Waters-151241凝膠滲透色譜GPC操作規(guī)程講解學(xué)習(xí)

1、I Waters 1515-2414凝膠滲透色譜（GPC操作規(guī)程!、溶劑和樣品準(zhǔn)備11 選擇溶劑：嘗試和選擇對聚合物具有良好溶解性的THF或者DMF作!i為溶劑；!2溶劑處理：采用溶劑過濾系統(tǒng)（真空抽濾）對色譜純?nèi)軇┻M(jìn)行過濾和II脫氣處理；I 3祥品配制：選用處理后的溶劑配置待測樣品溶液，樣品體積> 4mL|樣品濃度根據(jù)估算的分子量確定（Mw二IO?IO濃度為1,5-2mg/mL; Mw二 104105,濃度為 1 i.5mg/mL; Mw 二 105-5X 105,濃度為 0.5i1mg/mL; Mw 二 5 X 105106,濃度為 0.1 0.5mg/mL; Mw > 106

2、,濃度為iI0.050.1 mg/mL）;I 4樣品溶解：提供足夠時間使聚合物完全溶解（一般在室溫下靜止過夜）；注：可輕微搖動樣品以促進(jìn)溶解但不可劇烈搖動；!5樣品過濾：樣品溶解后，采用一次性微孔濾膜（孔徑0.22八!11對樣品I溶液進(jìn)行過濾，保存濾液待用；注意：每個樣品需要準(zhǔn)備兩個樣品瓶（分別用于溶解樣品和放置過濾后的溶液）和兩個注射器（分別用于過濾和進(jìn)樣）iI 二、儀器啟動IIi1 將經(jīng)過真空抽濾的溶劑倒入溶劑存貯瓶中；!2依次打開穩(wěn)壓電源-計算機(jī)-泵-柱溫箱-示差折光檢測器開關(guān)；II 3啟動Breeze軟件，輸入用戶名Breeze；選擇1515-2414系統(tǒng)，確定；II45AI4在Bre

3、eze軟件系統(tǒng)中點擊運行樣品一點擊丨流量圖標(biāo)設(shè)置泵流速；j0.2mL/min,注意：設(shè)置變化時間為2min,即以0.1mL/min緩慢增加流速，使色譜柱所受壓力緩慢變化；5在示差折光檢測器面板上，點擊Temp cC設(shè)置溫度40 cCI（set/control）；再點擊Home一 Shift 1 一顯示Purge圖標(biāo)；此時示差檢測器為Purge流路，沖洗示差檢測器的樣品池及參比池；點擊平衡系統(tǒng)/監(jiān)視基線圖標(biāo) 一調(diào)用PS-purge方法一點擊平衡/監(jiān)視器，監(jiān)控基線；Purge時間為10h；6.10h后（此時基線已穩(wěn)定）,在運行樣品界面點擊丨設(shè)置泵流速丨1mL/min （設(shè)置變化時間8min,以0.

4、1mL/min緩慢增加流速）,平衡0.5h；7在示差折光檢測器面板上，點擊Shift 1,取消Purge （回到正常測樣流路），平衡35min；再依次點擊Diag Optimize LED （16-17正常）一EnterI一Home；三、樣品測試JJII 點擊Breeze軟件系統(tǒng)中的單進(jìn)樣圖標(biāo)一輸入待測樣品名一選擇功能；I （寬分布進(jìn)樣）一選擇方法組PS輸入進(jìn)樣體積（20 uL及樣品測試時間丨（45mi n）點擊單進(jìn)樣，準(zhǔn)備進(jìn)樣；此時窗口顯示等待進(jìn)樣；JI2選用1mL注射器，安裝色譜專用平頭針頭，采用過濾后樣品溶液潤丨洗進(jìn)樣注射器后，再抽取過濾后的樣品溶液；將針口朝上排出氣泡（注意針頭 不要

5、有液珠，否則會污染進(jìn)樣口，必要時用鏡頭紙擦拭）；將進(jìn)樣閥門撥到Inject位置（即垂直狀態(tài)），將進(jìn)樣注射器插入進(jìn)樣器內(nèi)并插到底（不用過于 用勁）,進(jìn)樣；進(jìn)樣結(jié)束后迅速將進(jìn)樣閥門撥到Load位置；此時窗口顯示進(jìn)樣正在運行；注意：進(jìn)樣結(jié)束后，使用抽濾后的溶劑及時清洗針頭；!3到設(shè)定的運行時間后，儀器自動停止數(shù)據(jù)采集，此時窗口顯示單進(jìn)樣！結(jié)束；20miri后，按步驟1和2進(jìn)下一個樣品;注意：實驗過程中及時觀察溶劑存貯瓶中溶劑量；如需補加，必須在儀IIJ器停止數(shù)據(jù)采集時（最好在泵流速為0時）添加溶劑，且砂濾頭必須在液面下。j- 三、數(shù)據(jù)處理I;1 在Breeze軟件系統(tǒng)中點擊查詢數(shù)據(jù)；2在通道界面選中

6、要處理的寬分布未知樣-右鍵點擊查看；Ii3在查看窗口點擊文件-打開-處理方法-（選擇最新工作曲線的方法i名，THF體系選用33, DMF體系選用37）點擊處理參數(shù)圖標(biāo)一選擇編輯 現(xiàn)有的 GPC方法并保留校正，確定-根據(jù)處理區(qū)間確定積分區(qū)域（其余不變）一點擊下一 步直至完成一復(fù)制曲線一點擊工具欄中結(jié)果圖標(biāo)一查看樣品的分子量、分子量分布 指數(shù)、以及分布圖，根據(jù)需要復(fù)制GPC曲線，以及調(diào)取Ii相關(guān)數(shù)據(jù)（TEXT文本格式）；I4退出時點擊文件一保存一全部；II5返回到Breeze軟件系統(tǒng)中點擊查詢數(shù)據(jù)-在結(jié)果界面點擊更新-出現(xiàn)剛保存的數(shù)據(jù)一選中該樣品一點擊工具欄中預(yù)覽報告圖標(biāo)一點擊文件一打印報 告一 相關(guān)數(shù)據(jù)即存儲為PDF文件；|6實驗結(jié)束后，請使用格式化U盤將相關(guān)數(shù)據(jù)文件及時拷出。|I 四、關(guān)機(jī)II 對GPC儀器而言，不要時開時停。為此，建議第二天的測試者在上一位 ；同學(xué)測試結(jié)束后，將溶劑過濾后加入到溶劑儲存瓶中（溶劑量不少于100mL），調(diào)整變化時間將泵流量從1mL/min降至01mL/min,走Purge流 路。同時還注意：廢溶劑接收瓶有足夠的空間且兩根流路出口管均插入到廢溶 劑瓶中。I 如果直接關(guān)機(jī)， 關(guān)機(jī)步驟如下Ii1.在樣品測試結(jié)束后，必須在10mL/min流速下讓流動相繼續(xù)流0.5