短期內(nèi)農(nóng)作物和土壤微生物對(duì)無機(jī)氮肥的爭(zhēng)奪利用

1、短期內(nèi)農(nóng)作物和土壤微生物對(duì)無機(jī)氮肥的爭(zhēng)奪利用摘要:在含有大量的無機(jī)氮肥(主要以銨、硝酸鹽或復(fù)合物形式存在)的農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中, 預(yù)計(jì)NH4+和NO3-具不同的土壤氮轉(zhuǎn)化率和效果。運(yùn)用15N示蹤技術(shù)研究作物和土壤微生物如何在短時(shí)間內(nèi)(幾小時(shí)到幾天)吸收和競(jìng)爭(zhēng)氮肥變化的能力。兩塊試驗(yàn)田(施用NH4+、NO3-或NH4NO3)單一種植大麥(Hordeum vulgare L. cv. Morex)。且在每種肥料中分別添加15N示蹤處理過的15NH4+和15NO3_。施肥8天后,通過對(duì)15N肥進(jìn)入植物、微生物和無機(jī)土壤氮池以及總氮轉(zhuǎn)化速率的變化進(jìn)行研究。施肥一星期后, 作物中檢測(cè)到有45 - 80%的15N

2、,土壤微生物中只有1 - 10%,這說明植物對(duì)氮肥吸收具較強(qiáng)能力。就對(duì)氮素吸收能力看, 在提供土壤氮和肥料氮兩種形式時(shí),前4h時(shí)土壤微生物比作物強(qiáng)。一天內(nèi)微生物氮素吸收大幅減少,可能是由于受到碳素限制。就兩塊試驗(yàn)田而言,作物和土壤微生物吸收的NO3+比NH4+多。并且對(duì)NH4+的吸收和硝態(tài)氮的同化沒有抑制作用,可能由于快速硝化率引起銨源的快速消耗所致。與微生物的NH4+吸收速率和毛硝化率相比，作物的均為前者的3 - 75倍高,表明在兩試驗(yàn)田中,硝酸鹽是導(dǎo)致兩者競(jìng)爭(zhēng)的最重要因素。由于土壤微生物對(duì)NH4+與NO3+快速轉(zhuǎn)化和NO3+的優(yōu)先利用,表明在較高無機(jī)氮肥的農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中,土壤微生物群落能適應(yīng)高

3、濃度的NO3+和加強(qiáng)對(duì)NO3+的利用從而為其生存提供氮源。1.簡(jiǎn)介在中歐，集約型農(nóng)業(yè)的生產(chǎn)很大程度取決于所施用的氮肥,其主要形式為NH4+或NO3-或二者的化合物。據(jù)估算，全球每年大約只有50%的肥料N被作物吸收,約2 - 5%的存留在土壤中，約25%的排放到大氣中和約20%的排放到水體系統(tǒng)中(Galloway et al., 2004)。過去十多年里,大量的研究集中于如何提高肥料利用率和谷物糧食的生產(chǎn)及減少氮肥對(duì)環(huán)境的負(fù)面影響(Tilman et al., 2002; Mosier et al., 2004)。其他的研究集中于在一個(gè)或多個(gè)生長(zhǎng)周期后N的去向,或預(yù)測(cè)作物氮的有效性(Jackso

4、n et al., 2008)。植物有效氮是土壤中可溶性的無機(jī)(NO3+、NH4-、NO2-)和有機(jī)氮。在從未施過肥的耕地土壤中可溶性有機(jī)氮和礦物N一樣多，并參與礦化作用和固化作用(Murphy et al., 2000)。然而可溶性有機(jī)氮，特別是游離氨基酸,在一些生態(tài)系統(tǒng)中較有利于植物營(yíng)養(yǎng)(Näsholm et al., 2009),無機(jī)氮肥含量高的農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中定量性似乎并不重要,(Xu et al., 2008)。這表明在農(nóng)業(yè)土壤中，植物N主要受到礦物氮肥施用的影響。不僅所施用氮肥的量,同時(shí)N的形式(如 NH4+、NO3-和NH4NO3)也影響植物和微生物的氮代謝. 在許多耕作土壤

