潔凈室環(huán)境監(jiān)測操縱制度

1、青島有限公司文件文件名稱潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測操作規(guī)程文件編號SOP-ZL66-1制定人審核人審核人制定日期審核日期審核日期批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期生效日期頒發(fā)部門品管部印 數(shù)份分發(fā)部門品管部本標(biāo)準(zhǔn)適用于潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的監(jiān)測。 環(huán)境監(jiān)測員目的 建立潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測規(guī)程，規(guī)范潔凈區(qū)沉降菌、浮游菌、懸浮粒子的測試，保 證藥品在規(guī)定的潔凈級別內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)。范圍 責(zé)任 內(nèi)容檢驗(yàn)依據(jù):沉降菌的測試方法 浮游菌的測試方法 懸浮粒子的測試方法1.1 GB/T16294-20101.2 GB/T16293-2010醫(yī)藥潔凈室醫(yī)藥潔凈室醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）（區(qū)）（區(qū)）1、1.3 GB/T16292-20102、懸浮粒子的

2、監(jiān)測2.1概述：本測試方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過測定潔凈區(qū)環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中 含大于或等于某粒徑懸浮粒子數(shù)，來評定潔凈室（區(qū)）的懸浮粒子潔凈度等級。2.2儀器和設(shè)備：塵埃粒子計(jì)數(shù)器，嚴(yán)格按照塵埃粒子計(jì)數(shù)器操作、維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程 （SOP-ZL95-1 ）操作。2.3測試步驟2.3.1測試條件：在測試之前，要對潔凈室（區(qū)）相關(guān)參數(shù)進(jìn)行預(yù)先測試，包括溫度 控制在18-26 C、相對濕度控制在45-65%、壓差等，同時(shí)應(yīng)滿足儀器的使用范圍。2.3.2測試狀態(tài)：靜態(tài)測試，人員不得多于2人。測試報(bào)告中應(yīng)明確測試時(shí)所采用的 狀態(tài)及測試人員數(shù)。2.3.3測試時(shí)間：在空態(tài)或靜態(tài)a測試時(shí)，對單向流潔凈室（區(qū)）而言

3、，測試宜在凈 化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 10min后開始。對非單向流潔凈室（區(qū)），測試宜 在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 30min開始。在靜態(tài)b測試時(shí)，對單向流潔 凈室（區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過 10min后開始；對非單向流潔凈室（區(qū)），測試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20min自凈后開始。2.4采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置2.4.1在空態(tài)或靜態(tài)測試時(shí)，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)力求均勻，并不得少 于最少采樣點(diǎn)數(shù)目。在動態(tài)測試時(shí)，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及 工藝關(guān)鍵操作區(qū)設(shè)置。最少采樣點(diǎn)數(shù)目如下最少采樣點(diǎn)數(shù)目面積（rf）潔凈級別A級C級D級<

4、102-322>10 < 20422>20 < 40822>40 < 1001642采樣點(diǎn)的布置:* X><XXXX2.4.2采樣點(diǎn)位置：一般在離地0.8m高度的水平面上均勻布置，并避開回風(fēng)口。測 試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)。2.4.3采樣次數(shù)的限定：對于任何小潔凈室或局部空氣凈化區(qū)域，采樣點(diǎn)的數(shù)目不得少于2個(gè)，總采樣次數(shù)不得少于5次。最小采樣量潔凈度級別采樣量L/次>0.5 jjm>5阿A級5.668.5C級2.838.5D級2.838.52.5判斷標(biāo)準(zhǔn):潔凈度級別懸浮粒子最大允許數(shù)（個(gè)/m 3）（靜態(tài)）X）.5 阿>5A級35

5、2020C級3520002900D級3520000290002.6監(jiān)測頻率：2 ）。2.6.1每季度對微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行監(jiān)測，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件262 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件 1）263每季度對D級潔凈區(qū)所有房間進(jìn)行監(jiān)測，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件3、沉降菌的監(jiān)測以平板的潔凈3.1概述：本測試方法利用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子 于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)， 培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)） 度。本法采用動態(tài)監(jiān)測，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為不大于 4小時(shí)。X15mm

6、）、3.2儀器和設(shè)備：高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿（已滅菌，©90mm 大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）。3.3測試步驟：3.3.1測試前培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。將已于 30 35 C恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48 小時(shí)且無菌落生長的培養(yǎng)皿按照采樣點(diǎn)布置圖逐個(gè)放置，然后從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中。全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在3035 C下培養(yǎng)，時(shí)間不 少于2天。采用沙氏瓊脂培養(yǎng)基（SDA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后在2025 C下培養(yǎng)，時(shí) 間不少于5天。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照

