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1、生物學案擴充資料專題2 微生物的培養(yǎng)與應用課題專題一 微生物的實驗室培養(yǎng)一、微生物:原核生物界:例如細菌、藍藻 真菌界:例如酵母菌 原生生物界:例如草履蟲、變形蟲、衣藻 病毒:例如艾滋病病毒、SARS病毒二、細胞質:核糖體:蛋白質的合成場所。質粒:小型環(huán)狀DNA,含有抗藥性基因、固氮基因、抗生素生成基因。三、菌落的定義:是單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖,形成肉眼可見具有一定形態(tài)結構的子細胞群體。思考1、培養(yǎng)乳酸桿菌時需要添加什么特殊物質? 維生素培養(yǎng)霉菌時需要將培養(yǎng)基pH調節(jié)為什么條件? 酸性培養(yǎng)細菌時需要將pH調節(jié)為什么條件? 中性或微堿性四、生長因子定義:某些微生物正常生長代謝過程中

2、必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機小分子,如某些氨基酸、堿基、維生素等。(并不是所有微生物培養(yǎng)時都需要外源添加生長因子)五、獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵(目的)是:防止外來雜菌的入侵六、滅菌的方法:灼燒滅菌法:用于接種環(huán)、接種針、試管的滅菌。干熱滅菌法:用于玻璃器皿等耐熱器具的滅菌。高壓蒸汽滅菌法:用于培養(yǎng)基、無菌水等的滅菌。 七、平板冷凝后,為什么要將平板倒置? 答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。八、在作第二次及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?答:劃線后,線條

3、末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少,最終得到由單個細菌繁殖而來的菌落。九、比較平板劃線法與稀釋涂布平板法平板劃線法:定義:通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。如何進行無菌操作? 對接種環(huán)、瓶(皿)口及時進行灼燒滅菌; 迅速進行操作; 將劃線后的平板倒置。稀釋涂布平板法:定義:將菌液進行一系列的梯度稀釋后,分別涂布到固體培養(yǎng)基表面。稀釋度足夠高時,能培養(yǎng)出單個菌落。2 如何進行無菌操作?對涂布器、瓶(皿)口及時進行灼燒滅菌; 吸管頭不要接觸任何物體; 迅速進行操作。思考2、培養(yǎng)12h和

4、24h后,觀察到的實驗結果相同嗎?如果不同,請分析產生差異的原因。答:培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小不同(相同、不同);菌落分布位置相同(相同、不同)。原因是時間越長,菌落中細菌繁殖越多,菌落體積越大;菌落的位置不動,但菌落數(shù)增多。生物學案擴充資料專題2 微生物的培養(yǎng)與應用課題2 土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)一、常見的一些選擇培養(yǎng)基:加入青霉素的培養(yǎng)基,分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基,分離金黃色葡萄球菌不加碳源(有機物)的無碳培養(yǎng)基,分離自養(yǎng)型的微生物不加氮源的無氮培養(yǎng)基,分離自生固氮菌二、顯微鏡直接計數(shù)法:缺點:不能區(qū)分死菌與活菌;不適于對運動細菌的計數(shù);需要相對高的細菌濃

5、度;思考1、利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計菌落數(shù)目的關鍵是什么? 恰當?shù)南♂尡稊?shù)三、 設計對照實驗組應遵循:單一因素不同(自變量惟一); 其他因素(無關變量)相同且最適;觀察并記錄實驗結果(因變量)。思考2、如何設置對照實驗排除培養(yǎng)基被雜菌污染? 答:將未稀釋涂布的空白平板與進行了稀釋涂布的平板放在相同且適宜的條件下培養(yǎng),觀察是否有菌落生長。四、鑒別培養(yǎng)基實例:分解尿素的細菌使加入了酚紅的以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基變紅。五、鑒別培養(yǎng)基實例:大腸桿菌在伊紅美籃培養(yǎng)基上形成黑色菌落。生物學案擴充資料IV1、課題2是將土樣制成細菌稀釋液,直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇培養(yǎng)基上,分離得到菌落2、由于生物與

6、環(huán)境的相互依存關系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對提高。3、將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集(實際上是人工設置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境);一般應將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。4、(1)選擇培養(yǎng)基未加入凝固劑(瓊脂)是液體培養(yǎng)基;鑒別培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基。 (2)有選擇性;通過加入纖維素作為主要的碳源,選擇出能分解纖維素的微生物。(3)配制不含纖維素含其他碳源的培養(yǎng)基,用稀釋涂布平板法培養(yǎng)纖維素分解菌,觀察是否有菌落形成。5、方法一:缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜;優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用。方法二:缺點是由于纖維素、瓊脂和土豆汁中都含有淀粉類物質,可以使能夠產生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應;優(yōu)點是操作簡便,不存在菌落混雜問題。6、在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。選擇培養(yǎng)基:允許特定種類的微生物生長、同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)

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