生化室作業(yè)指導書

1、文件編號：SEZYY-JYK-3-SF-04第A版編制：錢宇清審核：錢宇清批準：曹勤生效日期：2008年8月8日江蘇省第二中醫(yī)院檢驗科目錄序號主題內容代號頁號1血清總膽紅素測定SEZYY-JYK-3-SF-0162血清直接膽紅素測定SEZYY-JYK-3-SF-02103血清總蛋白液體雙縮脲法測定SEZYY-JYK-3-SF-03134血清白蛋白溴甲酚綠法測定SEZYY-JYK-3-SF-04165血清丙氨酸氨基測定SEZYY-JYK-3-SF-05196血清天門冬氨酸氨基測定SEZYY-JYK-3-SF-06237血清堿性磷酸酶測定SEZYY-JYK-3-SF-07278血清-淀粉酶測定SE

2、ZYY-JYK-3-SF-08319血清葡萄糖己糖激酶法測定SEZYY-JYK-3-SF-093510血清尿素氮谷氨酸測定SEZYY-JYK-3-SF-103911血清肌酐苦味酸法測定SEZYY-JYK-3-SF-114312血清尿酸TBHBA法測定SEZYY-JYK-3-SF-124613血清總膽固醇酶試劑法測定SEZYY-JYK-3-SF-134914血清甘油三酯酶試劑法測定SEZYY-JYK-3-SF-145315血清鎂二甲苯胺藍法測定SEZYY-JYK-3-SF-155616血清無機磷磷鉬酸法測定SEZYY-JYK-3-SF-165917血清鈣偶氮胂法測定SEZYY-JYK-3-SF-

3、176218血清載脂蛋白A1測定SEZYY-JYK-3-SF-186519血清載脂蛋白B測定SEZYY-JYK-3-SF-196820血清高密度脂蛋白膽固醇測定SEZYY-JYK-3-SF-207121血清低密度脂蛋白膽固醇測定SEZYY-JYK-3-SF-217522血清肌酸激酶(CK) 法測定SEZYY-JYK-3-SF-227923血清乳酸脫氫酶DGKC法測定SEZYY-JYK-3-SF-238224血清總膽汁酸循環(huán)酶法測定SEZYY-JYK-3-SF-248625血清二氧化碳酶試劑法測定SEZYY-JYK-3-SF-258926血清-谷氨酰轉移酶測定SEZYY-JYK-3-SF-269

4、227正常值、病理值復合控制品SEZYY-JYK-3-SF-279528血脂復合控制品SEZYY-JYK-3-SF-289729復合校準品SEZYY-JYK-3-SF-299930載脂蛋白A1、載脂蛋白B校準品SEZYY-JYK-3-SF-3010131高、低密度脂蛋白膽固醇校準品SEZYY-JYK-3-SF-3110332722分光光度計維護規(guī)程SEZYY-JYK-3-SF-3210533純水機操作維護規(guī)程SEZYY-JYK-3-SF-3310834AU2700生化分析儀操作維護規(guī)程SEZYY-JYK-3-SF-3411035離心機操作維護規(guī)程SEZYY-JYK-3-SF-3511436血氣

5、分析儀操作維護規(guī)程SEZYY-JYK-3-SF-3611537電解質分析儀操作規(guī)程SEZYY-JYK-3-SF-3711638生化室內質量控制操作程序SEZYY-JYK-3-SF-3812039生化室間質量控制操作程序SEZYY-JYK-3-SF-39126404142434445464748495051525354555657585960修訂頁序號文件編號頁碼需更改的內容更改內容批準人批準日期123456789101112131415161718192021血清總膽紅素(T-BIL)測定1.實驗原理血清中的膽紅素分為直接（結合）膽紅素和間接（未結合）膽紅素。大多數(shù)方法是在1883年Ehrli

