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文檔簡介
1、第14章DNA的復(fù)制、修復(fù)與重組單元自測題1、DNA復(fù)制時(shí),前導(dǎo)鏈的合成是是,復(fù)制方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向2、在真核細(xì)胞的DNA切除修復(fù)過程中,受損傷的堿基可由和切除,并由和共同作用將缺失的堿基補(bǔ)上。3、在線粒體中的環(huán)狀基因組是通過合成方式復(fù)制。滾筒式復(fù)制的特點(diǎn)是由4、DNA復(fù)制和RNA的合成都需要酶,在DNA復(fù)制中該酶的作用。5、DNA聚合酶I是一個(gè)多功能酶,其主要的功能是,和作用。6、DNA聚合酶W的活性使之具有功能,極大地提高了DNAM制的保真度。7、染色體中參與復(fù)制的活性區(qū)呈一Y型結(jié)構(gòu),稱為。8、在DNAM制和修復(fù)過程中修補(bǔ)DNA螺旋上缺口的酶稱為。9、如果DNA聚合酶出現(xiàn)錯(cuò)誤,會(huì)產(chǎn)生一
2、對(duì)錯(cuò)配堿基,這種錯(cuò)誤可以被一個(gè)通過甲基化作用來區(qū)別新鏈和舊鏈的特別系統(tǒng)進(jìn)行校正。10、可被看成一種可形成暫時(shí)單鏈缺口(I型)或暫時(shí)雙鏈缺口(口型)的可逆核酸酶。11、在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)了種DNA聚合酶。DNA修復(fù)時(shí)需要DNA聚合酶。12、在DNA修復(fù)過程中,需要第二種酶,,作用是話一DNA中相鄰的堿基起來。DNA聚合酶具有外切核酸酶的活性。有兩種外切核酸酶活性,它們分別從一和降解DNADNA聚合酶只有外切核酸酶活性。73途徑可以切去任何造成DNA雙螺旋大片段改變的DNAjg傷。14、在中,基因交換發(fā)生在同源DNA序列間,最常見是發(fā)生在同一染色體的兩個(gè)拷貝間。15、在交換區(qū)域,一個(gè)DN粉子的一條鏈
3、與另一個(gè)DN砌子的一條鏈相互配對(duì),在兩個(gè)螺旋間形成一個(gè)。16、大腸桿菌的染色體配對(duì)需要;它與單鏈DNA吉合并使同源雙鏈DNAf之配對(duì)。17、一般性重組的主要中間體是,也用它的發(fā)現(xiàn)者命名為。18、位點(diǎn)特異性重組發(fā)生在兩條DNA的特異位點(diǎn)上,它又常叫做。位點(diǎn)特異性重組不需要蛋白質(zhì)的參與。20、轉(zhuǎn)座作用既不依靠轉(zhuǎn)座成分和插入?yún)^(qū)段序列的,又不需要。21、利用自己的位點(diǎn)專一重組酶把自己從寄主基因組中的一個(gè)地方轉(zhuǎn)移到另一地方的遺傳元件叫22、由于轉(zhuǎn)座作用總是伴隨著轉(zhuǎn)座成分的復(fù)制,故又稱為。(三)單項(xiàng)選擇1、在DNA復(fù)制過程中需要(1)DNA聚合酶W;(2)解鏈蛋白;(3)DNA聚合酶I;(4)以DNA為模
