產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶ESBLS革蘭陰性桿菌的耐藥性研究

1、產(chǎn)超廣譜-內(nèi)酰胺酶（ESBLS）革蘭陰性桿菌的耐藥性研究【關(guān)鍵詞】 耐藥性分析【摘要】 目的 了解臨床產(chǎn)超廣譜-內(nèi)酰胺酶（ESBLS）革蘭陰性桿菌的耐藥情況，以利于對ESBLS的監(jiān)測和治療。方法 用NCCLS推薦的初篩和確證試驗(yàn)對臨床分離的216株革蘭陰性桿菌進(jìn)行ESBLS鑒定，并用K-B法對檢出的ESBLS陽性菌株進(jìn)行9種抗生素的藥敏試驗(yàn)，作耐藥性分析;調(diào)查ESBLS陽性菌株產(chǎn)生的重點(diǎn)科室。結(jié)果 共檢出ESBLS陽性菌株82株，總檢出率38.0%;亞胺配能、頭孢西丁、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦的敏感率分別為99%、90%、86%、98%、86%。結(jié)論 亞胺配能、頭孢西丁、

2、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦是對ESBLS臨床治療有效的藥物;新生兒病房、血液科病房、腎病病房、外科ICU是ESBLS產(chǎn)生的重點(diǎn)科室。 關(guān)鍵詞 超廣譜-內(nèi)酰胺酶 革蘭陰性桿菌 耐藥性分析 隨著臨床頭孢菌素類超廣譜-內(nèi)酰胺酶類抗生素的廣泛使用，使得產(chǎn)超廣譜-內(nèi)酰胺酶（ESBLS）菌株檢出率逐年增多，給臨床抗生素的使用造成很大困難，為更好地控制產(chǎn)ESBLS菌株傳播，指導(dǎo)臨床用藥，我們對2002年1月2003年12月本院臨床標(biāo)本中分離的216株大腸埃希菌，克雷伯菌產(chǎn)ESBLS情況及耐藥性進(jìn)行了研究。1 材料與方法1.1 材料 1.1.1 實(shí)驗(yàn)菌株 實(shí)驗(yàn)所用菌株來自本院2002年1月2003年12月臨

3、床標(biāo)本中分離的標(biāo)本，其中大腸埃希菌125株，肺炎克雷伯菌70株，產(chǎn)酸克雷伯菌21株，質(zhì)控菌株為標(biāo)準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603。 1.1.2 藥敏紙片 頭孢他啶、頭孢噻肟、頭孢曲松、氨曲南、慶大霉素、環(huán)丙沙星、阿米卡星、亞胺配能、頭孢西丁、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦、氨芐西林/舒巴坦、復(fù)方新諾明（上海伊華公司）頭孢他啶/棒酸、頭孢噻肟/棒酸（英國Oxoid公司），M-H瓊脂干粉購自英國Oxoid公司，培養(yǎng)基由本室自配。 1.1.3 菌株鑒定 法國生物梅里埃API鑒定系統(tǒng)鑒定。1.2 方法 1.2.1 初篩試驗(yàn) 1 按NCCLS初篩標(biāo)準(zhǔn)，在紙片法

4、藥敏試驗(yàn)中，只要符合下列任何一項(xiàng)指標(biāo):頭孢他啶22mm，頭孢曲松25mm，頭孢噻肟27mm，氨曲南27mm，即為產(chǎn)ESBLS可疑菌株。 1.2.2 確診試驗(yàn) 1 按NCCLS紙片法確診試驗(yàn)，將初篩可疑菌株用頭孢他啶、頭孢他啶/棒酸及頭孢噻肟、頭孢噻肟/棒酸做紙片法藥敏試驗(yàn)，經(jīng)攝氏35度溫育1618h，觀察結(jié)果，含棒酸和不含棒酸的抗生素紙片間的抑菌直徑相差5mm，可證實(shí)產(chǎn)ESBLS。 1.2.3 藥敏試驗(yàn) 用紙片瓊脂擴(kuò)散法（K-B法）檢測確證陽性菌株對9種抗生素的藥敏情況。2 結(jié)果 2.1 初篩試驗(yàn) 篩選出可疑菌株128株，其中大腸埃希菌72株，肺炎克雷伯菌43株，產(chǎn)酸克雷伯菌13株，質(zhì)控結(jié)果為

