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文檔簡介
1、實驗內(nèi)容實驗一、顯微鏡的使用、組織切片的顯微觀察實驗二、犬骨骼的觀察、骨骼辨認(rèn)測試實驗三、血液的凝固實驗四、紅細(xì)胞的脆性試驗實驗五、蛙心活動觀察實驗六、紅細(xì)胞計數(shù)實驗七、反射弧分析及脊髓反射活動觀察實驗八、胃腸運動觀察和小腸吸收觀察 實驗一 顯微鏡的構(gòu)造、使用和保養(yǎng)實驗?zāi)康牧私怙@微鏡的基本構(gòu)造,掌握顯微鏡的使用方法和保養(yǎng)方法。材料設(shè)備顯微鏡、組織切片、擦鏡紙等。方法步驟(一)機械部分1、鏡筒2、物鏡轉(zhuǎn)換器3、鏡臂4、調(diào)焦器5、載物臺6、鏡柱7、鏡座(二)光學(xué)系統(tǒng)部分光鏡的光學(xué)系統(tǒng)主要包括物鏡、目鏡和照明裝置(反光鏡、聚光器和光圈等)。1、 目鏡:常見的有5X、10X和15X (X表示放大倍數(shù))
2、的目鏡,可根據(jù)不同的需要選擇使用, 最常使用的是10X目鏡。2、 物鏡:常用物鏡的放大倍數(shù)有10 X、40 X和100X等幾種。一般將 8X或10X的物鏡稱為低倍鏡(而將5 X以下的叫做放大鏡);將40 X或45 X的稱為1高倍鏡;將90 X或100 X的稱為油鏡(這種鏡頭在使用時需浸在鏡油中)圖 1-3 物鏡的性能參數(shù)及工作距離C 線為蓋玻片的的上表面, 10 物鏡的工作距離為7.63mm; 40 物鏡的工作距離為 0.198mm;10/0.25 、40/0.65 、100/1.25 表示鏡頭的放大倍數(shù)和數(shù)字孔徑。 160/0.17 表示鏡筒長度為 160mm, 蓋玻片厚度為 0.17mm。
3、3、聚光器:調(diào)節(jié)光線的強弱,升高聚光器可使光線增強,反之則光線變?nèi)酢?光圈能控制進入聚光器的光束大小的可變光闌。 以調(diào)節(jié)光線的強弱。 在光圈的下方常裝有濾光片 框,可放置不同顏色的濾光片。4、反光鏡:反光鏡有兩個面,一面為平面鏡,另一面為凹面鏡,凹面鏡有聚光作用,適于較弱 光和散射光下使用,光線較強時則選用平面鏡。二、光學(xué)顯微鏡的使用方法()準(zhǔn)備 將顯微鏡平穩(wěn)地放在身前的實驗桌上,略偏左,使鏡臂對著身體,鏡筒向前。(二)對光 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器, 使低倍鏡對準(zhǔn)通光孔, 轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器, 使低倍鏡前端距載物臺約 1-2 厘米的距離。 將光圈放大;讓左眼朝目鏡里注視,同時用手將反光鏡轉(zhuǎn)向光源;調(diào)節(jié)反光鏡,直
4、至從目鏡里看到一個白色明亮的圓形視野。(三)低倍鏡觀察 將玻片標(biāo)本放在載物臺上,使待檢查部分位于通光孔中心,用彈簧夾片壓住載玻片兩端。 兩眼從側(cè)面注視,將物鏡降至距標(biāo)本約0.5厘米時停止。 用左眼朝目鏡里觀察,同時轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,緩慢上升鏡筒,直到視野中岀現(xiàn)物象,再用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)。(四)高倍鏡觀察 先將低倍鏡下找到所需觀察的物象,把要進一步放大的部位移到視野正中央。 轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使高倍鏡到位。調(diào)節(jié)反光鏡和光圈,使光照明亮,再微微調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)器,直到物 象清晰。(五)顯微鏡復(fù)原用擦鏡紙揩凈目鏡和物鏡,用清潔紗布揩凈鏡體。再轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,把兩個物鏡偏到兩旁,并將鏡筒下降,然后將顯微鏡平穩(wěn)地放入鏡箱內(nèi)保存
