中國(guó)藥典四部通則藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原則

1、9205藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制指導(dǎo)原那么本指導(dǎo)原那么是用于指導(dǎo)藥品微生物檢驗(yàn)用的潔凈室等受控環(huán)境微生物污染情況的監(jiān)測(cè) 和控制。藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室是指用于藥品無(wú)菌或微生物檢驗(yàn)用的潔凈實(shí)驗(yàn)室、隔離系統(tǒng)及其他受控環(huán)境。藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室的潔凈級(jí)別按空氣懸浮粒子大小和數(shù)量的不同參考現(xiàn)行“藥品生產(chǎn)質(zhì) 量管理標(biāo)準(zhǔn)分為 A B、C、D 4個(gè)級(jí)別。為維持藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境的穩(wěn)定性、確保 藥品質(zhì)量平安及檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)對(duì)藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè)和控制，使受控環(huán)境維持可接受的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)水平。本指導(dǎo)原那么包括人員要求、初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室參數(shù)確認(rèn)、微生物監(jiān)測(cè)方法、監(jiān)測(cè)頻次及監(jiān)測(cè)工程、監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)、警戒限

2、和糾偏限、數(shù)據(jù)分析及偏差處理、微生物鑒定和微生物控制。人員從事藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室微生物監(jiān)測(cè)和控制的人員應(yīng)符合現(xiàn)行?中國(guó)藥典? 通那么中“藥品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理指導(dǎo)原那么通那么9203的相關(guān)要求。確認(rèn)初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行參數(shù)確認(rèn)，確認(rèn)參數(shù)包括物理參數(shù)、空氣懸浮粒子和微生物。潔凈實(shí)驗(yàn)室假設(shè)有超凈工作臺(tái)、空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)等關(guān)鍵設(shè)備發(fā)生重大變化時(shí)應(yīng)重新進(jìn)行參數(shù)測(cè)試。藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室物理參數(shù)的測(cè)試應(yīng)當(dāng)在微生物監(jiān)測(cè)方案實(shí)施之前進(jìn)行，確保操作順暢， 保證設(shè)備系統(tǒng)的運(yùn)行能力和可靠性。主要的物理參數(shù)包括高效空氣過(guò)濾器完整性，氣流組織、空氣流速平均風(fēng)速，換氣次數(shù)、壓差、溫度和相對(duì)濕度等，測(cè)試應(yīng)在模擬正常檢測(cè)條件 下

3、進(jìn)行。各級(jí)別潔凈環(huán)境物理參數(shù)建議標(biāo)準(zhǔn)及最長(zhǎng)監(jiān)測(cè)周期見表1,必要時(shí)，各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)潔凈實(shí)驗(yàn)室使用用途、檢測(cè)藥品的特性等制定適宜的參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。物理參數(shù)測(cè)試方法參照?潔凈室施工及驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)?的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中附錄 D3高效空氣過(guò)濾器現(xiàn)場(chǎng)掃描檢漏方法、附錄E12氣流的檢測(cè)、附錄E1風(fēng)量和風(fēng)速的檢測(cè)、 附錄E2靜壓差的檢測(cè)、附錄E5溫濕度的檢測(cè)進(jìn) 行。初次使用的潔凈實(shí)驗(yàn)室其空氣懸浮粒子和微生物確實(shí)認(rèn)及監(jiān)測(cè)照以下“監(jiān)測(cè)進(jìn)行。監(jiān)測(cè)藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期進(jìn)行微生物監(jiān)測(cè)，內(nèi)容包括非生物活性的空氣懸浮粒子數(shù)和有生物活性的微生物監(jiān)測(cè)，其中微生物監(jiān)測(cè)包括環(huán)境浮游菌和沉降菌監(jiān)測(cè)，及關(guān)鍵的檢測(cè)臺(tái)面、 人員操作服外表及 5指手套等

4、的微生物監(jiān)測(cè)。當(dāng)潔凈區(qū)有超凈工作臺(tái)、空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)等關(guān)鍵設(shè)備發(fā)生重大改變時(shí)應(yīng)重新進(jìn)行監(jiān)測(cè)；當(dāng)微生物監(jiān)測(cè)結(jié)果或樣品測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生偏離， 經(jīng)評(píng)估潔凈區(qū)可能存在被污染的風(fēng)險(xiǎn)時(shí)， 應(yīng)對(duì)潔 凈區(qū)進(jìn)行清潔消毒后重新進(jìn)行監(jiān)測(cè)。*吒It 快監(jiān)帽耳mD. tSfl.D. M -DL ucmmv MJ!IE HI KM3*曙非底址卓店盧1轟o, a-o, He*監(jiān)抑Mi朗KJjflVh 1|!牛H總樸于0PibIfi-BST：Brnim+7iT4- SSM林IT】宦毎堵一探5一ltJ|1.監(jiān)測(cè)方法藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室懸浮粒子的監(jiān)測(cè)照?醫(yī)藥工業(yè)潔凈室區(qū)懸浮粒子的測(cè)試方法? 的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；沉降菌的監(jiān)測(cè)照?醫(yī)藥工業(yè)潔凈室區(qū)