5、中，研究發(fā)現(xiàn)植物和微生物對(duì)NH4+的同化超過對(duì)NO3-的同化(e.g. Azamet al., 1993),這與生物NO3-同化所需的高能有關(guān)(Gutschick, 1981; Smirnoff and Stewart, 1985; Puri and Ashman, 1999)。此外,研究結(jié)果也表明,NH4+的存在抑制真菌(Wang et al., 2007)和植物（Gessler et al., 1998; Gazzarrini et al., 1999; Siddiqi et al., 2002）對(duì)NO3-的吸收,卻促進(jìn)植物對(duì)NH4+的吸收。然而,相較于這些分子生物學(xué)的研究,其它利用土壤的

6、研究表明在這種環(huán)境下,土壤微生物和植物對(duì)NH4+的利用較低或與NO3-的利用相類似(Burger and Jackson, 2003; Song et al., 2007),可能與NH4+相比，NO3-在土壤中具較強(qiáng)的流動(dòng)性(Hodge et al., 2000)。 導(dǎo)致這些無機(jī)氮同化差異的一個(gè)因素，可能與微生物活動(dòng)和施肥引起的農(nóng)業(yè)土壤無機(jī)氮池動(dòng)態(tài)變化有關(guān)(e.g. Jackson et al.,1989)。雖然這些動(dòng)力學(xué)已經(jīng)建立,但對(duì)其機(jī)制及微生物N轉(zhuǎn)換過程中NH4+與NO3-的不同比例的短期效應(yīng)(幾小時(shí)到幾天)卻了解甚少。由于此過程中可能導(dǎo)致土壤中的N損失(例如由硝化和反硝化作用引起的氣態(tài)

7、N的排放),甚至微生物短期內(nèi)活動(dòng)性的增強(qiáng)也可以對(duì)肥料利用率和作物會(huì)帶來負(fù)面影響。 除無機(jī)氮的可利用性外，與土壤微生物競(jìng)爭(zhēng)是影響植物從土壤中吸收氮能力的重要因素之一(Kaye and Hart, 1997)。在數(shù)個(gè)短期(可達(dá)數(shù)天)15N示蹤調(diào)查草原生態(tài)系統(tǒng)的研究中,微生物同化標(biāo)記15N的無機(jī)氮的量要比植物多,但一開始快速吸收氮，微生物生物量會(huì)達(dá)到一個(gè)穩(wěn)定狀態(tài),可能由于C源不足以維持其快速增長(zhǎng)(Hodge et al.,2000;Harrison et al.,2008)。 同樣的研究表明,隨后的時(shí)期，由于微生物的衰退和再礦化作用，微生物15N逐漸釋放到土壤中,最終被植物根系吸收。長(zhǎng)時(shí)間后(數(shù)周到

8、數(shù)月)，植物添加的15N比例增加,表明植物確實(shí)利用了此N源(Harrison et al., 2007)。植物的繁殖周期比微生物慢得多,這使的植物爭(zhēng)奪同樣的N源所需時(shí)間更長(zhǎng)。 在高施氮生態(tài)系統(tǒng)（如農(nóng)耕土壤中）,研究表明競(jìng)爭(zhēng)可能并不嚴(yán)重(Schimel and Bennett,2004),植物與微生物只競(jìng)爭(zhēng)有效氮，尤其是NH4+和NO3-。然而除了植物和土壤微生物之間的競(jìng)爭(zhēng),在不同群體的土壤微生物之間對(duì)肥料N的競(jìng)爭(zhēng)最為重要。Burger 和Jackson(2003)發(fā)現(xiàn),由于施肥后高濃度的可利用無機(jī)氮,植物和異養(yǎng)細(xì)菌之間對(duì)NH4+的競(jìng)爭(zhēng)明顯降低且銨的去向以硝化作用為主。隨著時(shí)間變化,肥沃的農(nóng)田中

9、N的儲(chǔ)存形式以NO3-為主，植物所需的N也以NO3-為主(Schimel and Bennett, 2004)。但是,植物、自養(yǎng)微生物和異養(yǎng)微生物之間競(jìng)爭(zhēng)吸收肥料N在哪個(gè)階段受所施氮肥的形式和數(shù)量的影響尚不清楚。 本研究的主要目的是評(píng)定: (1)所施用的無機(jī)氮形態(tài)影響作物與土壤微生物之間競(jìng)爭(zhēng)肥料N的階段。 (2)基于基因拷貝數(shù)的差異，施用的不同氮對(duì)細(xì)菌和真菌數(shù)量的影響。 (3)植物和土壤微生物吸收NH4+或NO3-的差異,以及不同形態(tài)氮素吸收之間的抑制作用。 (4)氮肥的誘致性介導(dǎo)微生物的氮轉(zhuǎn)化率變化，從而控制不同土壤間N的分配,以及環(huán)境中肥料N的流失。2. 材料和方法2.1 土壤取樣和實(shí)驗(yàn)裝