5、。實驗二 動物主要組織的顯微鏡識別 實驗?zāi)康?掌握單層扁平上皮、單層柱狀上皮、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨骼肌、平滑肌、神經(jīng)元的 結(jié)構(gòu)特點。 材料設(shè)備 顯微鏡、單層扁平上皮、單層柱狀上皮、單層立方上皮、疏松結(jié)締組織、骨骼肌、平滑肌、神經(jīng) 組織切片及相關(guān)的圖。 方法步驟 1、取鏡與放置 移動顯微鏡時,要一手拿鏡臂,一手托鏡座,將顯微鏡放置在前方桌面上。2、打開光源,上升聚光鏡,開大孔徑光闌。3、觀察 將被檢標(biāo)本置于載物臺上,用壓片夾夾住 , 旋轉(zhuǎn)最低倍數(shù)物鏡觀察。 調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋,使載物臺緩緩上升,直至物鏡鏡頭接近標(biāo)本。這時,一邊使用目鏡觀察,一邊 調(diào)節(jié)粗調(diào)焦螺旋使載物臺下降,直至視野中看到物
6、像為止。移動載片位置, 使物象處于視野的中心, 此時再調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺旋以增加物象的清晰度, 可以調(diào)節(jié) 聚光鏡和孔徑光闌,使光線強弱適中,以便于觀察。轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,換用高倍鏡頭。用細(xì)調(diào)焦螺旋調(diào)節(jié),換用高倍鏡后, 可調(diào)節(jié)聚光鏡和孔徑光闌 以增加亮度。觀察更細(xì)微結(jié)構(gòu)必需使用油鏡時, 則在制片上滴一滴香柏油。 油鏡使用完后, 要及時地用蘸有乙 醚的擦鏡紙把油鏡鏡頭擦拭干凈。4. 收顯微鏡 關(guān)閉光源;下降聚光鏡;關(guān)閉孔徑光闌;轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,使之處于最低倍數(shù)物鏡下。 顯微鏡保持清潔。顯微鏡的光學(xué)部分只能用專門的擦鏡紙擦拭。按實驗室的要求,做好顯微鏡的使用記錄等。 實驗結(jié)果 1復(fù)層上皮組織 2平滑肌3.
7、神經(jīng)組織4. 心肌切片5. 硬骨組織6. 軟骨組織實驗三 犬全身主要骨、關(guān)節(jié)、骨性標(biāo)志的識別 實驗?zāi)康?在犬骨骼標(biāo)本上識別各部位骨骼及骨性標(biāo)志。 材料設(shè)備 犬骨骼標(biāo)本。 方法步驟 1 脊柱骨的組成:頸椎、胸椎、腰椎、薦椎、尾椎的形態(tài)與連結(jié)。2 胸廓的組成:胸椎、肋骨和胸骨。3 骨盆腔構(gòu)造:背側(cè)薦骨、側(cè)面髖骨、后側(cè)坐骨、腹側(cè)恥骨組成。4 四肢骨組成及分布:骨骼名稱、形態(tài)、關(guān)節(jié)名稱、關(guān)節(jié)角度。5 骨性標(biāo)志:肩胛岡、大結(jié)節(jié)、髖結(jié)節(jié)、大轉(zhuǎn)子、坐骨結(jié)節(jié)。 實驗結(jié)果 繪制犬全身主要骨、關(guān)節(jié)和骨性標(biāo)志的圖示。 技能考核 在標(biāo)本和活體上識別主要骨、關(guān)節(jié)及骨性標(biāo)志。*骨骼辨認(rèn)測試實驗三 血液凝固 實驗?zāi)康?以血