4、板的RNA聚合酶;(5)DNA連接酶。這些酶作用的正確順序是:()A2-4-1-3-5B4-3-1-2-5C2-3-4-1-5D4-2-1-3-52、4)X174感染寄主后:()A先形成雙鏈環(huán)狀DNA,然后再以滾筒式進(jìn)行復(fù)制。B直接用原來的單鏈環(huán)狀DNA為模板以滾筒式進(jìn)行復(fù)制。C先形成雙鏈環(huán)狀DNA,然后再以定點(diǎn)雙向的方式進(jìn)行復(fù)制。D直接用原來的單鏈環(huán)狀DNA,以滾筒式進(jìn)行復(fù)制。3、在E.coli細(xì)胞中DNA聚合酶I的作用主要是:()ADNA復(fù)制BE.coliDNA合成的起始C切除RNA引物D崗崎片段的連接4、5一漠尿嗑咤是經(jīng)常使用的誘變劑,它的作用是:()A在DNA復(fù)制時(shí),可引入額外的堿基。
5、B取代胸腺嗑咤到新合成的DNA分子中,在新鏈DNA復(fù)制時(shí)產(chǎn)生錯(cuò)配堿基C使腺嗯吟、鳥嗯吟和胞嗑咤脫氨。D摻人RNA導(dǎo)致密碼子錯(cuò)位。5、小白鼠的基因組比E.coli的基因組長600多倍,但是復(fù)制所需要的時(shí)間僅長10倍,因?yàn)椋海ǎ〢染色質(zhì)蛋白加速小白鼠DNA的復(fù)制。B在細(xì)胞中小白鼠基因組不全部復(fù)制。C小白鼠DNA聚合酶合成新鏈的速度比E.coliDNA聚合酶快60倍。(一)名詞解釋1、復(fù)制2、半保留復(fù)制5、岡崎片段6、光復(fù)活9、DNA突變10、同源重組(二)填空題3、前導(dǎo)鏈與滯后鏈7、切除修復(fù)11、特異位點(diǎn)重組4、半不連續(xù)復(fù)制8、重組修復(fù)12、轉(zhuǎn)座因子的,復(fù)制方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向,后隨鏈的合成19
6、、入噬菌體DNA過其位點(diǎn)和大腸桿菌DNA的位點(diǎn)之間的位點(diǎn)特異性重組而實(shí)現(xiàn)整合過程。D小白鼠基因組含有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn),E.coli的基因組只含有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)6、細(xì)菌DNA復(fù)制過程中不需要:()A一小段RNA作引物BDNA片段作模板C脫氧三磷酸核昔酸D限制性內(nèi)切酶的活性7、DNA復(fù)制的精確性遠(yuǎn)高于RNA的轉(zhuǎn)錄,這是因?yàn)椋海ǎ〢新合成的DNA鏈與模板鏈形成了雙螺旋結(jié)構(gòu),而RNA則不能BDNA聚合酶有3/-5的外切酶活力,而RNA聚合酶無相應(yīng)活力C脫氧核糖核昔酸之間的氫鍵配對(duì)精確性高于脫氧核糖核昔酸與核糖核普酸間的配對(duì)DDNA聚合酶有5/-3的外切酶活力,而RNA聚合酶無相應(yīng)活力8、大腸桿菌DNA聚合酶
7、I經(jīng)枯草桿菌蛋白酶處理得到兩個(gè)片段,大片段叫作Klenow片段,失去了()A聚合酶活性B5/-3外切酶活性C3/-5外切酶活性9、端粒酶是一種()A限制性內(nèi)切酶B反轉(zhuǎn)錄酶CRNA聚合酶D肽酰轉(zhuǎn)移酶10、大腸桿菌中主要行使復(fù)制功能的酶是()ADNA聚合酶IBDNA聚合酶UCDNA聚合酶WDKlenow酶11、既有內(nèi)切酶活力,又有連接酶活力是()A大腸桿菌聚合酶UB連接酶C拓?fù)洚悩?gòu)酶DDNA連接酶12、需要以RNA為引物的是()A復(fù)制B轉(zhuǎn)錄C翻譯DRNA復(fù)制13、復(fù)制過程中不需要的成分是()A弓I物BdUTPCdATPDdCTP14、在原核生物復(fù)制子中以下哪種酶除去RNA引物并加入脫氧核糖核普酸?
