霉菌的形態(tài)觀察

1、霉菌的形態(tài)觀察09級(jí)生物科學(xué)（3）班 張剛剛 200900140165組員：岳永勝 俞華軍 余振洋 謝英健2010/11/101 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 了解并掌握霉菌形態(tài)觀察的基本方法2. 了解根霉、曲霉、毛霉、青霉的基本形態(tài)特征2 實(shí)驗(yàn)原理 霉菌菌絲體由基內(nèi)菌絲、氣生菌絲和繁殖菌絲組成，其菌絲比細(xì)菌及放線菌粗幾倍到幾十倍?？梢圆扇≈苯又破屯该髂z帶法觀察，也可以載玻片培養(yǎng)觀察法，通過(guò)無(wú)菌操作將薄層培養(yǎng)基瓊脂置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)，使菌絲體在蓋玻片和載玻片之間的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，將培養(yǎng)物直接置于顯微鏡下可觀察到霉菌自然生長(zhǎng)狀態(tài)并可觀察不同發(fā)育期的菌體結(jié)構(gòu)特征變化。對(duì)霉菌可利用乳酸石炭酸棉藍(lán)染液

2、進(jìn)行染色，蓋上蓋玻片后制成霉菌制片鏡檢。石炭酸可以殺死菌體及孢子并可以防腐，乳酸可以保持菌體不變形，棉藍(lán)使菌體著色。同時(shí)，這種霉菌制片不易干燥，能防止孢子飛散，用樹(shù)膠封固后可制成永久標(biāo)本長(zhǎng)期保存。三實(shí)驗(yàn)材料1.菌種 根霉、毛霉、黑曲霉、青霉的平板培養(yǎng)物2. 儀器和其他用品 酒精燈；接種環(huán)；鑷子；濾紙；吸管，平皿，載玻片，蓋玻片，解剖針，顯微鏡等。四操作步驟 1.配培養(yǎng)基 配制200mL馬鈴薯培養(yǎng)基 2.準(zhǔn)備小室 在平皿底部鋪一張略小于皿底的圓形濾紙片，在其上放一個(gè)U形玻棒，在U形玻棒上放一塊載玻片和四片蓋玻片，蓋上皿蓋。準(zhǔn)備九套小室，與兩套空白平皿一起用牛皮紙包好。 3.滅菌 將培養(yǎng)基、平皿、

3、包好的吸管、鑷子、解剖刀及30mL20%的甘油放入滅菌鍋中滅菌。 4.制備瓊脂塊 通過(guò)無(wú)菌操作，用解剖刀由馬鈴薯瓊脂薄平板上切下1cm×1cm左右的瓊脂塊，將其移至小室的載玻片上，每片兩塊。 5.接種 通過(guò)無(wú)菌操作，用接種環(huán)從根霉、曲霉、毛霉或青霉的瓊脂平板培養(yǎng)物中挑取很少量孢子，接種于小室中瓊脂塊邊緣上，將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上。 6.培養(yǎng) 通過(guò)無(wú)菌操作，在培養(yǎng)小室中圓濾紙片上加3-5mL滅菌的20%甘油，蓋上皿蓋，于28培養(yǎng)7天。 7.鏡檢 取出后直接用低倍鏡和高倍鏡鏡檢。五注意事項(xiàng)1.在載玻片培養(yǎng)觀察中，在注意無(wú)菌操作，接種量要少并盡可能將分散孢子接種在瓊脂塊邊緣，避免培養(yǎng)后菌絲

4、過(guò)于密集便于觀察。2.加蓋玻片時(shí)勿壓入氣泡，以免影響觀察。 3.標(biāo)本制好后，先用低倍鏡觀察，再用高倍鏡觀察加蓋玻片時(shí)勿壓入氣泡。六實(shí)驗(yàn)結(jié)果孢子囊孢子梗假根假根 根霉（10×40倍） 根霉（10×40倍）足細(xì)胞分生孢子梗頂囊曲霉（10×40倍） 根霉（10×40倍）孢子囊孢囊梗 毛霉（10×10倍） 毛霉（10×40倍）分生孢子青霉（10×40倍）菌種描述根霉 菌絲無(wú)隔膜、有分枝和假根，營(yíng)養(yǎng)菌絲體上產(chǎn)生匍匐枝，匍匐枝的節(jié)間形成特有的假根，從假根處向上叢生直立、不分枝的孢囊梗，頂端膨大形成圓形的孢子囊，囊內(nèi)產(chǎn)生孢囊孢子。 毛霉 菌絲無(wú)隔、多核、分枝狀，無(wú)假根或匍匐菌絲。菌絲體上直接生出孢囊梗。各分枝頂端著生球形孢子囊 曲霉菌絲有隔膜，菌絲體產(chǎn)生大量的分生孢子梗。分生孢子梗頂端膨大成為頂囊，一般呈球形。項(xiàng)囊表面長(zhǎng)滿一層或兩層輻射狀小梗，最上層小梗瓶狀，頂端著生成串的球形分生孢子。 青霉 菌絲有橫隔，頂端不形成膨大的頂囊，其分生孢子梗經(jīng)過(guò)多次分枝，產(chǎn)生幾輪對(duì)稱或不對(duì)稱的小梗，形如掃帚，稱為帚狀體。分生孢子球形、橢圓形或短柱形， 7 思考題1. 黑曲霉和黑根霉在形態(tài)特征上有何區(qū)別？答：根霉菌絲無(wú)隔膜，產(chǎn)生匍匐枝，匍匐枝末端長(zhǎng)有假根。 曲霉菌絲體分