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文檔簡介
1、解剖與生理學(xué)實驗內(nèi)容及學(xué)時安排考核方法1、考勤10%2、課前預(yù)習(xí)10%3、課堂表現(xiàn):規(guī)范操作+隨堂抽查50%4、實驗報告:書寫工整、畫圖及文字闡明清楚、分析準(zhǔn)確30%實驗一、四大根本組織的察看目的要求 聯(lián)絡(luò)功能察看了解四種根本組織的構(gòu)造特點及分布。 學(xué)習(xí)體腔膜或腸系膜平鋪片的制造方法。 學(xué)習(xí)疏松結(jié)締組織新穎平鋪片的制造方法及活體染色方法。資料與器械 蛙,小鼠,解剖器械一套手術(shù)剪、解剖針、眼科鑷,注射器及針頭,滴管,蓋玻片,顯微鏡; 1%硝酸銀水溶液,1%臺盼藍(lán)生理鹽水溶液,甘油,蒸餾水,組織切片手術(shù)剪:彎、直、眼科剪 手術(shù)剪 主要用于剪皮膚或肌肉等粗軟組織。此外,也可用來分別組織,即利用剪刀的
2、尖端,插入組織間隙,分別無大血管的結(jié)締組織等。手術(shù)剪分尖頭剪和鈍頭剪。其尖端還有直、彎之別。生理學(xué)實驗中常習(xí)慣于用彎型手術(shù)剪剪毛。另外,還有一種小型手術(shù)剪,稱眼科剪,主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織。眼科剪也有直頭與彎頭之分。正確的執(zhí)剪姿態(tài)即用拇指與環(huán)指(即無名指)持剪,示指(即食指)置于手術(shù)剪的上方。 鑷子:圓頭、眼科鑷 手術(shù)鑷 主要用于夾持或牽拉切口處的皮膚或肌肉組織。眼科鑷用于夾持細(xì)軟組織。手術(shù)鑷有圓頭、尖頭兩種,又有直頭和彎頭、有齒和無齒之別,而且長短不一,大小不等,可根據(jù)手術(shù)需求選用。通常,有齒鑷主要用于夾持較堅韌或較厚的組織,如皮膚、筋膜、肌腱等;無齒鑷主要用于夾持較細(xì)軟的組織,如血
3、管、黏膜等;正確的執(zhí)鑷姿態(tài)類似于執(zhí)筆式,較為靈敏方便。止血鉗:有齒、無齒 止血鉗 主要作用是分別組織和止血,不同類型的止血鉗又有不同的用途。執(zhí)止血鉗的姿態(tài)均與執(zhí)剪刀的姿態(tài)一樣。常用止血鉗有以下3種: (1)直止血鉗 分長短兩種類型,又有有齒和無齒之別。無齒止血鉗主要用以夾住淺層出血點,以便止血,也可用于淺部的組織分別。有齒止血鉗主要用于強韌組織的止血,提起皮膚等。 (2)彎止血鉗 與直型的大同小異,也分長短兩種,主要用于深部組織或內(nèi)臟出血點的止血。 (3)蚊式止血鉗(蚊嘴鉗)此種止血鉗頭端細(xì)小,又稱小止血鉗,適用于細(xì)嫩組織的止血和分別,不宜鉗夾大塊或鞏固組織。 動物的抓取與固定方法目的:限制動
