稻谷玉米脂肪酸值測定操作練習(xí)-實(shí)操

1、稻谷、玉米脂肪酸值測定操作練習(xí)實(shí)驗項目稻谷、玉米脂肪酸值測定時長：4h目的要求1 .熟悉和掌握脂肪酸值檢驗流程；2 .掌握微量滴定管的使用和滴定終點(diǎn)的判斷。練習(xí)重點(diǎn)1 .調(diào)節(jié)1己制L氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液所需95叱醇至中性；2 . L氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制；3 .樣品制備：去雜、粉碎、稱量、提取、過濾；4 .脂肪酸值滴定速度控制；5 .滴定終點(diǎn)的判斷；6 .脂肪酸值檢測結(jié)果的的報出。練習(xí)難點(diǎn)1 .滴定速度控制；2 .滴定終點(diǎn)的判斷。預(yù)習(xí)要點(diǎn)1 .脂肪酸值測定原理。2 .脂肪酸值測定方法中對錘式旋風(fēng)磨的要求有哪些？3 .脂肪酸值測定用樣品粉碎粒度要求？4 .如何配制脂肪酸值測定所用

2、L氫氧化鉀-乙醇溶液？5 .如何將稀釋氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液用的 95叱醇溶液調(diào)節(jié)至中性？6 .影響脂肪酸值測定因素后哪些？7 .脂肪酸值滴定應(yīng)在什么條件下進(jìn)行？8 .脂肪酸值滴定速度應(yīng)如何控制？9 .如何判斷脂肪酸值滴定終點(diǎn)？10 .應(yīng)怎樣報出脂肪酸值檢測結(jié)果？實(shí)驗原理在f 溫度（15C25C）條件下，以無水乙醇提取谷物及制品中的游離脂 肪酸，用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，游離脂肪酸與氫氧化鉀發(fā)生中和反應(yīng)，以 中和100 g試樣中游離脂肪酸所需氫氧化鉀的毫克數(shù)表示。谷物脂肪酸值測定的實(shí)質(zhì)是酸堿滴定。 但由于谷物成分比較復(fù)雜，溶于乙醇 的組分比較多，用乙醇提取游離脂肪酸的同時，還啟具他醇溶性物質(zhì)，如： 醇

3、溶蛋白、色素、植酸等也被提取出來，而且提取的游離脂肪酸不是單一的 脂肪酸，因此，提取液組分非常復(fù)雜，酸堿滴定也就與通常的強(qiáng)堿滴定單一 的弱酸有所不同，是強(qiáng)堿滴定混合弱酸。試齊I 與儀器無水乙醇：；1幽酥-乙醇溶液：酚酥溶于100 mL95% （V/V）乙醇；不含二 氧化碳的蒸儲水：將蒸儲水煮沸10min,加蓋冷卻；L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液； L氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。錘式旋風(fēng)磨：具有風(fēng)口可調(diào)和自清理功能，不易發(fā)熱，粉碎后的樣品一次通過CQ16（40目）篩的達(dá)95犯上；往返式振蕩器，振蕩頻率為100次/min ; 微重滴止菅：5mL取小亥J度為；10mL取小刻度為；移液管：50mL 25mL 天

4、平：感里為； 具塞錐形瓶：250mL錐形瓶：150mL實(shí)驗步驟1 . L KOH-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制準(zhǔn)確移取20mL已經(jīng)標(biāo)定好的L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用事先調(diào)節(jié)至中 性的95% （V/V）乙醇稀釋定容至1000mL盛放于聚乙烯塑料瓶中。臨用前 稀釋o （V濃=c稀x V矛it/ c濃）注：需要組織單位提供事先配制并已經(jīng)標(biāo)定的L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲備液。2 .試樣制備稻谷試樣的制備：從混合均勻的平均樣品中分取100 g左右，去除雜質(zhì)（保留谷外糙米），得到凈稻谷樣品。用錘式旋風(fēng)磨粉碎，粉碎后的樣品一 次通過CQ16（相當(dāng)于40目）篩的應(yīng)達(dá)到95姒上。粉碎樣品（篩上、篩下 的全部篩分范圍樣品）經(jīng)充分混

5、合后裝入磨口瓶中備用。玉米試樣的制備：從混合均勻的平均樣品中分取100 g左右，去除雜質(zhì)， 得到凈玉米樣品。用錘式旋風(fēng)磨粉碎，粉碎后的樣品一次通過 CQ16相當(dāng)于 40目）篩的應(yīng)達(dá)到95犯上。收集篩上、篩下的全部篩分范圍的粉碎樣品樣 品，經(jīng)充分混合后裝入磨口瓶中備用。3 .試樣處理稱取制備好的試樣約10 g ,精確到g ,于250 mL具塞磨口錐形瓶中， 并用大肚移液管（或同等精度加液器）加入 mL無水乙醇，置于往返式振蕩 器上振蕩提取30 min ,（振蕩頻率為100次/min）。靜置1 min 2 min ,在 玻璃漏斗中放入折疊濾紙過濾。笄去最初幾滴濾液，收集濾液25 mL以上。注：樣品