8、()ADNA聚合酶WBDNA聚合酶UCDNA聚合酶IDDNA連接酶15、一種突變細(xì)菌從群落形態(tài)學(xué)(即表型)不能與其野生型相區(qū)別,這一突變可能是:()A一個(gè)點(diǎn)突變B一個(gè)無義突變或錯(cuò)義突變C密碼子第三個(gè)堿基的替換DA和C16、一個(gè)轉(zhuǎn)座子的準(zhǔn)確切除:()A切除轉(zhuǎn)座子和兩個(gè)靶序列B恢復(fù)靶DNAiU它插入前的序列C比不準(zhǔn)確切除更經(jīng)常發(fā)生17、RecA蛋白質(zhì)在遺傳重組中的主要作用是:()A促進(jìn)DNA分子的同源聯(lián)會(huì)和DN砌子之間的單鏈交換B將單鏈從雙螺旋DNA分子上解離C具有位點(diǎn)專一的單鏈切割的活性D促進(jìn)單鏈DNAK域的形成(四)多項(xiàng)選擇1、DNA聚合酶I具有A5-3外切酶活性B5C3-5外切酶活性D32、
9、需要DNA連接酶參與的反應(yīng)是ADNA復(fù)制BDNACDNA的體外重組DRNA3、下列關(guān)于岡崎片段的敘述正確的是A在原核細(xì)胞中岡崎片段含有1000-2000個(gè)核昔酸B岡崎片段只是在隨后鏈合成時(shí)才出現(xiàn)C岡崎片段是在RNA引物上合成的D岡崎片段的合成沿著模板鏈的5-3方向進(jìn)行4、DNA復(fù)制的特點(diǎn)是A半保留復(fù)制B一般是定點(diǎn)開始,雙向等速進(jìn)行C半不連續(xù)復(fù)制D新鏈的延長方向是5-35、下列特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)復(fù)制起始位點(diǎn)都共有的是:A起始位點(diǎn)是包括多個(gè)短重復(fù)序列的獨(dú)特DNA片段B起始位點(diǎn)是形成穩(wěn)定二級(jí)結(jié)構(gòu)的回文序列C多聚體DNA吉合蛋白專一性識(shí)別這些短的重復(fù)序列-3聚合酶活性-5聚合酶活性
10、損傷修復(fù)的轉(zhuǎn)錄D起始位點(diǎn)旁側(cè)序列是A-T豐富的,能使DNA螺旋解開6、滾環(huán)復(fù)制:A是細(xì)菌DNA的主要復(fù)制方式B可以使復(fù)制子大量擴(kuò)增C產(chǎn)生的復(fù)制子總是雙鏈環(huán)狀拷貝D是噬菌體DNA在細(xì)菌中最通常的一種復(fù)制方式7、DNA的復(fù)制:()A包括一個(gè)雙螺旋中兩條子鏈的合成B遵循新的子鏈與其親本鏈相配對(duì)的原則C依賴于物種特異的遺傳密碼D是堿基錯(cuò)配最主要的來源8、關(guān)于DNA的修復(fù),下列描述中,哪些是不正確的?()AUV照射可以引起嗑咤堿基的交聯(lián)BDNA聚合酶W可以修復(fù)單鏈的斷裂C雙鏈的斷裂可以被DNA聚合酶II修復(fù)DDNA的修復(fù)過程中需要DNA連接酶9、RecA蛋白與重組有關(guān)的活性有:()A單鏈DNA吉合活性B
11、雙鏈DNA吉合活性CNTP酶活性D促進(jìn)互補(bǔ)單鏈復(fù)性的能力10、RecBCDg白質(zhì)是一種多功能的酶,具有:()A依賴于ATP的單鏈和雙鏈外切酶的性質(zhì)B螺旋酶活性C序列特異性的單鏈內(nèi)切酶活性D聚合酶活性11、IS元件:()A全是相同的B具有轉(zhuǎn)座酶基因C是旁側(cè)重復(fù)序列D引起宿主DNA整合復(fù)制12、組成轉(zhuǎn)座子的旁側(cè)IS元件可以:()A同向B反向C兩個(gè)都有功能D兩個(gè)都沒有功能13、復(fù)制轉(zhuǎn)座:()A復(fù)制轉(zhuǎn)座子,即在原位點(diǎn)上留有一個(gè)拷貝B移動(dòng)元件到一個(gè)新的位點(diǎn),在原位點(diǎn)上不留元件C要求有轉(zhuǎn)座酶D要求解離酶(拆分酶)14、非復(fù)制轉(zhuǎn)座:()A復(fù)制轉(zhuǎn)座子,即在原位點(diǎn)上留有一個(gè)拷貝B移動(dòng)元件到一個(gè)新的位點(diǎn),在原位點(diǎn)