5、沉降菌的測(cè)試方法?的現(xiàn)行國(guó)家 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行；浮游菌的監(jiān)測(cè)照?醫(yī)藥工業(yè)潔凈室區(qū)浮游菌的測(cè)試方法?的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn) 行。外表微生物測(cè)定是對(duì)環(huán)境、設(shè)備和人員的外表微生物進(jìn)行監(jiān)測(cè)，方法包括接觸碟法和擦拭法。接觸碟法是將充滿規(guī)定的瓊脂培養(yǎng)基的接觸碟對(duì)規(guī)那么外表或平面進(jìn)行取樣，然后置合適的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間并計(jì)數(shù)，每碟取樣面積約為25cm2,微生物計(jì)數(shù)結(jié)果以cfu/碟報(bào)告；擦拭法是接觸碟法的補(bǔ)充，用于不規(guī)那么外表的微生物監(jiān)測(cè)，特別是設(shè)備的不規(guī)那么外表。擦拭法的擦拭面積應(yīng)采用適宜尺寸的無(wú)菌模板或標(biāo)尺確定，取樣后，將拭子置適宜的緩沖液或培養(yǎng)基中，充分振蕩，然后采用適宜的方法計(jì)數(shù)，每個(gè)拭子取樣面積為約25cm2，微

6、生物計(jì)數(shù)結(jié)果以cfu/拭子報(bào)告。接觸碟法和擦拭法采用的培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和時(shí)間同浮游菌或沉降 菌監(jiān)測(cè)。外表菌測(cè)定應(yīng)在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行。環(huán)境浮游菌、沉降菌及外表微生物監(jiān)測(cè)用培養(yǎng)基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基TSA，必要時(shí)可參加適宜的中和劑， 當(dāng)監(jiān)測(cè)結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時(shí)，可增加沙氏葡2進(jìn)行。萄糖瓊脂培養(yǎng)基SDA。在藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室監(jiān)控中，監(jiān)測(cè)頻次及監(jiān)測(cè)工程建議按表表2推薦的藥品潔淨(jìng)實(shí)驗(yàn)宦的監(jiān)測(cè)頻次及監(jiān)測(cè)工程壘控匱域采樣頻次無(wú)園隔離1毎枕實(shí)驗(yàn)空代忌浮粒子化外表撤生物含手套徹生物潔凈實(shí)驗(yàn)劄A級(jí)每次實(shí)驗(yàn)空氣想萍粒子牡 浮腓菌.機(jī)降菌 表崗律生含手賽i譚每辟一次空氣慈浮粒子化 浮游餵揮沉降生#H含

7、手膏及勢(shì)作C級(jí)每李度一次空弋量浮粒子曲、浮WM.機(jī)降菌、外表微生物毎半年一次空吒懸浮粧子.#游菌.沉障韻、外表懺生物注：每月一次。工作臺(tái)面沉降菌的日常監(jiān)測(cè)采樣點(diǎn)數(shù)不少于3個(gè)，且每個(gè)采樣點(diǎn)的平皿數(shù)應(yīng)不少于1個(gè)。每季度一次每半年一次。如果出現(xiàn)連續(xù)超過(guò)糾偏限和警戒限、關(guān)鍵區(qū)域內(nèi)發(fā)現(xiàn)有污染微生物存在、空氣凈化系統(tǒng)進(jìn)行任何重大的維修、消毒規(guī)程改變、設(shè)備有重大維修或增加、潔凈室區(qū)結(jié)構(gòu)或區(qū)域分 布有重大變動(dòng)、引起微生物污染的事故、日常操作記錄反映出傾向性的數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)考慮修改監(jiān)測(cè)頻次。2.監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)各潔凈級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)見表3、微生物監(jiān)測(cè)的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)見表4。表3各潔凈級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)懸浮粒子最大允許數(shù)/

8、立方米潔凈度級(jí)別靜態(tài)動(dòng)態(tài) 0. 5 m 5. 0 mmmA級(jí)352020352020B級(jí)3520293520002900C級(jí)3520002900352000029000D級(jí)352000029000不作規(guī)定不作規(guī)定表4 備潔凈級(jí)別環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)的動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)處外表微生物沽凈度級(jí)別浮游繭cfu/m注：表中各數(shù)值均為平均值； 單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于4小時(shí)，同一位置可 使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)并累積計(jì)數(shù)。 警戒限和糾偏限藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)歷史數(shù)據(jù)，結(jié)合不同潔凈區(qū)域的標(biāo)準(zhǔn)， 采用適宜的方法，制定適當(dāng)?shù)奈⑸锉O(jiān)測(cè)警戒限和糾偏限。限度確定后，應(yīng)定期回憶評(píng)價(jià)，如歷史數(shù)據(jù)說(shuō)明環(huán)境有所改善，限度應(yīng)作出相應(yīng)調(diào)