6、粉碎后應(yīng)在 2h內(nèi)進(jìn)行提取。4 .測定用大肚移液管移取mL濾液于150 mL錐形瓶中，力口 50 mL不含二氧化碳 的蒸儲水，滴加34滴酚吹指示劑后，用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至呈微 紅色，30 s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶的體積（V）。注1:滴定速度宜先快后慢，不能太慢或太快，一般控制在（68） mL/min,即每秒（23）滴，滴定液成串不成線。臨近滴定終點(diǎn)時，要適當(dāng)放慢滴定速度，注意觀 察樣液的顏色變化。注2：有的樣品由于受提取液本身顏色的影響，到達(dá)滴定終點(diǎn)時樣液不可見微紅色，當(dāng)樣液顏色與參照樣液有明顯色差時，即為滴定終點(diǎn)。5 .空白試驗用移液管移取mL無水乙醇于150 mL

7、錐形瓶中，力口 50 mL不含二氧化碳 的蒸儲水，滴加35滴酚吹指示劑，用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至呈微紅 色，30 s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積（V。）。6 .結(jié)果計算按公式計算結(jié)果。7 .報出結(jié)果每份試樣取兩個平行樣進(jìn)行測定，兩個測定結(jié)果之差的絕對值符合重復(fù) 性要求時，以其平均值為測定結(jié)果；不符合重復(fù)性要求時，應(yīng)再取兩個平行 樣進(jìn)行測定。若4個結(jié)果的極差不大于n=4的重復(fù)性臨界極差CrR95（4）, 則取4個結(jié)果的平均值作為最終測試結(jié)果； 若4個結(jié)果的極差大于n=4的重 復(fù)性臨界極差CrR95（4）,則取4個結(jié)果的中位數(shù)作為最終測試結(jié)果，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。實(shí)驗記錄1

8、（稻谷）稻谷脂肪酸值測定記錄樣品名稱編號試樣質(zhì)量（g）試樣耗標(biāo)液 體積（mD空白耗標(biāo)液 體積（mD制備樣水分（為脂肪酸值（mg/100g）雙試驗差值（mg/100g）四平行極差（mg/100g）脂肪酸值報出結(jié)果（mg/100g）注：制備樣水分按%十。實(shí)驗記錄2（玉米）玉米脂肪酸值測定記錄樣品名稱編號試樣質(zhì)量（g）試樣耗標(biāo)液 體積（mD空白耗標(biāo)液 體積（mD制備樣水分（為脂肪酸值（mg/100g）雙試驗差值（mg/100g）四平行極差（mg/100g）脂肪酸值報出結(jié)果（mg/100g）注：制備樣水分按%十。1 .脂肪酸值測定方法中對錘式旋風(fēng)磨的要求有哪些？答：要求具有風(fēng)門可調(diào)和自清理功能，不易發(fā)

9、熱，粉碎后的樣品一次通 過CQ16（40目）篩的達(dá)95姒上。2 .測定脂肪酸值所用的粉碎樣品是通過 CQ16（相當(dāng)于40目）篩的樣品 嗎？答：測定脂肪酸值所用的粉碎樣品不僅僅是通過 CQ16（相當(dāng)于40目） 篩的篩下物，而是篩上、篩下的全部篩分范圍樣品，也即除了篩下物而外， 還應(yīng)該包括殘留在篩上的樣品。3 .脂肪酸值測定為什么要做空白試驗？答：為了消除試劑的影響，減少系統(tǒng)誤差。4 .脂肪酸值滴定應(yīng)在什么條件下進(jìn)行？答：滴定應(yīng)在散射日光或日光型日光燈下對著光源方向進(jìn)行，光線不能 太強(qiáng)或太暗，陽光不能直射；環(huán)境溫度應(yīng)控制在 15C25c之間。5 .脂肪酸值滴定速度應(yīng)如何控制？思考題答：滴定速度宜先

10、快后慢，不能太慢或太快，一般控制在（68） mL/min, 即每秒（23）滴，滴定液成用不成線。臨近滴定終點(diǎn)時，要適當(dāng)放慢滴定 速度，注意觀察樣液的顏色變化。滴定手法應(yīng)盡量一致，振搖速度一致，滴 定操作要熟練，整個滴定過程一氣呵成。6 .如何判斷脂肪酸值滴定終點(diǎn)？答：對提取液顏色很淺的樣品，可將滴定至微紅色出現(xiàn)視為到達(dá)滴定終 點(diǎn)；但有些樣品由于受提取液本身顏色的影響，到達(dá)滴定終點(diǎn)時樣液不可見 微紅色，終點(diǎn)難以判定，可用一個已加入提取液和去二氧化碳蒸儲水尚未滴 定的錐形瓶作參照，當(dāng)被滴定樣液顏色與參照樣液有明顯色差時，即可視為 已到滴定終點(diǎn)。7 .影響脂肪酸值測定結(jié)果準(zhǔn)確性的因素有哪些？答：脂肪酸值測定是較低濃度的強(qiáng)堿滴定多種混合弱酸的體系，加之提 取液中除了酸性物質(zhì)以外，還有一些其他的醇溶性物質(zhì)如色素等也被提取出 來，使提取液本身有一定顏色，而顏色及顏色的深淺因糧食種類和品種的不 同而有所不同，從而增加了準(zhǔn)確測定脂肪酸值的難度。因此，影響脂肪酸值 測定結(jié)果準(zhǔn)確性的因素很多，如：粉碎磨升溫、樣品粉