效果也是一級(jí)棒。從此就再也不用 DEPC 了。配制 RNA 裂解試劑時(shí)，直接用滅菌的 雙蒸水配制，最后，加入蛋白酶K 至終濃度 1ug/ml 。輕輕混勻，室溫放置15 分鐘后即 可。槍頭及離心管去除RNase ：先將槍頭及離心管清洗干凈后，移入預(yù)先混好的含1ug/ml 蛋白酶 K 的雙蒸水，徹底浸入。室溫放置 30 分鐘后，連水一起高壓滅菌。棄水后，烘干即 可。RNase-Free 水的獲得： 直接在滅菌的雙蒸餾水中加入蛋白酶K 至終濃度 1ug/ml 。輕輕混 勻，室溫放置15

15、 分鐘后，滅菌處理即可。該蛋白質(zhì)的殘留對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)沒有可見的影響。無蛋白質(zhì)殘留的 RNase-Free 水的獲得：這比較麻煩。直接在滅菌的雙蒸餾水中加入蛋白 酶 K至終濃度1ug/ml 。輕輕混勻后， 倒入專用的蒸餾器中。 放置 15 分鐘后，加熱蒸餾， 流出的就是無蛋白質(zhì)殘留的 RNase-Free 水。要提醒的是，該專用蒸餾器頭幾次流出來的 水，只能當(dāng)普通蒸餾水用，因?yàn)橥ǖ乐须y確保RNase-Free 的環(huán)境；另外，一定要主要密 閉性，否則，流出的水又被污染了。DNA 裂解液的作用是破壞細(xì)胞膜、，并使組織蛋白與 DNA 分離，抑制細(xì)胞中 Dnase 的活性， 而的作用是將蛋白質(zhì)降解成小肽或氨

16、基酸，使完整地分離出來！溶菌酶溶壁酶DnaseRnase多糖水解酶：水解多糖飽和酚 酚是一種有機(jī)溶劑 ,預(yù)先要用 STE 緩沖液飽和 , 因未飽和的酚會(huì)吸收水相而帶走一部分核酸。 酚也易氧化發(fā)黃, 而氧化的酚可引起核酸鏈中磷酸二酯鍵斷裂或使核酸鏈交聯(lián)： 故在制備酚 飽和液時(shí)要加入82 羥基喹嚀 , 以防止酚氧化。苯酚非極性分子水為極性分子使蛋白質(zhì)變性，同時(shí)抑制了 DNase 的降解作用。用苯酚處理勻漿液時(shí)，由于蛋白與 DNA 聯(lián)結(jié)鍵已斷，蛋白分子表面又含有很多極性基團(tuán)與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相， 而 DNA溶于水相。使用酚的優(yōu)點(diǎn)：1.有效變性蛋白質(zhì)；2.抑制了 DNase 的降解作用。能

17、有效使蛋白質(zhì)變性而出去，酚形成的有機(jī)相破壞蛋白質(zhì)的膠體穩(wěn)定性，從而蛋白質(zhì)不會(huì)分布在水 相中，避免核酸污染缺點(diǎn)：1.能溶解10-15% 的水，從而溶解一部分poly （ A） RNA 2.不能完全抑制 RNase 的 活性。酚變性大，但與水相有一定程度的互溶，大約 10-15% 的水溶在酚相中，使核酸損失酚（ Phenol ）對(duì)遠(yuǎn)大于氯仿，按道理應(yīng)該用酚來最大程度將蛋白質(zhì)抽提掉，但是水的比重 略比水重，碰到高濃度的鹽溶液（比如 4M 的），離心后酚相會(huì)跑到上層，不利于含質(zhì)粒的 水相的回收；但加入氯仿后可以增加比重，使得酚/ 氯仿始終在下層，方便水相的回收；還有一點(diǎn)，酚與水有很大的互溶性，如果單獨(dú)

18、用酚抽提后會(huì)有大量的酚溶解到水相中，而酚會(huì)抑制很多酶反應(yīng)（比如限制性酶切反應(yīng)），應(yīng)此如果單獨(dú)用酚抽提后一定要用氯仿抽提一次將水相中的酚去除，而用酚 / 氯仿的混合液進(jìn)行抽提，跑到水相中的酚則少得多，微量 的酚在乙醇沉淀時(shí)就會(huì)被除干凈而不必?fù)?dān)心酶切等反應(yīng)不能正常進(jìn)行。至于的添加，其作 用主要是為了讓離心后上下層的界面更加清晰，也方便了水相的回收。氯仿非極性分子水為極性分子去除脂肪 , 使更多蛋白質(zhì)變性 ,從而提高提取效率克服酚的缺點(diǎn)；加速有機(jī)相與液相分層。最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的跡量酚。 （酚 易溶于氯仿中）氯仿變性不如酚好，但與水不混溶，不會(huì)帶走 DNA 因此混合使用最佳，經(jīng)酚第一次抽

19、提的水相有殘留的酚，由于酚和氯仿互溶，可用氯仿第 二次帶走酚，也可在第二次抽提中混合使用，比例為1： 1苯酚 / 氯仿苯酚、氯仿抽提去除蛋白質(zhì)非極性分子水為極性分子，當(dāng)?shù)鞍姿芤号c他們混合時(shí)，蛋白質(zhì)分子見的水分子被擠去， 使蛋白失去水合狀態(tài)而變性，經(jīng)離心，變性蛋白密度比對(duì)大，而與水相分離，苯酚/ 氯仿比 重大，保留在最下層苯酚氯仿 使蛋白質(zhì)變性 量要足夠，因?yàn)楸椒尤コ鞍资怯幸欢ǖ娘柡投鹊?，超過飽和度，裂解體系中蛋白質(zhì)不能被一次性去除，必須多次抽提。離心后分三層，下層中有 一些的雜質(zhì)，白色絮狀沉淀是蛋白，中即含有； 變性后的蛋白質(zhì)從水相中析出，位于苯酚 中或苯酚與水相之間。異戊醇 抽提 DNA