8、液凝固時間作為指標(biāo),了解對血液凝固影響的因素,加深對生理止血過程的理解。 實驗原理 血液凝固是一個酶的有限水解激活過程,可分為三個環(huán)節(jié):(1)凝血酶原激活物的形成; ( 2)凝血酶原激活為凝血酶; ( 3)纖維蛋白的形成。在此過程中有多種凝血因子和Ca 離子的參與。根據(jù)凝血過程起動時激活因子來源不同,可將血液凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。 內(nèi)源性激活途徑是指參與血液凝固的所有凝血因子在血漿中, 外源性激活途徑是指受損的組織中 的組織因子進入血管后,與血管內(nèi)的凝血因子共同作用而啟動的激活過程。 實驗藥品和器材 生理鹽水,液狀石蠟、草酸鹽、檸檬酸鹽、肝素( 8 U/ml )。注射器,試管
9、 6 支,小燒杯 2 個, 試管架,竹簽 1 束 (或細(xì)試管刷 ),秒表。 實驗方法與步驟 1. 采血(動物不限) 。2. 準(zhǔn)備試管。試管 1不加任何處理(對照管)試管 2用液狀石蠟潤滑整個試管內(nèi)表面試管 3放少許脫脂棉試管4加草酸鉀12 ml試管5加檸檬酸鹽12 ml3. 每管加入血液 1-2 ml 。將多余的血盛于小燒杯中,并不斷用竹簽攪動直至纖維蛋白形成。4. 記錄凝血時間每個試管加血1-2 ml后,即刻開始計時,每隔壁 15 s傾斜一次,觀察血液是否凝固,至血液成為凝膠狀不再流動為止,記錄所經(jīng)歷的時間。4、5號試管加入血液后,用拇指蓋住試管口將試管顛倒兩次,使血液與藥物混合。5. 如果
10、加草酸鉀和檸檬酸鹽的試管不出現(xiàn)血凝,可再向兩管內(nèi)分別加入 60.025 mol?L-1的CaCI溶液23滴,觀察血液是否發(fā)生凝固 ? 2注意事項1. 采血的過程盡量要快,以減少計時的誤差。對比實驗的采血時間要緊接著進行。2. 判斷凝血的標(biāo)準(zhǔn)要力求一致。一般以傾斜試管達(dá) 45 度時,試管內(nèi)血液不見流動為準(zhǔn)。3. 每支試管口徑大小及采血量要相對一致,不可相差太大。 實驗結(jié)果 將實驗結(jié)果及各種條件下的凝血時間,并進行比較、分析解釋產(chǎn)生差異的原因。 思考題 1 .血液凝固的機制及影響血凝的外界因素?2. 為什么有幾管不凝?為什么有幾管比對照組管凝血時間長?為什么有幾管比對照管凝血時 間短?實驗四 紅細(xì)
11、胞脆性的測定 實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞滲透脆性的方法, 理解細(xì)胞外液滲透張力對維持細(xì)胞正常形態(tài)與功能的重要性。 實驗原理 正常紅細(xì)懸浮于等滲的血漿中,若置于高滲溶液內(nèi),則紅細(xì)胞會因失水而皺縮;反之,置于低滲溶液內(nèi),則水進入紅細(xì)胞,使紅細(xì)胞膨脹。如環(huán)境滲透壓繼續(xù)下降,紅細(xì)胞會因繼續(xù)膨脹而破裂,釋放血紅蛋白,稱之為溶血。紅細(xì)胞膜對低滲溶液具有一定的抵抗力,這一特征稱為紅細(xì)胞 的滲透脆性。 紅細(xì)胞膜對低滲溶液的抵抗力越大, 紅細(xì)胞在低滲溶液中越不容易發(fā)生溶血, 即紅 細(xì)胞滲透脆性越小。 將血液滴入不同的低滲溶液中, 可檢查紅細(xì)胞膜對于低滲溶液抵抗力的大小。 開始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的低滲溶液濃度, 為該血液
12、紅細(xì)胞的最小抵抗力; 出現(xiàn)完全溶血時的低滲溶液 濃度,則為該血液紅細(xì)胞的最大抵抗力。生理學(xué)上將與血漿滲透壓相等的溶液稱為等滲溶液;而將能維持紅細(xì)胞正常形態(tài)、 大小和懸浮于其中的溶液稱為等張溶液。等滲溶液不一定是等張溶液(如1.99%的尿素溶液),但等張溶液一定是等滲溶液。實驗藥品1%肝素,1%氯化鈉溶液,2%氯化鈉溶液,蒸餾水。儀器與器材10 ml小試管,試管架,滴管, 1 ml移液管,2 ml移液管。實驗方法與步驟1. 溶液配制:取11個小試管,配制岀 11種不同濃度的氯化鈉低滲溶液。 不同濃度的NaCL溶液配制1 2 3 4 試管號 試液 1%NaCl/ml 1.21.1 0.8 0.9
