中藥及其制劑的含量測定方法

1、中藥及其制劑的含量測定方法徐雋佳藥學0202 3021901009中藥及其制劑制劑產(chǎn)生的療效不是 某單一成分作用的結(jié)果，也不是某些成 分簡單作用的加和，是各成分之間的協(xié) 同作用。用一種成份衡量其質(zhì)量優(yōu)劣有 失偏頗，某單一成分的含量高低并不一 定與其臨床作用呈簡單的線性關(guān)系。目的確定某種成分的含量高低是否符合規(guī)定以判定藥物的優(yōu) 劣,確保臨床用藥的安全有效有重要的作用.特點只能對某一個或幾個成分進行測定受到對照品的限制測定藥味選擇君藥毒性藥貴重藥測 定成分 的選定原則：測定成分應(yīng)盡量與中醫(yī)'理論一致，與藥理作用和主治-有效成分（首選）I功能一致 丿毒性成分：保證中藥制劑的安全性有效成分不確

2、定的：可測定指標性成分測定浸出物測定總成分：總黃酮，總生物堿，總有機酸.樣品的預(yù)處理粉碎提取分離凈化常用定量方法-化學分析法：重量法、容量法分光光度法：可見-紫外分光光度法薄層掃描法(TLCS):薄層吸收掃描法, 薄層熒光掃描法高效液相色譜法氣相色譜法熒光分析法應(yīng)用：某些含量較高的成分、礦物藥制劑中的 無機成分優(yōu)點：儀器簡單，結(jié)果準確缺點：靈敏度低、專屬性不高重量法分類揮發(fā)法：有揮發(fā)性或能定量轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性物 質(zhì)的組分的含量萃取法：被測組分在互不相容的兩相中溶解 度不同（例）沉淀法：將被測組分定量轉(zhuǎn)化為難溶化合物昆明山海棠片的含量測定取本品60片一除去糖衣+青密稱定一研細一精密稱取適量 （約相當

3、于25片）一置200ml錐形瓶中一加適量硅藻土 一混勻一加乙醇70ml 加熱回流40minf放冷濾過一 濾渣再加乙醇加熱回流濾過一合并濾液一置水浴上蒸干一 殘渣加鹽酸溶液（1100） 30ml置水浴上攪拌使溶解一放 冷一濾過一殘渣再用鹽酸同法提取3次一合并濾液于分 液漏斗中一加氨試液使溶液成堿性一用乙醯振搖提取4次 一合并乙醯液一用水振搖洗滌2次一乙醯液用濾紙濾過 一濾液置已稱定重量的蒸發(fā)皿中-> 低溫水浴蒸去乙醯一 殘渣加少量乙醇蒸干一置100°C干燥至恒重一>稱定重量（不得少于1.0mg/片）f吸收系數(shù)法丿契壓專:鸚富 r單波長光度法對照品比較才、 日I標準曲線V、|

4、雙波長法 | A在030.7間（計算分光光度法系數(shù)倍率法I為宜 一丿樣品經(jīng)連續(xù)回流左金丸中小漿堿含量的測提取，柱色譜 凈化后，用吸 收系數(shù)法測定 照分光光度法，在345nm處測定吸收度按鹽酸小槃堿(C20H17NO4 HCI)的吸收度(E1%1cm)為728計算丿AID含量(mg/ml)二 W*100*L*100%(E1%1cm)r以薄層色譜法為基礎(chǔ)發(fā)展起來的薄層色譜組分原位分析方法 及薄層色譜的記錄方法用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜中吸收紫外光 或可見光的斑點，或經(jīng)激發(fā)后能發(fā)射出熒光的斑點進行掃描. 即固定波長，斑點移動，測定A-1或F-1曲線將掃描得到的圖譜及積分數(shù)據(jù)用于藥品的鑒