6、ch提出的重氮法膽紅素測量法1，一些改良的方法已被用來增進反應。這些改良的方法是使直接膽紅素直接和重氮化合物進行反應，生成一種有顏色的化合物，而間接膽紅素需要一種溶劑，如表面活性劑后才能進行反應。奧林巴斯總膽紅素試劑是改良的重氮法。使用一種穩(wěn)定的重氮鹽，2,4-二氯苯胺重氮鹽（DCA），與膽紅素反應，形成紅色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm時的吸光度與標本中總膽紅素的濃度成正比。膽紅素+DCA 紅色偶氮化合物 表面活性劑2. 標本：2.1 病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2 類型：血清、肝素或EDTA血漿，應避光保存。3.標本存放：152

7、5保存可穩(wěn)定2天；28保存可穩(wěn)定7天；-20保存可穩(wěn)定3個月，如冰凍保存，不可反復凍融！。4. 標本運輸：常溫條件下避光保存運輸。5. 標本拒收標準：標本溶血、細菌污染、脂血、非避光保存運輸?shù)臉吮尽?. 實驗材料6.1試劑：奧林巴斯總膽紅素試劑盒（ 試劑試劑空白對照） 試劑準備：試劑為即用式。6.1.2試劑穩(wěn)定性與貯存試劑避光保存于28，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個月。試劑必需避光保存。試劑不可冰凍。6.1.3變質指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。 注意事項：此試劑為體外診斷用，不要入口，毒性還末確定；警告！腐蝕劑！不要入口；避免和眼睛，皮膚或衣服接觸，如果接

8、觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘，接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護。6.2 校準品：使用奧林巴斯校準品對自動分析儀進行校準，參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件6.3 質控品：參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件7. 儀器：奧林巴斯AU2700生化分析儀8. 操作步驟8.1 項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件。8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件。9. 檢驗結果的判斷與分析10. 質量控制：在每一批標本中都應把非定值血清水平I與II質控做為未知標本進行分析，以2S為質控警告限，3S為失

9、控限，繪制質控圖，判斷是否在控。質控規(guī)則參見生化室室內質控操作規(guī)程.SOP文件。11. 計算方法：以TruCal U復合校準品校準儀器后，在病人結果可報告范圍內，儀器直接報告可靠的檢測結果無需手工計算，以mol/L報告。手工測定計算方法為：Au總膽紅素(mol/L) = ×校準液濃度As12. 參考值范圍：嬰兒： 出生24小時內 150mol/L出生第2天 22-193mol/L出生第3天 12-217mol/Lmol/L兒童： 一個月 mol/L成年人： mol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應建立自己的參考值。13. 臨床意義：膽

10、紅素是血紅蛋白的降解產物。游離膽紅素非極性很強，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復合物由脾臟向肝臟運輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血（肝前黃疸）、實質的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會導致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細胞破碎增多，使6070%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測方法能檢測總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測定主要檢測水溶性的結合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計游離膽紅素的含量。14

11、. 操作性能14.1 線性范圍：1.2513mol/L14.2 精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法5，AU2700批內精密度小于3%或SD0.07，總精密度小于5%或SD0.10。用于分析的質控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)批間精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)樣品1樣品10.408樣品2樣品2樣品3樣品314.3 方法學比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對247個樣品進行T-BIL檢測，將檢測結果作方法學比較，其統(tǒng)計結果如下：；。14.4 靈敏度：本試劑的檢測限為mo

12、l/L。14.5 病人結果可報告范圍：1.2513mol/L15. 超出范圍結果處理：本法線性上限為513mol/L。如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。16. 病危報警值的處理當新生兒血清標本測定結果總膽紅素340mol/L時，在經(jīng)過復查等確認手段處理后應及時向臨床主管醫(yī)生匯報。17. 方法局限性17.1 本法線性上限為513mol/L。如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。17.2 干擾物質：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，血紅蛋白濃度/L，甘油三酯濃度時沒有觀察到干擾。18. 補救措施：當儀器發(fā)

13、生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。19. 參考文獻 1.Thomas L ed. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt:TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.192-202.2.Tolman KG, Rej R. Liver function. In: BurtisCA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P

14、.1125-77.3.Rand RN, di Pasqua A. A new diazo method for the determination of bilirubin. Clin Chem 1962;6:570-8.20. 其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按檢驗科廢物處置管理規(guī)定執(zhí)行。血清直接膽紅素（D-BIL）測定1. 實驗原理直接膽紅素與2,4-二氯苯胺重氮鹽形成重氮化合物，在酸性條件下呈紅色。2. 標本：2.1 病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2 類型：血清、肝素或EDTA血漿，應避光保存。3. 標本存放：1525保存可穩(wěn)定2天；28保存