13、/ml 蒸餾水 0.55 0.6 NaCl 濃 度1.4 1.30.6 0.7 0.70.650.50.42.制備抗凝血:不同動物采血方法各有所異,但多采用末梢血,將血滴在有1%肝素(或檸檬酸鹽)的表面皿上,混勻(1%肝素0.1 ml可抗10 ml血)。83. 加抗凝血:用滴管吸取抗凝血,在各試管中各加一滴,輕輕搖勻,靜置0.51 ho4. 觀察結(jié)果:根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同,判斷紅細(xì)胞脆性。 未發(fā)生溶血的試管:液體下層為大量紅細(xì)胞沉淀,上層為無色透明,表明無紅細(xì)胞破裂。 部分紅細(xì)胞溶血的試管:液體下層為紅細(xì)胞沉淀,上層岀現(xiàn)透明淡紅(淡紅棕)色,表明部 分紅細(xì)胞已經(jīng)破裂,稱為不完全溶血
14、。 紅細(xì)胞全部溶血的試管:液體完全變成透明紅色,管底無紅細(xì)胞沉淀,表明紅細(xì)胞完全破裂, 稱為完全溶血。實驗結(jié)果報告該實驗動物紅細(xì)胞的最小滲透抵抗力和最大滲透抵抗力。將全班的結(jié)果加以統(tǒng)計,并用平均值士標(biāo)準(zhǔn)差表示。討論如何通過滲透脆性特征判斷機體的健康狀況。注意事項小試管要干燥,加抗凝血的量要一致,只加一滴?;靹驎r,輕輕傾倒12次,減少機械震動,避免人為溶血。抗凝劑最好為肝素,其他抗凝劑可改變?nèi)芤旱臐B透性。配制不同濃度的 NaCI溶液時應(yīng)力求準(zhǔn)確、無誤。NaCI溶液的濃度梯度可根據(jù)動物的實際情況適當(dāng)進行調(diào)整。思考題1. 紅細(xì)胞的形態(tài)與生理特征有何關(guān)系?2. 根據(jù)結(jié)果分析血漿晶體滲透壓保持相對穩(wěn)定的
15、生理學(xué)意義。3. 輸液時應(yīng)注意的事項。實驗五蛙心活動觀察實驗?zāi)康挠^察滴加乙酰膽堿、腎上腺素對心臟運動的影響。實驗原理9心臟的特殊傳導(dǎo)系統(tǒng)具有自動節(jié)律性,但各部分的自動節(jié)律性高低不同。兩棲類動物的心臟起搏點是靜脈竇(哺乳動物的是竇房結(jié))。正常情況下,靜脈竇(竇房結(jié))的自律性最高,能自動產(chǎn) 生節(jié)律性興奮,并依次傳到心房、房室交界區(qū)、心室,引起整個心臟興奮和收縮,因此靜脈竇(竇房結(jié))是主導(dǎo)整個心臟興奮和搏動的正常部位,被稱為正常起搏點;其他部位的自律組織僅起著興奮傳導(dǎo)作用,故稱之為潛在起搏點。實驗材料蛙或蟾蜍。任氏液、1:10000腎上腺素、1: 10000乙酰膽堿。儀器與器械蛙板,蛙類常用手術(shù)器械
16、一套,蛙釘,玻璃分針,秒表,滴管。實驗方法與步驟1. 實驗的準(zhǔn)備(1)在體蛙心的制備取蛙一只,破壞腦、脊髓后背位固定于蛙板上,左手持鑷子提起胸骨后端的皮膚剪一小口,然后向左、右兩側(cè)鎖骨外側(cè)剪開皮膚。把游離的皮膚掀向頭端。再用鑷子,提起胸骨后方的腹肌,剪開一小口后,剪刀伸入胸腔(勿傷及心臟和血管),沿皮膚切口剪開胸壁,剪斷左右烏喙骨和鎖 骨,使創(chuàng)口呈一倒三角形,充分暴露心臟部位。持眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開心包膜,暴露心臟(圖5.4-1 )。.2. 實驗項目10(1)觀察心臟的結(jié)構(gòu)參照圖5.4-1識別蛙類心臟。自心臟腹面可觀察到心室、心房,動脈球和主動脈。用玻璃分針向前翻轉(zhuǎn)蛙心,暴露心臟背面