9、整以反映環(huán)境實(shí)際質(zhì)量狀況。表5列出了各級(jí)別潔凈環(huán)境微生物糾偏限參考值。沉降90mm)cfu/4小時(shí)霊接觸環(huán)55mm)cfu/J5指手套如手奪A級(jí)1111B級(jí)10555C級(jí)1005025D級(jí)200100501-* 5各級(jí)別潔浄環(huán)境橄生翻糾偏限參考值 注：數(shù)據(jù)表示建議的環(huán)境質(zhì)量水平，也可根據(jù)檢測(cè)或分析方法的類型確定微生物糾偏限度標(biāo)準(zhǔn)；可根據(jù)潔凈區(qū)域用途、檢測(cè)藥品的特性等需要增加沉降碟數(shù)；A級(jí)環(huán)境的樣本，正常情況下應(yīng)無(wú)微生物污染。 數(shù)據(jù)分析及偏差處理數(shù)據(jù)分析 應(yīng)當(dāng)對(duì)日常環(huán)境監(jiān)測(cè)的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和回憶，通過(guò)收集的數(shù)據(jù)和趨勢(shì)分析， 總結(jié)和評(píng)估潔凈實(shí)驗(yàn)室是否受控，評(píng)估警戒限和糾偏限是否適合，評(píng)估所采取的糾偏

10、措施是否適宜。應(yīng)當(dāng)正確評(píng)估微生物污染，不僅僅關(guān)注微生物數(shù)量，更應(yīng)關(guān)注微生物污染檢出的頻率，往往在一個(gè)采樣周期內(nèi)同一環(huán)境中多點(diǎn)發(fā)現(xiàn)微生物污染，可能預(yù)示著風(fēng)險(xiǎn)增加，應(yīng)仔細(xì)評(píng)估。幾個(gè)位點(diǎn)同時(shí)有污染的現(xiàn)象也可能由不標(biāo)準(zhǔn)的采樣操作引起，所以在得出環(huán)境可能失控的結(jié)論之前，應(yīng)仔細(xì)回憶采樣操作過(guò)程。 在污染后的幾天對(duì)環(huán)境進(jìn)行重新采樣是沒(méi)有意義的，因?yàn)椴蓸舆^(guò)程不具有可重復(fù)性。偏差處理 當(dāng)微生物監(jiān)測(cè)結(jié)果超出糾偏限度時(shí)，應(yīng)當(dāng)按照偏差處理規(guī)程進(jìn)行報(bào)告、記錄、調(diào)查、處理以及采取糾正措施，并對(duì)糾正措施的有效性進(jìn)行評(píng)估。 微生物鑒定建議對(duì)受控環(huán)境收集到的微生物進(jìn)行適當(dāng)水平的鑒定，微生物菌群信息有助于預(yù)期常見菌群，并有助于評(píng)

11、估清潔或消毒規(guī)程、方法、清潔劑或消毒劑及微生物監(jiān)測(cè)方法的有效性， 尤其當(dāng)超過(guò)監(jiān)測(cè)限度時(shí)，微生物鑒定信息有助于污染源的調(diào)査。關(guān)鍵區(qū)域別離到的菌落應(yīng)先于非關(guān)鍵區(qū)域進(jìn)行鑒定。微生物鑒定參照微生物鑒定指導(dǎo)原那么(通那么9204)進(jìn)行。微生物控制為了保證藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室環(huán)境維持適當(dāng)?shù)乃?，并處于受控狀態(tài)，除保持空調(diào)系統(tǒng)的良好運(yùn)行狀態(tài)，對(duì)設(shè)施進(jìn)行良好維護(hù)外，潔凈室內(nèi)人員應(yīng)嚴(yán)格遵守良好的行為標(biāo)準(zhǔn)，并定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控，減少人員干預(yù)比監(jiān)測(cè)更有效。其次是通過(guò)有效控制人員和物品的移動(dòng)，適當(dāng)?shù)目刂茰囟群蜐穸?。微生物控制措施還包括良好的清潔和衛(wèi)生處理，應(yīng)定期對(duì)藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室漕凈度級(jí)別殍游菌糾備限$(cfu/m3)沉降菌糾偏限詢90mmcfd/4小時(shí)?A級(jí)11B級(jí)73g105級(jí))0050進(jìn)行清潔和消毒，應(yīng)當(dāng)監(jiān)