加味四妙方抗痛風作用有效部位的藥效學(xué)研究

1、加味四妙方抗痛風作用有效部位的藥效學(xué)研究                     作者：胡新 時樂 徐立 尹蓮【關(guān)鍵詞】  四妙方；,有效部位；,藥效學(xué)摘要：目的：觀察加味四妙方（簡稱全方）各部位的抗炎、鎮(zhèn)痛作用及對痛風性關(guān)節(jié)炎的影響，探討全方治療痛風作用的有效部位。方法：采用尿酸鈉結(jié)晶致大鼠足腫脹法、化學(xué)刺激引起小鼠扭體反應(yīng)、二甲苯致小

2、鼠耳腫脹，觀察全方及各部位的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。結(jié)果：全方、有機酸能顯著減少小鼠扭體次數(shù)(P<0.01)。全方、黃酮、生物堿、皂苷能明顯抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹(P<0.01)，有機酸、水溶性成分，揮發(fā)油也有一定的抑制作用(P<0.05)。對由尿酸鹽引起的大鼠足腫脹，全方和水溶性成份組在16 h內(nèi)，均有抑制作用(P<0.01或P<0.05)，黃酮組大鼠足腫脹率均低于模型組，在 1，5 h和6 h有統(tǒng)計學(xué)的差異(P<0.01或P<0.05)，有機酸組在1、3和5 h對鼠足腫脹率也有一定的抑制作用(P<

3、0.05)。結(jié)論：有機酸體現(xiàn)出了抗炎、鎮(zhèn)痛和抗痛風的綜合作用。關(guān)鍵詞：四妙方；  有效部位；  藥效學(xué)對四種加味四妙方方劑進行了藥理學(xué)比較， 實驗結(jié)果表明：加用了土茯苓的四妙方具有明顯的抗炎作用，而且起效快、作用維持時間長，無明顯毒性反應(yīng)。本實驗采用分部位提取的方法分離出黃酮、皂苷、有機酸、揮發(fā)油、生物堿、水溶成分等1，在此基礎(chǔ)上，擬對全方各部位開展進一步藥效學(xué)研究，以期尋找出加味四妙方發(fā)揮作用的有效部位。1  實驗材料1.1  動物昆明種小鼠，SD大鼠，雄性。由南京中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，實驗動物飼

4、養(yǎng)許可證號：SYXK(蘇)20020012。1.2  藥物全方，2.73 g生藥/ml；生物堿，5 g生藥/m1；黃酮，5 g生藥/m1；有機酸，5 g生藥/ml；皂苷，7.5 g生藥/m1；水溶性部位，7.5 g生藥/ml；揮發(fā)油，15 g生藥/m1；批號:031016。微晶型尿酸鈉(MSU)，批號：030328。以上藥物由南京中醫(yī)藥大學(xué)中藥化學(xué)教研室提供。吲哚美辛25 mg/片，廣東華南制藥廠，批號：020602；冰醋酸，上海試劑四廠，批號：020430；二甲苯，上海凌峰化學(xué)試劑有限公司，批

5、號：020402。1.3  儀器 9 mm打孔器；鼠足容積測定器，自制；JA1203上皿電子天平，上海天平儀器廠。2  實驗方法2.1  對醋酸引起化學(xué)性刺激的鎮(zhèn)痛作用2將小鼠隨機分為模型組、陽性組、全方組、生物堿、黃酮、有機酸、皂苷、水溶性成分、揮發(fā)油等9組，分別灌給生理鹽水、吲哚美辛、全方、生物堿、黃酮、有機酸、皂苷、水溶性成分、揮發(fā)油。給藥后30 min腹腔注射0.7%醋酸0.2 ml/只，觀察小鼠第1次因疼痛引起扭體的時間和20 min內(nèi)扭體次數(shù)。結(jié)果見表1。結(jié)果表明，全方、有