15、可穩(wěn)定7天；-20保存可穩(wěn)定3個月，如冰凍保存，不可反復凍融！。4. 標本運輸：常溫條件下避光保存運輸。5. 標本拒收標準：標本溶血、細菌污染、脂血、非避光保存運輸?shù)臉吮尽?. 實驗材料6.1 試劑：奧林巴斯總膽紅素試劑盒：試劑空白對照6.1.1試劑準備：試劑為即用式。6.1.2試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于28，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個月。試劑2必需避光保存。試劑不可冰凍。6.1.3變質指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.4注意事項：此試劑為體外診斷用。警告！腐蝕劑！不要入口。避免和眼睛，皮膚或衣服接觸。如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位

16、15分鐘。接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護。6.2 校準品：使用奧林巴斯公司提供的校準品對自動分析儀進行校準，參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件6.3 質控品：參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件7. 儀器：奧林巴斯AU2700生化分析儀8. 操作步驟8.1 項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2 儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗結果的判斷與分析10. 質量控制：在每一批標本中都應把非定值血清水平I與II質控做為未知標本進行分析，以2S為質控警告限，3S為失控限，繪制質控圖，判斷是否在控。質

17、控規(guī)則參見生化室室內質控操作規(guī)程.SOP文件。11. 計算方法以TruCal U復合校準品校準儀器后，在病人結果可報告范圍內，儀器直接報告可靠的檢測結果無需手工計算，以mol/L報告。手工測定計算方法為：Au直接膽紅素(mol/L) =-×校準液濃度As12. 參考值范圍：mmol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應建立自己的參考值。13. 臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產物。游離膽紅素非極性很強，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復合物由脾臟向肝臟運輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。

18、溶血（肝前黃疸）、實質的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會導致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細胞破碎增多，使6070%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測方法能檢測總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測定主要檢測水溶性的結合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計游離膽紅素的含量。14. 操作性能14.1 線性范圍：171mmol/L14.2 精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法5，AU2700批內精密度小于4%或SD，總精密度小于5%或SD。用于分析的

19、質控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)批間精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)樣品1樣品1樣品2樣品2樣品3樣品314.3 方法學比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對85個樣品進行DBIL檢測，將檢測結果作方法學比較，其統(tǒng)計結果如下：mol/L；。14.4 靈敏度：mmol/L。14.5 病人結果可報告范圍：171mol/L15 超出范圍結果處理本法線性上限為171mmol/L。樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。16. 病危報警值的處理 無。17.

20、 方法局限性17.1 本法線性上限為171mmol/L。樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。干擾物質：當樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，甘油三酯濃度時沒有觀察到干擾。血紅蛋白濃度/L將產生干擾。18. 補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。19. 參考文獻：Tietz, N.W.(Ed), Fundamentals of Clinical Chemistry, 3rd Edition, W.B. Saunders,1987.Van den Bergh, A. and Mueller, P., Biochem Z,77:90,191

21、6NCCLS, Interference Testing in Clinical Chemistry, EP7-P,1986.Young, D.S., Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, 4th Edition, AACC Press, 1995.NCCLS, Evaluation Protocol EP5-T2,1992.Rand, R. N., DI Pasque, A., Clin Chem 1962; 8: 570 Henry, J., Cannon, D. C., Winkelmann, J. V., Clinical che

22、mistry, principles and technics, Harper & Row Publishers Ins., Hagerstown Maryland, 1974:1042Thomas, L.: Labor and diagnose, 4th edition, Die Medizinische Verlagsgesellschaft, Marburg, 1992: 23520. 其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按檢驗科廢物處置管理規(guī)定執(zhí)行。血清總蛋白液體(TP)雙縮脲法測定1. 實驗原理雙縮脲比色終點法。在堿性條件下，蛋白與銅離子生成紫藍色復合物。顯色強度和