17、可觀察到靜脈竇和心房。記錄每分鐘的收縮次數(shù)(次min-1),注意它們的跳動次序(2)在靜脈竇上分別滴加1:10000腎上腺素2滴,記錄每分鐘心臟收縮次數(shù),滴加數(shù)滴任氏液,用吸水紙吸干。(3)再在靜脈竇上滴加 1 : 10000乙酰膽堿2滴,記錄每分鐘心臟收縮次數(shù),滴加數(shù)滴任氏液, 用吸水紙吸干。實驗結(jié)果記錄并分析各項結(jié)果。思考題1. 正常情況下,兩棲類動物(或哺乳類動物)的心臟起搏點是心臟的哪一部分?它為什么能控 制潛在起搏點的活動?2. 如何證明兩棲類心臟的起搏點是靜脈竇?11實驗六紅細(xì)胞計數(shù)實驗?zāi)康?學(xué)習(xí)、掌握應(yīng)用稀釋法計數(shù)紅細(xì)胞和白細(xì)胞的方法。實驗原理血液中血細(xì)胞數(shù)很多,無法直接計數(shù),需
18、要將血液稀釋到一定倍數(shù),然后再用血細(xì)胞計數(shù)板,在顯微鏡下計數(shù)一定容積的稀釋血液中的紅、白細(xì)胞數(shù)量,最后將之換算成每升血液中所含的紅、白細(xì) 胞數(shù)。常用的血細(xì)胞計數(shù)板是改良式牛鮑爾計數(shù)板),為優(yōu)質(zhì)厚玻璃制成。每塊計數(shù)板由 Neubauer (計數(shù)池的兩側(cè)各有一個支持堤,。(圖6.5-1)“H"型凹槽分為兩個同樣的計數(shù)池的1 mmmm寬各3.00,平均分成邊長為。比計數(shù)池高岀0.1mni十?dāng)?shù)池的長、3個大格中,位于四角的四個大方格是計9每個大格容積為 0.1mm。在個大格。9個中方格;位于中央的大方格用16數(shù)白細(xì)胞的區(qū)域,每個大方格又用單線分為個中方格是計數(shù)紅細(xì)胞和血小個中方格,其中位于正
19、中及四角的5雙線分成25。圖個小方格板的區(qū)域,每個中方格又用單線分為 16(6.5-2) 12動物種類不限。實驗對象酒精,乙醚,血細(xì)胞稀釋液。75%酉精,95%實驗藥品 蒸餾水,), 小試管,微量(血 Neubauer顯微鏡,血細(xì)胞記數(shù)板(改良 儀器器材ml移液管,玻璃棒, 刺血針,干棉球。紅蛋白)采血管,1 ml、5實驗方法和步驟采血與血液的稀釋:1.)4 ml20卩l(xiāng)血液,加至有紅細(xì)胞稀釋液(用微量(血紅蛋白)采血管吸倍(白細(xì)這樣使紅細(xì)胞稀釋了 200的試管中,吹打幾次,使稀釋液與血液混勻。倍)。胞稀釋20充池(布血)使蓋玻片平放在然后緩慢放下,將蓋玻片的一邊與計數(shù)池的縱線末端接觸,用微量
20、采血管或蘸有紅細(xì),計數(shù)室兩側(cè)的隆起上(這樣可趕走蓋玻片下的空氣)靠毛細(xì)管作用將紅細(xì)胞懸浮液充入計胞懸浮液的玻璃棒靠近蓋玻片的前方邊緣,分鐘,待細(xì)胞下沉后顯微鏡下計數(shù)。若計數(shù)池未被布滿5數(shù)池。室溫中平放 3 或過多以致使蓋玻片浮動,或弄到蓋玻片外面都需重新充池(布血)。計數(shù):2.或四5個中方格內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)。于高倍鏡下計數(shù)中間大方格內(nèi)四角及中央的如果細(xì)胞壓所示。周四個大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。計數(shù)視野的移動路線如圖6.5-3如果各中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)相差數(shù)左不數(shù)右原則進行。邊線,則按數(shù)上不數(shù)下,1320個以上(魚類紅細(xì)胞相對較少不應(yīng)多于10個),四周各大方格內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)相差8個以上,則說明血細(xì)胞分布不均勻