4、物的活動,持安靜形狀 以便正確操作和記錄要求:不損傷實驗動物 不影響察看目的 實驗者不被動物咬傷 保證明驗順利進(jìn)展小心細(xì)致、大膽矯捷,切忌粗暴。小鼠的抓取小鼠的抓取保定:小鼠的抓取保定: 器材:小鼠豢養(yǎng)盒器材:小鼠豢養(yǎng)盒+ +盒蓋盒蓋1 1套。套。 方法步驟:方法步驟: 1 1、用右手拇指和食指捏、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部將小鼠提住小鼠尾巴中部將小鼠提 起,放在豢養(yǎng)盒蓋上。起,放在豢養(yǎng)盒蓋上。 2 2、用左手拇指和食指迅速、用左手拇指和食指迅速、 準(zhǔn)確地捏住小鼠的兩耳后、準(zhǔn)確地捏住小鼠的兩耳后、 頸背部的皮膚,將小鼠提起。頸背部的皮膚,將小鼠提起。 3 3、翻轉(zhuǎn)左手掌,以左手、翻轉(zhuǎn)左
5、手掌,以左手掌心和中指夾小鼠背部的掌心和中指夾小鼠背部的皮膚,使小鼠整個呈一條皮膚,使小鼠整個呈一條直線。直線。 4 4、用左手無名指壓住小、用左手無名指壓住小鼠背部的皮膚,小指壓住鼠背部的皮膚,小指壓住小鼠的尾巴根部。小鼠的尾巴根部。 5 5、松開捏住小鼠尾巴的、松開捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。右手拇指和食指。 皮下注射蛙類的抓取實驗步驟細(xì)胞 cell + 間質(zhì)cytoplasm根本組織tissue上皮組織、結(jié)締組織、肌肉組織、神經(jīng)組織器官 organ系統(tǒng) system上皮組織上皮組織單層扁平上皮單層扁平上皮外表觀:細(xì)胞呈多邊形,胞核扁圓形,位于細(xì)胞中央外表觀:細(xì)胞呈多邊形,胞核扁圓形,位
6、于細(xì)胞中央垂直觀:細(xì)胞扁平,中央有核處較厚,其他部分胞質(zhì)很薄垂直觀:細(xì)胞扁平,中央有核處較厚,其他部分胞質(zhì)很薄單層扁平上皮 3.540 蟾蜍腸系膜涂片 鍍銀染色上皮組織分布:內(nèi)皮心血管、淋巴管內(nèi)外表間皮心包膜、胸膜、腹膜其它肺泡、腎小囊蛙體腔膜或腸系膜平鋪片的制造和察看: 將蛙雙毀髓處死,取體腔膜或腸系膜放于載玻片上,以解剖針 將其挑開展平,稍晾干; 加1%硝酸銀水溶液數(shù)滴于標(biāo)本上,將標(biāo)本浸蓋; 立刻放在日光下曬35min或在日光燈下1015min; 至標(biāo)本變?yōu)闇\褐色時,傾去載玻片上的溶液,用蒸餾水洗凈,加上12滴甘油,蓋上蓋玻片,即可用于顯微鏡察看。上皮組織單層立方上皮單層立方上皮取甲狀腺切
7、片HE染色察看:外表觀:細(xì)胞呈六角形垂直觀:細(xì)胞立方形,核圓居于細(xì)胞中央甲狀腺 H-E染色 3.540 濾泡 濾泡旁細(xì)胞 濾泡上皮細(xì)胞 上皮組織單層柱狀上皮單層柱狀上皮單層柱狀上皮 人小腸 H-E染色 3.540 杯狀細(xì)胞 紋狀緣上皮組織取小腸上皮切片察看:外表觀:細(xì)胞呈六角形垂直觀:細(xì)胞呈柱狀,核長圓形,接近基底部分布:胃、腸、膽囊、子宮等假復(fù)層纖毛柱狀上皮假復(fù)層纖毛柱狀上皮由柱狀細(xì)胞、梭形細(xì)胞、錐體形細(xì)胞和杯狀細(xì)胞構(gòu)成 游離面常見有纖毛 基細(xì)胞 一種腺細(xì)胞假復(fù)層纖毛柱狀上皮 人氣管 H-E染色 3.540 纖毛 杯狀細(xì)胞 基膜上皮組織分布:呼吸道 復(fù)層扁平上皮復(fù)層扁平上皮復(fù)層扁平上皮(st