5、別、雜質(zhì)檢查或 含量測定雙波長薄層掃描儀常選擇斑點中化合物 的吸收峰波長作為測 定波長選擇化合物吸收的基線部 分（即化合物無吸收的部 分）作為參比波長用一定波長的光束對薄層板進 行掃描，記錄其吸光度隨展開 距離的變化，即得薄層掃描曲 線丿吸光度/KX1 校正前的標準曲線2 校正后的標準曲線根據(jù)散射參數(shù)SX的值將AKX曲 線校正后即可用于定量/ 2Z吸光度與物質(zhì)濃度服從'Kubelka-Munk 方程k為單位薄層厚度的吸光系數(shù)KX稱吸收參數(shù)（相當于斑點單在一定范圍內(nèi)， 峰面積與斑點中 的物質(zhì)的量（或 點樣量）成直線SX的值于薄層板固定相的性質(zhì)、粒度和分布有關(guān)7薄層熒光掃描法適用范圍本身具

6、有熒光或經(jīng)過適當處理后可產(chǎn)生熒光的物質(zhì)的測定光源用氤燈或汞燈，采用直線式掃描.專屬性強，靈敏度高靈敏度比吸收法高13個數(shù)量級，最低可測到1050pg樣品，但適用范圍較窄. 對于能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)，可直接采用熒光掃描法測定對于有紫外吸收，而不能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)，需采用熒光淬滅法測定.定量依據(jù)當溶液濃度很稀時(ECL<0.05),熒光物質(zhì)的熒光強度F與激發(fā) 光光強10及物質(zhì)濃度C之間存在如下關(guān)系F=2.3K'l0ECL=KC熒光效率有關(guān)為常數(shù)，E為吸收系數(shù)，厶為薄層厚度.F- 卑點熒光強度的積分值(色譜峰峰面積),組分濃度.即在點樣量很小時，斑點中組分的濃度與其熒光強度、成線性關(guān)系耳Ku

7、belka一Munk理論不適用于薄層熒光掃描，無需進行曲 線樁直.TLCS定量分析方法外標法內(nèi)標法定量依據(jù)C樣 =A樣C對照 A對照C - 人樣 c。樣_ AX U對照A對照外標法（外標一點法，外標兩點法）最常用 簡便，但點樣必須準確薄層板間差異較大，應(yīng)采用隨行標準法（即供試品與標準溶液或?qū)φ找航徊纥c在同一板上）-外標一點法 工作曲線通過原點，只需點一種濃度的標準品溶液， 與供試液同板展開，對比，測定組分含量.C組分的重量或濃度；A組分的峰面積比直線的斜率或比例常數(shù)外標二點法工作曲線不通過原點時，需用外標二點法定 量至少需點二種不同濃度的標準溶液（或一 種濃度兩種點樣量），才能決定一直線.A計

8、算 C=F1A+F2F2縱坐標的截距，其值由儀器自動算出.內(nèi)標法（內(nèi)標一點法，內(nèi)標二點法）''X定義：選一個純物質(zhì)作為內(nèi)標物，并準確稱取一定量內(nèi)標物加至供試液及標準液中，計算供試品溶液中某組分含量的定量方法.丿優(yōu)點：定量準確度與點樣量無關(guān).缺點：內(nèi)標物不易尋找,操作麻煩較少應(yīng)用個標物要>與被測組分及樣品中其他組分完全分離， 純度高丿高效液相色譜法中藥制劑多采用反相高效液相色譜法反相色譜法特點 流動相極性大于固定相極性的分配色譜法。常用固定相 非極性固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS或6）辛基鍵合硅膠（Cg）等 常用流動相 甲醇水或乙月青水。出峰先后 極性強的組分因K值較小先流出色譜柱，極 性小的組分后流出。流動相中有機溶劑的比例增加，極 性減小，洗脫力增強反相離子對色譜分離的樣品離子與離子對試劑的反離把離子對試劑加入極性流動相中,壬生成不荷電的中性離子對,從而增加了樣品離子在非極性固定相中的溶解度，使分離系數(shù)增加，改善分離效 色譜柱 Ci*或qB流動相 含310mmol/L離子對試劑的反相流動相被分離組分及離 子對試劑的疏水性越大，所需有機溶劑比例越高.離子對選擇 堿類分離 常用烷基磺酸（鹽）,如己烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷基磺酸鈉