10、置 2006年4月, 從維也納鄰近的Purkersdorf和Niederschleinz兩個(gè)地點(diǎn)取樣。 從兩個(gè)地點(diǎn)土壤分布廣泛且經(jīng)常用于大麥種植在這個(gè)地區(qū)。一個(gè)詳細(xì)的總結(jié)和土壤性質(zhì)網(wǎng)站特征表1規(guī)定的數(shù)值。土壤樣品(每個(gè) 25公斤)標(biāo)本從0到20厘米深度從兩個(gè)地點(diǎn),立即儲(chǔ)存在4到進(jìn)一步分析。在開始前的實(shí)驗(yàn)均質(zhì)土壤及已篩(< 2毫米)。試驗(yàn)利用近年來發(fā)展起來的一種描述微觀系統(tǒng)(Inselsbacher王汝成等,2009)。簡(jiǎn)而言之,剩余microcosms由50毫升聚丙烯離心管的補(bǔ)充以上兩個(gè)不銹鋼藍(lán)寶石圓錐形基地。8成圓錐形孔鉆基地,從而保證充足的曝氣的土壤。Aliquots石的均質(zhì)土壤fi

11、eld-moist意義(1分鐘,187克一揮出轉(zhuǎn)子在試管達(dá)成最后30毫升的體積。microcosms一直在受控條件下在一個(gè)氣候室以一個(gè)15小時(shí)/ 9小時(shí)晝夜循環(huán)在21/18 C溫度和55%相對(duì)的空氣水分。提供輔助照明由8個(gè)400 W盞日光燈。在pre-equilibration 14 d的土壤水分含量(WC)兩種土壤gravimetrically調(diào)整到62%孔隙空間滿了水(WFPS)。詳細(xì)的土壤Purkersdorf 28.8克DW進(jìn)行調(diào)整到23.6% WC(%干重),及25.8克DWof土壤Niederschleinz到19.2% 大麥種子在濕潤(rùn)濾紙上發(fā)芽2天后,然后下種,期間一天要進(jìn)行兩次

12、通過重量分析來調(diào)節(jié)土壤水分含量。2.2. 施肥和15N追蹤進(jìn)行了三個(gè)實(shí)驗(yàn)使用相同的協(xié)議:三個(gè)不同的來源的解決方案,或是6.25毫米K2HPO4 12.5毫米,NH4NO3 25毫米NH4Cl或25毫米,混合并用于硝酸鉀受精。3 d在播種前1.6毫升應(yīng)用這些混合物的每個(gè)小種植后5 d - 1.2毫升,導(dǎo)致總氮、1毫克0.55毫克磷、鉀在1.4毫克,所有的治療方式。肥料應(yīng)用到早晨,2小時(shí)后開始的光期。確定利率和固定化微生物總量由15 N加入K15NO3 15 NH4Cl分別在每個(gè)肥料和治療。15 N總金額22.05毫克每碗是15 NH4-N或15 NO3-N在NH4NO3肥料處理,44.1毫克15

13、 NH4-N或15 NO3-N 8.8毫克的治療和8.8毫克NH4Cl 15 NH4-N或44.1毫克15 NO3-N硝酸鉀的治療。 均勻分布的應(yīng)用15 N是確保7-cm針插入一個(gè)side-hole的底部的土壤濾芯,慢慢地注入4個(gè)位置標(biāo)記的解決方案(400毫升每注)而撤回針(Portlet王汝成等,2007)。這項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)被證明,保證均勻15 N標(biāo)簽在microcosms滿足15 N跟蹤研究假設(shè)(Inselsbacher王汝成等,2009)。植物和土壤的樣本4 h,被1、2、3、6、8 d第二次施肥的事件。2.3。 化學(xué)分析在每一個(gè)收獲并為每個(gè)肥料和15 N處理5 microcosms和采樣中