20、 為混合均勻，容易產(chǎn)生氣泡，氣泡會(huì)阻止相互間的充分作用，加入異戊醇降低分子表面張力，一般采用氯仿：異戊醇 =24 ： 1 或酚：氯仿：異戊醇 =25 ： 24： 1 （不必先配置，臨用前加入即可）減少操作過程中產(chǎn)生的氣泡。減少蛋白質(zhì)變性操作過程中產(chǎn)生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力，從而減少氣泡產(chǎn)生。另外，異戊醇有助于分相，使離心后的上層含DNA 的水相、中間的變性蛋白相及下層有機(jī)溶劑相維持穩(wěn)定。NaCl提供一個(gè)高鹽環(huán)境，使DNA 充分溶解于液相沉淀 DNA 寸總會(huì)加入高濃度的鹽， 加鹽的目的是破壞能使蛋白質(zhì)保持穩(wěn)定的兩個(gè)因素 ， 使蛋 白和 DNA 分離并沉淀下來.而此時(shí)鹽的陽離子會(huì)與DNA

21、吉合形成 DNA 陽離子鹽溶于溶液中 , 再用無水乙醇可以將DNA 陽日離子鹽沉淀下來提取 DNA 寸先加 L 氯化鈉，因?yàn)樵谶@種濃度的氯化鈉溶液中， DNA 勺溶解度最低，而蛋白質(zhì)的溶解度增加，這樣通過過濾能將DNA 分離開，以除去蛋白質(zhì)。再加入95%勺酒精能 使DNA 沉淀，因?yàn)樵谶@個(gè)濃度下 DNA 溶解度最低。如果直接加酒精不先加氯化鈉， DNA 和 蛋白質(zhì)都能被酒精所沉淀，就無法將DNA 和蛋白質(zhì)分離開。所以必須先加氯化鈉后加酒精， 順序不能顛倒。DNA 溶液是 DNA 以穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時(shí)，乙醇會(huì)奪去 DNA 周圍的，使DNA 失水而易于聚合。這樣可以是 DNA 沉淀出來在pH

22、為 8左右的溶液中，是帶的，加一定濃度的 NaAc 或NaCI,使Na+中和上的，減少之間的同性電荷相斥力，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉 淀，當(dāng)加入的鹽溶液濃度太低時(shí)，只有部分DNA 形成 DNA 鈉鹽而聚合，這樣就造成 DNA 沉 淀不完全，當(dāng)加入的鹽溶液濃度太高時(shí)，其效果也不好。在沉淀的 DNA 中，由于過多的鹽 雜質(zhì)存在，影響 DNA 勺酶切等反應(yīng)，必須要進(jìn)行洗滌或重沉淀。檸檬酸鈉它可以控制反應(yīng)體系的，同時(shí)還有一定的緩沖作用，保證體系 PH 的相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)，總之在這里的作用類似于食物中的防腐劑。DEPC焦碳酸二乙酯，它通過和 RNA 酶的活性基團(tuán)組氨酸的咪唑環(huán)結(jié)合使蛋白質(zhì)變性，從而抑制

23、 酶的 活性。與肝素何用效果增強(qiáng)。在 Tris 中不穩(wěn)定，很快會(huì)分解為二氧化碳和乙醇。強(qiáng)烈但不徹底的 RNA 酶抑制劑%濃度Tris-HCI緩沖體系，使pH 變化不會(huì)太大異丙醇加入異丙醇之后立即出現(xiàn)絮狀沉淀，我一直以為這是正確的，看了帖子才知道是蛋白質(zhì)污染，異丙醇的沉淀效果要比無水乙醇的沉淀效果要好，但是異丙醇沉淀有一個(gè)弊端就是會(huì)沉淀下來好多的鹽和蛋白質(zhì)這樣會(huì)影響下一步的操作， 一般我加異丙醇是等體積的效果還可以。70%乙醇70 I1醇洗滌DNA沉淀（因?yàn)樵?0%乙醇里DNA是不溶的,而鹽離子卻可溶），用無水乙醇則達(dá) 不到這個(gè)目的 ！ 乙醇對(duì)于蛋白質(zhì)、核酸的沉淀效應(yīng)隨分子量加大而增大， 小分子的核酸和蛋 白質(zhì)碎片是可以溶于 75%乙醇的。漂洗DNA 是為了去除殘余的鹽類，去除過量 SDS 和酚等 雜物，因?yàn)?SDS 在 70%勺乙醇中保持溶解狀態(tài)，不與 DNA 共沉淀，從而通過棄上清液去除 這種去污劑 , 避免對(duì)以后 PCF 反應(yīng)的影響。DEPC（焦碳酸二乙酯） ： 常用 RNA 酶抑制劑，與RNA 酶的活性基團(tuán)組氨酸的咪唑環(huán)結(jié)合使蛋白質(zhì)變性 ,強(qiáng)烈但不徹底的RNA 酶抑制劑甲酰胺用高濃度甲酰胺替代苯酚從細(xì)胞裂解物的蛋白酶K 消化物中分離抽提DNA 甲酰胺是 一種離子化溶劑，能分離蛋白質(zhì)-DNA 復(fù)合物并使蛋白變