實驗二氨氮的測定

1、實驗二氨氮的測定（一）納氏試劑比色法（標準法）一. 實驗?zāi)康?. 掌握絮凝沉淀法和蒸餾法進行水樣預(yù)處理的操作技能。2. 掌握用納氏試劑比色法（標準法）測定氨氮的原理和技術(shù)。二. 實驗原理碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)，生成淡紅棕色膠態(tài)化合物，其顏色深淺與氨氮含量成正比，通常可在波長410-425nm范圍內(nèi)測其吸光度，計算其含量。本法最低檢出濃度為0.025mg/L ,測定上限為2mg/L。水樣作適當?shù)念A(yù)處理后，本法可適用于地表水、地下水、工業(yè)廢水和生活污水中氨氮的測定。1.2.3.4.三. 實驗儀器、設(shè)備 氨氮蒸餾裝置。/ 、/,、/, iff: ' 分光光度計。pH計。50mL比色

2、管。5. 1mL、5mL和 10mL吸管。四. 實驗試劑1 moI/L HCI 。1 mol/L NaOH。輕質(zhì)MgO將MgC在500 C下加熱，以除去碳酸鹽。0.05%溴百里酚藍指示劑。硼酸吸收液：稱取 20g硼酸溶于無氨水，稀釋至 1L。10% ZnSO:稱取10g ZnSO4溶于無氨水，稀釋至100mL。25%NaOH稱取25g氫氧化鈉溶于無氨水，稀釋至納氏試劑：可選擇下列方法之一制備：稱取碘化鉀5g,溶于10mL無氨水中，1. 無氨水：每升蒸餾水中加 0.1mL硫酸，在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄去50mL初餾液，接 取其余餾出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。2.3.4.5.6.7.lO

3、OmL,貯于聚乙烯瓶中。&9.邊攪拌邊分次少量加入二氯化汞 （HgCI2）粉末2.5g , 充分攪拌混合，并改為滴加二氯化汞飽和溶液， 當出 將上述溶液徐徐注入氫氧化鉀溶液中（15g氫氧，以無氨水稀釋至lOOmL,混勻。于暗處靜置過夜， 直至出現(xiàn)微量朱紅色沉淀溶解緩慢時，現(xiàn)少量朱紅色沉淀不再溶解時，停止滴加。化鉀溶于50mL無氨水中，冷卻至室溫）將上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。此試劑至少可穩(wěn)定一個月。 稱取16g氫氧化鈉，溶于50mL無氨水中，冷卻至室溫。另稱取7g碘化鉀和10 g碘化汞（HgI2 ）分別用少量無氨水溶解，再混合，然后將此混合液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用無氨水

4、稀釋至100mL,貯于聚乙烯瓶中，密塞于暗處保存，有效期可達一年。10. 酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6 4H2O溶于無氨水中，定容至100mL=11. 銨標準貯備液：稱取 3.8190g經(jīng)100C烘干過的優(yōu)級純氯化銨（NH4CI）溶于無氨水中， 定容至1000mL容量瓶中。此溶液 NH3-N濃度為1.00mg/mL。12. 銨標準使用液：移取5.00mL銨標準貯備液于500mL容量瓶中，用無氨水稀釋至標線。此 溶液NH3-N濃度為0.01mg/mL。五. 實驗步驟1. 水樣預(yù)處理：（對于清潔水樣，可直接測定）（1 ）絮凝沉淀法：取100mL混勻水樣，加1.0mL的1

5、0%硫酸鋅溶液和0.20.3mL的25%S氧 化鈉溶液，調(diào)節(jié) pH值約10.5，混勻，放置20min使之沉淀。取上清液用經(jīng)無氨水充分洗滌 過的中速定量濾紙過濾，棄去 25mL初濾液后，接取濾液供測定用。（2）蒸餾法：取250mL水樣（如氨氮含量較高，可取適量并加水至250mL使氨氮含量不超過2.5mg）,移入凱氏燒瓶中， 加數(shù)滴溴百里酚藍指示液，用氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液調(diào)節(jié)至PH=7左右。加入0.25g輕質(zhì)氧化鎂和數(shù)粒玻璃珠，立即連接氮球和冷凝管，導管下端插入吸 收液（50mL硼酸溶液）液面下。加熱蒸餾，至餾出液達200mL時，停止蒸餾，定容至250mb氨氮蒸餾裝置1.凱氏燒瓶；2.定氮球；3

