大孔樹脂使用方法

1、WORD格式大孔樹脂使用方法一、大孔吸附樹脂的預(yù)處理：大孔樹脂在試驗中使用時間較長， 必須保證不受霉菌污染。 新購樹脂一般用氯化鈉及硫 酸鈉處理過，但樹脂內(nèi)部存在未聚合的單體殘存的致孔劑、引發(fā)劑、分散劑等用前必須除掉。預(yù)處理的流程簡述如下：以 0.5BV 的乙醇浸泡樹 24h （ 1BV 為 1 個樹脂床體（1 ） 脂 積）用 2BV 的乙醇以 流速通過樹脂柱，并浸泡4-5（ 2 ） 2BV/h h（3 ）再用水以同樣流速洗凈（ 4 ）用乙醇洗至流出液加水不呈白色混濁為止。（ 5 ） 用 2BV 的 5%HCL 溶液以 4-6 BV/h 的流速通過樹脂層。并浸泡樹脂 2-4h 。 而后用水以同

2、樣流速洗至出水 pH 中性溶液 以 4-6（ 6 ） 用 2BV 的 2%NaOH BV/h 的流速通過樹脂層 并浸泡樹脂 2-4h 而后用水以同樣流速洗至出水 pH 中性。也可采用下列程序： 在潔凈的分離柱內(nèi)， 放入已去除外來雜質(zhì)， 體積恒定的大孔吸附樹脂加 入相當(dāng)于樹脂體積 0.4- 倍的乙醇（或甲醇）浸24 h ，然后用樹脂體積的 2-3 倍的0.5 泡 乙2-3 次，至最終以水洗脫后，保持分離使用前 醇（或甲醇）與水交替反復(fù)洗脫交替洗脫 的 狀態(tài)。醇洗脫液加水不顯混濁。也可用電導(dǎo)率、熒光和紫外吸收等作為前處理的標(biāo) 準(zhǔn)。二、大孔樹脂的使用 大孔樹脂是大孔徑的高分子分離材料，中草藥有效成分

3、在大孔樹脂上的 吸附 是大孔樹 脂與有效成分形成以范德華力和氫鍵為主的一分子間作用力的結(jié) 果。 大孔樹脂依據(jù)其聚合物 的單體組成不同， 可以分成非極性和極性兩大 非極性吸附樹脂適合從極性溶液 類。 中（如水溶液） 中吸附非極性物質(zhì)。 中等極性樹脂可從極性溶液中吸附非極性物 質(zhì)， 還能從非極性溶 液中吸附極性物質(zhì)。大孔樹脂的孔徑和比表面積是影響大孔樹脂對物質(zhì)的吸附的主要因素。 大孔樹脂比表面 積越大，單位質(zhì)量大孔樹脂吸附的作用面積越大，單位質(zhì)量大孔樹脂吸附有效成分就越 大。而大孔樹脂的比表面積還包括內(nèi)孔網(wǎng)的面積。樹脂孔徑過小有效成分分子不能進(jìn)入樹 脂內(nèi)因此選擇的時候應(yīng)該根據(jù)目標(biāo)物的選擇適用的樹脂

4、， 采用合理的實驗 用吸附曲線解析曲線具體地應(yīng)該通過實部，只能在樹脂外表面吸 相應(yīng)的比表面積就比較小 附， 分子量選擇合適孔徑的樹脂才能使吸附的有效面積增 大。設(shè)計和方法工藝條件才能充分發(fā)揮大孔樹脂的作 用。驗確定。2.1 樹脂型號的確定 考察某種樹脂是否適合于該產(chǎn)品。首先考察該樹脂的吸附率和吸附量。即樹脂對所純化分離的有效成分要有較大的吸附量。 然后，需考察樹脂對所分離的有效成分有良好的 分離性能 目標(biāo)成分能比較集中的被洗脫出來。采用的方法如下吸附率和吸附量的測定：吸附率專業(yè)資料整理E% =C 0 Ce / C 0 ×100%C0 吸附前溶液的濃 度E% 吸附率吸附量 C0 Ce

5、)Q= ( × V/Wmg/ml Ce 吸附后溶液濃度Q 吸附 量mg/g W 干樹脂重V 溶液體積A 靜態(tài)吸附以葛根素中黃酮提取為例 將 10g 處理好的各種樹脂分別加入葛根素水溶液 30ML 總黃酮濃度為 9.4mg /mL 每 5min 振搖 1 次，2h 小時后分別取各樹脂的吸附溶液1ML進(jìn)行吸光度的分析，計算各種樹脂對葛根素總黃酮的吸附率。B 靜態(tài)解析：將靜態(tài)吸附的樹脂過濾抽干，加 30 ml 70% 乙醇解析每 5 分鐘振一次 2h 后分別取 各解析液測定黃酮的濃度。以計算各種樹脂對黃酮的解析率。C 動態(tài)吸附準(zhǔn)確稱取 10ml 或 20ml 樹脂在干凈的 2 ×

6、 20cm 色譜柱內(nèi)， 加入葛根素的水溶液總 黃酮的濃度為 9.4mg/ml 于柱頂，以 2BV/h 的流速進(jìn)行動態(tài)吸附，收集流出液。按床體 積收集進(jìn)行分析， 測出目標(biāo)物的濃度黃酮含量， 然后以洗脫液體積為橫坐標(biāo)， 流出液中的目 標(biāo)物含量為縱坐標(biāo)繪制動態(tài)吸附曲線， 計算飽和動態(tài)吸附量。 并計算達(dá)到吸附飽和時， 所吸 附的目標(biāo)物的量?？梢员容^出何種樹脂的吸附量大。2.1 吸附工藝的確定A 上樣液 pH 值的選擇和鹽的濃度的影響 改變?nèi)芤?pH 值可以影響有效成分在大孔樹脂上的吸附。溶液的 pH 值可以體現(xiàn)在下列幾 方面 , 改變有效成分在溶液中的的存在形式 , 例如生物堿在堿性溶液中以游離態(tài)形式

