凝膠成像系統(tǒng)軟件操作指南2

1、Quantity One應(yīng)用講義本講義介紹Quantity One的兩個(gè)重要分析功能：定量分析和分子量確定。Quantity One軟件HelpàQuick Guide快捷指南提示如何實(shí)現(xiàn)一個(gè)功能，如定量分析(Volumes Quick Guide)，電泳條帶分析(Band Analysis)，差顯分析(Differential Display Analysis)，克隆計(jì)數(shù)(Colony Counting Analysis)等?？旖葜改舷掠?，2，3步驟，根據(jù)提示完成。二條帶分析功能Band Analysis介紹用此功能對(duì)泳道內(nèi)的所有條帶進(jìn)行分子量確定，相對(duì)濃度分析1，2，3同上4，

2、5，6確定泳道lane,并可對(duì)泳道進(jìn)行各種調(diào)整（實(shí)際實(shí)驗(yàn)中泳道往往不是垂直的而出現(xiàn)各種變形。在軟件的工具欄中有一Lane Tool圖標(biāo)，包含有更多泳道編輯工具。Band Tool條帶編輯工具包Lane Tool泳道編輯工具包7Lane Background去除泳道背景，建議不做8Detect Band，檢測(cè)泳道內(nèi)的條帶，打開出現(xiàn)如下窗口，一般可通過調(diào)節(jié)sensitivity靈敏度來調(diào)節(jié)檢測(cè)出的條帶，或通過人工編輯來增加/減少條帶。打開工具欄中Band Tool條帶編輯工具包可看到更多編輯工具（如上圖）10. Standard輸入分子量標(biāo)準(zhǔn)，軟件自帶有許多Bio-Rad的分子量標(biāo)準(zhǔn)，如你用的是自

3、己的標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)入New Standard建立新的分子量標(biāo)準(zhǔn)，軟件可以選擇標(biāo)準(zhǔn)單位是MW（蛋白質(zhì)）還是BP（核酸）等（左下圖）。在Protein-Standard對(duì)話框中輸入分子量數(shù)值，完成后單擊賦值圖標(biāo)（右下圖），回到圖象文件上單擊標(biāo)準(zhǔn)樣品的泳道，軟件自動(dòng)將所輸?shù)姆肿恿繑?shù)值和泳道內(nèi)的條帶一一對(duì)應(yīng)。賦值圖標(biāo)：告訴軟件哪條是分子量標(biāo)準(zhǔn)樣品的泳道輸入分子量數(shù)值10. Band Attribute條帶屬性，在完成第9步以后，軟件已自動(dòng)計(jì)算出了其他未知條帶的分子量,打開band attribute選擇要報(bào)告的參數(shù)，這里我們選擇Molecular Weight，圖象上可以看到所有條帶的分子量（紅顏色標(biāo)記），標(biāo)準(zhǔn)分子量為藍(lán)色標(biāo)記。11. Match，跳過不做12. Print Image打印圖象13. All Lane Report所有泳道條帶結(jié)果報(bào)告。打開窗口，選擇要報(bào)告的參數(shù)，如Mol.Wt.（分子量，如左下圖），軟件將報(bào)告結(jié)果（右下圖），在報(bào)告的右下腳有一報(bào)告輸出工具，點(diǎn)擊