12、上不留元件C要求有轉(zhuǎn)座酶D要求解離酶15、玉米轉(zhuǎn)座因子:()A在結(jié)構(gòu)和功能上與細(xì)菌轉(zhuǎn)座子是相似的B可能引起染色體結(jié)構(gòu)的許多變化C可能引起單個(gè)玉米顆粒的表型發(fā)生許多變化D在植物發(fā)育期間的不同時(shí)間都有活性16、DS元件:()A是自主轉(zhuǎn)座元件B不具備編碼轉(zhuǎn)座酶的功能C與人元件相似D內(nèi)部有缺失(五)是非題(正確的打“,”,錯(cuò)誤的打:“X”)1、DNA的復(fù)制方式有多種,通常是雙向進(jìn)行的,但滾動(dòng)環(huán)式復(fù)制卻是單向的。()2、所有核酸的復(fù)制過程中,新鏈的形成都必須遵循堿基配對(duì)的原則。()3、雙鏈DNA經(jīng)過一次復(fù)制形成的子代DNA分子中,有些不含親代核昔酸鏈。()4、原核細(xì)胞的每一個(gè)染色體只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn),而真
13、核細(xì)胞的每一個(gè)染色體有許多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)()5、在細(xì)胞中,DNA鏈延長的速度隨細(xì)胞的培養(yǎng)條件而改變。()6、所有核酸合成時(shí),新鏈的延長方向都是從5-3。()7、抑制RNA合成酶的抑制J劑不影響DNA的合成。()8、在E.coli細(xì)胞和真核細(xì)胞中都是由DNA聚合酶I切除RNA引物。()9、缺失DNA聚合酶I的E.coli突變株,可以正常地進(jìn)行染色體復(fù)制和DNA修復(fù)合成()10、DNA重組修復(fù)可將DNA損傷部位徹底修復(fù)。()11、大腸桿菌DNA聚合酶I是由Kornberg發(fā)現(xiàn)的,大腸桿菌DNA的復(fù)制主要依靠這個(gè)酶的酶促聚合作用。()12、生物體中遺傳信息的流動(dòng)方向只能由DNARNA絕不能由RNADNA
14、()13、DNAM制時(shí),先導(dǎo)鏈?zhǔn)沁B續(xù)合成,而后隨鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)合成的。()14、DNA半不連續(xù)復(fù)制是指復(fù)制時(shí)一條鏈的合成方向是5-3,而另一條鏈方向?yàn)?-5。()15、真核細(xì)胞的DNA聚合酶都不具有核酸外切酶的活性。()16、細(xì)菌DNA復(fù)制是在起始階段進(jìn)行控制的,一旦復(fù)制開始,它即進(jìn)行下去,直到整個(gè)復(fù)制子完成復(fù)制。()17、DNAK合酶I能在DNA1的3/端發(fā)生焦磷酸解。()18、DNA的5-3合成意味著當(dāng)在裸露3-OH的基團(tuán)中添加dNTP時(shí),除去無機(jī)焦磷酸DNA鏈就會(huì)伸長。()19、大腸桿菌DNA聚合酶缺失3-5校正外切核酸酶活性時(shí)會(huì)降低DN蛤成的速率但不影響它的可靠性。()20、DNA的復(fù)制需
15、要DNA聚合酶和RNA聚合酶。()21、復(fù)制叉上的單鏈結(jié)合蛋白通過覆蓋堿基使DNA的兩條鏈分開,這樣就避免了堿基配對(duì)。()22、只要子鏈和親本鏈中的一條或兩條被甲基化,大腸桿菌中的錯(cuò)配校正系統(tǒng)就可以把它們區(qū)別開來,但如果兩條鏈都沒有甲基化則不行。()23、大腸桿菌、酵母和真核生物病毒DNA的新一輪復(fù)制是在一個(gè)特定的位點(diǎn)起始的,這個(gè)位點(diǎn)由幾個(gè)短的序列構(gòu)成,可用于結(jié)合起始蛋白復(fù)合體。()24、DNA修復(fù)機(jī)制有很多種,但所有這些機(jī)制都依賴于二倍體染色體上兩套遺傳信息的存在。()25、一般性重組需要交換的雙方都有一長段同源DNA序列,而位點(diǎn)專一性重組僅需要短而轉(zhuǎn)移的核音酸序列,某些情況下,只需要交換雙
