輸血后丙型肝炎感染的前瞻性研究

1、輸血后丙型肝炎感染的前瞻性研究 摘要： 目的了解經(jīng)雙重篩檢后醫(yī)院內(nèi)丙型肝炎病毒感染 的情況。方法采用前瞻性隊列研究方法。結(jié)果雙重篩檢后醫(yī)院內(nèi)輸血后丙肝的感染率為4.95%，與單次篩檢相比輸血后丙肝的感染 率下降了80%，但輸血組與未輸血組相比，感染率仍有顯著性差異。結(jié)論對血源進(jìn)行雙重篩檢可大大降低輸血后丙肝，需加強(qiáng)更靈敏可靠的篩檢方法的研究， 以及大力提倡義務(wù)獻(xiàn)血對預(yù)防丙肝仍是必要的。關(guān)鍵詞： 輸血； 感染率； 丙型肝炎中分類號： R457.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼： B 文章編號： 1005-4529(2000)06-0421-02大量的流行病學(xué)調(diào)查都證實了輸血是丙型肝炎(HC)傳播的重 要途徑，我國從

2、1991年開始對獻(xiàn)血員進(jìn)行篩檢，輸血后HC的發(fā)病率有了明顯的下降，但仍處 于一個較高水平。為此，自1993年起成都中心血站對血源標(biāo)本進(jìn)行了雙重篩檢，即獻(xiàn)血員查 體時進(jìn)行抗-HCV的篩檢，血源用于臨床前再次進(jìn)行篩檢，兩次篩檢后對輸血后HC的發(fā)病影 響，國內(nèi)尚未見報道。為此我們進(jìn)行前瞻性的研究，觀察經(jīng)雙重篩檢輸血后HC的發(fā)病情況， 以考察雙重篩檢的防制效果。1材料與方法1.1觀察對象納入標(biāo)準(zhǔn)：1996年12月1997年3 月華西醫(yī)科大學(xué)附一院外科手術(shù)患者，現(xiàn)住成都市及郊縣易于隨訪的患者；排除標(biāo)準(zhǔn)：觀察 開始肝功已有異常者，觀察開始抗-HCV檢測已呈陽性者。滿足納入標(biāo)準(zhǔn)的患者共267人。 排除抗-H

3、CV陽性2人，肝功能異常者1人。共有264人進(jìn)入觀察隊列。手術(shù)時輸血的124例患 者為暴露組，手術(shù)未輸血140例患者作為對照組。收集暴露組及對照組患者觀察前及觀察開 始后1月、3月的血清標(biāo)本和對應(yīng)獻(xiàn)血員的血清標(biāo)本，置-20備檢。1.2試劑獻(xiàn)血員標(biāo)本的雙重篩檢采用ELISA二代 方 法；暴露組及對照組隨訪患者標(biāo)本，抗-HCV的檢測試劑盒購自北京優(yōu)耐特生物有限公司， 批號BJ180047；用于HCV-RNA檢測的RT-PCR試劑盒購自華美生物工程公司。1.3HC抗體的檢測方法步驟：各待檢標(biāo)本均在相 同條件下檢測。將待檢標(biāo)本120稀釋加入反應(yīng)孔洗滌加入酶標(biāo)二抗(辣根過氧化物氧 化酶標(biāo)記的羊抗人IgG

4、)洗滌加底物液加終止液在酶標(biāo)本儀上492 nm測OD值； 結(jié)果 判斷：cutoff值=強(qiáng)陽性對照平均值0.2；陰性結(jié)果：樣品OD值cutoff值；陽性結(jié)果：樣 品OD值cutoff值。1.4肝功能的檢測檢測接受隨訪患者受血前后血 清的肝功能指標(biāo)。1.5HCV-RNA的檢測標(biāo)本要求：將抗HCV陽性、 可 疑陽性和(或)肝功能異常的血清用RT-PCR法檢測其HCV-RNA；方法步驟：用酚氯仿異 戊醇法抽提，純化血清RNA在RT酶的作用下將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA以cDNA為模板進(jìn)行擴(kuò)增擴(kuò) 增結(jié)果在2%的瓊酯糖凝膠中電泳在紫外燈下判讀結(jié)果(出現(xiàn)24 bp條帶的結(jié)果為陽性)。1.6統(tǒng)計分析方法采用t檢驗及

5、2檢驗來進(jìn)行資料統(tǒng)計分析。 2結(jié)果2.1兩組資料的均衡性比較2.1.1應(yīng)答率調(diào)查輸血組及未輸血組分別確定隨訪人數(shù)12 4 人、140人。輸血組滿1月應(yīng)答人數(shù)為102人，應(yīng)答率為85%，滿3月的應(yīng)答人數(shù)為101人，應(yīng)答 率為84.1%，未輸血組未進(jìn)行1月的隨訪，滿3月的應(yīng)答人數(shù)為109人，應(yīng)答率77.8%，經(jīng)統(tǒng)計 學(xué)2檢驗兩組3月應(yīng)答率無顯著性差異。2.1.2年齡、性別均衡性分析見表1、表2。表1兩組年齡均衡性分析組別應(yīng)答人 數(shù)年齡均值最大(歲)最小(歲)t值(雙側(cè)a=0.05)P 輸 血 組未輸血組1011093 7.7441.6170.073.53.04.5-1.570.119 2.2肝功能