7、試驗(yàn)，檢查培養(yǎng)基本身是否污染，可每批選定3只培 養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。3.3.2菌落計(jì)數(shù)：用肉眼直接計(jì)數(shù)，然后用510倍放大鏡檢查有否遺漏。若培養(yǎng)皿 上有2個(gè)或2個(gè)以上菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。3.3.3采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置：參照懸浮粒子的采樣點(diǎn)數(shù)目。3.3.4最少培養(yǎng)皿數(shù)：在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)目的同時(shí)，還應(yīng)滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級別最少培養(yǎng)皿數(shù)（©90mm ）A級2C級2D級23.3.5采樣次數(shù)：每個(gè)采樣點(diǎn)采樣一次。3.3.6評定標(biāo)準(zhǔn)：潔凈度級別浮游菌cfu/m 3沉降菌（©90mm ） cfu/4 小時(shí)接觸蝶cfu/ 蝶手套cfu/ 手套A級小于

8、1小于1小于1小于1C級1005025D級200100503.3.7監(jiān)測頻率：3.3.7.1微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室凈化臺樣品每次實(shí)驗(yàn)時(shí)監(jiān)測，其他房間每周一次并及時(shí) 填寫監(jiān)測記錄（附件4 ）。3 ）。3 ）。337.2 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件3.3.7.3 D級潔凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件3.3.7.4陽性對照間生物安全柜每次實(shí)驗(yàn)時(shí)監(jiān)測，其他房間每季度測一次并及時(shí)填 寫監(jiān)測記錄（附件4）3.3.7.5微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室表面微生物（手套及操作服）每周測一次，并及時(shí)填寫 監(jiān)測記錄（附件4 ）。4、浮游菌的監(jiān)測4.1概述 本方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過收集懸

9、游在空氣中的生物性粒子于專門 的培養(yǎng)基，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判 定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)，以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。本法采用動態(tài)監(jiān)測。4.2儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基：FKC-1型浮游菌采樣器，嚴(yán)格按照浮游菌采樣器操作及 維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程（SOP-ZL96-1 ）操作。培養(yǎng)皿（已滅菌，© 90mm X15mm ）、大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏瓊 脂培養(yǎng)基（SDA）、恒溫培養(yǎng)箱。4.3測試步驟4.3.1測試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測房間前先的消毒劑 滅菌，用于100級潔凈室的采樣器宜一直放在被測房間內(nèi)。先用

10、消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。采樣 口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時(shí)，應(yīng) 將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放 入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。4.3.2儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸 發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子 后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。4.3.3培養(yǎng)全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培

11、養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在30 C35 C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。每批培養(yǎng)基應(yīng)有對照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染。 可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。4.3.4菌落計(jì)數(shù) 用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用 510 倍放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有 2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以 2 個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。4.4采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置浮游菌測試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置參照懸浮粒子的采樣點(diǎn)數(shù)目。4.5監(jiān)測頻率：6 ）。5 ）。5 ）。4.5.1微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室每季度監(jiān)測一次，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件4.5.2 D級取樣間每季度監(jiān)測所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件4.5.3 D級潔

12、凈區(qū)每季度監(jiān)測所有房間，并及時(shí)填寫監(jiān)測記錄（附件5、注意事項(xiàng)使用前仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不5.1 能使用。采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對樣本的污染。對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)5.25.45.3觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必 要時(shí)用顯微鏡鑒別。6、年度回顧審核與數(shù)據(jù)趨勢分析6.1品管部每年對通過質(zhì)量回顧對監(jiān)測數(shù)據(jù)收集并經(jīng)評價(jià)，用統(tǒng)計(jì)分析圖將趨勢直 觀地反映出來，在圖中標(biāo)出警戒限度及糾偏限度。6.2根據(jù)趨勢分析結(jié)果可對環(huán)境

13、控制區(qū)的微生物學(xué)質(zhì)量做出評估，并對警戒和糾偏 限度做出相應(yīng)調(diào)整，并通知相關(guān)部門。7、警戒限度與糾偏限度的確定原則7.1警戒限度：用以指示環(huán)境中的微生物水平是否有偏離正常水平的可能性如超 過，至少應(yīng)予以調(diào)查。7.2糾偏限度：一旦超出，表示環(huán)境中微生物污染水平已嚴(yán)重偏離正常水平，對產(chǎn) 品質(zhì)量造成高度的污染風(fēng)險(xiǎn)必須立即采取糾偏措施。潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄(R-SO P-ZL66-1-01)微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室懸浮粒子監(jiān)測記錄(R-S OP-ZL66-1-02 )潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄(R-S OP-ZL66-1-03 )微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室沉降菌監(jiān)測記錄(R-S OP -ZL66-1-04 )潔凈區(qū)浮游菌監(jiān)測

