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1、第一節(jié) 酶的制備及活力測(cè)定【課標(biāo)要求】研究酶的存在和簡(jiǎn)單制作方法,嘗試?yán)妹富盍y(cè)定的一般原理和方法。【知識(shí)梳理】背景知識(shí) 1、酶在活細(xì)胞內(nèi)合成,在細(xì)胞內(nèi)起催化作用,稱(chēng)為_(kāi)。1、生物細(xì)胞產(chǎn)生的酶2、由細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生然后分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用,稱(chēng)為_(kāi)。 1、提取胞內(nèi)酶,需要破碎_(kāi),可用破碎儀、研磨器或勻漿機(jī)2、提取酶的方法 使酶從中釋放出來(lái),進(jìn)入細(xì)胞外的溶液中,經(jīng)過(guò)濾、離心制備成_。 2、提取胞外酶,可直接從_中提取。在酶的提取過(guò)程中,_、_等多種環(huán)境條件都可能影響酶的空間結(jié)構(gòu)導(dǎo)致酶變性直至喪失活力。因而,提取出的酶首先需要檢測(cè)酶的_。 (1)定義:通常以單位時(shí)間內(nèi)_或者單位時(shí)間內(nèi)_ 3、酶的活力 (
2、2)測(cè)定方法:_和_ 實(shí)踐案例:植物淀粉酶的制備及活力測(cè)定材料器具:略活動(dòng)程序:1、提取酶液 2、滴加酶液:取4支試管編號(hào)后均加入PH=5.6的_緩沖溶液。 向1、2試管中各加入未煮過(guò)的_ 1ml 向3、4試管中各加入已煮過(guò)的_ 1ml3、恒溫處理:為什么要進(jìn)行恒溫40°C處理?答:保證酶在_溫度下充分發(fā)生反應(yīng)。4、鈍化處理:鈍化處理的原因?答:使酶的活性_,從而使反應(yīng)減慢或停止。5、測(cè)定吸光值:用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)_處進(jìn)行比色。6、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)7、結(jié)果分析:(1)從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中查出_。 (2)計(jì)算淀粉酶的活力。探究活動(dòng):1、制備過(guò)氧化氫酶粗酶液以新鮮_、_為材料經(jīng)過(guò)粉碎、研磨、離心,取
3、_即可得到過(guò)氧化氫酶粗酶液。2、用分光光度法測(cè)定過(guò)氧化氫酶的活力在過(guò)氧化氫酶存在時(shí),過(guò)氧化氫將愈創(chuàng)木酚氧化生成_色產(chǎn)物,這種產(chǎn)物在波長(zhǎng)470 nm處有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定_可以計(jì)算出過(guò)氧化氫酶的活力。3、用高錳酸鉀滴定法測(cè)定過(guò)氧化氫酶的活力如果在反應(yīng)系統(tǒng)中加入_的過(guò)氧化氫溶液,經(jīng)酶促反應(yīng)后,在酸性條件下,用高錳酸鉀溶液滴定_的H2O2,然后根據(jù)消耗的H2O2量計(jì)算出過(guò)氧化氫酶的活力。高錳酸鉀滴定時(shí):當(dāng)出現(xiàn)_色并不再消退時(shí)標(biāo)志著滴定達(dá)到終點(diǎn)?!緩?fù)習(xí)指要】1、學(xué)法指導(dǎo):本節(jié)課應(yīng)初步學(xué)會(huì)酶的制備及活力測(cè)定。學(xué)會(huì)使用滴定法的具體操作,并運(yùn)用所學(xué)知識(shí)和方法去進(jìn)行酶的活力的測(cè)定。本節(jié)課的酶的相關(guān)知識(shí)和酶的
4、活力測(cè)定技術(shù)的知識(shí)應(yīng)引起重視,在高考選擇題和實(shí)驗(yàn)題中都有可能體現(xiàn)。2、疑難解析:在溫度、pH影響酶活性的實(shí)驗(yàn)中,始終都貫穿著對(duì)照原則,而在設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)時(shí)最重要的是運(yùn)用單一變量原則,其中的變量就是我們所研究的對(duì)象,所以在分析實(shí)驗(yàn)問(wèn)題時(shí),要緊緊抓住研究變量,把其他可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的變量變?yōu)槌A?,才能保證對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果的嚴(yán)密性和準(zhǔn)確性。對(duì)于溫度對(duì)酶活性影響的關(guān)系曲線(xiàn),在低于最適溫度時(shí),活性受溫度影響比高于最適溫度時(shí)的小?!镜漕}解析】1.在生物體內(nèi),各種化學(xué)反應(yīng)之所以能有條不紊地進(jìn)行,是因?yàn)椋?)A.酶的催化效率具有高效性 B.酶的種類(lèi)具有多樣性 C.酶的催化作用具有專(zhuān)一性 D.酶的空間結(jié)構(gòu)具有穩(wěn)定性解
5、析生物體內(nèi)同時(shí)進(jìn)行很多化學(xué)反應(yīng),這些化學(xué)反應(yīng)是互不干涉的,因?yàn)榇呋鞣N化學(xué)反應(yīng)的酶不同,對(duì)一種酶來(lái)講,只能催化一種或一類(lèi)化學(xué)反應(yīng),即酶的專(zhuān)一性特點(diǎn)保證了各種化學(xué)反應(yīng)互不干涉。答案C2.下列關(guān)于酶的敘述錯(cuò)誤的是( )A.有些酶是核酸 B.酶的數(shù)量因與化學(xué)反應(yīng)而減少 C.酶的活性與pH有關(guān) D.酶的催化效率很高解析本題考查了酶的性質(zhì),酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的一類(lèi)具有催化作用的有機(jī)物,絕大多數(shù)的酶是蛋白質(zhì)少數(shù)酶是RNA。酶既具有無(wú)機(jī)催化劑的特點(diǎn),又有本身的特點(diǎn),高效性和專(zhuān)一性,并且需要適宜的條件。答案B【聚焦高考】1. (2005年全國(guó)高考題)將小麥種子分別置于200C和300C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4天,依次取等量
6、的萌發(fā)種子分別制成提取液I和提取液。取3支試管甲、乙、丙,分別加入等量的淀粉液,然后按下圖加入等量的提取液和蒸餾水,450C水浴保溫5分鐘,立即在3支試管中加人等量斐林試劑并煮沸2分鐘,搖勻觀察試管中的顏色。結(jié)果是( D )A、甲呈藍(lán)色,乙呈磚紅色,丙呈無(wú)色 B、甲呈無(wú)色,乙呈磚紅色,丙呈藍(lán)色C、甲、乙皆呈藍(lán)色,丙呈磚紅色 D、甲呈淺磚紅色,乙呈磚紅色,丙呈藍(lán)色2. (上海高考題)右圖為某酶在不同溫度下反應(yīng)曲線(xiàn)和時(shí)間的關(guān)系,從圖中不能獲得的信息是( D )A、酶反應(yīng)的最適溫度B、酶因熱而失活 生 成 物 時(shí)間生成物量706020503040C、酶反應(yīng)生成物量與時(shí)間的關(guān)系D、酶反應(yīng)速度和酶量的關(guān)系第一節(jié) 酶的制備及活力測(cè)定【知識(shí)梳理】胞內(nèi)酶、胞外酶、生物組織細(xì)胞、粗酶液、動(dòng)物分泌物或細(xì)胞外的組織間隙、溫度、PH、活力、底物的消耗量、產(chǎn)物的生成量、分光光度法、滴定
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