6、檢查結(jié)果見表3。 表2兩組人群性別構(gòu)成均衡性分析組別男性人數(shù)女 性人數(shù)2值P 輸 血 組未輸血組584943602.7 80.095 表3兩組人群滿3月肝功能檢查組別檢測人數(shù)異常人數(shù)ALT AS T總膽紅質(zhì)總蛋白白蛋白輸血組未輸血組1011091 110311000 2.3HCV感染檢測結(jié)果在輸血組滿1月的102個患 者 中，有2人呈抗-HCV陽性，肝功能有2人異常，對以上4人進(jìn)行HCV RNA的檢測全部呈現(xiàn)陰性 。在輸血組滿3月的101個患者中，有5人抗HCV陽性，4人肝功異常，經(jīng)HCV RNA檢測發(fā)現(xiàn)1人 為陽性。感染率為4.95%。未輸血組滿3月的109個患者中僅2個肝功能異常者，抗-H

7、CV、HCV RNA均為陰性。將輸血組與未輸血組滿3月隨訪患者的HCV感染亦進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗，經(jīng)四格表確切概率法算得 P=0.0244，說明兩組感染率差別是有顯著性的。輸血組滿3月隨訪到的101例患者，共輸血229個單位，輸單位血感染丙肝危險性為2.2%。2.4血源與HCV感染的關(guān)系在輸血組調(diào)查的101人 中，有33人僅輸注義務(wù)無償血源，51人輸注職業(yè)血源，17人輸注兩種類型的血源?？?HCV 的感染率依次為0%、7.84%、5.88%，經(jīng)2檢查3組感染率有顯著性差異 。血源規(guī)格與HCV感染的關(guān)系見表4。 表4血源規(guī)格與HCV感染率(%)血源規(guī)格隨訪人數(shù)抗HCV陽 性人數(shù)感染率義務(wù)無償血源330

8、0.00職業(yè)血源5147.84兩種類型血源1715.88 2.5輸血后HCV感染者與對應(yīng)獻(xiàn)血員輸血后5例HC V感染者共受血14個單位，其中2例感染者對應(yīng)的血源HCV RNA陽性，1例對應(yīng)的血源抗-HCV 陽性，另2例感染者對應(yīng)的血源未發(fā)現(xiàn)HCV感染標(biāo)記。3討論輸血是HC傳播的主要途徑，40%50%的HC與輸血有關(guān)，在輸血后肝炎中約占90%， 故嚴(yán)格注意血液、血制品篩檢，可有效地控制HC。本次調(diào)查是在對血源標(biāo)本進(jìn)行雙重篩選后 進(jìn)行的(獻(xiàn)血前進(jìn)行抗-HCV的檢測，在用于患者之前再次進(jìn)行篩檢)，本次隨訪的感染率與 華西醫(yī)科大學(xué)肝炎研究室19931994年，僅對獻(xiàn)血員進(jìn)行單次篩檢的輸血后HCV感染率

9、 1相比下降了80%，這說明了對血源標(biāo)本雙重篩檢是必要且有效的，特別是在目前尚無 更靈敏、特異的、可行的HCV篩檢試劑出現(xiàn)以前，雙重篩檢可進(jìn)一步降低輸血后HC的感染率 。我國李金星等2對合格庫血(即對獻(xiàn)血員進(jìn)行肝功能及抗HCV篩檢后的血)進(jìn)行抗 HCV和HCV RNA的復(fù)檢，發(fā)現(xiàn)仍有3.4%和7.8%的陽性率，說明用ELISA對獻(xiàn)血員進(jìn)行抗HCV的篩 檢雖可大大降低輸血后HC的發(fā)病率，但由于HCV基因型的變異和病毒經(jīng)高變區(qū)的變化，而導(dǎo) 致病毒抗原的變異及檢測藥盒自身的穩(wěn)定性問題，仍可造成漏檢；另外，ELISA進(jìn)行抗HCV抗 體的篩檢，對于“窗口期”患者及無癥狀攜帶者可能無法檢出3，4，本次調(diào)查

10、輸 血組5例感染者中，2例感染者對應(yīng)的血源標(biāo)本中抗HCV陰性，而HCV RNA陽性也說明了這一問 題，而這部分人在人群中占有相當(dāng)?shù)谋壤?。另外，本次調(diào)查中仍發(fā)現(xiàn)輸血組與未輸血組兩組 患者HCV感染有顯著性差異，這說明了盡管對輸血的質(zhì)量嚴(yán)格把關(guān)，輸血后HC雖有明顯下降 ，但輸血仍然是HC的一個危險因素。由此來看，加緊更靈敏、可靠、經(jīng)濟(jì)的HCV篩檢試劑盒 的研制，仍是十分必要的。本次輸血組隨訪到的101人中，5人發(fā)生感染。而這5人輸入的血源均來自職業(yè)獻(xiàn)血員，而33 人輸入的血源來自義務(wù)或無償獻(xiàn)血者，卻沒有1例發(fā)生HCV的感染，我國北京市積極開展義務(wù) 無償獻(xiàn)血活動，目前輸血后HC的感染率已降到0.2%

11、2。因而積極開展和宣傳義務(wù) 獻(xiàn)血，提高人群的自覺意識，將有助于降低HC的發(fā)生。相信隨著我國義務(wù)獻(xiàn)血法的頒布和 實施，將會有效地控制輸血后HC的發(fā)生。雷秉鈞(華西醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院， 四川 成都610041)張再偉(山東濟(jì)寧醫(yī) 學(xué)院附屬醫(yī)院， 山東 濟(jì)寧272129)王錦蓉(華西醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院， 四川 成都610041)趙連三(華西醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院， 四川 成都610041)范宗華(華西醫(yī)科大學(xué)流行病學(xué)教研室， 四川 成都610041)參考文獻(xiàn)：1雷秉鈞，付希賢，胡德昌，等. 輸血后丙肝的前瞻性研究J . 中華肝臟病雜志，1998，6(1)：26. 2李金星，張彤，李華，等. 合格庫血中HBVM、抗-HCV、HBVDNA及HCVRNA 的檢