16、方的一方具有該序列即可。()26、RecA蛋白同時(shí)具有位點(diǎn)專一的單鏈切割的活性和將單鏈從雙螺旋DNA分子上解離的解旋酶的功能,后一功能依賴于ATR()27、一般性重組包括DNA片段的物理交換,該過程涉及DNA骨架上磷酸二酯鍵的斷裂和重新形成。()28、RecA蛋白同時(shí)與單鏈、雙鏈DNA吉合,因此它能催化它們之間的聯(lián)會(huì)。()29、基因轉(zhuǎn)換(geneconversion)是真菌類偶然改變性別的方式;正常情況下,一次接合產(chǎn)生等量的雄性和雌性抱子,但偶然也會(huì)出現(xiàn)1:3或3:1的比例。()30、遺傳重組中,處于異源雙鏈區(qū)兩側(cè)的基因在形成重組DN砌子的拆分中可以發(fā)生交互,也可以不發(fā)生交互重組。()31、H
17、olliday中間體無論以何種方式進(jìn)行拆分,都會(huì)在兩條DNA分子上留下一段異源雙鏈區(qū)。()32、轉(zhuǎn)座要求供體和受體位點(diǎn)之間有同源性。()33、TnA家族的轉(zhuǎn)座子通常轉(zhuǎn)移三種基因:轉(zhuǎn)座酶、拆分酶和氨荒抗性基因。()(六)問答與計(jì)算1、如何用實(shí)驗(yàn)證實(shí)在復(fù)制叉區(qū)域存在許多小片段(Okazaki片段)?2、組織培養(yǎng)產(chǎn)生的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的細(xì)胞中,每個(gè)DNA長1.2m,這些細(xì)胞生長周期中的S期長達(dá)5小時(shí),如果這種細(xì)胞DNA延長的速度與E.coli相同,即16“m/min,那么染色體復(fù)制時(shí)需要有多少復(fù)制叉同時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)?3、如果E.coli的DNA長度為1100Mm,復(fù)制一代大約需要40分鐘通過一個(gè)復(fù)制叉完成,求
18、復(fù)制體的鏈增長速度和DNA螺旋的旋轉(zhuǎn)速度是多少(以每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)表示)?4、怎樣確定DNA復(fù)制是雙向復(fù)制還是單向復(fù)制?5、解釋DNA的半保留復(fù)制與半不連續(xù)復(fù)制。6、DNA復(fù)制的高度準(zhǔn)確性是通過什么機(jī)制來實(shí)現(xiàn)的?7、DNA損傷的原因是什么?損傷的DNA是怎樣修復(fù)的?8、DNA聚合酶的一個(gè)特殊的特征是沒有起始一條多核昔酸鏈合成的能力,它們僅能延伸一個(gè)已存在的鏈。不連續(xù)合成的DNA鏈的新生片段是怎樣起始的?9、描述Meselson-Stahl試驗(yàn),說明這一實(shí)驗(yàn)加深我們對(duì)遺傳理解的重要性。10、IS元件整合到靶位點(diǎn)時(shí)會(huì)發(fā)生什么?11、列出一個(gè)轉(zhuǎn)座子插入到一個(gè)新位點(diǎn)所要求的步驟。12、(1)在一組非全同等
19、位基因中,基因轉(zhuǎn)換具有極性梯度的效應(yīng)。(2)A、aa2、a3組成非全同等位基因,研究發(fā)現(xiàn)它們發(fā)生基因轉(zhuǎn)換的頻率為aa?a313、DNAt組有何生物學(xué)意義?六、參考答案(一)名詞解釋1、復(fù)制:親代雙鏈DNA的每一條鏈為摸板,按照堿基配對(duì)原則,合成出兩個(gè)相同核昔酸序列的子代DN砌子的過程2、半保留復(fù)制:DNAM制過程中,新合成的DNAZ螺旋,一條鏈來自親代DNA另一條是新合成的,這種復(fù)制方式稱半保留復(fù)制。3、前導(dǎo)鏈與滯后鏈:DNA復(fù)制時(shí),一條鏈的合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向一致,其合成是連續(xù)的,稱為前導(dǎo)鏈;另一條鏈的合成方向與復(fù)制叉移動(dòng)方向相反,其合成是不連續(xù)的,稱滯后鏈。4、半不連續(xù)復(fù)制:DNAM制