6、機酸能明顯減少小鼠扭體次數(shù)，與模型組相比，有顯著性差異（P0.01)。2.2  加味四妙方對二甲苯所致的耳腫脹的抗炎作用3小鼠分組同上，分別灌胃給藥，連續(xù)3 d。第3天給藥后45 min，于小鼠右耳兩面涂二甲苯0.025 ml/只致腫，左耳不涂為正常耳。45 min后脫頸椎處死小鼠，用9 mm打孔分別在相同部位打下圓片，電子天平稱重，每鼠右耳重量左耳重量=腫脹度。結(jié)果見表2。結(jié)果表明，全方、黃酮、生物堿、皂苷對二甲苯所致小鼠耳腫脹有明顯的抑制作用(P<0.01)，有機酸組、水溶性成分組、揮發(fā)油組也有一定的抑制作用（P0

7、.05）。2.3  加味四妙方對尿酸鹽所致足腫脹的抗痛風作用4大鼠分組同上，分別灌胃給藥，連續(xù)5 d。第5天灌胃后，用鼠足容積測定器測量大鼠右后足容積，記錄。于右后足關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射MSU0.2 ml/只（100 mg/ml），1，2，3，4，5，6 h后分別測量大鼠右后足容積，計算足腫脹率。腫脹率=（注射MSU后大鼠右后足容積-注射MSU前大鼠右后足容積）/注射MSU前大鼠右后足容積。結(jié)果見表3。表1  加味四炒方對化學(xué)性刺激的鎮(zhèn)痛作用（略）與模型組比較,*P0.05，*P0.01，n=10表2  

8、;加味四炒方對二甲苯致小鼠耳腫脹的抗炎作用（略）與模型組比較,*P0.05，*P0.01，n=10表3  加味四炒方抗痛風作用的結(jié)果（略）與模型組比較，*P0.05，*P0.01，n=8    結(jié)果表明，全方和水溶性成份組在造模后16 h內(nèi)，均能抑制大鼠的足腫脹率（P0.01或P0.05），黃酮組大鼠足腫脹率均低于模型組，且在1，5 h和6 h有統(tǒng)計學(xué)的差異（P0.01或P0.05），有機酸組在1，3 h和5 h對鼠足腫脹率也有一定的抑制作用（P0.05）。3  結(jié)

9、論采用醋酸引起的小鼠化學(xué)性刺激模型、二甲苯所致的小鼠耳腫脹模型、尿酸鹽所致大鼠痛風性關(guān)節(jié)炎模型，對加味四妙方各部位進行評價。結(jié)果表明，全方有抗炎、鎮(zhèn)痛和抗痛風作用(P<0.01工P<0.05)；有機酸有一定的抗炎鎮(zhèn)痛作用(P<0.01或P<0.05)，在形成大鼠痛風性關(guān)節(jié)炎模型1，3 h和5 h后，也有一定的抗痛風作用(P<0.05)；水溶性成份有一定的抗炎和抗痛風作用(P<0.01或P<0.05)，但未表現(xiàn)出鎮(zhèn)痛作用；黃酮對耳廓炎癥有明顯的抑制作用(P<0.01)，在1、5和6 h也表現(xiàn)出一定的抗痛風作用(P<

10、;0.01或P<0.05)。生物堿和皂苷僅對小鼠耳廓炎癥有明顯的抑制作用(P<0.05)，未表現(xiàn)出鎮(zhèn)痛和抗痛風的作用。以上實驗結(jié)果可以看出，加味四妙方的各部位都表現(xiàn)有一定的作用，但有機酸體現(xiàn)出了抗炎、鎮(zhèn)痛和抗痛風的綜合作用，因此，對本方抗炎、鎮(zhèn)痛作用以及治療痛風的有效部位的研究，可在有機酸的基礎(chǔ)上進一步開展。參考文獻：1  時  樂，徐  立，尹  蓮.四種不同加味“四妙散”抗實驗性痛風作用的比較J.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2005，21（2）：106107.2  陳  奇.中藥藥理研究方法學(xué)M.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：378378.3  李儀奎.中藥藥理實驗方法學(xué)M.上海：科學(xué)技術(shù)出版社，1991：300300.4   Coderre TJ and Wall PD.Ankle joint urate arthritis in&