14、隨機(jī)挑選的。植物分為枝及根并簡(jiǎn)要。然后用蒸餾水漂洗水。植物材料是烤箱干(70 C 48小時(shí)),體重。每一個(gè)微觀的土壤混合、均質(zhì)當(dāng)進(jìn)一步分析。一個(gè)aliquot(4 g)土壤就干入預(yù)熱70 C / f,重來確定土壤水分。干燥的土壤和植物是地面在球磨機(jī)(Retsch MM2000)和15 N總氮同位素比值分析質(zhì)譜(IRMS)使用一個(gè)元素分析儀(EA 1110、CE樂器)連接到一個(gè)連續(xù)flow-mode氣相同位素比值質(zhì)譜儀(DELTAPLUS,斐尼甘墊)。另一個(gè)aliquot(2 g)中提取的均質(zhì)土壤15毫升CaSO4(10毫米),隨后陰離子反相高效液相色譜法測(cè)定離子色譜(DX 500年,Dione

15、x,維也納,奧地利)和電導(dǎo)率檢測(cè)。在一個(gè)三分離陰離子交換柱(AS11,250年4 mmi.d.,維也納,奧地利,Dionex)經(jīng)過化學(xué)壓制(ASRS-Ultra,Dionex)和線性氫氧化鈉采用梯度洗脫(0.5 e37.5mM在10分鐘內(nèi)流量min1 2毫升,柱溫35 C)。從aliquots NH4提取(6 g)的均質(zhì)土壤除45毫升(1米)和由indophenol反應(yīng)改性方法(Kandeler、Gerber、1988)。微生物量碳、氮在土壤中分析了氯仿熏蒸萃取技術(shù),描述阿馬托賴德(1988年)和計(jì)算氮濃度的差異之間非熏煙熏和泥土樣本。簡(jiǎn)單地說,aliquots的新土(6克)進(jìn)行氯仿(etha

16、nol-free)在24小時(shí)22度。 兩個(gè),煙熏和非熏蒸土壤樣品提取K2SO4 45毫升(0.5美元)前60分鐘的過濾?？?cè)芙釴和C的提取,確定了除一個(gè)自動(dòng)C分析儀(島津萬能試驗(yàn)機(jī),TOC-VCPH、日本)和總氮的測(cè)量單位,日本島津萬能試驗(yàn)機(jī),TNM-1)。一個(gè)轉(zhuǎn)換因子對(duì)微生物量碳、氮(肯)0.45應(yīng)用考慮不完全萃取(Jenkinson王汝成等,2004)。2.4。 重大轉(zhuǎn)型和15 N吸收速率 總氮礦化、毛重硝化率和總NH4固定,以及總NH4和NO3消耗速率方程計(jì)算使用15 N池稀釋測(cè)定開發(fā)和巴肯尼思(1954)作為改性和Tietema由Wessel(1992)和Bengtson吳昱。(200

17、6)。土壤樣品被4 h和24小時(shí)后應(yīng)用、同質(zhì)性aliquots標(biāo)簽(6 g)提取土壤除45毫升(1米)1小時(shí)。所有被限制在20 C精華直到有進(jìn)一步的分析。extractswas 15 N isolatedfor NH4 fromtheKCl修改microdiffusion分析技術(shù)(索倫森和詹森,1991)。 簡(jiǎn)而言之,剩余精華除被轉(zhuǎn)移到玻璃瓶(50毫升)和NH4轉(zhuǎn)為氨水的添加ofw200毫克氧化鎂。陷阱捕捉到了酸氨(含有玻璃纖維濾盤10毫升硫酸氫鉀為2.5米,局限于聚四氟乙烯磁帶)在5 d一罐培養(yǎng)在37 c酸陷阱被移走而干燥的3 d在濃硫酸在干燥機(jī)。干過濾盤被剔除出了聚四氟乙烯密封和折疊成為后

18、續(xù)分析錫膠囊15 N IRMS內(nèi)容使用。土壤微生物生物量15 N確定在K2SO4轉(zhuǎn)換總氮和熏non-fumigated提取物的土壤NO3被堿性過硫酸鹽消化(多伊爾王汝成等,2004)。15 N豐度在消化后NO3過硫酸鹽以及除NO3在反相高效液相色譜法測(cè)定提取物SPINMAS系統(tǒng)(離奇王汝成等,2007)。簡(jiǎn)單地說,硝酸鹽在水SpinMas標(biāo)本減少系統(tǒng)(樣品制備無機(jī)氮用質(zhì)譜)沒有與V(3)Cl3解決方案(默克,達(dá)姆施塔特,德國)在酸性介質(zhì)(鹽酸、Merck、達(dá)姆施塔特,德國()。無氣producedwas傳遞載體流的永久他通過公開瓶分裂入口毛細(xì)管的四極質(zhì)譜(400年,在制品映射工具GmbH是一家