20、時(shí),前導(dǎo)鏈連續(xù)合成,滯后鏈不連續(xù)合成,這種方式稱半不連續(xù)復(fù)制。5、岡崎片段:1968年日本人岡崎發(fā)現(xiàn)以DNA5/-3/摸板合成新鏈時(shí),先形成一些1000核昔酸左右的DN砥片段,然后由連接酶連接成完整的子鏈。這些在DNAM制過程中形成的DNA片段稱岡崎片段。6、光復(fù)活:由可見光(300-600nm)激活光復(fù)活酶,分解由于紫外線引起的DNA損傷形成的嗑咤二聚體,使受傷細(xì)胞恢復(fù)原狀的過程。7、切除修復(fù):又稱暗修復(fù)。指在一系列酶的作用下,將被損傷的部位切除,然后重新合成一段DNA1,以填補(bǔ)缺口的DNA音修復(fù)過程。8、重組修復(fù):復(fù)制時(shí)跳過DNA的損傷部位先復(fù)制,使子代鏈在損傷的對(duì)應(yīng)處留下缺口,然后從完整
21、的母鏈上將相應(yīng)的核音酸序列片段移至子鏈缺口處,最后用再合成的序列來彌補(bǔ)母鏈的空缺。這種通過遺傳重組修復(fù)DN砸傷的過程,稱為重組修復(fù)。9、DNA突變:指DNA的堿基順序發(fā)生突然而穩(wěn)定的變化。10、同源重組:由兩條同源區(qū)的DN砌子,通過配對(duì)、鏈的斷裂和再連接,而產(chǎn)生片段交換的過程。11、特異位點(diǎn)重組:發(fā)生在特定位點(diǎn)內(nèi)的重組,有特異的酶(重組酶)參與作用。12、轉(zhuǎn)座因子:是一種可以由染色體的一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另外位置的遺傳因子。(二)填空題1、連續(xù)相同不連續(xù)相反2、核酸內(nèi)切酶核酸外切酶DNA聚合酶連接酶3、D-環(huán)式環(huán)狀親代雙鏈產(chǎn)生線形子鏈4、RNA聚合酶合成RNA引物5、5,-3聚合酶3/-5核酸外切酶
22、5/-3核酸外切酶6、3/-5核酸外切酶校對(duì)7、DNAM制叉8、DN陲接酶9、錯(cuò)配校正(錯(cuò)配修復(fù))10、DNAffi撲異構(gòu)酶11、5I12、DN陲接酶連接原核生物5-3/3/-5/U3/-512、切除修復(fù)13、點(diǎn)密碼子同義錯(cuò)義14、一般性重組15、異源雙鏈連接(搖擺連接)16、RecA蛋白17、交叉鏈互換Holliday連接18、保守重組RecA蛋白19、attPattB20、同源性RecA蛋白21、轉(zhuǎn)座元件22、復(fù)制重組(三)單項(xiàng)選擇1A2A3C4B5D6D7B8B9B10C11C12A13B14C15D16B17A(四)多項(xiàng)選擇1 ABC2ABC3ABC4ABCD5ACD6BD7BD8BC
23、9ABCD10ABC11BD12ABC13ACD14BC15ABCD16BCD(五)是非題1,2,3X4V5X6V7X8X9X10X11X12X13V14X15X16V17V18V19X20V21X22X23V24X25V26X27V28V29X30,31V32X33V(六)問答與計(jì)算1、用帶標(biāo)記的脫氧三磷酸核昔酸作為合成DNA的原料,經(jīng)過一段時(shí)間后,加入堿溶液使合成停止,檢查發(fā)現(xiàn)標(biāo)記出現(xiàn)在小片段DNA上,追蹤標(biāo)記發(fā)現(xiàn)帶標(biāo)記的DNA分子量相同而且在細(xì)胞DNA中占較多的比例。2、每個(gè)復(fù)制叉5小時(shí)復(fù)制DNA片段的長度為:16Rm/minX560min=4800Rm,每個(gè)細(xì)胞內(nèi)DNA長1.2m=1.