23、蛋白濃度成正比。OH蛋白質 + Cu2+ -紫紅色復合物2. 標本采集2.1 病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2 類型：血清或血漿。3. 標本存放 2025保存可穩(wěn)定6天；48保存可穩(wěn)定4周；-20保存至少可穩(wěn)定1年。4. 標本運輸 室溫條件下運輸5. 標本拒收標準：細菌污染的不能做測定。6. 實驗材料:6.1 奧林巴斯總蛋白測定試劑盒試劑1試劑26.1.1試劑準備：試劑為即用式。 試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于225，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為24個月。試劑不可冰凍。開蓋后應避免污染。 變質指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，不能繼續(xù)使用。 注意

24、事項：試劑中含有氫氧化鈉，不可入口！如與皮膚及粘膜接觸，請立即用大量水沖洗。使用試劑時應采取必要的防護。6.2 校準品：使用奧林巴斯公司提供的校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件。6.3 質控品：具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件。7. 儀器：奧林巴斯AU2700生化分析儀8. 操作步驟8.1 項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9. 檢驗結果的判斷與分析10. 質量控制：在每一批標本中都應把非定值血清水平I與II質控做為未知標

25、本進行分析，以2S為質控警告限，3S為失控限，繪制質控圖，判斷是否在控。質控規(guī)則參見生化室室內質控操作規(guī)程.SOP文件。11. 計算方法：以TruCal U復合校準品總蛋白校準值或標準品標準值校準儀器后，在病人結果可報告范圍內，儀器直接報告可靠的檢測結果，以g/L報告。12. 參考值范圍 g/L成人：6688兒童/青少年：男女130天4262416316個月446647676個月1歲56795570118歲57805780（注：各實驗室應有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應建立自己的參考值。13. 臨床意義：總蛋白檢測對于多種疾病

26、的診斷都有價值。肝臟蛋白合成缺陷、腎功能損傷引起蛋白丟失、腸道吸收不良或營養(yǎng)不良時總蛋白濃度下降。而在慢性炎癥疾病、肝硬化和脫水時總蛋白濃度升高。14. 操作性能14.1 線性范圍：0.5150g/L14.2 精密度：重復性的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU2700批內重復性小于3%，總不精密度小于3%。用于分析的質控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天間精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)樣品1樣品1樣品2樣品2樣品3104樣品310414.3 方法學比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對68個樣品

27、進行TP檢測，將檢測結果作方法學比較，其統(tǒng)計結果如下：y=x/L；97。14.4 靈敏度：本試劑的檢測限為0.5g/L。14.5 病人結果可報告范圍 0150g/L，如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。15. 超出范圍結果處理：本法線性上限為150g/L。如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。16. 病危報警值的處理 無。17. 方法局限性17.1 本法線性上限為150g/L。如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。17.2 干擾物質：靜脈滴注大量右旋糖酐的病人血清或血

28、漿，使用雙縮脲方法的檢測結果會明顯增高，請選用其它方法（如凱氏定氮法）；當樣品中抗壞血酸濃度£1704mmol/L，膽紅素濃度£684mmol/L，血紅蛋白濃度£/L，甘油三酯濃度£mmol/L時沒有觀察到干擾18. 補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。19. 參考文獻 1. Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.644-7.2. Johnson Am, Rohl

29、fs EM, Silverman LM. Proteins. In: BurtisCA, Ashwood ER. editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999.p.477-540.20. 其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按檢驗科廢物處置管理規(guī)定執(zhí)行。血清白蛋白（ALB）溴甲酚綠（BCG）法測定1. 實驗原理在pH值4.2時，白蛋白和溴甲酚綠染料結合產生藍綠色復合物，在630nm處比色，顏色的深度與白蛋白濃度成正比。白蛋白+溴甲酚綠-

30、綠色化合物2. 標本采集2.1 病人準備：無特殊要求。最好用禁食的標本以減少乳糜血的干擾。2.2 類型：血清、肝素或EDTA血漿。3. 標本存放 留取標本后請盡快分離血清/血漿。在室溫條件下（1525）可以穩(wěn)定一周，在冰箱保存的條件下（28）穩(wěn)定一個月，-20保存至少可以穩(wěn)定3個月。4. 標本運輸 室溫條件下運輸5. 標本拒收標準：細菌污染的不能做測定。6. 實驗材料:6.1 上海奧林巴斯白蛋白測定試劑盒 試劑準備：試劑為即用式。 試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于225，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為24個月。試劑不可冰凍。開蓋后應避免污染。 變質指示：當試劑有濁度時，表明有細菌污染，