14、記錄(R-S OP-ZL66-1-05 )微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室浮游菌監(jiān)測記錄(R-S OP -ZL66-1-06 ) 監(jiān)測點(diǎn)分布圖7.3制定依據(jù):警戒限、糾偏限以正常監(jiān)測數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，并賦與一定的安全系數(shù)。即: 警戒限度=平均值+2糾偏限度=平均值+ 3 C8、附件1附件附件附件附件附件附件9、修訂歷史文件修訂、變更歷史原文件編號現(xiàn)文件編號生效日期修訂變更原因附件1潔凈區(qū)懸浮粒子監(jiān)測記錄編號：R-S 0P -ZL66-1-01監(jiān)測狀態(tài)靜態(tài)監(jiān)測日期年月日監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)D 級：0.5 阿 3520000/m 3;藥 ym29000 /m 3報(bào)告日期年月日監(jiān)測依據(jù)GB/T16292-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮

15、粒子的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)房間名稱平均值房間名稱平均值0.5 m5 pm0.5 pm5 pm男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產(chǎn)氣劑前室2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干室備料室*男二更潔具間*女二更物料氣閘室*緩沖間內(nèi)包材室*潔凈走廊潔凈走廊*中控室暫存室*模具室顆粒填充室*暫存室產(chǎn)氣劑前室1*物料緩沖間模具室*器具存放室預(yù)留間*器具清洗室配料室*潔具間器具存放室*噴干室器具清洗室*內(nèi)包裝室機(jī)械間取樣緩沖間取樣間備注：帶為一樓潔凈區(qū)監(jiān)測人:復(fù)核人:附件3微生物潔凈實(shí)驗(yàn)室懸浮粒子監(jiān)測記錄編號：R-S 0P-ZL66-1-02監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)A 級：0.5 pm 3520/m 3;>5 阿20/ m 3監(jiān)測

16、狀態(tài)靜態(tài)C 級：>0.5 阿 352000/m 3 ;>5 阿2900/ m 3監(jiān)測依據(jù)GB/T16292-2010 醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)年區(qū)域名稱平均值年區(qū)域名稱平均值月日0.5 pm5 pm月日0.5 pm5 pm附件4潔凈區(qū)沉降菌監(jiān)測記錄編號：R-S 0P -ZL66-1-03監(jiān)測狀態(tài)動態(tài)監(jiān)測日期年月日監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)D 級：V 100cfu/4 小時(shí)，©90mm 平皿報(bào)告日期年月日監(jiān)測依據(jù)GB/T16294-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)區(qū)域名稱菌落數(shù)平均菌落數(shù)區(qū)域名稱菌落數(shù)平均菌落數(shù)1#采樣點(diǎn)（累計(jì)）2#采樣點(diǎn)（累計(jì)）1#采樣點(diǎn)（

17、累計(jì)）2#采樣點(diǎn)（累計(jì)）男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產(chǎn)氣劑前室2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干室備料室*男二更潔具間*女二更物料氣閘室*緩沖間內(nèi)包材室*潔凈走廊潔凈走廊*中控室暫存室*模具室顆粒填充室*暫存室產(chǎn)氣劑前室1*物料緩沖間模具室*器具存放室預(yù)留間*器具清洗室配料室*潔具間器具存放室*噴干室器具清洗室*內(nèi)包裝室機(jī)械間取樣緩沖間取樣間備注：帶為一樓潔凈區(qū)監(jiān)測人:復(fù)核人:附件7沉降菌、溫濕度、壓差監(jiān)測記錄微生物實(shí)驗(yàn)室口陽性菌對照室口編號：R-S 0P-ZL66-1-04年二更c(diǎn)fu/ 皿操作間cfu/ 皿操作臺cfu/ 皿相對濕度%溫度C壓差Pa備注月日121212監(jiān)測人:復(fù)核人:潔凈區(qū)

18、浮游菌監(jiān)測記錄編號：R-S 0P -ZL66-1-05監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)D 級：w200cfu/m 3監(jiān)測日期年月日監(jiān)測狀態(tài)動態(tài)報(bào)告日期年月日米樣點(diǎn)2個(gè)（面積W 100m 2）采樣量200L/ 次監(jiān)測依據(jù)GB/T16293-2010醫(yī)藥潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法監(jiān)測數(shù)據(jù)區(qū)域名稱菌落數(shù)cfu菌落數(shù)cfu/m 3區(qū)域名稱菌落數(shù)cfu菌落數(shù)cfu/m 31#采樣點(diǎn)2#采樣點(diǎn)1#采樣點(diǎn)2#采樣點(diǎn)1#采樣點(diǎn)2#采樣點(diǎn)1#采樣點(diǎn)2#采樣點(diǎn)男二更中控室女二更粉篩室緩沖間產(chǎn)氣劑前室2洗衣整衣間配漿室稱量室制粒烘干至備料室*男二更潔具間*女二更物料氣閘室*緩沖間內(nèi)包材室*潔凈走廊潔凈走廊*中控室暫存室*模具室顆粒填充室*暫存室產(chǎn)氣劑前室1*物料緩沖間模具室*器具存放室預(yù)留間*器具清洗室配料室*潔具間器具存放室.*噴干室器具清洗