21、,需振蕩稀釋液,重新充池(布血)。3. 計算:.000 N 101=N 200 10 25 5-1=紅細(xì)胞數(shù)L- 個中方格內(nèi)數(shù)得的紅細(xì)胞數(shù);:表示5 N-1 :將五個中方格紅細(xì)胞數(shù)換算為一個大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù);25 5 l血液內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)。10:將一個大方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)換算為1卩200 :為血液稀釋倍數(shù)。注意事項,以免凝血。1、取血操作應(yīng)迅速 吸血和稀釋液的體積一定要準(zhǔn)確。,采血管中不得有氣泡,吸取血液時2、計數(shù)時,顯微鏡要放穩(wěn),載物臺應(yīng)置水平位,不得傾斜。一般在暗 光下計3數(shù)的效果較好。漂洗和蒸餾水漂洗,血細(xì)胞計數(shù)板只能用清水浸泡、血細(xì)胞計數(shù)板洗 滌4、然后以濾紙吸干。實驗結(jié)果用平均值并對全班的結(jié)
22、果加以統(tǒng)計,報告該實驗動物的紅細(xì)胞數(shù)和白細(xì)胞數(shù)。士標(biāo)準(zhǔn)差表示。思考題1.稀釋液裝入計數(shù)板后,為什么要靜止一段時間才開始計數(shù)?2. 顯微鏡載物臺為什么應(yīng)置于水平位,而不能傾斜?3. 分析影響計數(shù)準(zhǔn)確性的可能因素。反射弧分析及脊髓反射活動觀察實驗七 實驗?zāi)康耐ㄟ^對脊蛙的屈肌反射的分析,探討反射弧的完整性與反射活動的關(guān)系;1.以蛙的屈肌反射為指標(biāo),觀察脊髓反射中樞活動的某些基本特征,并分析2.它們產(chǎn)生可能的神經(jīng)機制。實驗原理較在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下,機體對刺激所產(chǎn)生的適應(yīng)反應(yīng)過程稱為反射。較簡單的反射只需復(fù)雜的反射需要由中樞神經(jīng)系統(tǒng)較高級的部位整合才能完成,僅保留脊髓將動物的高位中樞切除, 通過中樞
23、神經(jīng)系統(tǒng)較低級的部位就能完成。由于脊髓的動物稱為脊動物。此時動物產(chǎn)生的各種反射活動為單純的脊髓反射。便于觀察和分析反射過所以反射活動比較簡單, 已失去了高級中樞的正常調(diào)控,14程的某些特征。反射活動的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧。典型的反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳岀神經(jīng)和效應(yīng)器五個部分組成。 引起反射的首要條件是反射弧必須保持完整性。反射弧任何一個環(huán)節(jié)的解剖結(jié)構(gòu)或生理完整性一旦受到破壞,反射活動就無法實現(xiàn)。完成一個反射所需要的時間稱為反射時。 反射時除與刺激強度有關(guān)外, 反射時的長短與反射弧在 中樞交換神經(jīng)元的多少及有無中樞抑制存在有關(guān)。 由于中間神經(jīng)元連結(jié)的方式不同, 反射活動的 范圍和持續(xù)時
24、間,反射形成難易程度都不一樣。 實驗藥品與器材 硫酸溶液( 0.1%、0.3% 、0.5%、 1%)、1%可卡因或普魯卡因。蛙類手術(shù)器械、鐵支柱、玻 璃平皿、燒杯(500 ml或搪瓷杯)、小濾紙(約 1 cm x 1 cm )、紗布、秒表。 實驗方法與步騾 1. 標(biāo)本制備取一只蟾蜍, 用粗剪刀由兩側(cè)口裂剪去上方頭顱, 或用探針沿枕骨大孔刺入腦腔, 破壞腦髓, 制成脊蟾蜍。 將動物俯臥位固定在蛙板上, 于右側(cè)大腿背部縱行剪開皮膚, 在股二頭肌和半膜肌 之間的溝內(nèi)找到坐骨神經(jīng)干,在神經(jīng)干下穿一條細(xì)線備用。將脊蟾蜍懸掛在鐵支柱上。2. 實驗項目( 1 )脊髓反射的基本特征: 騷扒反射 將浸有 1%硫