19、德國不來梅)。對(duì)一氧化氮的離子電流I在m / z 30日和31日計(jì)算測(cè)定15 N豐富的NO3。 dissimilatory硝酸鹽還原率為銨離子(DNRA)在第一個(gè)24小時(shí)計(jì)算公式是土壤源自15 NO3根據(jù)收到的銀吳昱。(2001)。 簡(jiǎn)單地說,DNRA被確定為不同的原子之間的15銨采樣% 4 h和24小時(shí)后,乘以標(biāo)簽應(yīng)用平均NH4池大小和糾正,在這段期間,平均停留時(shí)間在池中NH4間隔。這是然后除以平均15 NO3原子%在幕間休息時(shí)占同位素的源池。意味著住宅的15倍除以估計(jì)了NH4池初始NH4池,根據(jù)率數(shù)據(jù)NH4消費(fèi)總量增加15 NH4(銀王汝成等,2001)。意味著住宅的15倍計(jì)算了NO3池同

20、樣通過把初始NO3池決定總NO3消費(fèi)。 氮是植物和微生物生物量的增加估計(jì)為15 N回收的生物量在最初的4小時(shí),24小時(shí),再除以平均原子% 15 N現(xiàn)有NH4和NO3水池在這些時(shí)間間隔。15 N回收植物和微生物都以及NH4和NO3水池進(jìn)行了計(jì)算為:3.結(jié)果3.1. 作物和微生物生物量及微生物群落組成8天內(nèi),在兩塊施過肥的試驗(yàn)田里,作物生物量顯著增加(圖1)。然而在施用氮肥后的前兩天,在不同氮素形態(tài)和土壤類型方面,作物生物量沒顯著的差異(單因子變異數(shù)分析,P > 0.05)。3天后,在兩塊試驗(yàn)田中施用NH4Cl作為氮源的作物的生物量都明顯低于施用NH4NO3和KNO3。這一差別逐漸增大,直到

21、實(shí)驗(yàn)后期,在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),在兩塊試驗(yàn)田中施用KNO3的植物生物量明顯比NH4NO3和NH4Cl的高 (單因子變異數(shù)分析,P < 0.05)。此外,對(duì)結(jié)果進(jìn)行方差分析(表2)表明,在兩塊試驗(yàn)田中都以NH4+為單一氮源時(shí),作物生物量累積開始的較晚。使用此方法處理后,在Niederschleinz試驗(yàn)田中植物生物量明顯累積明顯變快(圖1)。不像植物生物量那樣, 影響微生物量氮最重要的因素是土壤類型(F=229.6,P < 0.0001),以及肥料的氮素形式(F=121.3,P<0.0001,表2),而不是收獲的時(shí)間(F=38.3,P<0.0001)。最初,Niederschle

22、inz試驗(yàn)田的微生物生物量氮要比Purkersdorf的高,在兩塊試驗(yàn)田中施用NH4Cl的生物量最高(圖1)。在接下來的8d微生物生物量變化顯著,在 Niederschleinz中變化更大(表2).兩塊試驗(yàn)田在施用氮肥后的前兩天 ,在施用NH4Cl和NH4NO3的微生物量氮下滑,而發(fā)現(xiàn)施用KNO3的并無明顯變化。與微生物量氮變化不同,兩塊試驗(yàn)田中細(xì)菌16S和真菌18S基因拷貝數(shù)極為相似,與觀察到的微生物N變量相比,其隨時(shí)間變化很小(圖2),但受不同形態(tài)氮素影響較大(表3)。在兩塊試驗(yàn)田中, 施用 NH4NO3后細(xì)菌16S和真菌18S基因拷貝數(shù)變化較大, 施用KNO3的最小(圖2)。然而, 在兩