7、存在，而 在酸性溶液中以離子形式存在。 再次，溶液 pH 值改變可以影響有效成分在溶液中的溶解度。值改變可以改變?nèi)芤旱臉O性，影 溶液 pH 值升高皂苷在溶液中的溶解度增大。溶液 pH 響 有效成分和大孔樹脂間的分子間作用力。如生物堿等堿性有效成分在溶液變成酸 性后 , 會改 變生物堿等堿性成分在溶液中的存在形式 , 降低其在大孔樹脂上的吸附。實驗發(fā)現(xiàn)，隨著溶 液的 pH 增加，生物堿的吸附量增加。羅漢果皂甙 選用 pH9-10 時吸附性能最好。這和羅 漢果皂甙是非離子性物質(zhì)是相一致的。在提取羅漢果的時候色素也會提取出來. 這些色素為酚類物質(zhì)和羅漢果的極性相似很難分離但在堿性條件下色素轉(zhuǎn)化為鹽而

8、溶于水, 不易被樹脂吸附 . 另外羅漢果皂甙在堿性條件下比較穩(wěn)定因此羅漢果溶液采用 pH9-10 為宜。酸性有效 成分應(yīng)該在酸性條件下吸附，堿性有效成分應(yīng)該在堿性條件下吸附。反之在解析洗脫階段， 酸性有效成分使用戶堿性洗脫液洗脫效果好，堿性有效成分使用酸性洗脫液效果 好。鹽離子濃度對吸附影響： 無機鹽可以降低有機質(zhì)的水溶 性， 可以增加很多有機化合物對吸附 劑的親和力?？赏ㄟ^實驗求得吸附量最大之最佳鹽濃 度。B 溫度對大孔樹脂提取有效成分效果的影響 由于黃酮、 皂甙、生物堿等有效成分在大孔樹脂是通過分子間作用 力， 屬于物理吸附。 溫度 升高， 一方面有效吸附作用降低。另一方 面，有效成分在溶

9、液中的溶解度增大。綜合結(jié)果溫度升高可使有效成分在大孔樹脂上的吸附速度和吸附量降 低。 實驗證明， 溫度升高葛根素的 吸附量減少，反之在解析階段，應(yīng)該升高溫 度。C 進(jìn)柱液濃度 從物理吸附的等溫方程 由于黃酮、 皂苷、生物堿等有效成分在大孔樹脂吸附是物理吸附，可一般低濃度下進(jìn)行比較 以發(fā)現(xiàn)，初始濃度增加吸附率降低。 平衡時間延長，吸附率降低。有利。如果進(jìn)柱液濃度過高則泄漏早處理量小樹脂使用周期短。但如果濃度偏低則耗時增加， 工作效率過低也不可取。如果取葛根素的水溶液分別加水稀.5 ，10 ，15 ，釋。20倍后上樣以 2BV/h 的流速進(jìn)行吸100ML 于 250nm 計算吸光度計0.5g/mL

10、 藥液濃度上樣即可。附后先以 5BV 水洗脫再用 70% 乙醇洗脫， 收集洗脫液 至 算總黃酮的含量。即多篇文獻(xiàn)研究結(jié)果表示當(dāng)總黃酮濃度D 吸附速率的確定皂甙溶液通過玻璃柱內(nèi)考察不同流速對流速對吸附的影響： 將濃度為 7.96 mg/ml pH =9.0吸附量的影響。 流速過大會使樹脂的工作吸附量下降提早泄漏。 且樹脂壓力增大能量損失。皂甙吸附以 3BV /h為宜。黃酮吸附以 2BV/h 時效果最好E 洗脫劑濃度 中草藥有效成分從大孔樹脂上洗脫，是利用有效成分在洗脫液中的溶解 作用 大于有效成分在大孔樹脂間的吸附作用。使用的吸脫液應(yīng)該對有效成分具有良好的溶解 作用。吸附目標(biāo)物后可選用對目標(biāo)物溶

11、解度較高的溶劑如乙醇作為解析劑， 采用不同濃度的乙 醇作為解析劑。分析洗脫液中目標(biāo)物濃度。求得最佳的濃 度。黃酮、皂苷、生物堿以及其他苷類物質(zhì)在乙醇類溶液中溶解度較 大。 常使用乙醇作為洗脫液。一方面乙醇濃度不同乙醇溶液 乙醇溶液從兩方面影響有效成分在大孔吸附樹脂上的吸附。 的 極性不同。 乙醇溶液的極性不同影響有效成分和大孔吸附樹脂間的作用 力。另一方面乙醇濃度不同影響有效成分在大孔樹脂上的解吸作 用。 是兩者作用相互作用相互競爭的結(jié)果。 如分 離大豆皂苷時， 洗脫液中的研究結(jié)果是洗脫液中的皂苷含量隨洗脫液乙醇濃度增加先 增加后 降低。在乙醇濃度 為 50% 時，洗脫液中總皂苷含量最大。而分離羅漢果皂甙時，采用 60% 乙醇水溶液進(jìn)行洗脫效果最好。