24、2X106gm,染色體復(fù)制時(shí)應(yīng)當(dāng)有:1.2106gm+4800m:250個(gè)復(fù)制叉3、按照Watson-Crick模型,10個(gè)核昔酸對(duì)形成一個(gè)螺旋長3.4nm,所以E.coliDNA應(yīng)含有:1100Mm+(3.410一3”m)=3.24X105個(gè)螺旋,即3.24106個(gè)核昔酸對(duì)。復(fù)制體的鏈增長速度為:3.24X106核昔酸對(duì)/40min=8100核昔酸對(duì)/min正在復(fù)制的DNA分子旋轉(zhuǎn)速度為:810轉(zhuǎn)/min。4、通過放射自顯影的方法確定。在復(fù)制開始時(shí)將E.coli放在含低放射性強(qiáng)度3H-胸腺嗑咤核普酸的培養(yǎng)基中生長,數(shù)分鐘后,移置含高放射性強(qiáng)度3H一胸腺嗑咤核普酸的培養(yǎng)基中生長;經(jīng)過一段時(shí)間后
25、,進(jìn)行放射自顯影。在圖像上看到,若復(fù)制起始區(qū)的放射性標(biāo)記密度低,后續(xù)的合成區(qū)放射性標(biāo)記密度高,則清楚地表明DNA的復(fù)制為定點(diǎn)雙向,如果起始部位既有高密度也有低密度,就表明DNA的復(fù)制為定點(diǎn)單向。研究證明多數(shù)細(xì)胞的DNA的復(fù)制為定點(diǎn)雙向。但也有一些例外,如:噬菌體P2、質(zhì)體和真核細(xì)胞的線粒體等DNA為單向復(fù)制。5、DNAM制過程中,子代DNA勺一條鏈來自親代DNA另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?,稱“半保留復(fù)制”。因DNA1合酶只能以5/-3/方向延伸DNA鏈,所以以復(fù)制叉移動(dòng)方向?yàn)榛鶞?zhǔn),先導(dǎo)鏈可以連續(xù)合成,而后隨鏈則只能不連續(xù)地合成岡崎片段,然后連接成DNA鏈。這樣,復(fù)制時(shí)一條DNA1合成是連續(xù)的,另一條鏈
26、則是不連續(xù)的,稱為“半不連續(xù)復(fù)制”。6、DNA復(fù)制的高度準(zhǔn)確性通過下列幾種機(jī)制來實(shí)現(xiàn):(1)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。核酸的堿基部分處于疏水環(huán)境中,不會(huì)受到活性水溶性物質(zhì)的攻擊,從而保證了遺傳信息的穩(wěn)定;dNTP比NTP還原性更高,保證了其聚合物與組蛋白等物質(zhì)的結(jié)合,而使DNA更穩(wěn)定,不易被Dnase降解。(2) dNTP與模板之間以A=T、G三C配對(duì),形成大量氫鍵,氫鍵的形成有方向性,并放出大量自由能來保證配對(duì)的準(zhǔn)確性。(3)DNA聚合酶有外切酶活性,對(duì)聚合中的錯(cuò)誤可及時(shí)校正。3/-5外切酶活性切除錯(cuò)配核昔酸,5/-3/外切酶活性對(duì)損傷的DNAWRNA引物進(jìn)行切除。(4)DNA的錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)能夠區(qū)分“新鏈”與“舊鏈”,將“新鏈”上的錯(cuò)配堿基切除7、造成DNA損傷的原因是一些理化因素,如紫外線、電離輻射和化
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