31、不能繼續(xù)使用。 注意事項：避免試劑與皮膚及粘膜接觸。6.2 校準品：參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件6.3 質控品：參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件7. 儀器：奧林巴斯AU2700生化分析儀8. 操作步驟8.1 項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9. 檢驗結果的判斷與分析10. 質量控制：在每一批標本中都應把非定值血清水平I與II質控做為未知標本進行分析，以2S為質控警告限，3S為失控限，繪制質控圖，判斷是否在控。質控規(guī)則參見生化室室內質控操作規(guī)程.SOP

32、文件。11. 計算方法：以TruCal U復合校準品白蛋白校準值或標準品標準值校準儀器后，在病人結果可報告范圍內，儀器直接報告可靠的檢測結果。手工測定計算方法為：Au白蛋白 (g/L)= ×校準液濃度 As 12. 參考值范圍 成人 3552g/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應建立自己的參考值。13. 臨床意義：白蛋白是血漿中多種物質重要的結合與運輸?shù)鞍?，并是維持血漿滲透壓的主要組分。血清白蛋白可用于眾多疾病的診斷。血清白蛋白升高通常見于脫水的。血清白蛋白降低多見于營養(yǎng)不良、腎臟疾病，肝臟疾病，感染性疾病，嚴重的燒傷和癌癥。白蛋白的定

33、量測定有助于對肝臟疾病如肝硬化的診斷與監(jiān)視。此外，白蛋白量反映了個體的健康與營養(yǎng)狀況，因此可用于營養(yǎng)不良的診斷及老年住院患者的預后評估。14. 操作性能14.1 線性范圍 260g/L14.2 精密度：重復性的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU2700批內重復性小于3%，總不精密度小于3%。用于分析的質控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天間精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)樣品1樣品1樣品2樣品2樣品3樣品314.4 靈敏度：2g/L。14.5 病人結果可報告范圍：260g/L，如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化

34、鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。15. 超出范圍結果處理 本法線性上限為60g/L。如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。16. 病危報警值的處理17. 方法局限性60g/L。如樣品測定值超過上限時，應將樣品用氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測定，結果乘以2。17.2干擾物質：當樣品中抗壞血酸濃度£1704mmol/L，膽紅素濃度£684mmol/L，血紅蛋白濃度£4.00g/L，甘油三酯濃度£時沒有觀察到干擾。18. 補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。19. 參考文獻 1.DOUMAS

35、, B., WATSON, W. A., BIGGS, H. G., CLINCHIMACTA 1971; 31: 87-962. WEBSTER, D., CLINCHIMACTA 1974; 53: 109-1153. TIETZ, N. W.: TEXTBOOK OF CLINICAL CHEMISTRY, 2ND EDITION, W. B. SAUNDERS COMPANY, PHILADELPHIA, 1994: 7034. AACC Press Friendman,R.B.,and Young,D.S.,Effects of Disease on Clinical Laborat

36、ory Tests,2nd Edition,1989.5. Rodkey,F.L.,Clin Chem,2:478;19656. Doumas,B.T.,Watson,W.A.and Biggs,H.G.,Clin Chem Acta 31:87-96,1971.7. Tietz,N.W.,Clinical Guide to Laboratory Tests,2nd Edition,W.B.Saunders,1990.8. NCCLS,Interference Testing in Clinical Chemistry,EP7-P,1986.9. Young,D.S.,Effects of D

37、rugs on Clinical Laboratory Tests,4th Edition,AACC Press,1995.10. NCCLS,Guideline EP5-T2,1992.20. 其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按檢驗科廢物處置管理規(guī)定執(zhí)行。血清丙氨酸氨基轉移酶IFCC推薦方法測定1. 實驗原理國際臨床化學學會(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測法。ALTLDH（乳酸脫氫酶）L-丙氨酸 + a-酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸 + NAD+ + H2O加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是為了穩(wěn)定ALT活性，避免樣品中因內源性磷酸吡哆醛不足造

