細(xì)菌的形態(tài)、染色ppt課件

1、微生物的分類微生物的分類 微生物：包括細(xì)菌、支原體、衣原體、螺旋體、微生物：包括細(xì)菌、支原體、衣原體、螺旋體、放線菌、立克次體、病毒及真菌。放線菌、立克次體、病毒及真菌。微生物的生物學(xué)性狀包括：形狀構(gòu)造、染色特微生物的生物學(xué)性狀包括：形狀構(gòu)造、染色特性、生長繁衍與培育、理化性狀、分類等。性、生長繁衍與培育、理化性狀、分類等。細(xì)細(xì) 菌菌 細(xì)菌 廣義一切原核細(xì)胞型微生物細(xì)菌、支原體衣原體、立克次體、螺旋體、放線菌 共性：有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)、二分裂、對抗生素敏感 狹義專指其中的細(xì)菌 細(xì)菌的大小與形狀n察看細(xì)菌常用光學(xué)顯微鏡，其大小用測察看細(xì)菌常用光學(xué)顯微鏡，其大小用測微尺在顯微鏡下進(jìn)展丈量，以微米微

2、尺在顯微鏡下進(jìn)展丈量，以微米(m)為單位。不同種類的細(xì)菌大小不一，同為單位。不同種類的細(xì)菌大小不一，同一種細(xì)菌也因菌齡和環(huán)境要素的影響而一種細(xì)菌也因菌齡和環(huán)境要素的影響而有差別。有差別。n細(xì)菌按其外形，主要有細(xì)菌按其外形，主要有球菌球菌桿菌桿菌螺形菌螺形菌雙球菌雙球菌 分裂后兩個(gè)球菌成對分裂后兩個(gè)球菌成對陳列的為雙球菌陳列的為雙球菌. . 如肺炎雙球菌如肺炎雙球菌1雙球菌雙球菌一、 球 菌腦膜炎奈瑟菌腦膜炎奈瑟菌雙球菌雙球菌肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌雙球菌雙球菌 (2) (2)鏈球菌鏈球菌 分裂是沿一個(gè)平面進(jìn)分裂是沿一個(gè)平面進(jìn)展，分裂后細(xì)胞陳列成鏈展，分裂后細(xì)胞陳列成鏈狀狀. .如乳鏈球菌如乳鏈球菌

3、鏈球菌鏈球菌鏈球菌鏈球菌鏈球菌鏈球菌 (3) (3)葡萄球菌葡萄球菌 分裂面不規(guī)那么，多個(gè)分裂面不規(guī)那么，多個(gè)球菌聚在一同，像一串串葡球菌聚在一同，像一串串葡萄。萄。 如金黃色葡萄球菌如金黃色葡萄球菌 葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌葡萄球菌 (4) (4)四聯(lián)球菌四聯(lián)球菌 分裂是沿兩個(gè)相垂直分裂是沿兩個(gè)相垂直的平面進(jìn)展，分裂，分的平面進(jìn)展，分裂，分裂后每四個(gè)細(xì)胞在一同裂后每四個(gè)細(xì)胞在一同呈田字形呈田字形. . 如四聯(lián)微球菌如四聯(lián)微球菌 四聯(lián)球菌四聯(lián)球菌四聯(lián)球菌四聯(lián)球菌四聯(lián)球菌四聯(lián)球菌 (5) (5)八疊球菌八疊球菌 按三個(gè)相互垂直的平按三個(gè)相互垂直的平面進(jìn)展分裂后，每八個(gè)面進(jìn)展分裂后

4、，每八個(gè)球菌在一同成立方體形球菌在一同成立方體形. . 如藤黃八疊球菌如藤黃八疊球菌 八疊球菌八疊球菌八疊球菌八疊球菌 二、二、 桿菌桿菌不同桿菌的大小、長短、粗細(xì)很不一致。不同桿菌的大小、長短、粗細(xì)很不一致。炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌 3-10 m 3-10 m大大中中大腸埃希菌大腸埃希菌 2-3 m 2-3 m小小布魯菌布魯菌 0.6-1.5 m 0.6-1.5 m桿菌的形狀多樣桿菌的形狀多樣炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌白喉棒狀桿菌白喉棒狀桿菌梭狀芽孢桿菌桿菌的形狀多樣桿菌的形狀多樣分枝桿菌分枝桿菌雙歧桿菌雙歧桿菌球桿菌球桿菌鏈桿菌鏈桿菌棒狀桿菌棒狀桿菌分枝桿菌分枝桿菌三、螺形菌三、螺形菌弧菌弧

