決明子中蒽醌類成分的含量測(cè)定(1)

1、決明子中蒽醌類成分的含量測(cè)定(1)        作者：張小梅， 楊榮平， 勵(lì)娜， 王賓豪， 梁旭明【關(guān)鍵詞】 紫外分光光度法；,決明子；,蒽醌摘要：目的建立決明子中蒽醌類成分的含量測(cè)定方法。方法采用聚酰胺吸附純化樣品，醋酸鎂顯色，紫外分光光度法測(cè)定。結(jié)果在4.618.4 g/ml濃度范圍內(nèi)對(duì)照品1，8-二羥基蒽醌的吸收度與濃度線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r0.999 8。平均回收率為101.0，RSD2.48（n9）。結(jié)論該法快速，靈敏，重現(xiàn)性好，能準(zhǔn)確測(cè)定決明子中蒽醌類成分的含量。關(guān)鍵詞：紫外分光光度法； 決明子；

2、蒽醌Determination of the Content of Anthraquinones in Semen Cassiae by Ultraviolet SpectrophotometryAbstract：ObjectiveTo estabish a method for the determination of the content of anthraquinones in Semen Cassiae.MethodsSample was purified by polyamide,colored with magnesium acetate and it's content

3、 was determined by ultraviolet spectrophotometry.ResultsThe absorbency and concentration of 1，8-dihydroxy anthraquinone have good linearity in the range of 4.618.4 g/ml(r0.999 8). The average recovery was 101.0%.ConclusionThe method is sensitive,reliable,reproducible and can be applied to determine

4、anthraquinones in Semen Cassiae accurately.Key words：UV spectrophotometry; Semen Cassiae; Anthraquinones    決明子為豆科植物決明Cassia obtusifolia L.或小決明Cassia tora L.的干燥成熟種子。具有清肝明目、潤(rùn)腸通便之功效，為臨床常用中藥。其主要化學(xué)成分為蒽醌類化合物。本實(shí)驗(yàn)采用紫外分光光度法，首次采用聚酰胺樹脂對(duì)其進(jìn)行純化，以醋酸鎂乙醇溶液為顯色劑，對(duì)決明子中結(jié)合蒽醌、總蒽醌類化合物進(jìn)行了含量測(cè)定?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1

5、 儀器與材料UV-1601紫外-可見分光光度計(jì)（日本島津公司），AEG-45SM電子天平（十萬(wàn)分之一，日本島津公司），決明子（由本院生藥室提供并鑒定），1，8-二羥基蒽醌(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：0829 9702)，聚酰胺（無(wú)錫光明化工有限公司），所用試劑均為分析純重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司化學(xué)試劑廠。2 方法與結(jié)果2.1 對(duì)照品溶液的制備取1,8-二羥基蒽醌對(duì)照品適量，精密稱定，加乙醇制成每毫升中含0.23 mg的溶液，即得。 2.2 供試品溶液的制備2.2.1 總蒽醌供試品溶液的制備取本品粉末（過4號(hào)篩）約1 g，精密稱定。置索氏提取器中，加乙醇100 ml回流提取至無(wú)色。提取液

6、經(jīng)減壓回收后，殘?jiān)訚舛葹? mol/L鹽酸溶液40 ml回流水解3 h，然后用120 ml氯仿分4次回流萃取，30 ml/次。合并氯仿萃取液并加適量蒸餾水洗至中性，回收氯仿。殘?jiān)勇确氯芙獠⑥D(zhuǎn)移至25 ml量瓶中，加氯仿至刻度，搖勻，即得。2.2.2 結(jié)合蒽醌供試品溶液的制備取本品粉末（過4號(hào)篩）約1g，精密稱定。置索氏提取器中，加乙醇100 ml回流提取至無(wú)色，提取液經(jīng)減壓回收后殘?jiān)?20 ml氯仿分4次回流提取至無(wú)色，按上述總蒽醌供試品溶液的制備方法，自“殘?jiān)訚舛葹? mol/L鹽酸溶液40 ml回流水解3 h”起同法制備，即得。2.3 最大吸收波長(zhǎng)的測(cè)定精密吸取總蒽醌供試品溶液適量

7、，加1 g聚酰胺拌勻，蒸干，通過聚酰胺樹脂柱（內(nèi)徑1.5 cm，長(zhǎng)30 cm），以水30 ml洗脫，棄去水液，再用95%乙醇200 ml洗脫，收集洗脫液，蒸干。另取對(duì)照品溶液適量，水浴蒸干，殘?jiān)?.5MgAC-乙醇溶液1溶解并轉(zhuǎn)移至25 ml量瓶中，加0.5MgAC-乙醇溶液至刻度，搖勻，以相應(yīng)試劑作空白，照紫外-可見分光光度法2在400800 nm范圍進(jìn)行光譜掃描，考察其最大吸收波長(zhǎng)。結(jié)果顯示供試品溶液、對(duì)照品溶液在510 nm均有最大吸收，故確定510 nm為測(cè)定波長(zhǎng)。光譜掃描圖見圖12。圖1 對(duì)照品光譜掃描圖（略）    圖2 供試品光譜掃描圖（

8、略）2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取對(duì)照品溶液0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8ml，分別置10 ml量瓶中，水浴蒸干，殘?jiān)?.5MgAC-乙醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，以相應(yīng)試劑作空白，照紫外-可見分光光度法，在510 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：A0.048 8C 0.049 6（r0.999 8，n7）。結(jié)果表明，1，8-二羥基蒽醌濃度在4.618.4 g/ml范圍內(nèi)的線性關(guān)系良好。2.5 精密度實(shí)驗(yàn)取同一對(duì)照品溶液，重復(fù)測(cè)定吸收度6次，計(jì)算，得RSD=0.46（n=6）。結(jié)果表明，精密度良好。2.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

9、取供試品溶液及對(duì)照品溶液適量，按2.3項(xiàng)下方法同法操作，室溫放置，顯色后分別于0，30，60，90，120 min測(cè)定吸收度。結(jié)果表明,對(duì)照品溶液及供試品溶液在顯色操作完成后120 min內(nèi)穩(wěn)定，其RSD分別為1.07和0.81。2.7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精密稱取同一樣品（重慶）6份，照2.2項(xiàng)下制備供試液，精密吸取供試品溶液適量，按2.3項(xiàng)下方法操作，測(cè)定吸收度，計(jì)算得平均含量為0.37, RSD=1.85%（n=6）。結(jié)果表明，供試品重復(fù)性良好。2.8 加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知總蒽醌含量的決明子藥材（重慶）0.6 g 9份，分別按樣品中總蒽醌含量的80%，100%和120%精密加入對(duì)照品，每個(gè)梯度3份。按照2.2.1項(xiàng)下制備供試液，按2.3項(xiàng)下方法操作，測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。表1 回收率實(shí)驗(yàn)（略）2.9 樣品含量測(cè)定精密量取供試品溶液各2 ml，按2.3項(xiàng)下方法同法操作，計(jì)算 ，即得。樣品的含量測(cè)定結(jié)果見表2。3 討論3.1 從線性、穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性及加樣回收率等實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出用紫外分光光度法測(cè)定決明子中蒽醌類成分的含量準(zhǔn)確性高，重現(xiàn)性好，方法