8、ratified squamous epithelium) 由基底面向游離面依次是: 基內(nèi)幕胞 多邊形細(xì)胞 扁平細(xì)胞 分布:皮膚的表皮 口腔、食管、陰道角化 未角化 復(fù)層扁平上皮 H-E染色3.540 A 未角化型 人食管 表皮細(xì)胞B 角化型 人手指表皮 真皮乳頭上皮組織復(fù)層扁平上皮復(fù)層扁平上皮上皮組織變移上皮變移上皮取膀胱切片HE染色察看:特點:上皮的層次和細(xì)胞形狀隨所在器官的收縮或舒張而改動由基底面向游離面依次是:基內(nèi)幕胞 中間層細(xì)胞 外表細(xì)胞蓋細(xì)胞 變移上皮 人膀胱 H-E染色3.540 蓋細(xì)胞上皮組織結(jié)締組織疏松結(jié)締組織疏松結(jié)締組織1、疏松結(jié)締組織活體染色標(biāo)本的制造與察看:、疏松結(jié)締組
9、織活體染色標(biāo)本的制造與察看:取小鼠一只,皮下注射取小鼠一只,皮下注射1%臺盼藍(lán)生理鹽水溶液少許,臺盼藍(lán)生理鹽水溶液少許,3060min后,頸椎脫臼法處死;后,頸椎脫臼法處死;剪開皮膚,在注射處附近剪取一小塊皮下結(jié)締組織,剪開皮膚,在注射處附近剪取一小塊皮下結(jié)締組織,置于載玻片上;置于載玻片上;雙手各持一解剖針將組織平鋪于載玻片上;雙手各持一解剖針將組織平鋪于載玻片上;待標(biāo)本稍干后,加待標(biāo)本稍干后,加12滴甘油,蓋上蓋玻片即可察看。滴甘油,蓋上蓋玻片即可察看。結(jié)締組織疏松結(jié)締組織切片的察看: 兔皮下組織鋪片A和腹膜鋪片B 520A 活體注射錐蟲藍(lán)+醛復(fù)紅染色+偶氮洋紅染色 紫藍(lán)色細(xì)絲為彈性纖維,
10、粉紅色條帶為膠原纖維 B 活體注射鋰卡紅+鐵蘇木精染色 成纖維細(xì)胞 巨噬細(xì)胞結(jié)締組織致密結(jié)締組織致密結(jié)締組織取跟踺縱切片HE染色察看:致密結(jié)締組織人肌腱 HE染色520 腱細(xì)胞成行陳列 膠原纖維成束陳列結(jié)締組織特點特點: :細(xì)胞和基質(zhì)相對較少細(xì)胞和基質(zhì)相對較少, ,纖維纖維成分較多成分較多分類:分類:1.1.規(guī)那么致密結(jié)締組織:大量密規(guī)那么致密結(jié)締組織:大量密集平行陳列的粗大膠原纖維,其集平行陳列的粗大膠原纖維,其間有成行陳列的成纖維腱細(xì)間有成行陳列的成纖維腱細(xì)胞;主要構(gòu)成肌腱、腱膜胞;主要構(gòu)成肌腱、腱膜2.2.不規(guī)那么致密結(jié)締組織:粗大不規(guī)那么致密結(jié)締組織:粗大膠原纖維縱橫交錯,構(gòu)成致密板膠
11、原纖維縱橫交錯,構(gòu)成致密板層構(gòu)造,其間有成纖維細(xì)胞,小層構(gòu)造,其間有成纖維細(xì)胞,小血管和神經(jīng)等。構(gòu)成真皮、腦硬血管和神經(jīng)等。構(gòu)成真皮、腦硬膜、器官的被膜等處;膜、器官的被膜等處;3 3、彈性組織:粗大的彈性纖維或、彈性組織:粗大的彈性纖維或平行陳列,或編織成膜狀,其間平行陳列,或編織成膜狀,其間有膠原纖維和成纖維細(xì)胞分布;有膠原纖維和成纖維細(xì)胞分布;構(gòu)成韌帶、聲帶、大動脈彈性膜構(gòu)成韌帶、聲帶、大動脈彈性膜等。等。脂肪組織脂肪組織取小腸切片HE染色察看:特點:HE染色標(biāo)本中,脂滴被溶解,細(xì)胞呈空泡狀,胞 核和胞質(zhì)被擠向細(xì)胞的一側(cè)寶石戒指狀 脂肪細(xì)胞 H-E染色3.540 細(xì)胞核骨組織骨組織 取骨