6、.直形冷凝管；4.收集瓶；5.電爐2.標準曲線的繪制：吸取 0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00 mL 銨標準使用液分別于50 mL比色管中，加無氨水至標線，力口1.0 mL酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加試劑，混勻。放置10min后，在波長420nm處，用光程 吸光度。由測得的吸光度減去零濃度空白管的吸光度后， m （mg）對校正吸光度的標準曲線。具體配制見下表。1.5 mL納氏20mm比色皿，以蒸餾水為參比，測定 得到校正吸光度，繪制以氨氮含量0123456管號0.01 mg/mL 銨標準使00.501.003.005.007.0010.00用液（mL）酒石酸鉀鈉溶液（

7、mL）1.01.01.01.01.01.01.0納氏試劑（mL）1.51.51.51.51.51.51.5氨氮含量 m（mg）00.0050.010.030.050.070.10原吸光度AnA0A1A2A3A4A5A6經(jīng)試劑空白修正后A0-A0A1-A0A2-A0A3-A0A4-A0A5-A0A6-A0氨氮標準系列吸光度A(An-AO)03水樣的測定：（1 ）分取適量經(jīng)絮凝沉淀預(yù)處理后的水樣（使氨氮含量不超過 中，稀釋至標線，加1.0 mL酒石酸鉀鈉溶液。以下同標準曲線的繪制。（2）分取適量經(jīng)蒸餾預(yù)處理后的餾出液，加入50 mL比色管中，加一定量1mol/L氫氧化鈉溶液以中和硼酸，稀釋至標線。

8、加1.5 mL納氏試劑，混勻。放置10min后，同標準曲線步驟測量吸光度。測出水樣的吸光度Ax= （測三次取平均值），扣除試劑空白吸光度AX-A0=，從標準曲線上查出相應(yīng)的氨氮含量4空白試驗：以無氨水代替水樣，作全程序空白測定。5.計算由水樣測得的吸光度減去空白試驗的吸光度后，從標準曲線上查得氨氮含量（xlOOO計算：氨氮（N, mg/L） = Vmx（ mg）。O.lmg),加入50 mL比色管AO后，即mg）,按下式式中：mxV水樣體積，六. 實驗報告要求1. 寫出實驗名稱、2. 寫出實驗?zāi)康?、從標準曲線上查得氨氮含量，mgmL實驗方法、采樣時間和地點。實驗原理、實驗儀器設(shè)備、實驗試劑、實

9、驗步驟。3. 認真做好課后思考題。七. 注意事項1. 納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對顯色反應(yīng)的靈敏度有較大影響。靜置后生成的沉 淀應(yīng)除去。2. 濾紙中常含痕量銨鹽，使用時注意用無氨水洗滌。所用玻璃器皿應(yīng)避免實驗室空氣中氨 的玷污。3. 水樣有顏色、渾濁和含鈣、鎂、鐵等金屬離子及硫化物、醛和酮類等均干擾測定，需作 相應(yīng)的預(yù)處理（絮凝沉淀或蒸餾），對金屬離子的干擾，可加適量的掩蔽劑（酒石酸鉀鈉） 加以消除。（二）納氏試劑比色法（儀器法）一.實驗?zāi)康?. 掌握絮凝沉淀法和蒸餾法進行水樣預(yù)處理的操作技能。2掌握用納氏試劑比色法（儀器法）測定氨氮的原理和技術(shù)。3掌握便攜式氨氮測定儀的使用方法。二實驗

10、原理碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)，生成淡紅棕色膠態(tài)化合物，其顏色深淺與氨氮含量成正比，通常可在波長410-425nm范圍內(nèi)測其吸光度，計算其含量。本法最低檢出濃度為0.02mg/L ,測定上限為10mg/L。水樣作適當?shù)念A(yù)處理后，本法可適用于地表水、地下水、工業(yè)廢水和生活污水中氨氮的測定。氨氮蒸餾裝置（同標準法）。 CM-03N型便攜式氨氮測定儀。pH計。10mL專用比色管。1mL和5mL吸管。三實驗儀器、設(shè)備1.2.3.4.四實驗試劑1無氨水：每升蒸餾水中加 0.1mL硫酸，在全玻璃蒸餾器中重蒸餾，棄去50mL初餾液，接取其余餾出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。2.3.4.5.6.7.

