《分子生物學(xué)》真核、原核生物-基因組-轉(zhuǎn)座子-DNA復(fù)制-轉(zhuǎn)錄-翻譯-轉(zhuǎn)錄后加工-基因調(diào)控表達(dá)-等比較_第1頁
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文檔簡介

1、比較點(diǎn)原核生物真核生物基因組大小重復(fù)量編碼區(qū)連續(xù)斷裂重疊稀疏復(fù)制子操縱子復(fù)制終止(1)通常僅由一條雙鏈環(huán)狀 DNA組成,形成擬核(2)結(jié)構(gòu)基因通常為單拷貝(除rRNA基因)(3)基因不編碼區(qū)域較真核少(4)基因一般是連續(xù)的,無內(nèi)含子(5)病毒基因組有基因重疊現(xiàn)象(6)具有單個復(fù)制起點(diǎn),為單復(fù)制子(7)具有操縱子(8)有復(fù)制終止區(qū)(環(huán)形 2個終止區(qū))(1)基因組龐大,DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成染色質(zhì)(2)有人里重受序列(3)非編碼區(qū)域遠(yuǎn)多于編碼區(qū)(4)真核基因是斷裂基因,有內(nèi)含子(5)基因在基因組上的分布比原核稀疏(6)具有多個復(fù)制起點(diǎn),每個復(fù)制子長度較小(7)無操縱子,有基因家族和基因簇(8)無復(fù)制

2、終止區(qū)轉(zhuǎn)座子(1)插入序列IS【非復(fù)制型】1) 最簡單,不含宿主基因2) 末端有倒置重復(fù)序列3) 僅一個開放讀碼框4) 轉(zhuǎn)座時,宿主形成一小段正向重復(fù)區(qū)(2)復(fù)合式轉(zhuǎn)座子(Tn+數(shù)字)1) 帶抗藥或其他宿主基因2) 兩側(cè)各一個IS序列(缺則不單獨(dú)移動)(3) TnA家族【復(fù)制型】1) 帶3個基因(2個轉(zhuǎn)座必須基因)2) 無IS序列,體積龐大3) 兩翼帶38bp倒置重復(fù)序列玉米斑點(diǎn):AC-DS系統(tǒng)AC檄活因子DS-S離因子果蠅P轉(zhuǎn)座子DNA復(fù)制半保留半不連續(xù)雙向復(fù)制【DNA聚合酶I、II、IIIIII是真正的DNA復(fù)制所需的酶全酶:10種/、同業(yè)基核心酶(2個):分別負(fù)責(zé)前導(dǎo)鏈、后隨鏈a ( 5

3、-3聚合)、e ( 3-5外切)、0亞基【DNA聚合酶3 丫 “Se數(shù)量多、種類多(對應(yīng)多起點(diǎn)復(fù)制)a -引發(fā)酶活性B -DNA修復(fù)S -真核細(xì)胞主要DNA聚合酶復(fù)制原點(diǎn)DNA解旋多種蛋白參與需模版、引物dNTP底物方向5-3DNA聚合酶催化【聚合酶共同點(diǎn)】底物、Mg激活、模版、引物、方向滑動夾子:丫 -線粒體DNA主要酶【DNA復(fù)制起始】:前導(dǎo)鏈、后隨鏈同時合成。2個核心酶,一個負(fù)責(zé)前導(dǎo)鏈,一個負(fù)責(zé)后隨鏈【岡崎片段連接】【DNA復(fù)制終止】環(huán)形2個終止區(qū),每個終止區(qū)對一個方向復(fù)制叉有用。問題:環(huán)狀基因組,子代 DNA仍連接在一起無復(fù)制終止區(qū),遇到鄰近復(fù)制子的復(fù)制叉終止。問題:5'端將越