12、橫磨片察看:特點:由于骨組織內(nèi)的軟組織神經(jīng)、血管、淋巴管、結(jié)締組織及細(xì)胞都已腐爛,僅剩下空腔和管道。長骨骨干部的橫斷面,在低鏡下可見34層外環(huán)骨板、12層內(nèi)環(huán)骨板、內(nèi)外環(huán)骨板之間的骨單位和間骨板。骨單位是由中央管和其周圍呈同心圓陳列的多層骨板構(gòu)成。高倍鏡下察看可見骨板內(nèi)或骨板間的卵圓形骨陷窩及骨陷窩向周圍發(fā)出的骨小管。 長骨磨片 540 黏合線 血液血液采血、涂片、染色制造血液涂片:取末捎血一滴置于玻片的一端,左手持載玻片,右手以邊緣平滑的推片的一端從血滴前方后移接觸血滴,使推片與載片夾角堅持3040度平穩(wěn)地向前挪動,載片上保管下一薄層血膜。手持玻片在空氣中揮動,使血膜迅速枯燥,以免血細(xì)胞伸展
13、。加瑞氏染液23滴,覆蓋整個血膜,固定0.51.0min,滴加等量或稍多的新穎蒸餾水,與染料混勻染色510min。用清水沖去染液,待枯燥后即可置于顯微鏡下進(jìn)展察看。鏡下察看血涂片。低倍鏡下分辨白細(xì)胞和紅細(xì)胞,高倍鏡察看、區(qū)分各種血細(xì)胞和血小板。人血液涂片 Wright染色 3.31001、紅細(xì)胞質(zhì) 2、中性粒細(xì)胞桿狀核3、中性粒細(xì)胞分葉核4、嗜酸性粒細(xì)胞 5、嗜堿性粒細(xì)胞 6、單核細(xì)胞 7、淋巴細(xì)胞肌組織肌組織骨骼肌骨骼肌取骨骼肌縱、橫切片取骨骼肌縱、橫切片HE染色察看:察看肌纖維的染色察看:察看肌纖維的形狀、胞核的外形,縱切片上還可見明顯的橫紋,比較形狀、胞核的外形,縱切片上還可見明顯的橫紋
14、,比較縱切和橫切面上的細(xì)胞核的位置和構(gòu)造差別??v切和橫切面上的細(xì)胞核的位置和構(gòu)造差別。 骨骼肌縱橫切片3.340 肌細(xì)胞核 肌原纖維 骨骼肌纖維光鏡圖骨骼肌纖維光鏡圖心肌心肌取心室肌縱、橫切片HE染色察看:鏡下可見縱切片上,心肌纖維彼此分支吻合成網(wǎng)狀,卵圓形胞核位于中央。減少顯微鏡虹彩光圈可見心肌纖維的橫紋,但不如骨骼肌纖維明顯。在肌纖維及其分支上可見深藍(lán)色的梯形閏盤。橫切片上,心肌纖維為不規(guī)那么的圓形,有或無胞核,留意細(xì)胞核的形狀和位置。 人心肌纖維縱切片HE 染色3.340 閏盤 脂褐素 分布:心臟,收縮具自動節(jié)律性,無肌衛(wèi)星細(xì)分布:心臟,收縮具自動節(jié)律性,無肌衛(wèi)星細(xì)胞胞心肌心肌心肌光鏡構(gòu)造方式圖心肌光鏡構(gòu)造方式圖平滑肌平滑肌 取小腸縱、橫切片HE染色察看:察看平滑肌纖維的形狀、胞核的外形,比較縱切和橫切面上的構(gòu)造差別。平滑肌縱橫切片HE染色 3.340 分布:廣泛分布于中空性器官管壁內(nèi)分布:廣泛分布于中空性器官管壁內(nèi) 形狀:長梭形,大小和外形因所在部位和器官
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