11、&9.5.1 mol/L HCl 。1 mol/L NaOH。輕質(zhì)MgO將MgC在500 C下加熱，以除去碳酸鹽。0.05%溴百里酚藍指示劑。1L。lOOmL。lOOmL,貯于聚乙烯瓶中。硼酸吸收液：稱取20g硼酸溶于無氨水，稀釋至10% ZnSC4稱取10g ZnSO4溶于無氨水，稀釋至25%NaOH稱取25g氫氧化鈉溶于無氨水，稀釋至納氏試劑：可選擇下列方法之一制備：稱取碘化鉀5g,溶于10mL無氨水中，邊攪拌邊分次少量加入二氯化汞（HgCI2）粉末2.5g ,直至出現(xiàn)微量朱紅色沉淀溶解緩慢時，充分攪拌混合，并改為滴加二氯化汞飽和溶液，當出現(xiàn)少量朱紅色沉淀不再溶解時，停止滴加。將上

12、述溶液徐徐注入氫氧化鉀溶液中（15g氫氧化鉀溶于50mL無氨水中，冷卻至室溫），以無氨水稀釋至100mL,混勻。于暗處靜置過夜， 將上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。此試劑至少可穩(wěn)定一個月。稱取16g氫氧化鈉，溶于50mL無氨水中，冷卻至室溫。另稱取 7g碘化鉀和10 g碘化汞（HgI2 ）分別用少量無氨水溶解，再混合，然后將此混合液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用無氨水稀釋至100mL,貯于聚乙烯瓶中，密塞于暗處保存，有效期可達一年。10. 酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6 4H2O溶于無氨水中，定容至100mL=11. 銨標準貯備液：稱取 3.8190g經(jīng)100C烘

13、干過的優(yōu)級純氯化銨（NH4CI）溶于無氨水中， 定容至1000mL容量瓶中。此溶液 NH3-N濃度為1.00mg/mL。12. 銨標準使用液：移取5.00mL銨標準貯備液于500mL容量瓶中，用無氨水稀釋至標線。此 溶液NH3-N濃度為0.01mg/mL。五.實驗步驟1.水樣預(yù)處理：（對于清潔水樣，可直接測定）（1 ）絮凝沉淀法：取100mL混勻水樣，加1.0mL的10%硫酸鋅溶液和0.20.3mL的25%氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)pH值約10.5，混勻，放置20min使之沉淀。取上清液用經(jīng)無氨水充分洗滌過的中速定量濾紙過濾，棄去25mL初濾液后，接取濾液供測定用。（2）蒸餾法：取250mL水樣（如氨

14、氮含量較高，可取適量并加水至250mL使氨氮含量不超過2.5mg），移入凱氏燒瓶中， 加數(shù)滴溴百里酚藍指示液，用氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液調(diào)節(jié)至pH=7左右。加入0.25g輕質(zhì)氧化鎂和數(shù)粒玻璃珠，立即連接氮球和冷凝管，導管下端插入吸 收液（50mL硼酸溶液）液面下。加熱蒸餾，至餾出液達200mL時，停止蒸餾，定容至250mb0、0.20、0.50、2. 標準曲線的測定：取七支 10mL專用比色管，按下表配制標準系列。吸取1.00、2.00、4.00和5.00mL銨標準使用液于比色管中，用無氨水補足到5mL相應(yīng)的氨氮濃度值為：0、0.40、1.00、2.00、4.00、8.00 和 10.00 mg