38、成測定結果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特別監(jiān)護病人的結果)12.標本：2.1 病人準備：12小時禁食。 類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標本存放：3天內的活性損失：28保存：<10%；1525保存：<17%；標本穩(wěn)定性：-20保存至少可穩(wěn)定4周。4. 標本運輸：常溫條件下保存運輸。5. 標本拒收標準：標本溶血、細菌污染的標本。6. 實驗材料6.1 試劑 奧林巴斯ALT測定試劑盒試劑1+ 試劑2 試劑準備：試劑為即用式。 試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于28，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.3變質指示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表

39、明試劑已變質，不能繼續(xù)使用。 注意事項：試劑中含疊氮鈉（/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應采取必要的預防措施使用試劑。6.2 校準品：使用奧林巴斯公司提供的校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件。6.3 質控品：具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件。7. 儀器：奧林巴斯AU2700生化分析儀8. 操作步驟8.1 項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2 儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9. 檢驗結果的判斷與分析10. 質量控制：在每一批標本中都應把非定值

40、血清水平I與II質控做為未知標本進行分析，以2S為質控警告限，3S為失控限，繪制質控圖，判斷是否在控。質控規(guī)則參見生化室室內質控操作規(guī)程.SOP文件。11. 計算方法：以TruCal U復合校準品ALT校準值校準儀器后，在病人結果可報告范圍內，儀器直接報告可靠的檢測結果，以U/L報告。12. 參考值范圍 4不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛女性 <31U/L 1035U/L男性 <41U/L 1050U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應建立自己的參考值。13. 臨床意義1,2：丙氨酸氨基轉移酶（ALT）舊稱谷丙轉氨酶（GPT），天門冬氨酸

41、氨基轉移酶（AST）舊稱谷草轉氨酶（GOT）。它們是氨基轉移酶類的典型代表。氨基轉移酶催化氨基從氨基酸轉移給a-酮酸的反應。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及肝組織損害等都有關。因此同時進行ALT和AST的檢測，可用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率用于肝病的鑒別診斷。比率<1預示中度的肝損傷；比率>1和嚴重肝病有關，常見慢性肝病。14. 操作性能14.1 線性范圍 4800U/L14.2 精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU2700批內精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質控血清和

42、數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。不含磷酸吡哆醛批內精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品122.8樣品1樣品2樣品2樣品3樣品3101含磷酸吡哆醛批內精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)批間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品1樣品1樣品2樣品2樣品3133樣品312814.3 方法學比較：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時對78個樣品進行ALT活力檢測，將檢測結果作方法學比較，其統(tǒng)計結果如下：+L；。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(

43、x)，同時對80個樣品進行ALT活力檢測，將檢測結果作方法學比較，其統(tǒng)計結果如下：+L；。14.4 靈敏度：本試劑的檢測限為4U/L。14.5 病人結果可報告范圍 4U/L-800U/L 15. 超出范圍結果處理 本法對ALT活力檢測的最大A/min在340、334nm為0.16,在365nm為0.08。當樣品測定值超過上限時，應將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1：9稀釋，重新測定，結果乘以10。16. 病危報警值的處理 17. 方法局限性17.1 本法對ALT活力檢測的最大A/min在340、334nm為0.16,在365 nm為0.08。當樣品測定值超過上限時，應將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1

44、：9稀釋，重新測定，結果乘以10。17.2 干擾物質：當樣品中抗壞血酸濃度£1704mmol/L，膽紅素濃度£684mmol/L，血紅蛋白濃度£g/L，甘油三酯濃度£22.6mmol/L時沒有觀察到干擾。18. 補救措施：當儀器發(fā)生故障時，迅速聯(lián)系儀器廠家進行維修。19. 參考文獻 1. Thomas L. Alanine aminotransferase(ALT), Aspartate aminotransferase(AST). In: Thomas L, editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed

45、. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.55-65.2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: BurtisCA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. P.617-721.3. Bergmeyer HU, Horder M, Rej R. International Federation of