23、塊試驗(yàn)田中,肥料的氮形式對(duì)細(xì)菌16S基因拷貝數(shù)的影響比真菌18S強(qiáng)(表3)。在兩塊試驗(yàn)田中,細(xì)菌16S基因拷貝數(shù)均高于真菌18S基因拷貝數(shù), 細(xì)菌16S與真菌18S基因拷貝數(shù)比率具相同的基因距離(10 -20)。在Purkersdorf中,細(xì)菌銨單氧酶亞單位A(amoA) 的拷貝數(shù)較高,而Niederschleinz中真菌amoA的拷貝數(shù)較高(表3,圖3),這表明兩種土壤中不同的群落組成中NH3氧化劑的能力不同。細(xì)菌與真菌amoA的拷貝數(shù)比值通常大于1,說明真菌amoA 的豐富度比細(xì)菌的大(數(shù)據(jù)未顯示)。細(xì)菌與真菌amoA的豐富度隨時(shí)間變化而改變,且受所施肥料N形式的影響更大(表3),施用NH

24、4Cl的最大,KNO3的最小(圖3)。3.2. N轉(zhuǎn)化率 施肥24小時(shí)后,Niederschleinz比Purkersdorf的N轉(zhuǎn)化更活躍,氮的礦化、消耗和硝化率也較高,土壤中NH4+和NO3+的平均停滯時(shí)間較短(表4)。除NH4+的固定外,所有過程均明顯受不同形態(tài)氮肥的影響(表4)。在兩個(gè)土壤NH4+應(yīng)用消速率明顯增加,平均住宅銨的時(shí)代,NH4和令人驚奇的NO3。此外,在土壤Purkersdorf,但不是在土壤Niederschleinz、NO3消耗速率降低氨氮強(qiáng)烈相比,應(yīng)用NH4NO3和NO3。 施肥的影響小于NO3明顯,輕微的增加,雖然沒有消耗速率和NO3被顯著(P > 0.05

25、)。很明顯,在兩個(gè)土壤氮轉(zhuǎn)化的主要過程,硝化作用顯著高于總氮礦化所有的治療方式(表4)。硝化作用的重要性也反映在比例15 N回收率和NO3池在銨(圖4)。在所有的施肥處理氨氮的初始15示蹤快速下降,與此同時(shí)恢復(fù)NH4池在NO3池。disimilatory硝酸鹽還原利率的toammonium(DNRA),另一方面,不過< 3%的硝化率(表4),它再次被反映在15 N回收率,因?yàn)闆]有顯著上升15 N在NH4池在應(yīng)用15示NO3(圖4)。氣態(tài)損失從系統(tǒng)氮N2O由低,不到0.1%的總?cè)芙釴(數(shù)據(jù)未顯示)3.3 作物和微生物中15N的回收15 N回收比例、植物和微生物,都沒有顯著差別兩種土壤(圖5

26、,表5)。植物15 N含量在不斷增多,8 天授精(和15 N示蹤劑應(yīng)用)、總里程達(dá)到45 e80%回收應(yīng)用15 N開始。相反,15 N固定化微生物直接在最高(4小時(shí))后,達(dá)到了15 Napplication應(yīng)用15 N總量的30%,隨后下降到少于10%而實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)。當(dāng)15 N復(fù)蘇通常更高或類似細(xì)菌工廠相比,對(duì)二維受精后,三維大大超過15 N后來在所有治療和兩個(gè)植物土(圖5)。獨(dú)立的不同形態(tài)氮素化肥,15 N復(fù)蘇時(shí)植物明顯高于15 N示蹤劑加入銨相比,15三15。這種差異更明顯是在土壤Purkersdorf Niederschleinz比土壤。 沒有這樣的差異可以發(fā)現(xiàn)在微生物15 N康復(fù)。雖然有一種趨勢(shì)走向更大的15 N回收土壤微生物受到15 NH4在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間,這個(gè)差異不顯著,在任何情況下(四因子變異數(shù)分析、Tukey HSD事后比較的測(cè)試)。然而,形式的應(yīng)用有很大影響肥料氮15 N恢復(fù)的速度在植物與微生物(表5)。更明顯的15 N后來當(dāng)土壤植物或NH4NO3更明顯,而NH4Cl。15 N的恢復(fù)在微生物,另一方面,土壤中是最高的NH4Cl或更明顯。進(jìn)一步,有顯著差異,在植物15 N恢復(fù),這取決于土壤類型、肥料氮15 N示蹤形式和應(yīng)用。沒有這樣的依賴性,被發(fā)現(xiàn)為15 N