25、酸溶液的小濾紙片貼在蟾蜍的下腹部,可見四肢向此處騷扒。之 后將蟾蜍浸入盛有清水的大燒杯中,洗掉硫酸濾紙片。 屈肌反射和反射時的測定:在平皿內(nèi)盛適量的 趾,浸入硫酸溶液中,同時按動秒表開始記錄時間, 該足趾浸入大燒杯水中浸洗數(shù)次, 然后用紗布擦干。 所經(jīng)歷的時間,稱為反射時。用上述方法重復(fù)三次,0.1%硫酸溶液,將蟾蜍一側(cè)后肢的一個腳 當(dāng)屈肌反射一出現(xiàn)立刻停止記時, 并立即將 此時秒表所示時間為從刺激開始到反射出現(xiàn) 注意每次浸入趾尖的深度要一致, 相鄰兩次實驗間隔至少要 23 s。三次所測時間的平均值即為此反射的反射時。再用不同的硫酸濃度測定 反射的反射時。2)反射弧的分析分別將左右后肢趾尖浸入
26、盛有1%硫酸的平皿內(nèi)(深入的范圍一致),雙后 15肢是否都有反應(yīng) ? 實驗完后 ,將動物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸, 用紗布擦干皮膚。 在左后肢趾關(guān)節(jié)上作一個環(huán)形皮膚切口, 將切口以下的皮膚全部剝除 (趾尖皮膚一定要剝除干凈),再用 1%硫酸溶液浸泡該趾尖,觀察該側(cè)后肢的反應(yīng)。實驗完后,將動物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸,用紗布擦干皮膚。 將浸有 1%硫酸溶液的小濾紙片貼在蛙的左后肢的皮膚上。 觀察后肢有何反應(yīng) ?待出現(xiàn)反應(yīng) 后,將動物浸于盛有清水的燒杯內(nèi)洗掉濾紙片和硫酸,用紗布擦干皮膚。 提起穿在右側(cè)坐骨神經(jīng)下的細(xì)線,剪斷坐骨神經(jīng),刺激右后肢趾,觀察有無反應(yīng)? 以探針搗毀蟾
27、蜍的脊髓后再重復(fù)上步驟,觀察有何反應(yīng)。 注意事項 1. 制備脊蛙時,顱腦離斷的部位要適當(dāng),太高因保留部分腦組織而可能出現(xiàn)自主活動,太低 又可能影響反射的產(chǎn)生。2. 用硫酸溶液或浸有硫酸的紙片處理蛙的皮膚后,應(yīng)迅速用自來水清洗,以清除皮膚上殘存 的硫酸,并用紗布擦干,以保護皮膚并防止沖淡硫酸溶液。3. 浸入硫酸溶液部位應(yīng)限于一個趾尖,每次浸泡范圍應(yīng)一致,切勿浸入太多。 實驗結(jié)果 1. 描述各項實驗結(jié)果,探討形成的機制。2. 說出有反射活動時的反射弧的組成。 思考題 1. 右側(cè)坐骨神經(jīng)被剪斷后,動物的反射活動發(fā)生了什么變化?這是損傷了反射弧的哪一部分?2. 剝?nèi)ブ宏P(guān)節(jié)以下皮膚后,不再出現(xiàn)原有的反射
28、活動,為什么?,反射時有可能增加 可能出現(xiàn)的問題與解釋 在測反射時時,有可能出現(xiàn) H2SO4 的濃度低,反而反射時短。 (1)隨著實驗進程,標(biāo)本產(chǎn)生了適應(yīng)性,反應(yīng)靈敏性下降,因此濃度增加(2)標(biāo)本本身興奮性就很低。16實驗八 胃腸運動和小腸吸收觀察 實驗?zāi)康?觀察胃腸道的各種形式的運動, 以及神經(jīng)和體液因素對胃腸運動的調(diào)節(jié)。 了解小腸吸收與內(nèi)容 物滲透壓間的關(guān)系。 實驗原理 消化道平滑肌具有自動節(jié)律性,可以形成多種形式的運動,主要有:緊張性收縮、蠕動、分節(jié) 運動及擺動。 在整體情況下, 消化道平滑肌的運動受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。 阿托品具有松弛內(nèi)臟 平滑肌的作用, 可用于治療解除平滑肌痙攣。 兔的胃腸運動活躍且運動形式典型, 是觀察胃腸運 動的好材料。腸內(nèi)容物的滲透壓為制
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