4、來越越短真核生物DNA復(fù)制的特殊性更復(fù)雜、S期、多復(fù)制子、復(fù)制子小復(fù)制慢、多復(fù)制子獨(dú)立活化、無終止區(qū)結(jié)構(gòu)。DNA模版NTP為底物不需引物方向5-3RNA聚合酶只什-種全酶:2 2 3 3 3 b核心酶:2 2 3 3 3°因子:負(fù)責(zé)啟動子的特異性識別【RNA聚合酶I II III線粒體葉綠體聚合酶 】I rRNAII mRNA前體(hnRNA)III tRNA啟動啟動子:三個聚合酶各有對應(yīng)的啟動子每個酶對應(yīng)的子轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)轉(zhuǎn)小因子也小同。轉(zhuǎn)錄-10區(qū)(DNA雙鏈熔解,形成開放復(fù)合物 )-10與-35間隔區(qū)RNA聚合酶II:核心啟動子【決定轉(zhuǎn)錄起始位置】:因子-35區(qū)(啟動子強(qiáng)弱的決定因

5、素)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)、TATA box (轉(zhuǎn)錄精確起始,TATAAT、DPE元件(不含 TATA的啟動子)上游啟動子元件【控制轉(zhuǎn)錄頻率】CAAT box ( GGCAATCT GC box (GGGCGGG轉(zhuǎn)錄【起始】三元起始復(fù)合物:DNA、RNA、RNA聚合酶機(jī)制【延伸】【終止】依賴p因子(過程),不依賴p因子(結(jié)構(gòu)特征:回文、莖富GG 6U)RNA轉(zhuǎn)rRNA5s 16S 23S錄后加mRNA馬上翻譯,常無加工。 5'無帽子,3'少有多聚Ao5帽子結(jié)構(gòu)(N7-甲基鳥甘酸殘基),3'加poly工壽命短,半衰期僅幾分鐘(A)尾,剪接去內(nèi)含子【GU-AG法則】。tRNA【斬頭】、

6、【去尾】:成3'-OH末端,缺CCA-3',需tRNA核酸轉(zhuǎn)移酶加【修飾】RNA編輯(轉(zhuǎn)錄后):校正作用、調(diào)控翻譯(可構(gòu)建或去除起始、終止密碼子)、擴(kuò)充遺傳信息翻譯起始很多 eIF-1 2 3 4A 4B 4F 細(xì)菌有二種翻譯起始因子:第一步是因子IF-1,結(jié)合A位,阻止氨酰-tRNA進(jìn)入氨基酸活I(lǐng)F-2,特異性結(jié)合起始tRNA,控制其進(jìn)入P位化。形成IF-3,與游離30S業(yè)基結(jié)合,組織大小業(yè)基結(jié)合成氨酰-tRNA無活性核糖體。3個作用。起始f Met-tRNAMet-tRNAt-RNA起始SD序列依靠掃描。密碼起始密碼AUG與fMet-tRNA配對eIF1和eIf1A促進(jìn)43

7、S復(fù)合體從帽子結(jié)構(gòu)處沿的選5 'UTR動,直到找到合適 AUG擇終止- 釋放 因子RF1:識另1J UAA和UAGRF2:識別 UAA 和 UGARF3:具GTP酶活,刺激 RF1、RF2協(xié)助釋放肽鏈一個eRF1識別三個終止密碼子真核跟原核不同之處:起始 tRNA,起始密碼子的選擇,真核有較多起始因子,真核5'帽子和3'尾巴都參與起始復(fù)合物的形成,真核ATP水解功能是結(jié)合 mRNA必需,真核小業(yè)基先跟氨酰-tRNA結(jié)合再結(jié)合mRNA(原核小業(yè)基先結(jié)合 30S核糖體,再結(jié)合mRNA)。蛋白質(zhì)降解依賴于ATP的蛋白酶泛素化修飾介導(dǎo)E1 E2 E3蛋白酶體基因表達(dá)調(diào)控DNA水

8、平基因重排調(diào)節(jié)(沙門氏菌鞭毛蛋白H2-rH1)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、基因打增、基因丟失、基因重排(免疫球蛋白多樣性 V、J、C;酵母交配型)DNA甲基化、組蛋白乙?;?、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)錄水平【操縱子】乳糖操縱子(Lac)【Lac I負(fù)調(diào)控、CAP正調(diào)控】, 色氨酸操縱子(trp )【trp R阻遏系統(tǒng)、衰減系統(tǒng)】, 阿拉伯糖操縱子(ara C具正負(fù)調(diào)節(jié)蛋白兩種構(gòu) 象)【順式作用元件】啟動子、增強(qiáng)子、絕緣子、沉默子【反式作用因子】RNA加工可艾男接、RNA編輯翻譯水平RF2合成自體調(diào)控(延伸)嚴(yán)謹(jǐn)反應(yīng)(終止)影響因素:內(nèi)在mRNA二級結(jié)構(gòu)修飾(加帽加尾)、信息體組成、dsRNA3、遺傳密碼的特征三聯(lián)體、通用