46、Clinical Chemistry (IFCC) Scientific Committee, Analytical section: approved recommendation (1985) on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 3. IFCC method for alanine aminotransferase(L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase, EC .2). J Clin Chem Clin Biochem

47、1986; 24:481-95.4. Lorentz K, Rohle G, Siekmann L. Einfuhrung der neuen Standardmethoden 1994 zur Bestimmung der katalytischen Enzymkonzentrationen bei 37. DG Klinische Chemie Mitteilungen 1995;26:190-2.20. 其他：儀器測定后的廢液及難降解的材料集中收集后按檢驗科廢物處置管理規(guī)定執(zhí)行。血清天門冬氨酸氨基轉移酶IFCC推薦方法測定1.實驗原理：國際臨床化學學會(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測法。L

48、-天門冬氨酸+ a-酮戊二酸AST 草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+ MDH蘋果酸脫氫酶L-蘋果酸+NAD+H2O2.標本：2.1 病人準備：12小時禁食。2.2 類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標本存放：3天內的活性損失：28保存：<8%；1525保存：<10%；標本穩(wěn)定性：-20保存至少可穩(wěn)定3個月。4. 標本運輸：常溫條件下保存運輸。5. 標本拒收標準：標本溶血、細菌污染的標本。6. 實驗材料6.1 試劑：奧林巴斯AST測定試劑盒 試劑1：；試劑2： 試劑準備：試劑為即用式。 試劑穩(wěn)定性與貯存試劑保存于28，若無污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。 變質指

49、示：當試劑有看得見的微生物生長，有濁度，或者未開蓋的液體有沉淀時，表明試劑已變質，不能繼續(xù)使用。 注意事項：試劑中含疊氮鈉（/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應采取必要的預防措施使用試劑。6.2 校準品：使用奧林巴斯公司提供的校準品對自動分析儀進行校準，具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件。6.3 質控品：具體參見生化檢驗校準品和質控品.SOP文件。7. 儀器：奧林巴斯AU2700生化分析儀8. 操作步驟8.1 項目基本參數(shù)：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀項目測定參數(shù).SOP文件8.2 儀器操作步驟：參見生化檢驗奧林巴斯AU2700生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9

50、. 檢驗結果的判斷與分析10. 質量控制：在每一批標本中都應把非定值血清水平I與II質控做為未知標本進行分析，以2S為質控警告限，3S為失控限，繪制質控圖，判斷是否在控。質控規(guī)則參見生化室室內質控操作規(guī)程.SOP文件。11. 計算方法：以TruCal U復合校準品AST校準值校準儀器后，在病人結果可報告范圍內，儀器直接報告可靠的檢測結果。不使用校準品進行AST活力檢測，可以直接使用A/min均值乘以計算因子得到結果，但是這樣所得結果的可靠性不如使用校準品。計算ALT活力的計算因子見下表：A/min×因子=AST活力U/L底物起始的反應（37） 樣品起始的反應（37）340 nm 21

51、43 1745334 nm 2184 1780365 nm 3971 323512. 參考值范圍 4不含磷酸吡哆醛 含磷酸吡哆醛女性 <31U/L1035U/L男性 <37U/L1050U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實驗室經(jīng)驗，每個實驗室應建立自己的參考值。13. 臨床意義1,2丙氨酸氨基轉移酶（ALT）舊稱谷丙轉氨酶（GPT），天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）舊稱谷草轉氨酶（GOT）。它們是氨基轉移酶類的典型代表。氨基轉移酶催化氨基從氨基酸轉移給a-酮酸的反應。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及

52、肝組織損害等都有關。因此同時進行ALT和AST的檢測用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率可用于肝病的鑒別診斷。比率<1預示中度的肝損傷；比率>1和嚴重肝病有關，常見慢性肝病。14. 操作性能14.1 線性范圍2-800U/L。14.2 精密度：精密度的評估是根據(jù)NCCLS推薦的標準方法，AU2700批內精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。不含磷酸吡哆醛批內精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品1樣品1樣品2樣品2樣品3116樣品3115含磷酸吡哆醛批內精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品1樣品1樣品2樣品2樣品3174樣品318714.3 方法學比較：不