5、菌螺菌螺菌螺桿菌螺桿菌弧弧 菌菌螺螺 菌菌n革蘭氏染色法由革蘭氏染色法由Gram發(fā)明，沿用至今已發(fā)明，沿用至今已有有100多年歷史。多年歷史。n是臨床細(xì)菌學(xué)中最簡單、最重要的方法是臨床細(xì)菌學(xué)中最簡單、最重要的方法之一。之一。n染色后把細(xì)菌分成革蘭氏陽性菌和革蘭染色后把細(xì)菌分成革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。氏陰性菌。細(xì)菌的革蘭氏染色細(xì)菌的革蘭氏染色n1.鑒別細(xì)菌鑒別細(xì)菌n2.選擇藥物參考選擇藥物參考n G+ 菌的敏感藥物：青霉素菌的敏感藥物：青霉素n G- 菌的敏感藥物：鏈霉素、氯霉素菌的敏感藥物：鏈霉素、氯霉素n3.與致病性有關(guān)與致病性有關(guān)n G+ 菌的致病物質(zhì)：產(chǎn)生外毒素菌的致病物質(zhì)：產(chǎn)生外毒

6、素n G- 菌的致病物質(zhì)：產(chǎn)生內(nèi)毒素菌的致病物質(zhì)：產(chǎn)生內(nèi)毒素革蘭染色的意義革蘭染色的意義n1.涂片涂片 layering a filmn2.枯燥枯燥 air-dryn3.固定固定 heat-fixingn4.初染初染 first stainn5.媒染媒染 stain with iodinen6.脫色脫色 decolorizen7.復(fù)染復(fù)染 counter-stain第一步第一步 涂片涂片n臨床標(biāo)本和液體培育物：直接涂片臨床標(biāo)本和液體培育物：直接涂片n固體培育基上的細(xì)菌和不易涂開的標(biāo)本：固體培育基上的細(xì)菌和不易涂開的標(biāo)本：取一滴生理鹽水置玻片中央，取菌在鹽取一滴生理鹽水置玻片中央，取菌在鹽水中磨

7、勻，成水中磨勻，成1cm2的涂面。的涂面。技巧：涂片時(shí)從中技巧：涂片時(shí)從中心向外研磨，用力心向外研磨，用力要均勻，厚度以把要均勻，厚度以把涂片放到紙上，透涂片放到紙上，透過涂片剛美觀到下過涂片剛美觀到下面紙上的字為宜。面紙上的字為宜。第二步第二步 枯燥枯燥n涂片最好在室溫下自然枯燥涂片最好在室溫下自然枯燥n或?qū)?biāo)本面向上，置于火焰上部的熱氣或?qū)?biāo)本面向上，置于火焰上部的熱氣烘干，切不可在火焰上烤干烘干，切不可在火焰上烤干第三步第三步 固定固定n將已枯燥的涂片經(jīng)過火焰將已枯燥的涂片經(jīng)過火焰3次，以玻片觸次，以玻片觸及手背皮膚熱而不燙為度。及手背皮膚熱而不燙為度。l目的：目的：l1.殺死細(xì)菌殺死細(xì)

8、菌l2.使細(xì)菌附著于玻片上使細(xì)菌附著于玻片上l3.維持細(xì)菌原有形狀維持細(xì)菌原有形狀l4.改動(dòng)細(xì)菌對染料的通透性改動(dòng)細(xì)菌對染料的通透性第四步第四步 初染初染n滴結(jié)晶紫染液于玻片上，使細(xì)菌涂層被全滴結(jié)晶紫染液于玻片上，使細(xì)菌涂層被全部覆蓋，部覆蓋，1分鐘后，細(xì)流水沖洗，甩干。分鐘后，細(xì)流水沖洗，甩干。l留意：染液必需用水沖洗，而不能直接倒去，以防留意：染液必需用水沖洗，而不能直接倒去，以防染液沉渣留在玻片上。染液沉渣留在玻片上。第五步第五步 媒染媒染n滴加碘液于玻片上，滴加碘液于玻片上，1分鐘后，流水沖洗，分鐘后，流水沖洗，甩干。甩干。在這一步中，碘液作為媒染劑，它的主要作用是促進(jìn)染料與細(xì)菌的結(jié)合

9、，也就是初染時(shí)結(jié)晶紫與細(xì)菌的結(jié)合，所以媒染劑又叫助染劑。第六步第六步 脫色脫色n滴加滴加95%酒精數(shù)滴于玻片上，悄然搖動(dòng)，酒精數(shù)滴于玻片上，悄然搖動(dòng)，不斷補(bǔ)充酒精，脫色至流下來的液體無不斷補(bǔ)充酒精，脫色至流下來的液體無紫色為止，約半分鐘，流水沖洗，甩干。紫色為止，約半分鐘，流水沖洗，甩干。這一步在操作中最為這一步在操作中最為關(guān)鍵，脫色時(shí)間應(yīng)以關(guān)鍵，脫色時(shí)間應(yīng)以標(biāo)本涂片厚薄靈敏掌標(biāo)本涂片厚薄靈敏掌握，普通以流下的酒握，普通以流下的酒精無紫色為宜。精無紫色為宜。第七步第七步 復(fù)染復(fù)染n加稀釋石碳酸復(fù)紅數(shù)滴，一分鐘后流水加稀釋石碳酸復(fù)紅數(shù)滴，一分鐘后流水沖洗，用濾紙吸干玻片外表的水。沖洗，用濾紙吸干玻片外表的水。染色片制備好后，染色片制備好后，在油鏡下察看結(jié)果在油鏡下察看結(jié)果n正常情況下，細(xì)胞的成分與大多數(shù)