5、:肺炎克雷伯菌ATCC700603，頭孢他啶15mm，頭孢曲松21mm，頭孢噻肟20mm，氨曲南16mm;大腸埃希菌ATCC25922，頭孢他啶30mm，頭孢曲松32mm，頭孢噻肟32mm，氨曲南31mm，質(zhì)控均在合格范圍內(nèi)。 2.2 確診實(shí)驗(yàn) 檢出產(chǎn)ESBLS菌株共82株，其中大腸埃希菌為42株，占待檢菌33.5%，占初篩陽性菌58.0%;肺炎克雷伯菌32株，占待檢菌的45.7%，占初篩陽性菌的74.4%;產(chǎn)酸克雷伯菌8株，占待檢菌的38.1%，占初篩陽性菌的61.5%。 2.3 9種抗生素對82株產(chǎn)ESBLS菌的耐藥性分析 見表1。表1 9種抗生素對82株產(chǎn)ESBLS菌藥敏結(jié)果 （略） 2

6、.4 82株產(chǎn)ESBLS菌株的臨床科室分布 兒科（主要是新生兒病房）13株，血液科15株，腎病科16株，外科（主要是ICU）23株，內(nèi)科6株，婦產(chǎn)科2株，骨科3株，傳染科4株。3 討論我院產(chǎn)ESBLS革蘭陰性桿菌主要見于大腸埃希菌，肺炎克雷伯菌和產(chǎn)酸克雷伯菌，ESBLS的總檢出率為38.0%，上述三種菌的檢出率分別為33.5%、45.7%、38.1%，這比有的報(bào)道要高 2 ，又比有的報(bào)道低 3 ，其原因可能與統(tǒng)計(jì)的范圍大小、地區(qū)用藥差異及病種不同有關(guān)，但本院ESBLS的檢出率已經(jīng)較高，應(yīng)引起足夠重視，注意做好ESBLS的檢出工作，當(dāng)懷疑產(chǎn)ESBLS時(shí)，不管體外是否敏感，應(yīng)避免使用青霉素類、頭孢

7、類及氨曲南類抗生素 4 。根據(jù)NCCLS初篩標(biāo)準(zhǔn)得出的128株可疑菌株，經(jīng)確證陽性菌株為82株，后者占前者的64.1%，其中上述三種細(xì)菌的百分比分別為58%、74.4%、61.5%，可見ESBLS的檢出光靠初篩試驗(yàn)還不夠，還需試驗(yàn)證實(shí)，而且為提高檢出率，應(yīng)同時(shí)應(yīng)用兩對藥物 5 。 從結(jié)果（四）分析，本院產(chǎn)ESBLS的重點(diǎn)科室為兒科（主要是新生兒病房）、血液科、腎病科、外科ICU，這與上述科室病人較多使用三代頭孢菌素以及病人體質(zhì)較差，易誘導(dǎo)產(chǎn)生ESBLS菌株有關(guān) 6 。 9種抗生素對82株產(chǎn)ESBLS的藥敏結(jié)果顯示:亞胺配能、頭孢西丁、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低，尤

8、其是亞胺配能，耐藥率為1%是治療ESBLS的首選藥物，這與相關(guān)報(bào)道一致 7 。 哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦、阿莫西林/克拉維酸均為-內(nèi)酰胺/酶抑制劑類抗生素，前兩者藥物敏感率明顯大于后者，是因?yàn)檫呃髁趾皖^孢哌酮的抑菌能力大于阿莫西林，或者由于菌株大量產(chǎn)酶，藥敏紙片中的酶抑制劑不夠，所以適當(dāng)提高酶抑制劑的含量，可增強(qiáng)其抑菌活性。 參考文獻(xiàn) 1 National cornmittee for clinical Laboratory standards.Performance standards for antimicrobial testing ninth information supplement.NCCLS，1999，36. 2 馬越，李景云，張新妹.2002年臨床常見細(xì)菌耐藥性監(jiān)測.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2004，27:38-45. 3 項(xiàng)明潔，彭奕冰，劉明.肺炎克雷伯菌超廣譜-內(nèi)酰胺酶的耐藥性問題及檢測.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1999，22:316-317. 4 倪語星.質(zhì)粒介導(dǎo)的超廣譜-內(nèi)酰胺酶檢測.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，2004，22:23-25. 5 王輝，高屹，陳民均.簡介美國NCCLS藥敏試驗(yàn)法規(guī)（1999年1月版）的變動(dòng)部分.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