9、性、簡并性、擺動性、偏好性、連續(xù)性、不重疊性、起始、終止密碼子。(1)遺傳密碼是三聯(lián)體密碼。一個密碼子由mRNA上三個相鄰堿基組成。(2)連續(xù)性,密碼子之間是連續(xù)的,中間沒有停頓。如果插入或確實(shí)一個就會發(fā)生錯誤。(3)不重疊性,相鄰密碼子之間不共用核甘酸(4)通用性,不同生物共用一套密碼子(5)簡并性,多個密碼子編碼一個氨基酸的情況(6)擺動性:密碼子與反密碼子配對時,前兩個嚴(yán)格遵守堿基互補(bǔ)配對原則,第三對有一定自由度,可以擺 動”( 7)偏好性:不同生物對同義密碼子有一定的偏好。(8)密碼子有起始密碼子(AUG、少GUG)和終止密碼子(UAG、UGA、UAA)。4、染色體具備哪些作為遺傳物質(zhì)

10、的特征5、什么是核小體,簡述其形成過程6、簡述DNA的一、二、三級結(jié)構(gòu)7、什么是轉(zhuǎn)座子可分為哪些種類。8、請說說插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間的異同。2 蛋白質(zhì)合成后的加工修飾有哪些內(nèi)容( 6 分)(1) N 端 fMet 或 Met 的切除。(2) 二硫鍵的形成。(3) 特定氨基酸的修飾,包括磷酸化,糖基化,甲基化,乙基化,羥基化,羧基化等。(4) 切除新生肽鏈中的非功能片段。4、請簡述乳糖操縱子的控制模型的主要內(nèi)容。( 10 分)Z、Y、A基因的產(chǎn)物由同一條多順反子的mRNA分子所編碼。 這個mRNA分子的啟動子緊接著 。區(qū),而位于I與。之間的啟動子區(qū)(P),不能單獨(dú)起動合成3 -半 乳糖苷酶

11、和透過酶的生理過程。 操縱基因是DNA上的一小段序列(僅為 26bp),是阻遏物的結(jié)合位點(diǎn)。當(dāng)阻遏物與操縱基因結(jié)合時,lac mRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。誘導(dǎo)物通過與阻遏物結(jié)合,改變它的三維構(gòu)象, 使之不能與操縱基因結(jié)合,從而激發(fā)lac mRNA的合成。當(dāng)有誘導(dǎo)物存在時,操縱基因區(qū)沒有被阻遏物占據(jù),所以啟動子能夠順利起始mRNA的合成。試說明真核細(xì)胞與原核細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)錄,翻譯及DNA的空間結(jié)構(gòu)方面存在的主要差異,表現(xiàn)在哪些方面在真核細(xì)胞中,一條成熟的mRNA鏈只能翻譯出一條多肽鏈,很少存在原核生物中常見的多基因操縱子形式。真核細(xì)胞DNA與組蛋白和大量非組蛋白相結(jié)合,只有一小部分DNA是裸露的。 高等真核細(xì)胞DNA中很大部分是不轉(zhuǎn)錄的,大部分真核細(xì)胞的基因中間還存在不被翻譯的內(nèi)含子。真核生物能夠有序地根據(jù)生長發(fā)育階段的需要進(jìn)行DNA片段重排,還能在需要時增加細(xì)胞內(nèi)某些基因的拷貝數(shù)。 在真核生物中,基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)區(qū)相對較大,它們可能遠(yuǎn)離啟動子達(dá)幾百個甚至上千個堿基對,這些調(diào)節(jié)區(qū)一般通過改變整個所控制基因 5'上游區(qū)DN

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