15、/L，加 0.1 mL 酒石酸鉀鈉溶液，混 勻。加0.15 mL納氏試劑，混勻。放置10min后，以蒸餾水為參比，測定標準曲線。先以0 mL標準樣作為空白，放入 CM-03N型便攜式氨氮測定儀中進行比色，其吸光度作為此時測定儀的零點，然后依次放入氨氮濃度值為0.40、1.00、2.00、4.00、8.00和10.00 mg/L標準樣結(jié)束輸入，測定r值。將測得的的專用比色管。依次測得吸光度，并輸入相應(yīng)的已知氨氮濃度值，按“”b值、a值、儀會根據(jù)最小二乘法自動計算出010.00 mg/L的標準曲線的標準曲線保存，以備用于未知濃度的水樣測定。氨氮標準系列管號01234560.01 mg/mL 銨標準

16、使00.200.501.002.004.005.00用液（mL）無氨水（mL）5.004.804.504.003.001.000.00酒石酸鉀鈉溶液（mL）0.10.10.10.10.10.10.1納氏試劑（mL）0.150.150.150.150.150.150.15氨氮濃度C（mg/L）00.401.002.004.008.0010.00吸光度AnA0A1A2A3A4A5A6得出b=（曲線的斜率）,a=（曲線的截距）r=（相關(guān)系數(shù)），則標準曲線相應(yīng)的回歸方程為：C= b A + a（其中C為氨氮濃度，A為吸光度）。3. 水樣的測定：（1 ）取5mL經(jīng)絮凝沉淀預(yù)處理后的水樣（使氨氮濃度不超過

17、10mg/L）,加入10 mL專用比色管中，加0.1 mL酒石酸鉀鈉溶液，混勻。加 0.15 mL納氏試劑，混勻。放置 10min后，用上 述步驟測得的標準曲線，以 0mL標準樣作為空白，進行比色測定，測定儀自動顯示出水樣 的吸光度及氨氮濃度值。水樣Ax=, 氨氮濃度CX= mg/L 。（2）取5mL經(jīng)蒸餾預(yù)處理后的餾出液，加入10 mL專用比色管中，加一定量1mol/L氫氧化鈉溶液以中和硼酸。力口 0.15 mL納氏試劑，混勻。放置 10min后，以下操作與絮凝沉淀預(yù)處 理后的水樣測定相同。六. 實驗報告要求1. 寫出實驗名稱、實驗方法、采樣時間和地點。2. 寫出實驗?zāi)康?、實驗原理、實驗儀器

18、設(shè)備、實驗試劑、實驗步驟。3認真做好課后思考題。七注意事項1納氏試劑中碘化汞與碘化鉀的比例，對顯色反應(yīng)的靈敏度有較大影響。靜置后生成的沉 淀應(yīng)除去。2濾紙中常含痕量銨鹽，使用時注意用無氨水洗滌。所用玻璃器皿應(yīng)避免實驗室空氣中氨 的玷污。3. 水樣有顏色、渾濁和含鈣、鎂、鐵等金屬離子及硫化物、醛和酮類等均干擾測定，需作 相應(yīng)的預(yù)處理（絮凝沉淀或蒸餾），對金屬離子的干擾，可加適量的掩蔽劑（酒石酸鉀鈉） 加以消除。附：CM-03N型便攜式氨氮測定儀使用方法標準曲線的測定（功能2）操作方法顯示步驟1.啟動功能2按“功能” + “ 2 ”鍵F22.確定按“確定”鍵A03 放入0號標樣將裝有0濃度標樣的專用比色管插入4.確定測試孔，用遮光帽蓋住按“確定”鍵X.XXX （ 0號標樣的吸光度，5.確定待讀數(shù)穩(wěn)定后按“確定”鍵正常為± 0.005 ,否則試樣存 在問題）n16.放入1號標樣取出0號標樣，將1號標樣的專用比色7.確定管插入測試孔，用遮光帽蓋住按“確定”鍵X.XXX （1號標樣的吸光度）&確定待讀數(shù)穩(wěn)定后按“確定”鍵C9 .輸入已知氨氮濃度將1號標樣的濃度值通過數(shù)字鍵輸入，XXXX（最多4位有效數(shù)字）值按“確定”鍵（輸錯可按“回退”鍵10 .重復(fù)69步修改）依次放入下一個標樣11.結(jié)束顯示nX （提示放X號標樣，最大為9）b12.顯示b值時